宫内发育迟缓胎儿与正常胎儿胎盘表皮生长因子受体的比较
作者：高天金志魁 余艳红 张绍云 陈翠华 周凤琴
单位：510317 广州，解放军第一七七中心医院妇产科(高天)；第一军医大学南方医院妇产科(金志魁，余艳红，张绍云，陈翠华，周凤琴)
关键词：
中华妇产科杂志980216 近年来的研究表明，表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)可刺激许多培养的细胞分裂增生，有可能在胎儿、胎盘的生长发育中起作用。EGF需要通过与靶细胞上的EGF受体(EGFR)结合才能发挥作用，而EGFR在胎盘中有很强的表达。我们用免疫组化方法对妊娠各期胎盘EGFR的分布情况进行了研究，并将IUGR胎盘与正常胎儿胎盘的EGFR密度进行了比较，旨在了解IUGR胎盘上的EGFR的病理变化，探讨EGF及其受体在胎儿、胎盘生长过程中的生理作用。
一、资料与方法
, 百拇医药
1.资料：病例：选择1995年12月至1997年3月，在我院进行人工流产、引产、分娩的孕妇共60例，其中停经6～10周10例、妊娠20周12例、足月分娩38例，其中IUGR孕妇12例为IUGR组，同期住院分娩正常胎儿的孕妇26例为对照组，均在手术及分娩时取绒毛和胎盘组织。足月分娩时同时记录新生儿及胎盘情况。新生儿出生体重低于同孕龄儿的第10百分位数为IUGR。
2.方法：(1)胎盘标本制备：所有胎盘组织均于胎盘中间带取组织0.3mm×0.5mm，固定于4%中性福马林中，脱水、石蜡包埋，常规5μm连续切片，每个标本分别行HE染色和免疫组化染色。(2)免疫组化步骤：按SP法常规操作并行染色结果判断。(3)图象分析：用Quantimet 520图像分析仪进行场测量与计量分析，免疫组化标本选择A值(平均吸光度值)为定量参数；HE染色标本观察绒毛面积百分比(即绒毛面积占总面积的比例)。
3.试剂：单克隆鼠抗兔抗-EGFR抗体购自美国Sigma公司；免疫组化试剂购自北京中山生物技术有限公司。Quantimet 520图象分析仪为德国产品。
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4.数据处理：结果用±s表示，以t检验进行统计分析。
二、结果
附表 IUGR组与对照组临床情况比较 组别
例数
孕妇年龄
(岁)
孕周
(周)
新生儿体重
(g)
胎盘重量
(g)
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IUGR组
12
26.0±2.45
39.2±1.10
2 403.3±277.41
341.11±47.02
对照组
26
25.6±1.73
39.8±1.39
3 409.1±284.79
508.00±64.94
, 百拇医药
1.妊娠各期EGFR在胎盘上的分布情况：随孕期增长可见胎盘上合体滋养层渐代替细胞滋养层，且血管及结缔组织逐渐增加。孕早期EGFR仅分布于合体滋养层，位于其胞膜上及胞浆内。细胞滋养层及其他部位则未见染色。孕中、晚期也分布于相同部位，但是其受体密度渐减。以孕早期染色最深，孕晚期染色最浅。
2.IUGR组与对照组临床情况比较：两组孕妇年龄及孕周无明显差别(P>0.05)，IUGR组胎儿不仅体重明显低于正常胎儿(P<0.01)，而且伴小样胎盘(P<0.05)。见附表。
3.胎盘组织计量分析：IUGR组胎盘上绒毛面积百分比(37.08%±1.9%)较对照组(42.34%±3.3%)明显减少(P<0.001)，EGFR密度(0.181 9±0.001 5)较对照组(0.179 7±0.001 2)则明显增加(P<0.05)。
三、讨论
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IUGR对胎儿危害极大，可引起胎儿缺血缺氧、新生儿窒息和围产儿死亡。EGF在动物孕期中的作用已被广泛认识，ECF可促进多种动物器官发育及功能成熟[1]，EGF缺乏可致胎鼠失活及IUGR[2]。在人类，已发现EGF的作用涉及到胚胎的植入、促进合体滋养层的分化[3]，以及调节胎盘的分泌功能[4]。
本研究结果表明，孕6～41周，EGFR主要分布在有丝分裂不活跃的合体滋养层，有丝分裂活跃的细胞滋养层则未见染色，提示在妊娠过程中，EGF对胎盘的主要作用可能在于促进滋养细胞功能分化而不是增生。既往的研究也表明，EGFR主要分布在合体滋养层微绒毛顶端，后者是与母血直接接触的部位，是支持母胎交换与分泌激素等肽类物质的组织。众所周知，胎盘主要是在孕6周左右开始替代黄体功能产生孕酮与雌激素。有研究表明[3，4]EGF可促进培养的胎盘组织分泌hCG及人胎盘催乳素，我们的研究结果显示，EGFR于孕早期在合体滋养层有最强的表达，由此看来与孕早期胎盘分泌hCG的高峰是一致的。
, 百拇医药
我们的研究还表明，随孕期发展，虽然合体滋养层逐渐增多代替细胞滋养层，但EGFR密度随孕期渐减。这与孕晚期胎盘功能逐渐减退是一致的，其调节机制还不清楚。
Mimouni等[5]动物实验证实，孕鼠服用EGF后可增加胎盘的通透性，推测EGF可能是促进营养物质在胎盘以单纯扩散的方式摄取的调节因子之一。
我们既往的研究提示，发生IUGR时母血及脐血EGF均是下降的，低EGF环境可能影响了胎儿营养物质的摄取。本研究显示，IUGR胎盘EGFR密度的明显增加。对此我们认为，可能与EGF存在某种形式的反馈作用有关。但我们的研究同时表明IUGR不仅伴小样胎盘，且IUGR胎盘的绒毛面积百分比明显减少，所以其EGFR的绝对值仍有可能减少，胎盘功能仍为不足。母、胎血中EGF水平的降低与胎盘上EGF结合位点增多，两者在IUGR发生中可能相关或一致，有可能EGF的缺乏导致子宫胎盘功能不足而发生IUGR。同时由于EGF的自身调节作用而刺激胎盘导致EGFR增多，EGF结合位点也相应增多。
, 百拇医药
参考文献
1Plopper CG, Judith AG, Leanna CR, et al. Acceleration of alveolar type Ⅱ cell differentiation in fetal rhesus monkey lung by administration of EGF. Am J Physiol, 1992,262:313-321.
2Kamei Y, Tsutsumi O, Kuwabara Y, et al. Intrauterine growth retardiation and fetal losses are caused by epidemal growth factor deficiency in mice. Am J Physiol, 1993,264:597-600.
3Taga M, Sakakibara H, Sqji M, et al. Regulation of human decidual function by epidermal growth factor. Horm Res, 1995,44(Suppl 2):23-29.
, 百拇医药
4Barnea ER, Feldman D, Kaplan M, et al. The dual effect of epidermal growth factor upon human chorionic gonadotropin secretion by the first trimester placenta in vitro. J Clin Endocrinol Metab, 1990,71:923-928.
5Mimouni F, Hoath SB, Hammond G, et al. Effects of maternally administered epidermal growth factor on placental permeability. Am J Obstet Gynecol, 1991,165:173-176.
(收稿：1997-04-11 修回：1997-08-31)
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单位：510317 广州，解放军第一七七中心医院妇产科(高天)；第一军医大学南方医院妇产科(金志魁，余艳红，张绍云，陈翠华，周凤琴)
关键词：
中华妇产科杂志980216 近年来的研究表明，表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)可刺激许多培养的细胞分裂增生，有可能在胎儿、胎盘的生长发育中起作用。EGF需要通过与靶细胞上的EGF受体(EGFR)结合才能发挥作用，而EGFR在胎盘中有很强的表达。我们用免疫组化方法对妊娠各期胎盘EGFR的分布情况进行了研究，并将IUGR胎盘与正常胎儿胎盘的EGFR密度进行了比较，旨在了解IUGR胎盘上的EGFR的病理变化，探讨EGF及其受体在胎儿、胎盘生长过程中的生理作用。
一、资料与方法
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1.资料：病例：选择1995年12月至1997年3月，在我院进行人工流产、引产、分娩的孕妇共60例，其中停经6～10周10例、妊娠20周12例、足月分娩38例，其中IUGR孕妇12例为IUGR组，同期住院分娩正常胎儿的孕妇26例为对照组，均在手术及分娩时取绒毛和胎盘组织。足月分娩时同时记录新生儿及胎盘情况。新生儿出生体重低于同孕龄儿的第10百分位数为IUGR。
2.方法：(1)胎盘标本制备：所有胎盘组织均于胎盘中间带取组织0.3mm×0.5mm，固定于4%中性福马林中，脱水、石蜡包埋，常规5μm连续切片，每个标本分别行HE染色和免疫组化染色。(2)免疫组化步骤：按SP法常规操作并行染色结果判断。(3)图象分析：用Quantimet 520图像分析仪进行场测量与计量分析，免疫组化标本选择A值(平均吸光度值)为定量参数；HE染色标本观察绒毛面积百分比(即绒毛面积占总面积的比例)。
3.试剂：单克隆鼠抗兔抗-EGFR抗体购自美国Sigma公司；免疫组化试剂购自北京中山生物技术有限公司。Quantimet 520图象分析仪为德国产品。
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4.数据处理：结果用±s表示，以t检验进行统计分析。
二、结果
附表 IUGR组与对照组临床情况比较 组别
例数
孕妇年龄
(岁)
孕周
(周)
新生儿体重
(g)
胎盘重量
(g)
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IUGR组
12
26.0±2.45
39.2±1.10
2 403.3±277.41
341.11±47.02
对照组
26
25.6±1.73
39.8±1.39
3 409.1±284.79
508.00±64.94
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1.妊娠各期EGFR在胎盘上的分布情况：随孕期增长可见胎盘上合体滋养层渐代替细胞滋养层，且血管及结缔组织逐渐增加。孕早期EGFR仅分布于合体滋养层，位于其胞膜上及胞浆内。细胞滋养层及其他部位则未见染色。孕中、晚期也分布于相同部位，但是其受体密度渐减。以孕早期染色最深，孕晚期染色最浅。
2.IUGR组与对照组临床情况比较：两组孕妇年龄及孕周无明显差别(P>0.05)，IUGR组胎儿不仅体重明显低于正常胎儿(P<0.01)，而且伴小样胎盘(P<0.05)。见附表。
3.胎盘组织计量分析：IUGR组胎盘上绒毛面积百分比(37.08%±1.9%)较对照组(42.34%±3.3%)明显减少(P<0.001)，EGFR密度(0.181 9±0.001 5)较对照组(0.179 7±0.001 2)则明显增加(P<0.05)。
三、讨论
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IUGR对胎儿危害极大，可引起胎儿缺血缺氧、新生儿窒息和围产儿死亡。EGF在动物孕期中的作用已被广泛认识，ECF可促进多种动物器官发育及功能成熟[1]，EGF缺乏可致胎鼠失活及IUGR[2]。在人类，已发现EGF的作用涉及到胚胎的植入、促进合体滋养层的分化[3]，以及调节胎盘的分泌功能[4]。
本研究结果表明，孕6～41周，EGFR主要分布在有丝分裂不活跃的合体滋养层，有丝分裂活跃的细胞滋养层则未见染色，提示在妊娠过程中，EGF对胎盘的主要作用可能在于促进滋养细胞功能分化而不是增生。既往的研究也表明，EGFR主要分布在合体滋养层微绒毛顶端，后者是与母血直接接触的部位，是支持母胎交换与分泌激素等肽类物质的组织。众所周知，胎盘主要是在孕6周左右开始替代黄体功能产生孕酮与雌激素。有研究表明[3，4]EGF可促进培养的胎盘组织分泌hCG及人胎盘催乳素，我们的研究结果显示，EGFR于孕早期在合体滋养层有最强的表达，由此看来与孕早期胎盘分泌hCG的高峰是一致的。
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我们的研究还表明，随孕期发展，虽然合体滋养层逐渐增多代替细胞滋养层，但EGFR密度随孕期渐减。这与孕晚期胎盘功能逐渐减退是一致的，其调节机制还不清楚。
Mimouni等[5]动物实验证实，孕鼠服用EGF后可增加胎盘的通透性，推测EGF可能是促进营养物质在胎盘以单纯扩散的方式摄取的调节因子之一。
我们既往的研究提示，发生IUGR时母血及脐血EGF均是下降的，低EGF环境可能影响了胎儿营养物质的摄取。本研究显示，IUGR胎盘EGFR密度的明显增加。对此我们认为，可能与EGF存在某种形式的反馈作用有关。但我们的研究同时表明IUGR不仅伴小样胎盘，且IUGR胎盘的绒毛面积百分比明显减少，所以其EGFR的绝对值仍有可能减少，胎盘功能仍为不足。母、胎血中EGF水平的降低与胎盘上EGF结合位点增多，两者在IUGR发生中可能相关或一致，有可能EGF的缺乏导致子宫胎盘功能不足而发生IUGR。同时由于EGF的自身调节作用而刺激胎盘导致EGFR增多，EGF结合位点也相应增多。
, 百拇医药
参考文献
1Plopper CG, Judith AG, Leanna CR, et al. Acceleration of alveolar type Ⅱ cell differentiation in fetal rhesus monkey lung by administration of EGF. Am J Physiol, 1992,262:313-321.
2Kamei Y, Tsutsumi O, Kuwabara Y, et al. Intrauterine growth retardiation and fetal losses are caused by epidemal growth factor deficiency in mice. Am J Physiol, 1993,264:597-600.
3Taga M, Sakakibara H, Sqji M, et al. Regulation of human decidual function by epidermal growth factor. Horm Res, 1995,44(Suppl 2):23-29.
, 百拇医药
4Barnea ER, Feldman D, Kaplan M, et al. The dual effect of epidermal growth factor upon human chorionic gonadotropin secretion by the first trimester placenta in vitro. J Clin Endocrinol Metab, 1990,71:923-928.
5Mimouni F, Hoath SB, Hammond G, et al. Effects of maternally administered epidermal growth factor on placental permeability. Am J Obstet Gynecol, 1991,165:173-176.
(收稿：1997-04-11 修回：1997-08-31)
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