薄层扫描法测定补气安神胶囊中黄芪甲甙的含量
作者：陈洪涛 莫新华 黄红泓
单位：广西中医学院制药厂 南宁 530023
关键词：黄芪甲甙；补气安神胶囊；薄层扫描法
广西中医学院学报000137 中图分类号 R284.1
补气安神胶囊是以黄芪为主药组成的复方制剂，具有补中益气、宁心安神的功能，用于气血不足，神疲乏力等症。本法用薄层扫描测定黄芪中黄芪甲甙的含量。实验中采用甲醇超声提取，经大孔吸附树脂柱净化后测定，结果满意，现报道如下。
1 仪器、试剂与样品
仪器：CS-9301型薄层扫描仪(日本岛津)。SY-1200超声波清洗器(上海声源超声波仪器设备有限公司)；微量注射器(宁波市镇海玻璃仪器厂)；939薄层制板器(重庆南岸贝尔德仪器技术厂)。
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试剂与样品：D101大孔吸附树脂(天津制胶厂)；薄层用硅胶G(青岛海洋化工集团公司)。黄芪甲甙对照品(中国药品生物制品检定所)；样品由广西中医学院制药厂研究所提供。
其余所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 供试品溶液的制备 精密称取本品内容物1.5g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，水溶液用水饱和正丁醇振摇提取3次(30，20，20ml)，合并正丁醇液，正丁醇液蒸干，残渣用5%乙醇5ml使溶解并转移至D101型大孔吸附树脂柱内(内径1.5cm，长度10～12cm)，先用水50ml洗脱，洗脱液弃去，再用40%乙醇30ml洗脱，洗脱液弃去，继用70%乙醇50ml洗脱，收集洗脱液并蒸干，残渣用甲醇定溶至2ml作为供试品溶液。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取黄芪甲甙对照品用甲醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。
, 百拇医药
2.3 色谱分析条件 展开条件：正丁醇-乙酸乙酯-水(5∶1∶4)上层溶液为展开剂。喷以10%硫酸乙醇，110℃显色5～7分钟。反射法锯齿型双波长薄层扫描，λR=700mm,λS=530nm，扫描速度：中等。
2.4 空白试验 取不含黄芪的补气安神胶囊，按样品溶液制备，测定，结果空白无干扰，见图1。
图1 补气安神胶囊的薄层扫描图
A.对照品 B.样品 C.空白
2.5 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液2μl，4μl，6μl，8μl，10μl，分别点于同一硅胶CMC-Na薄层板上，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液显色后进行测定，以峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标作标准曲线：
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Y=472.91X+33.452 r=0.9992
说明黄芪甲甙在2～10μg范围内呈良好线性关系。
2.6 稳定性实验 对同一对照品斑点，每隔30min扫描一次，连续6次，结果RSD为1.71%，说明本品在3h内稳定。
2.7 精密度试验 ①同点精密度(仪器精密度) 对同一斑点连续扫描5次，RSD为0.35%。②同板精密度 取样品溶液，在同一薄层板上点样5次，分别测定峰面积，RSD为0.94%。③异板精密度 在5块不同板上点同样量同一浓度的对照品，测定其峰面积，RSD为4.88%。
2.8 重现性实验 吸取供试品溶液4μl，对照品溶液2μl，6μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，依法测定含量。对同一样品进行5次测定，RSD为4.74%。
, 百拇医药 2.9 回收率试验 取已知含量的样品进行回收试验，结果见表1。
表1 样品中黄芪甲甙的回收率测定结果 编号
样品含量
mg
加入 量
mg
测得量
mg
回收率
%
%
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RSD
%
1
4.81
9.38
95.21
2
4.84
9.43
95.63
3
4.87
4.80
, http://www.100md.com
9.48
96.04
96.04
1.27
4
4.85
9.42
95.21
5
4.83
9.54
98.13
2.10 样品测定 按上述条件测定样品5批，结果见表2。3 讨论
, 百拇医药
3.1 曾将本样品超声20min,30min,40min后依法进行测定，结果表明30min后提取已完全，故将超声处理时间定为30min。
表2 样品中黄芪甲甙含量测定结果 样品批号
含量(n=5)
mg/粒
RSD
%
970711
11.86
1.34
970714
7.92
, 百拇医药
1.57
970822
9.30
2.24
970829
10.42
1.87
980314
9.59
1.92
3.2 曾选择氯仿∶甲醇∶水(13∶6∶2)，10℃以下放置过夜，下层液[1]，氯仿∶甲醇∶丙酮(2∶1∶1)等作为展开剂，但结果均不理想，采用文中所用展开剂，斑点分离度较好，且空白无干扰。
3.3 本法准确，可行，重现性好，可作为本品的质量控制方法。
参考文献
[1] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(一部).广东科技出版社，化学工业出版社，1995.272
收稿日期：1999-11-01, 百拇医药
单位：广西中医学院制药厂 南宁 530023
关键词：黄芪甲甙；补气安神胶囊；薄层扫描法
广西中医学院学报000137 中图分类号 R284.1
补气安神胶囊是以黄芪为主药组成的复方制剂，具有补中益气、宁心安神的功能，用于气血不足，神疲乏力等症。本法用薄层扫描测定黄芪中黄芪甲甙的含量。实验中采用甲醇超声提取，经大孔吸附树脂柱净化后测定，结果满意，现报道如下。
1 仪器、试剂与样品
仪器：CS-9301型薄层扫描仪(日本岛津)。SY-1200超声波清洗器(上海声源超声波仪器设备有限公司)；微量注射器(宁波市镇海玻璃仪器厂)；939薄层制板器(重庆南岸贝尔德仪器技术厂)。
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试剂与样品：D101大孔吸附树脂(天津制胶厂)；薄层用硅胶G(青岛海洋化工集团公司)。黄芪甲甙对照品(中国药品生物制品检定所)；样品由广西中医学院制药厂研究所提供。
其余所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 供试品溶液的制备 精密称取本品内容物1.5g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，水溶液用水饱和正丁醇振摇提取3次(30，20，20ml)，合并正丁醇液，正丁醇液蒸干，残渣用5%乙醇5ml使溶解并转移至D101型大孔吸附树脂柱内(内径1.5cm，长度10～12cm)，先用水50ml洗脱，洗脱液弃去，再用40%乙醇30ml洗脱，洗脱液弃去，继用70%乙醇50ml洗脱，收集洗脱液并蒸干，残渣用甲醇定溶至2ml作为供试品溶液。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取黄芪甲甙对照品用甲醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。
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2.3 色谱分析条件 展开条件：正丁醇-乙酸乙酯-水(5∶1∶4)上层溶液为展开剂。喷以10%硫酸乙醇，110℃显色5～7分钟。反射法锯齿型双波长薄层扫描，λR=700mm,λS=530nm，扫描速度：中等。
2.4 空白试验 取不含黄芪的补气安神胶囊，按样品溶液制备，测定，结果空白无干扰，见图1。
图1 补气安神胶囊的薄层扫描图
A.对照品 B.样品 C.空白
2.5 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液2μl，4μl，6μl，8μl，10μl，分别点于同一硅胶CMC-Na薄层板上，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液显色后进行测定，以峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标作标准曲线：
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Y=472.91X+33.452 r=0.9992
说明黄芪甲甙在2～10μg范围内呈良好线性关系。
2.6 稳定性实验 对同一对照品斑点，每隔30min扫描一次，连续6次，结果RSD为1.71%，说明本品在3h内稳定。
2.7 精密度试验 ①同点精密度(仪器精密度) 对同一斑点连续扫描5次，RSD为0.35%。②同板精密度 取样品溶液，在同一薄层板上点样5次，分别测定峰面积，RSD为0.94%。③异板精密度 在5块不同板上点同样量同一浓度的对照品，测定其峰面积，RSD为4.88%。
2.8 重现性实验 吸取供试品溶液4μl，对照品溶液2μl，6μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，依法测定含量。对同一样品进行5次测定，RSD为4.74%。
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表1 样品中黄芪甲甙的回收率测定结果 编号
样品含量
mg
加入 量
mg
测得量
mg
回收率
%
%
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RSD
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1
4.81
9.38
95.21
2
4.84
9.43
95.63
3
4.87
4.80
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9.48
96.04
96.04
1.27
4
4.85
9.42
95.21
5
4.83
9.54
98.13
2.10 样品测定 按上述条件测定样品5批，结果见表2。3 讨论
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3.1 曾将本样品超声20min,30min,40min后依法进行测定，结果表明30min后提取已完全，故将超声处理时间定为30min。
表2 样品中黄芪甲甙含量测定结果 样品批号
含量(n=5)
mg/粒
RSD
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970711
11.86
1.34
970714
7.92
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1.57
970822
9.30
2.24
970829
10.42
1.87
980314
9.59
1.92
3.2 曾选择氯仿∶甲醇∶水(13∶6∶2)，10℃以下放置过夜，下层液[1]，氯仿∶甲醇∶丙酮(2∶1∶1)等作为展开剂，但结果均不理想，采用文中所用展开剂，斑点分离度较好，且空白无干扰。
3.3 本法准确，可行，重现性好，可作为本品的质量控制方法。
参考文献
[1] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(一部).广东科技出版社，化学工业出版社，1995.272
收稿日期：1999-11-01, 百拇医药