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编号:10279920
hMG对子宫内膜、卵泡发育及白细胞雌激素受体作用的探讨
http://www.100md.com 《现代妇产科进展》 1999年第1期
     作者:隋龙 张令浩 杨云纺 陈静 姚宇 刘志民 谈雯 林朗

    单位:上海第二军医大学长征医院妇产科,200003

    关键词:促性腺素类;人绝经;受体;雌激素;孕酮

    现代妇产科进展990109 摘要 目的:探讨hMG对子宫内膜、卵泡发育及白血胞雌激素受体含量的变化及其临床意义。方法:应用阴道超声、放免法和放射配体结合法对18例自然周期和16例hMG促排卵周期的不孕症患者子宫内膜厚度、分型、成熟卵泡数、血浆雌二醇及孕酮浓度和外周血白细胞雌激素受体含量进行测定比较。结果:①hMG组围排卵期子宫内膜厚度大于自然周期组(P<0.05);成熟卵泡数多于自然周期组(P<0.05);子宫内膜A、B型回声比例高于自然周期组(P<0.05);②hMG组围排卵期血浆雌二醇、孕酮浓度明显高于自然周期组(P<0.05);③hMG组围排卵期白细胞雌激素受体含量较自然周期组明显升高(P<0.01)。结论:①hMG可使促排卵周期成熟卵泡数增加,子宫内膜分型改善,血浆E2浓度及白细胞雌激素受体含量升高,有改善子宫内膜容受性的作用;②hMG可能有致卵泡过早黄素化的作用;③测定白细胞雌激素受体可间接反映子宫内膜雌激素受体的变化,具有无创、可靠、重复性好的优点。
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    The effect of human menopausal gonadotropin on endometrium,follicle development and estrogen receptor contents on peripheral white blood cells.

    Sui Long,Zhang Linghao,Yan Yunfang,et al.

    Second Military Medical University,Shanghai Chan Zheng Hospital,200003

    Abstract Objectives:To investigate whether human menopausal gonadotropin (hMG) influences on endometrium,follicle development,and estrogen receptor(ER) contents on peripheral blood white cells (PBWC),and to evaluate its clinical significance.Methods:Control group included eighteen cases of infertile women with natural cycle(NC) and study group contained sixteen cases with hMG stimulated cycle.The endometrial thickness,pattern and follicle development were evaluated using transvaginal ultrasonographic scanning.Serum estradiol(E2),progesterone(P) concentrations were measured using radioimmunoassay(RIA).ER contents on PBWC were determined usingradioligand binding assay in all cases.Results:1.During peri-ovulation period,endometrial thickness in hMG cycle was greater than that in NC(P<0.05).The number of mature follicle in study group was more than that in NC(P<0.05).The proportion of echoes with A or B pattern in hMG cycle was higher than that in NC(P<0.05).2.Serum E2 and P levels in hMG cycle were significantly higher those in NC during peri-ovulation period (P<0.05).3.ER contents on PBWC in hMG cycle were remarkably greater than those in NC during periovulation period(P<0.05).Conclusions:1.hMG can increase mature follicle number,improve endometrial pattern,even increase serum E2 concentration and ER contents on PBWC in stimulated cycle,then improve endometrial receptivity.2.hMG may result in early follicle luteinization.3.It is a better way to measure ER contents in PBWC for monitoring the change of ER contents in endometrium indirectly.
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    Key words Gonadotropins,human menopausal;Receptors,estradiol;Progesterone

    受精卵植入不但与卵子质量有关,而且取决于子宫内膜的容受性(receptivity)。促排卵药物对子宫内膜雌激素受体(ER)的影响与子宫内膜容受性直接相关[1]。子宫内膜ER检测方法的创伤性是影响其进一步研究和临床广泛应用的重要原因。我们观察了人绝经后促性腺激素(hMG)对子宫内膜、卵泡发育和白细胞ER的作用并探讨了白细胞ER检测的临床应用价值。

    1 资料与方法

    1.1 临床资料

    1.1.1 自然周期组(NC组):月经周期正常的18例,22~39y,平均27.8±6.3y;月经周期25~34d,平均28.6±4.3d,均排除了妇科器质性疾病。
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    1.1.2 hMG促排卵周期组(hMG组):16例,月经周期正常不孕,其中男性因素7例,子宫内膜异位症(轻度)5例,原因不明4例,24~35,平均29.1±3.8;月经周期25~36d,平均28.7±5.9d,不孕年限1.5~9a,平均3.3±1.8a。

    1.2 方法

    1.2.1 hMG组:月经周期第3天起每日肌注hMG1~2支,阴道超声监测卵泡发育,在卵泡直径≥18mm的当日肌注hCG1万U。

    1.2.2 超声监测排卵及子宫内膜情况 月经周期第8天起以阴道超声监测卵泡,直径≥18mm时记录成熟卵泡数、子宫内膜厚度及分型。后者参考Gonen等[2,3]的标准,分为A、B、C 3型。

    1.2.3 外周血白细胞ER测定

    1.2.3.1 主要试剂:(6,7-3H)雌二醇:(简称3H-E2),1.88TBq/mmol,放化纯度98%,系英国放化中心产品。非标雌二醇:(17β-E2),由Sigma公司提供。Dextran T500系Pharmacia公司产,用磷酸缓冲液(PBS)配制成3%溶液,Triton X100系瑞士Fluka公司产。
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    1.2.3.2 测定方法:于月经周期第7~8d(滤泡期),出现尿LH峰或阴道超声显示卵泡直径≥18mm的次日(围排卵期)及排卵后7~8d(黄体中期),抽取肘静脉血10ml回收白细胞[4]。用pH7.4的Hank液将白细胞调成(1.0~3.0)×107个/ml悬液。应用放射配体结合法,取1ml白细胞悬液加一定量[3H]E2;37℃保温1h,用3ml 0~4℃PBS中止反应,迅速通过玻璃纤维滤膜(孔径1μm)负压过滤,继以3ml冷PBS淋洗2次,80℃20min烘干滤膜,放入含4ml闪烁液的液闪瓶内,用美国Beckman公司产LS-5000CE 液闪仪计数。所得dpm为总结合(TB);平行管dpm为非特异结合(NSB),即加入500倍非标E2;特异结合(SB)=TB-NSB。

    1.2.3.5血浆E2及P测定 采用放免法,由天津九鼎生物医学制品公司提供药盒。批内CV:E2 4.3%,P为3.9%;批间CV:E2为8.1%,P为7.3%。
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    1.3 统计学处理 用t检验分析。

    2 结果

    2.1 注射hMG当日的结果 hMG组子宫内膜厚度≥8mm10例(62.5%),<6mm3例(18.7%),7mm3例(18.7%),平均9.3±1.7mm;NC组则分别为6例(33.3%),7例(38.8%)和5例(27.8%),平均7.4±1.4mm。两组差异有显著性(P<0.05)。子宫内膜回声呈A或B型者,hMG组为12例、占75%,NC组为11例、占61.1%,(P<0.05)。围排卵期卵泡直径≥18mm者、hMG组和NC组分别为1.9±0.8/c和0.9±0.4/c(P<0.05)。

    2.2 hMG组增生晚期血浆E2浓度 见表1。

    表1 自然周期及hMG促排卵周期血浆E2浓度(pmol/L,±s) 组别
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    n

    滤泡期

    围排卵期

    黄体中期

    NC

    hMG

    18

    16

    133±67

    162±49

    364±121

    697±163

    146±102
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    159±87

    vs NC *P<0.01

    2.3 hMG组增生晚期和黄体中期血浆P浓度 见表2。表2 自然周期及hMG促排卵周期血浆P浓度(nmol/±s) 组别

    n

    滤泡期

    围排卵期

    黄体中期

    NC

    hMG

    18
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    16

    0.56±0.47

    0.68±0.49

    1.44±0.24

    2.51±0.38

    6.91±1.76

    10.12±2.66

    vs NC *P<0.05

    2.4 hMG组围排卵期外周白血细胞ER含量 见表3。表3 自然周期及hMG促排卵周期白细胞ER含量比较(Rs.位点/细胞,±s) 组 别
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    n

    滤泡期

    围排卵期

    黄体中期

    NC

    hMG

    18

    16

    486±110

    516±147

    683±126

    927±189*

    545±167
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    581±137

    vs NC *P<0.01

    3 讨论

    3.1 促排卵药物现已广泛用于治疗排卵障碍性不孕症及各种助孕技术(ART)中,但其妊娠率远低于促排卵率。生殖过程虽涉及诸多因素,但促排卵药物对卵泡发育、性激素分泌及子宫内膜的某些影响决定着其效果,尤其是子宫内膜的容受性。已经证实,hMG促排卵周期妊娠率高于克罗米芬(CC)促排卵周期[5]。本研究结果亦表明,hMG可使子宫内膜厚度增加,成熟卵泡数增多,血浆E2、P浓度升高,子宫内膜A或B型回声的比例升高,从而有利于妊娠。

    3.2 围排卵期成熟卵泡数与血浆E2浓度成正比 研究发现,hMG可使围排卵期血浆E2浓度明显升高,与hMG使围排卵期成熟卵泡数增多、合成分泌的E2增加有关。近年,有关促排卵周期增生晚期血浆P浓度升高与生殖关系的研究报道较多。一般认为,增生晚期血浆P浓度≥0.9nmol/L为异常升高[6]。实验证明,血浆P的这一浓度是促使子宫内膜发生分泌期改变的最低有效浓度。Mio等[7]认为,增生晚期血浆P浓度升高对卵子质量有不良影响,可能是血浆P浓度升高后诱导颗粒细胞LH受体增加,使其对LH的敏感性增强,导致卵泡过早黄素化,不利于卵子发育成熟。本研究证实,NC组围排卵期血浆P浓度即使达到1.44±0.24nmol/L,而hMG组围排卵期和黄体中期血浆P浓度仍明显高于对照组,说明①血浆P浓度达到0.9nmol/L是促使子宫内膜发生分泌期改变的最低有效浓度;②hMG使增生晚期和黄体中期血浆P浓度异常升高可能,导致卵泡过早黄素化,间接影响卵子的发育成熟,其确切机制尚有待进一步研究。
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    3.3 妊娠率高低与子宫内膜回声分型及ER含量有关 因子宫内膜回声呈A或B型者的内膜ER和PR含量较高[8]。本研究表明,hMG使增生晚期白细胞ER含量显著升高(P<0.01),与hMG使E2的合成分泌增加,对白细胞ER有上调作用有关。由于白细胞ER与子宫内膜ER含量在月经周期中对E2、P调节效应及变化规律的一致性[9,10],可以推断hMG一方面,使子宫内膜增厚,成熟卵泡数增多,子宫内膜A或B型回声比例升高;另一方面,可使E的靶组织或靶细胞中ER含量升高,改善了子宫内膜容受性。深入探讨这一问题有利于阐明不同促排卵药物的作用机现。

    3.4 子宫内膜ER测定虽有结果较准确的优点,但可引起子宫内膜基底层损伤、出血,甚至继发感染而且重复性差,一般患者不易接受,不利于指导临床治疗。前期研究已经证实,子宫内膜ER与外周血细胞ER在月经周期中的变化规律相同,而且对E2、P及内分泌药物作用的效应具有一致性[10,11]。外周血白细胞ER测定具有取材方便、方法科学、结果可靠的优点,尤其是无创伤性,重复性好,可用于促排卵药物治疗前、后ER含量变化的监测,对治疗有指导意义。
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    总之,hMG既有改善子宫内膜容受性的作用,又可使围排卵期子宫内膜ER含量增加,有利于妊娠,但另一方面,hMG亦可致卵泡过早黄素化。白细胞ER放射配体测定是促排卵周期子宫内膜ER变化的重要监测手段。

    参考文献

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    10.隋龙,张令浩,杨云纺,等.白细胞雌激素受体测定及其周期性变化.中华妇产科杂志 1997;32(8):501

    11.Ohno Y,Hosokawa K,Tamura T,et al.Endometrum estrogen and progesterone receptors and their relationship to sonographic endometrial appearance.Hum Reprod 1995;10(3):708

    (收稿日期 1998-05-26), 百拇医药