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编号:10279077
柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠中一些兼性厌氧共生菌的影响
http://www.100md.com 《寄生虫与医学昆虫学报》 2000年第2期
     作者:秦泽荣 孔繁瑶 荒川皓

    单位:秦泽荣 孔繁瑶(中国农业大学动物医学院,北京 100094);荒川皓(日本大阪府立大学农学部,大阪593,日本)

    关键词:柔嫩艾美耳球虫;球虫;兼性厌氧菌;共生菌

    寄生虫与医学昆虫学报000203摘要 兼性厌氧菌是鸡盲肠中共生微生物菌群的重要组成部分。本文对鸡感染柔嫩艾美耳球虫后盲肠中一些兼性厌氧微生物的变化情况进行了研究。结果表明:鸡在感染球虫后第7、10、14天时盲肠中肠杆菌的数量显著升高(P<0.05);消化链球菌的数量显著减少(P<0.05);在球虫感染后的第7天时,盲肠中链球菌数量呈显著下降(P<0.05),而在第10、14天时则无明显变化。

    EFFECTS OF EIMERIA TENELLA INFECTION ON THE POPULATION OF
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    SOME CECAL FACULTATIVE ANAEROBIC FLORA

    Qin Zerong

    (College of Veterinary Medicine,China Agriculture University,Beijing 100094)

    Kong Fanyao

    (College of Veterinary Medicine,China Agriculture University,Beijing 100094)

    Akira Arakawa

    (Faculty of Agriculture,Osaka Prefectural University,Osaka 593,Japan)
, 百拇医药
    Abstract The effects of Eimeria tenella infection on the population of some facultative anaerobic flora were studied. Chickens were necropsied on 7th,10th and 14th day after coccidial infection for bacteriological examination.Significant increase was observed in cecal population of Enterobacteriaceae spp. in the birds with coccidiosis on 7th,10th and 14th day postinfection. Significant reduction was also demonstrated in the population of Peptostrptococcus spp. on 7th,10th and 14th day,and Streptococcus spp. on 7th day after coccidial infection. Results indicated that coccidial infection might cause the change of normal cecal facultative anaerobic flora.
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    Key words Eimeria tenella Coccidia Facultative anaerobic flora

    球虫病是现代养鸡业中最常见的疾病之一,危害严重(McDougald,1986)。我国每年用于防治鸡球虫病的药物费用就近5亿元人民币。鸡球虫病不仅可以造成雏鸡的大批死亡,发育迟缓,体重下降,产蛋率下降等。同时可以引起对其它感染的抵抗力下降或继发感染。笔者曾报道过柔嫩艾美耳球虫感染可以显著地加强鸡肠炎沙门氏菌感染,延长感染时间,引起向环境中排放更多的肠炎沙门氏菌,导致肠炎沙门氏菌感染的复发,增加肠炎沙门氏菌污染蛋等现象(Qin et al.,1995a,1995b,1996)。兼性厌氧菌是鸡消化道中最重要的微生物菌群之一,它对维持肠道内正常的微生态环境,抵御其它病原微生物的入侵等方面起着重要作用(陈德威,1994)。本研究旨在分析鸡感染柔嫩艾美耳球虫后,其盲肠中的兼性厌氧微生物菌群的变化情况,从一个方面探讨球虫感染导致抗病力下降的有关机制。
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    1 材料与方法

    1.1 鸡及饲料

    Hy-line○ R系莱杭雏鸡自1日龄起饲养于带空调的育雏室内,给予连续的人工光照和标准日粮。整个实验期间鸡自由采食、饮水。解剖时用颈椎脱臼的方法将鸡致死。

    1.2 柔嫩艾美耳球虫

    Wisconsin株柔嫩艾美尔球虫卵囊,经口接种第7、8天后,收集鸡盲肠中的球虫卵囊,孢子化备用。实验雏鸡1周龄时,用钝头长注射针头将1mL含有2×104个孢子化柔嫩艾美耳球虫卵囊悬液接种于鸡的嗉囊中。盲肠病变依据盲肠壁厚度、盲肠内容物、出血和干酪样肠心等情况按现行标准方法给予记分。

    1.3 实验设计

    80只雏鸡1周龄时,随机分成2组,其中1组感染球虫,另1组留作空白对照。球虫感染后第7、10、14天时,每次从各组随机取10只鸡解剖,分离培养盲肠中的肠杆菌(Enterobacteriaceae)、消化链球菌(Peptostreptococcus)和链球菌(Streptococcus)。实验共进行2次。
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    1.4 培养基

    盲肠中肠杆菌脱氧胆酸硫化氢乳糖(DHL)培养基培养,肠球菌和链球菌用肠球菌选择培养基分离培养,上述培养基均为日本日水(NISSUI)制药公司的产品。

    1.5 细菌学检查

    剖检时分离盲肠,称取每只鸡盲肠内容物0.1g,装入试管。将样品与9倍体积的的新鲜高压灭菌生理盐水溶液混匀。然后用灭菌的生理盐水溶液作连续10倍稀释和厌氧培养。每次稀释后,取0.1mL涂布于一琼脂板上,原液同此处理,在37℃下培养24h,将初步确定的菌落计数。依据《伯杰氏细菌学鉴定手册》(第八版)(Buchman et al.,1974)鉴定培养基上生长细菌的属。

    1.6 统计分析

    对盲肠内容物中微生物的数量进行对数换算后,作t检验,由于重复试验数据间无显著的差异,所以其结果置于一起进行分析。
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    2 结果

    2.1 柔嫩艾美耳球虫感染对盲肠中肠杆菌数量的影响

    细菌学检查的结果见表1。所有无论是否感染球虫的鸡盲肠中均分离到了肠杆菌。球虫感染鸡盲肠的肠杆菌数的平均对数变换值在球虫感染后第7、10、14天时分别为9.12、8.89、9.32。而同期未感染组鸡盲肠的肠杆菌的数的对数转换平均值则分别为7.51、7.12、7.63。球虫感染组和非感染组间差异显著(P<0.05)。

    表1 柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠内容物中肠杆菌的影响

    Tab. 1 Effect of Eimeria tenella infection on the

    Enterobacteriaceae in the cecal contents of chickens 组别
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    Group

    球虫感染后天数Days after coccidial infection

    第7天 7th days

    第10天 10th days

    第14天 14th days

    空白对照组Control

    分离率Isolation rate

    20/20

    20/20

    20/20
, 百拇医药
    平均数Mean number

    5.6×107

    3.3×108

    6.5×108

    对数转换值Logs

    7.51±1.61

    7.12±1.21

    7.63±3.12

    球虫感染组Coccidia-infected

    分离率Isolation rate

, http://www.100md.com     20/20

    20/20

    20/20

    平均数Mean number

    1.2×1010

    6.2×109

    1.2×1010

    对数转换值Logs

    9.12±2.14

    8.89±2.13

    9.32±1.16
, 百拇医药
    2.2 柔嫩艾美耳球虫感染对盲肠中消化链球菌数量的影响

    实验结果见表2。在整个实验中,所有无论是否感染球虫的鸡盲肠中均分离到了消化链球菌,分离率间无显著差异。球虫感染鸡盲肠消化链球菌数的平均对数变换值在球虫感染后第7、10、14天时分别为2.31、1.96、4.23,表现有一定的波动性,后期有所恢复。而同期未感染组鸡盲肠消化链球菌数的对数转换平均值则分别为4.13、5.56、6.18。两个处理之间在球虫感染后第4、7、14天时差异显著(P<0.05)。表2 柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠中消化链球菌的影响

    Tab. 2 Effect of Eimeria tenella infection on the Peptostreptococcus in the cecal contents of chickens 组别

    Group
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    球虫感染后天数Days after coccidial infection

    第7天 7th days

    第10天 10th days

    第14天 14th days

    空白对照组Control

    分离率Isolation rate

    20/20

    20/20

    20/20

    平均数Mean number
, 百拇医药
    1.1×105

    2.7×106

    4.4×108

    对数转换值Logs

    4.13±2.61

    5.56±1.01

    6.18±2.12

    球虫感染组Coccidia-infected

    分离率Isolation rate

    20/20

    20/20
, 百拇医药
    20/20

    平均数Mean number

    1.7×104

    5.1×106

    1.9×106

    对数转换值Logs

    2.31±2.01

    1.96±3.43

    4.23±2.52

    2.3 柔嫩艾美耳球虫感染对盲肠中链球菌数量的影响

    结果见表3。在整个实验中,所有鸡盲肠中均分离到了链球菌。球虫感染鸡盲肠链球菌数的平均对数变换值在球虫感染后第7、10、14天时分别为4.31、5.96、6.23,而同期未感染鸡盲肠链球菌数经对数转换后的平均值则分别为6.13、6.76、7.14。两个处理之间在球虫感染后第7天时差异显著(P<0.05),而在第10和14天时差异不显著。表3 柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠中链球菌的影响
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    Tab. 3 Effect of Eimeria tenella infection on the Streptococcus in the cecal contents of chickens 组别

    Group

    球虫感染后天数Days after coccidial infection

    第7天 7th days

    第10天 10th days

    第14天 14th days

    空白对照组Control

    分离率Isolation rate
, 百拇医药
    20/20

    20/20

    20/20

    平均数Mean number

    3.1×108

    2.5×107

    2.4×108

    对数转换值Logs

    6.23±2.61

    6.76±1.01

    7.14±2.12
, 百拇医药
    球虫感染组Coccidia-infected

    分离率Isolation rate

    20/20

    20/20

    20/20

    平均数Mean number

    2.7×106

    5.8×107

    1.8×108

    对数转换值Logs

    4.31±2.31
, 百拇医药
    5.96±2.23

    6.23±2.12

    2.3 柔嫩艾美耳球虫感染对盲肠中链球菌数量的影响

    结果见表3。在整个实验中,所有鸡盲肠中均分离到了链球菌。球虫感染鸡盲肠链球菌数的平均对数变换值在球虫感染后第7、10、14天时分别为4.31、5.96、6.23,而同期未感染鸡盲肠链球菌数经对数转换后的平均值则分别为6.13、6.76、7.14。两个处理之间在球虫感染后第7天时差异显著(P<0.05),而在第10和14天时差异不显著。

    3 讨论与小结

    生物间常常是相互作用,相互影响。本研究的结果表明:球虫感染不仅可以造成组织损伤病变,而且还可以引起机体内微生物菌群发生变化。后者在以往未能被充分认识。因此,本研究的结果为更全面认识鸡球虫病的危害和相关机制提供了有意义的科学依据。
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    球虫感染时,可以增强肠炎沙门氏菌感染的程度,并诱发继发性肠炎沙门氏菌感染。本研究所揭示的柔嫩艾美耳球虫感染可以引起盲肠微生物菌群的变化现象可能是上述肠炎沙门氏菌感染被增强和诱发的重要原因之一。兼性厌氧菌是健康鸡盲肠中的正常微生物菌群的重要组成部分,对维持体内微生物菌群平衡,增强动物抵抗力有一定影响(陈德威1994)。既然柔嫩艾美耳球虫感染可以引起盲肠中正常微生物菌群失调,那么对于感染球虫的病鸡,通过添加适当的微生态制剂则有可能缓解球虫病所造成的影响。笔者曾将嗜酸性乳酸杆菌和乳糖用于柔嫩艾美耳球虫感染的雏鸡,发现它能够显著地降低球虫感染对鸡盲肠中肠炎沙门氏菌数的增加作用(Qin et al.,1995b),为上述推测提供了一个实际例证。

    本项目为日本文部省的资助项目

    参考文献

    1,陈德威.1994.家禽微生态学.见:何明清主编,动物微生态学.北京:中国农业出版社,131~137.
, 百拇医药
    2,Buchanan,R.E. and N.E.Gibbons 1974. Bergey's Manual of Determinative Bacteriology.8th ed.,Williams & Wikins,Baltimore.

    3,McDougald,L.R.1986.Coccidian and related infections. In:Chemotherapy of Parasitic Diseases. Plenum Publishing Corporation,New York,157~170.

    4,Qin,Z.R.,T.Fukata,E.Baba,et al. 1995a Effect of Eimeria tenella infection on the infection of Salmonella enteritidis in chinkens. Poultry Sci. 74:1~7.
, 百拇医药
    5,Qin,Z.R.,T.Fukata,E.Baba et al. 1995b Effect of lactose and Lactobacillus acidophilus on the colonization of Salmonella enteritidis in chicks concurrently infected with Eimeria tenella. Avian Dis. 39:548~553.

    6,Qin,Z.R.,E.Baba,T.Fukata et al. 1995. Eimeria tenella infection induces recrudescence of previous Salmonella enteritidis infection in chickens. Poultry Sci. 74:1786~1792.

    7,Qin,Z.R.,E.Baba,T.Fukata et al. 1996. Effect of Eimeria tenella infection the production of Salmonella enteritidis-contaminated eggs and susceptibility of laying hens to S.enteritidis infection. Avian Dis. 40:361~367.

    收稿日期:1999-09-30, http://www.100md.com