TNFα、LPS诱导EA、hy926细胞一氧化氮合酶基因的转录
作者：斯勤 王小明 邱劲 李素敏 李健 郭恒怡 吴其夏
单位：中国医学科学院基础医学研究所 中国协和医科大学基础医学院病理生理室，北京 100005
关键词：
中国病理生理杂志001053
一氧化氮(NO)由一氧化氮合酶(NOS)催化L-精氨酸生成。诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是NOS三种亚型中催化产生NO较多的一种，可被多种炎症因子诱导，而诱导环节多在基因转录水平。目的：观察肿瘤坏死因子α(TNFα)、脂多糖(LPS)对内皮细胞系EA.hy926细胞iNOS基因转录的影响，并探讨蛋白激酶C(PKC)和丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)的作用。 方法：传代培养的EA.hy926细胞用TNFα，LPS处理18小时，并同时加入或不加蛋白激酶C抑制剂H-7、Calphostin和丝裂素原活化蛋白激酶抑制剂PD098059；人iNOS(hiNOS)基因表达以反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测。结果：200 IU/mL TNFα、100 ng/mL LPS均明显诱导EA.hy926细胞hiNOS基因的表达；H-7、Calphostin和PD098059可抑制TNFα诱导的hiNOS基因的表达。但PKC和MAPK抑制剂对LPS诱导的抑制效应均不显著。结论：TNFα诱导hiNOS基因的表达需要PKC和MAPK的活化，而LPS诱导hiNOS基因的表达可能还涉及其它蛋白激酶的途径。, 百拇医药
单位：中国医学科学院基础医学研究所 中国协和医科大学基础医学院病理生理室，北京 100005
关键词：
中国病理生理杂志001053
一氧化氮(NO)由一氧化氮合酶(NOS)催化L-精氨酸生成。诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是NOS三种亚型中催化产生NO较多的一种，可被多种炎症因子诱导，而诱导环节多在基因转录水平。目的：观察肿瘤坏死因子α(TNFα)、脂多糖(LPS)对内皮细胞系EA.hy926细胞iNOS基因转录的影响，并探讨蛋白激酶C(PKC)和丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)的作用。 方法：传代培养的EA.hy926细胞用TNFα，LPS处理18小时，并同时加入或不加蛋白激酶C抑制剂H-7、Calphostin和丝裂素原活化蛋白激酶抑制剂PD098059；人iNOS(hiNOS)基因表达以反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测。结果：200 IU/mL TNFα、100 ng/mL LPS均明显诱导EA.hy926细胞hiNOS基因的表达；H-7、Calphostin和PD098059可抑制TNFα诱导的hiNOS基因的表达。但PKC和MAPK抑制剂对LPS诱导的抑制效应均不显著。结论：TNFα诱导hiNOS基因的表达需要PKC和MAPK的活化，而LPS诱导hiNOS基因的表达可能还涉及其它蛋白激酶的途径。, 百拇医药