脑缺血中的细胞凋亡
作者：刘 璇 朱兴族
单位：(中国科学院上海药物研究所药理一室，上海 200031)
关键词：脑缺血；神经细胞；凋亡
中国药理学通报990406
摘要 凋亡和坏死是细胞死亡的两种主要方式，近期凋亡在脑缺血性细胞死亡中的作用逐步受到重视，这对近年来脑缺血中细胞凋亡的研究必有助益。
中国图书分类号 R 329.25； R 329.26； R 743.31
文献标识码 A 文章编号 1001-1978(1999)04-0307-04
Apoptosis in cerebral ischemia
, http://www.100md.com
LIU Xuan, ZHU Xing-Zu
(Department of Pharmacology, Shanghai Institute of Materia Medica,Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031)
ABSTRACT Apoptosis and necrosis are two main kinds of cell death. Inrecent years, apoptosis in cerebral ischemic cell death has gained more and more attention. Briefly summarized the recent of research on ap optosis in ce rebral ischemia.
KEY WORDS ischemia; neuronal cells; apoptosis
, 百拇医药
早在1972年，Kerr JFR等就提出根据细胞的超微结构特征可以把细胞死亡的方式分为凋亡和坏死两种方式。但是，早期研究者认为神经元的凋亡方式只存在于生长发育中神经元的正常死亡或一些慢性脑损伤的发展过程中，不存在于急性、严重的脑损伤如脑缺血所致神经元死亡中。直到近10年，凋亡在脑缺血性细胞死亡中的作用才逐步受到重视[1,2]。然而，由于对凋亡和坏死的判断标准目前仍有争议，不同的报道有时有互相矛盾的结果。因此，本文将从形态学特征、生化特征及基因调控特征3个方面分析总结凋亡在脑缺血性神经元死亡中的作用和地位。在每个方面的分析中，我们既引用了用各种脑缺血动物模型获得的在体研究结果，也引用了用原代培养神经元缺氧或兴奋性毒性损伤模型获得的离体研究结果。
1 形态学特征
细胞凋亡过程的形态学变化可以分为3个时期。以8d大鼠纹状体部分神经元在发育过程中凋亡的形态学变化为例，凋亡初期，细胞核内染色体凝缩并沿核膜形成月牙形团块，细胞质开始浓缩但各种细胞器如线粒体、内质网等均正常。中期，染色体进一步固缩成形态规则的数个紧密小球，细胞核裂解为碎片，每个碎片由基本完整的核膜包裹着染色体小球组成。细胞质浓缩，内质网解体，线粒体略有肿胀，细胞膜皱缩。末期，细胞通过“出芽”离散为数个“凋亡小体”，每个小体中含有部分细胞质，残存细胞器和一定量的核碎片，并由细胞质膜紧紧包裹。这些小体很快被别的细胞吞噬，因此细胞内容物绝不会漏出到细胞间隙中。相反，细胞坏死时，早期染色质呈絮状，无再分布现象，晚期染色质消失。坏死过程中细胞胞浆逐渐肿胀，细胞器表现为进行性降解。坏死末期细胞膜破裂，内容物释放到细胞间隙并引发炎症反应[3]。
, 百拇医药
形态学特征是最早被用来区分凋亡和坏死的标准，目前仍是最被广泛承认的标准。在不同的实验性脑缺血模型所致损伤过程中，均有报道观察到有凋亡特征的神经元。Nitarori T等发现沙土鼠全脑缺血后其海马CA1区神经元的染色体固缩，且细胞有皱缩现象[4]。脑缺血大鼠的多巴胺神经元也表现出明显的凋亡特征[5]。在新生小猪缺氧性脑缺血48h后，光镜和电镜观察均发现扣带回区有凋亡特征的神经元数量增多[5]。此外，对27个人类脑卒中患者标本的分析表明，人类卒中后神经元死亡的过程和方式与大鼠双侧颈总动脉结扎合并低血压所致海马神经元损伤的特点很相似。人类卒中亚急性期和大鼠缺血48至72 h期间的神经元均有凋亡的特征，而人类卒中急性和慢性期时的神经元无此特征[7]。
体外研究发现，缺氧可使培养的皮层神经元的细胞体积缩小，胞核紧密固缩[8]。对于兴奋性毒性损伤，神经元在给予低剂量的兴奋性氨基酸时主要以凋亡方式死亡，而在给予高剂量时主要以坏死方式死亡。并且，神经元在兴奋性损伤急性期主要以坏死方式死亡而随后则有部分细胞以凋亡方式死亡[9]。
, 百拇医药
虽然上述报道表明脑缺血后死亡的神经元可出现凋亡的特征，但也有不少报道(尤其是在体研究报道)观察不到脑缺血后有凋亡特征神经元的存在。这可能与研究时选用的观察时间，观察脑区以及所用缺血模型不同有关。因此，要从形态学方面确认脑缺血中凋亡的存在与否，必须进行严格的、系统的、有说服力的细胞超微结构形态学研究。
2 生化特征
凋亡细胞最典型的生化特征就是其DNA的裂解方式。凋亡中，细胞染色质的核小体间DNA 片段性断裂，形成由50～300碱基对组成的DNA碎片，用琼脂糖电泳检测时表现为特征性的梯形条带(ladder)。而坏死发生时，由于核DNA是被随机切割且组蛋白也同时降解，故形成扩散的涂抹性条带。此外，凋亡细胞的DNA缺口可用原位DNA末端标记法如末端脱氧转核苷酸酶介导的dUTP-生物素标记法(TUNEL)检测。一般认为凋亡细胞呈TUNEL阳性，而坏死细胞呈 TUNEL阴性。
大量的报道证实脑缺血后脑中发现有TUNEL阳性细胞或组织中提取的DNA电泳后呈梯形条带。沙土鼠和大鼠脑缺血后脑组织的DNA都表现出梯形电泳条带[3]。全脑缺血后，在沙土鼠的海马CA1区[10]和大鼠海马区[11]、纹状体区[12]均可以观察到有神经元的DNA发生片段性碎裂。局部缺血大鼠中也可见相似结果[13]。Saviano G等则用TUNEL和DNA电泳法同时确定了脑缺血后小鼠脑组织中凋亡神经元的存在[14]。而且，脑缺血后再灌与否和缺血损伤的程度均影响DNA片段性碎裂细胞的分布情况[15]。
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体外研究也发现，缺氧[16]或给予兴奋性氨基酸[17]可使细胞DNA的电泳条带呈梯形特征，或可观察，但细胞核DNA的断裂方式是核小体间连接的断裂，即有典型的凋亡特征。本实验室的研究结果也表明，给予原代培养的皮层神经元200～500μmol.L-1 的谷氨酸可以使细胞中提出的DNA在电泳时呈典型的梯形条带。
截止目前为止，关于生化特征方面的报道已有很多且结果也较为一致。但是，有研究者认为是否有DNA片段性碎裂特征并不能作为区分凋亡和坏死的标准。他们的依据是某些具有明显坏死形态学特征的细胞也可表现为DNA片段性碎裂，尤其是可呈TUNEL阳性[3，17，18]。
3 基因调控特征
由于凋亡是一个严格控制的、有序的死亡过程，因此凋亡过程中必需有一系列基因的参与和调控。相反，坏死是一个被动的死亡过程，细胞是因为在受到严重损伤时无法维持自身结构和功能的完整而崩溃死亡的。参与凋亡过程的基因调控机制目前仍未完全清楚。已知的基因主要有凋亡诱导基因如p53,c-myc等和凋亡抑制基因如bcl-2等。在凋亡诱因的刺激下，凋亡调控基因的转录和翻译水平均发生变化，进而影响其它基因如白细胞介素1-β转化酶(ICE)家族基因的表达。ICE家族基因编码的蛋白酶属于Caspases,可激活特定的核酸内切酶。核酸内切酶进入细胞核内对DNA进行片段性切割。因此，在细胞死亡过程中是否有这些基因的参与，以及阻断这种凋亡特有的调控系统是否能影响细胞的死亡状况，可以作为区分凋亡与坏死的标准。
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由于凋亡的调控过程中必需有新的蛋白质和mRNA的合成，早期人们试图用蛋白合成抑制剂如放线菌酮或RNA合成抑制剂如放线菌素D来考察脑缺血中凋亡的存在与否。遗憾的是，可能是由于这些抑制剂的作用特异性不强，这方面的报道中互相矛盾的结果很多，无法得出令人信服的结论[3，17]。
凋亡调控基因被报道广泛参与了脑缺血后的神经元损伤。大鼠全脑缺血后，其Bcl-X基因的mRNA和蛋白水平均升高[19]。Bax的mRNA水平在脑缺血后的缺血性敏感神经元和非敏感神经元中都有上升[3]。p53的靶蛋白产物p21 WAF1/CIP1的水平[20 ]和Bax的蛋白水平[21]也有报道能被脑缺血损伤诱导升高。而且，在脑缺血后神经元死亡过程中有ICE类蛋白酶的参与[22，23]。给大鼠脑内注射ICE类酶的抑制剂可以减轻脑缺血所致神经元损伤[24]。
, 百拇医药
在培养小脑颗粒神经元时，给予兴奋性氨基酸可以诱导神经元中p53的表达[27]和ICE类酶的激活[28]。缺氧则可使培养皮层神经元中bcl-2的水平下调，激活I CE类酶[29]，也可诱导p53的表达[30]。ICE类酶的抑制能保护神经元对抗缺氧缺糖所致损伤[31]。我们在实验中用流式细胞术和免疫细胞化学法等方法分析时也发现，兴奋性氨基酸(谷氨酸)可使培养皮层神经元中的bcl-2的水平下调、Bax的水平上调。并且，给予谷氨酸12 h后神经元中Caspase-3的活性显著升高。
转基因研究的结果给我们提供了更有力的证据。过度表达凋亡抑制基因bcl-2或通过病毒载体将bcl-2基因转入动物的大脑皮层，或敲除凋亡促进基因Bax均可以减轻脑缺血后神经元的损伤程度。相反，凋亡诱导基因p53敲除的小鼠对局部脑缺血损伤的敏感度下降[17]。凋亡抑制基因Bcl-XL过度表达的小鼠也能部分对抗脑缺血性损伤[26]。因此，我们可以认为这些凋亡的调控机制在脑缺血性细胞死亡中发挥了一定的作用。
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以上我们从形态学特征、生化特征和基因调控特征3方面对脑缺血性细胞死亡中是否有凋亡的参与进行了讨论和分析。其中，形态学特征是最被广泛接受的凋亡判断特征。但是，目前此方面的研究报道仍很不足。因此，某些认为形态学标准是判断凋亡唯一可信标准的研究者认为凋亡在脑缺血中是否存在仍不能确定[3]。至于生化特征，即DNA片段性碎裂特征，虽然已被广泛承认存在于脑缺血后细胞死亡过程中，但有此特征的细胞却不能被肯定为一定是凋亡细胞。基因调控特征是凋亡细胞的独特特征，有的研究者甚至认为它是判断凋亡的最好特征，因此他们也认为凋亡确实存在于脑缺血性细胞死亡中[17]。不难看出，有关脑缺血后细胞死亡过程中是否有凋亡存在的争议实际上是由于凋亡与坏死区分标准的不统一所致。有的研究者提出也许在凋亡和坏死间存在着中间方式，即细胞的死亡方式可能是凋亡和坏死的混合。例如在兴奋性毒性所致神经元死亡中有的神经元的形态学特征就介于凋亡和坏死之间[3]。关于这一点，需要经过进一步的研究才能得出结论。
, 百拇医药 但是，目前的各种证据至少可以确定在脑缺血后的细胞死亡中，有部分细胞的死亡或者在有的细胞死亡的某个时期，有凋亡的参与。即便是对凋亡在脑缺血后神经元死亡过程中的存在持怀疑态度的研究者，也承认可能有少数神经元或一些非神经元细胞在脑缺血后是通过凋亡方式死亡的[3]。这个发现对脑缺血研究工作的发展非常重要。首先，我们可以考虑用阻断凋亡过程的药物来直接治疗脑缺血损伤；其次，即使凋亡只是神经元死亡过程的一个时期，阻断此时期也可帮助我们赢得时间给予其它对抗神经元坏死的药物，即扩大了其它药物的治疗窗；再则，缺血性神经元凋亡的研究还可有助于明确一些已知有效的抗脑缺血药物的作用机制。
目前，单独应用阻断凋亡的药物或与其它药物合用来对抗脑缺血性损伤的离体实验和动物实验均已有不少报道并提供了可喜的结果[24，25，31，32]。例如，HaraA等发现凋亡抑制剂N-甲苯磺酰-L-苯丙氨酰基-氯甲基酮可以剂量依赖性减轻脑缺血后神经元损伤[32]。给予大鼠ICE抑制剂z-VAD-DCB也可见相似结果[24]。同时给予大鼠放线菌酮和另一种抗脑缺血药物(Dextrophan)能获得比单独应用其中一种更好的抗脑缺血损伤效果[17]。另一方面，不少报道从抗神经元凋亡的新角度探讨了一些抗脑缺血药物的可能作用机制。Yardin C等发现FK506(一种有抗脑缺血作用的免疫抑制剂)可以阻断神经元的凋亡过程[33]。我们在研究中也观察到，碱性成纤维细胞生长因子(目前在国外已作为抗脑缺血药物进入临床研究期)能对抗无血清或兴奋性氨基酸所致的神经元凋亡。碱性成纤维细胞生长因子的抗神经元凋亡作用可能是其抗脑缺血作用机制的一部分[34]。
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总之，脑缺血中细胞凋亡的存在给脑缺血的研究打开了一个新的视窗。可以肯定，随着神经元凋亡机制研究的进一步深入，脑缺血的病理学和药物治疗学研究必将迎来一个发展的新高潮。
作者简介：刘 璇，女，26岁，博士生；
朱兴族，男，52岁，博士生导师
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1999-01-28收稿，1999-05-30修回, 百拇医药
单位：(中国科学院上海药物研究所药理一室，上海 200031)
关键词：脑缺血；神经细胞；凋亡
中国药理学通报990406
摘要 凋亡和坏死是细胞死亡的两种主要方式，近期凋亡在脑缺血性细胞死亡中的作用逐步受到重视，这对近年来脑缺血中细胞凋亡的研究必有助益。
中国图书分类号 R 329.25； R 329.26； R 743.31
文献标识码 A 文章编号 1001-1978(1999)04-0307-04
Apoptosis in cerebral ischemia
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LIU Xuan, ZHU Xing-Zu
(Department of Pharmacology, Shanghai Institute of Materia Medica,Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031)
ABSTRACT Apoptosis and necrosis are two main kinds of cell death. Inrecent years, apoptosis in cerebral ischemic cell death has gained more and more attention. Briefly summarized the recent of research on ap optosis in ce rebral ischemia.
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早在1972年，Kerr JFR等就提出根据细胞的超微结构特征可以把细胞死亡的方式分为凋亡和坏死两种方式。但是，早期研究者认为神经元的凋亡方式只存在于生长发育中神经元的正常死亡或一些慢性脑损伤的发展过程中，不存在于急性、严重的脑损伤如脑缺血所致神经元死亡中。直到近10年，凋亡在脑缺血性细胞死亡中的作用才逐步受到重视[1,2]。然而，由于对凋亡和坏死的判断标准目前仍有争议，不同的报道有时有互相矛盾的结果。因此，本文将从形态学特征、生化特征及基因调控特征3个方面分析总结凋亡在脑缺血性神经元死亡中的作用和地位。在每个方面的分析中，我们既引用了用各种脑缺血动物模型获得的在体研究结果，也引用了用原代培养神经元缺氧或兴奋性毒性损伤模型获得的离体研究结果。
1 形态学特征
细胞凋亡过程的形态学变化可以分为3个时期。以8d大鼠纹状体部分神经元在发育过程中凋亡的形态学变化为例，凋亡初期，细胞核内染色体凝缩并沿核膜形成月牙形团块，细胞质开始浓缩但各种细胞器如线粒体、内质网等均正常。中期，染色体进一步固缩成形态规则的数个紧密小球，细胞核裂解为碎片，每个碎片由基本完整的核膜包裹着染色体小球组成。细胞质浓缩，内质网解体，线粒体略有肿胀，细胞膜皱缩。末期，细胞通过“出芽”离散为数个“凋亡小体”，每个小体中含有部分细胞质，残存细胞器和一定量的核碎片，并由细胞质膜紧紧包裹。这些小体很快被别的细胞吞噬，因此细胞内容物绝不会漏出到细胞间隙中。相反，细胞坏死时，早期染色质呈絮状，无再分布现象，晚期染色质消失。坏死过程中细胞胞浆逐渐肿胀，细胞器表现为进行性降解。坏死末期细胞膜破裂，内容物释放到细胞间隙并引发炎症反应[3]。
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形态学特征是最早被用来区分凋亡和坏死的标准，目前仍是最被广泛承认的标准。在不同的实验性脑缺血模型所致损伤过程中，均有报道观察到有凋亡特征的神经元。Nitarori T等发现沙土鼠全脑缺血后其海马CA1区神经元的染色体固缩，且细胞有皱缩现象[4]。脑缺血大鼠的多巴胺神经元也表现出明显的凋亡特征[5]。在新生小猪缺氧性脑缺血48h后，光镜和电镜观察均发现扣带回区有凋亡特征的神经元数量增多[5]。此外，对27个人类脑卒中患者标本的分析表明，人类卒中后神经元死亡的过程和方式与大鼠双侧颈总动脉结扎合并低血压所致海马神经元损伤的特点很相似。人类卒中亚急性期和大鼠缺血48至72 h期间的神经元均有凋亡的特征，而人类卒中急性和慢性期时的神经元无此特征[7]。
体外研究发现，缺氧可使培养的皮层神经元的细胞体积缩小，胞核紧密固缩[8]。对于兴奋性毒性损伤，神经元在给予低剂量的兴奋性氨基酸时主要以凋亡方式死亡，而在给予高剂量时主要以坏死方式死亡。并且，神经元在兴奋性损伤急性期主要以坏死方式死亡而随后则有部分细胞以凋亡方式死亡[9]。
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虽然上述报道表明脑缺血后死亡的神经元可出现凋亡的特征，但也有不少报道(尤其是在体研究报道)观察不到脑缺血后有凋亡特征神经元的存在。这可能与研究时选用的观察时间，观察脑区以及所用缺血模型不同有关。因此，要从形态学方面确认脑缺血中凋亡的存在与否，必须进行严格的、系统的、有说服力的细胞超微结构形态学研究。
2 生化特征
凋亡细胞最典型的生化特征就是其DNA的裂解方式。凋亡中，细胞染色质的核小体间DNA 片段性断裂，形成由50～300碱基对组成的DNA碎片，用琼脂糖电泳检测时表现为特征性的梯形条带(ladder)。而坏死发生时，由于核DNA是被随机切割且组蛋白也同时降解，故形成扩散的涂抹性条带。此外，凋亡细胞的DNA缺口可用原位DNA末端标记法如末端脱氧转核苷酸酶介导的dUTP-生物素标记法(TUNEL)检测。一般认为凋亡细胞呈TUNEL阳性，而坏死细胞呈 TUNEL阴性。
大量的报道证实脑缺血后脑中发现有TUNEL阳性细胞或组织中提取的DNA电泳后呈梯形条带。沙土鼠和大鼠脑缺血后脑组织的DNA都表现出梯形电泳条带[3]。全脑缺血后，在沙土鼠的海马CA1区[10]和大鼠海马区[11]、纹状体区[12]均可以观察到有神经元的DNA发生片段性碎裂。局部缺血大鼠中也可见相似结果[13]。Saviano G等则用TUNEL和DNA电泳法同时确定了脑缺血后小鼠脑组织中凋亡神经元的存在[14]。而且，脑缺血后再灌与否和缺血损伤的程度均影响DNA片段性碎裂细胞的分布情况[15]。
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体外研究也发现，缺氧[16]或给予兴奋性氨基酸[17]可使细胞DNA的电泳条带呈梯形特征，或可观察，但细胞核DNA的断裂方式是核小体间连接的断裂，即有典型的凋亡特征。本实验室的研究结果也表明，给予原代培养的皮层神经元200～500μmol.L-1 的谷氨酸可以使细胞中提出的DNA在电泳时呈典型的梯形条带。
截止目前为止，关于生化特征方面的报道已有很多且结果也较为一致。但是，有研究者认为是否有DNA片段性碎裂特征并不能作为区分凋亡和坏死的标准。他们的依据是某些具有明显坏死形态学特征的细胞也可表现为DNA片段性碎裂，尤其是可呈TUNEL阳性[3，17，18]。
3 基因调控特征
由于凋亡是一个严格控制的、有序的死亡过程，因此凋亡过程中必需有一系列基因的参与和调控。相反，坏死是一个被动的死亡过程，细胞是因为在受到严重损伤时无法维持自身结构和功能的完整而崩溃死亡的。参与凋亡过程的基因调控机制目前仍未完全清楚。已知的基因主要有凋亡诱导基因如p53,c-myc等和凋亡抑制基因如bcl-2等。在凋亡诱因的刺激下，凋亡调控基因的转录和翻译水平均发生变化，进而影响其它基因如白细胞介素1-β转化酶(ICE)家族基因的表达。ICE家族基因编码的蛋白酶属于Caspases,可激活特定的核酸内切酶。核酸内切酶进入细胞核内对DNA进行片段性切割。因此，在细胞死亡过程中是否有这些基因的参与，以及阻断这种凋亡特有的调控系统是否能影响细胞的死亡状况，可以作为区分凋亡与坏死的标准。
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由于凋亡的调控过程中必需有新的蛋白质和mRNA的合成，早期人们试图用蛋白合成抑制剂如放线菌酮或RNA合成抑制剂如放线菌素D来考察脑缺血中凋亡的存在与否。遗憾的是，可能是由于这些抑制剂的作用特异性不强，这方面的报道中互相矛盾的结果很多，无法得出令人信服的结论[3，17]。
凋亡调控基因被报道广泛参与了脑缺血后的神经元损伤。大鼠全脑缺血后，其Bcl-X基因的mRNA和蛋白水平均升高[19]。Bax的mRNA水平在脑缺血后的缺血性敏感神经元和非敏感神经元中都有上升[3]。p53的靶蛋白产物p21 WAF1/CIP1的水平[20 ]和Bax的蛋白水平[21]也有报道能被脑缺血损伤诱导升高。而且，在脑缺血后神经元死亡过程中有ICE类蛋白酶的参与[22，23]。给大鼠脑内注射ICE类酶的抑制剂可以减轻脑缺血所致神经元损伤[24]。
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在培养小脑颗粒神经元时，给予兴奋性氨基酸可以诱导神经元中p53的表达[27]和ICE类酶的激活[28]。缺氧则可使培养皮层神经元中bcl-2的水平下调，激活I CE类酶[29]，也可诱导p53的表达[30]。ICE类酶的抑制能保护神经元对抗缺氧缺糖所致损伤[31]。我们在实验中用流式细胞术和免疫细胞化学法等方法分析时也发现，兴奋性氨基酸(谷氨酸)可使培养皮层神经元中的bcl-2的水平下调、Bax的水平上调。并且，给予谷氨酸12 h后神经元中Caspase-3的活性显著升高。
转基因研究的结果给我们提供了更有力的证据。过度表达凋亡抑制基因bcl-2或通过病毒载体将bcl-2基因转入动物的大脑皮层，或敲除凋亡促进基因Bax均可以减轻脑缺血后神经元的损伤程度。相反，凋亡诱导基因p53敲除的小鼠对局部脑缺血损伤的敏感度下降[17]。凋亡抑制基因Bcl-XL过度表达的小鼠也能部分对抗脑缺血性损伤[26]。因此，我们可以认为这些凋亡的调控机制在脑缺血性细胞死亡中发挥了一定的作用。
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以上我们从形态学特征、生化特征和基因调控特征3方面对脑缺血性细胞死亡中是否有凋亡的参与进行了讨论和分析。其中，形态学特征是最被广泛接受的凋亡判断特征。但是，目前此方面的研究报道仍很不足。因此，某些认为形态学标准是判断凋亡唯一可信标准的研究者认为凋亡在脑缺血中是否存在仍不能确定[3]。至于生化特征，即DNA片段性碎裂特征，虽然已被广泛承认存在于脑缺血后细胞死亡过程中，但有此特征的细胞却不能被肯定为一定是凋亡细胞。基因调控特征是凋亡细胞的独特特征，有的研究者甚至认为它是判断凋亡的最好特征，因此他们也认为凋亡确实存在于脑缺血性细胞死亡中[17]。不难看出，有关脑缺血后细胞死亡过程中是否有凋亡存在的争议实际上是由于凋亡与坏死区分标准的不统一所致。有的研究者提出也许在凋亡和坏死间存在着中间方式，即细胞的死亡方式可能是凋亡和坏死的混合。例如在兴奋性毒性所致神经元死亡中有的神经元的形态学特征就介于凋亡和坏死之间[3]。关于这一点，需要经过进一步的研究才能得出结论。
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目前，单独应用阻断凋亡的药物或与其它药物合用来对抗脑缺血性损伤的离体实验和动物实验均已有不少报道并提供了可喜的结果[24，25，31，32]。例如，HaraA等发现凋亡抑制剂N-甲苯磺酰-L-苯丙氨酰基-氯甲基酮可以剂量依赖性减轻脑缺血后神经元损伤[32]。给予大鼠ICE抑制剂z-VAD-DCB也可见相似结果[24]。同时给予大鼠放线菌酮和另一种抗脑缺血药物(Dextrophan)能获得比单独应用其中一种更好的抗脑缺血损伤效果[17]。另一方面，不少报道从抗神经元凋亡的新角度探讨了一些抗脑缺血药物的可能作用机制。Yardin C等发现FK506(一种有抗脑缺血作用的免疫抑制剂)可以阻断神经元的凋亡过程[33]。我们在研究中也观察到，碱性成纤维细胞生长因子(目前在国外已作为抗脑缺血药物进入临床研究期)能对抗无血清或兴奋性氨基酸所致的神经元凋亡。碱性成纤维细胞生长因子的抗神经元凋亡作用可能是其抗脑缺血作用机制的一部分[34]。
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总之，脑缺血中细胞凋亡的存在给脑缺血的研究打开了一个新的视窗。可以肯定，随着神经元凋亡机制研究的进一步深入，脑缺血的病理学和药物治疗学研究必将迎来一个发展的新高潮。
作者简介：刘 璇，女，26岁，博士生；
朱兴族，男，52岁，博士生导师
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1999-01-28收稿，1999-05-30修回, 百拇医药