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齐可民 丁宗一 樊征鸿 周红 江载芳 唐建国
蛋白质类||克隆|分子||DNA|互补|||大肠杆菌,CloningofhumanleptincDNAanditsexpressioninE.coli,材料及方法,结果,图1,讨论,参考文献
作者：齐可民 丁宗一 樊征鸿 周红 江载芳 唐建国
单位：100045 北京儿科研究所(齐可民、丁宗一、樊征鸿、周红、江载芳)；北京大学生命科学学院(唐建国)
关键词：蛋白质类；；克隆；分子；；DNA；互补；；；大肠杆菌
论著 Cloning of human leptin cDNA and its expression in E. coli
Qi Kemin, Ding Zongyi, Fan Zhenghong, et al
【摘要】 目的 为获得大量人肥胖抑素(leptin)以便对其理化特性、生物学功能及其在肥胖发生中的作用进行深入的探讨。方法 作者从人脂肪细胞中提取总RNA，经逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得了人leptin cDNA；通过体外DNA重组技术，以pBV220为表达载体构建重组表达质粒pBV220-leptin，经酶切及序列分析所证实。然后将重组表达质粒转化大肠杆菌DH5α(E. coli DH5α)进行表达。结果 经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析，含有重组表达质粒的菌株表达出了特异性的16 ku蛋白质，其产量占总菌体蛋白的31%～47% ......
单位：100045 北京儿科研究所(齐可民、丁宗一、樊征鸿、周红、江载芳)；北京大学生命科学学院(唐建国)
关键词：蛋白质类；；克隆；分子；；DNA；互补；；；大肠杆菌
论著 Cloning of human leptin cDNA and its expression in E. coli
Qi Kemin, Ding Zongyi, Fan Zhenghong, et al
【摘要】 目的 为获得大量人肥胖抑素(leptin)以便对其理化特性、生物学功能及其在肥胖发生中的作用进行深入的探讨。方法 作者从人脂肪细胞中提取总RNA，经逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得了人leptin cDNA；通过体外DNA重组技术，以pBV220为表达载体构建重组表达质粒pBV220-leptin，经酶切及序列分析所证实。然后将重组表达质粒转化大肠杆菌DH5α(E. coli DH5α)进行表达。结果 经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析，含有重组表达质粒的菌株表达出了特异性的16 ku蛋白质，其产量占总菌体蛋白的31%～47% ......