吸附澄清-高速离心-微滤法制备菖蒲益智口服液
作者：崔元璐* 沈 锋 姚康德
单位：天津大学材料科学与工程学院 300072
关键词：吸附澄清-高速离心-微滤法；醇沉法；吸附澄清法；菖蒲益智口服液
吸附澄清 摘 要 采用吸附澄清-高速离心-微滤法制备菖蒲益智口服液，并与醇沉法和吸附澄清法工艺进行了比较。结果表明，吸附澄清-高速离心-微滤法工艺能够提高制剂的有效成分含量，实现连续化生产，具有简化工艺，缩短生产周期，提高制剂稳定性的优点。
Studies on the Preparation of Chinese Traditional Herbal Oral
Liquid by Adsorption and Clarification-Ultracentrifugation-
, http://www.100md.com
Microfiltration Method
Cui Yuanlu, Shen Feng and Yao Kangde
(College of Materials Sciences and Engineering, Tianjin University, Tianjin 300072)
Abstract The preparation of “Changpuyizhi Oral Liquid”， a traditional Chinese prescription containing acorus calamus and Alpinia oxyphylla by a sequential adsorption-clarification-ultracentrifugation-microfiltration process was studied in comparison with the alcohol-precipitation and adsorption clarification process. Results of the study showed that the sequential process gave a product with better stability and lower cost besides a shorter production cycle.
, 百拇医药
Key words adsorption and clarification-ultracentrifugation-microfiltration method adsorbing-clarifying method alcohol-precipitation method Changpuyizhi Oral Liquid
近年来，药学工作者对传统的中药水提醇沉工艺进行了论述与评价[1]，认为尽管乙醇沉淀法具有澄清药液、减少服用量等优点，但也存在许多不足之处，如对除去成分选择性差，致使中药总固体物及有效成分损失严重，尤其是一些对免疫功能有重要调节作用的多糖类成分几乎损失殆尽，影响了临床疗效；乙醇损耗量大，生产成本较高；工艺周期长，不便于连续化生产；成品稳定性差。为了解决上述问题，发展了吸附澄清法[2]、高速离心法[3]及超滤法[4]等工艺。在此基础上，我们建立了吸附澄清-高速离心-微滤法，使得工艺更为有效，实现了中药口服液的连续无醇化生产。
, 百拇医药
笔者以菖蒲益智口服液(由人参、菖蒲、远志、茯苓等8味中药配伍而成)为例，采用吸附澄清-高速离心-微滤法工艺生产，并与醇沉法和只采用吸附澄清法的工艺进行比较，探讨了工艺的可行性。
1 药材、仪器与试剂
人参、菖蒲、远志、茯苓等药材(购自天津达仁堂药店)。
CS-9000薄层扫描仪(日本岛津公司)；自动点样器(瑞士CAMAG公司)；722分光光度计(上海第三分析仪器厂)；管式离心机(辽阳制药机械厂)；内压式中空纤维滤器：聚偏氟乙烯膜，孔径0.15μm，水通量0.5m3/h，额定工作压力0.20MPa(天津纺织工学院)。
人参皂苷Rg1标准品(中国药品生物制品检定所)；高效硅胶G板(青岛海洋化工厂)；101大孔树脂(南开大学化工厂)；ZTC1+1天然澄清剂(天津正天成澄清技术有限公司)；所用试剂均为分析纯。
, 百拇医药
2 方法
按处方称取人参、菖蒲、远志、茯苓等药材，水浸透，6倍量水煎煮2次，每次1h；4倍量水煎煮1次，0.5 h。合并3次水提液，等分成3份，备用。
2.1 醇沉法制备工艺：将中药水提液浓缩至1g(生药)/mL，冷却。加入95%乙醇至含醇量达60%，4℃冷藏48h，过滤。滤液回收乙醇，加蒸馏水配成0.87g(生药)/mL，加入山梨酸钾，甜菊糖，4℃静置24h后过滤，灌封，灭菌。
2.2 吸附澄清法制备工艺：将中药水提液浓缩至0.65g(生药)/mL，先后加入配制好的ZTC1+1天然澄清剂A组分及B组分，充分搅拌，60℃～80℃保温1h，静置3h，过滤。滤液浓缩至0.87g(生药)/mL，加入山梨酸钾，甜菊糖，4℃静置24 h后过滤，灌封，灭菌。
2.3 吸附澄清-高速离心-微滤法制备工艺：将中药水提液浓缩至适量，先后加入配制好的ZTC1+1天然澄清剂A组分及B组分，充分搅拌，60℃～80℃保温1h，用管式离心机以16 000r/min离心分离清液，调整药液浓度为0.87g(生药)/mL，加入山梨酸钾，甜菊糖，再通过0.15μm孔径的中空纤维滤器微滤，滤液无菌灌封。
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3 含量测定
3.1 人参皂甘Rg1含量测定：精密吸取3个工艺制成的菖蒲益智口服液各10mL，水浴蒸干。用20 mL氨试液(浓氨水40mL，加蒸馏水使成100mL)分次将蒸干后的残留物溶解。以水饱和的正丁醇萃取5次，合并萃取液，用正丁醇饱和的蒸馏水洗涤3次，回收正丁醇至干，以甲醇溶解残留物分别定容于5mL容量瓶中待用。然后将3个工艺的样品及人参皂苷Rg1标准品分别点于同一薄层板上，以正丁醇-异丙醇-乙酸乙酯-水(4∶1.5∶1∶1.1，氨气饱和)为展开剂，进行层析。挥去展开剂的薄层板置于5%硫酸乙醇溶液中浸后立即取出，105℃显色5 min，以薄层扫描法测定样品中人参皂苷Rg1含量。
3.2 总多糖含量测定：精密吸取3个工艺制成的菖蒲益智口服液各1 mL，加10 mL95%乙醇振摇均匀，离心分离沉淀，以10mL蒸馏水溶解，溶液过101大孔树脂柱，收集流出液加1%活性炭煮沸30 min，抽滤，滤液浓缩至2mL，加8倍量95%乙醇醇析，收集沉淀，丙酮洗涤，定容于10 mL容量瓶中待用。以葡萄糖为标准品，按文献[5]方法，用苯酚-硫酸法显色后在490 nm处测定吸收度，计算总多糖含量。
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3.3 总固体物测定：精密吸取3个工艺制成的菖蒲益智口服液各20 mL，置于预先干燥恒重的蒸发皿中，水浴蒸干后置烘箱中105 ℃干燥恒重，取出冷却后称重，计算总固体物百分含量。
4 结果与讨论
4.1 3种工艺生产的菖蒲益智口服液的成分比较：见表1。
表1 不同工艺制备的菖蒲益智口服液成分比较
样 品
人参皂苷Rg1(mg/mL)
总多糖
(mg/mL)
总固体物
, 百拇医药
(%)
醇沉工艺
0.440
7.410
18.8
吸附澄清工艺
0.465
40.685
22.1
吸附澄清-高速离心-微滤工艺
0.467
39.970
21.1
, http://www.100md.com
表1的结果表明，吸附澄清-高速离心-微滤法工艺生产的菖蒲益智口服液中人参皂苷Rg1含量高于醇沉工艺和吸附澄清工艺；总多糖含量比醇沉工艺高出4倍多，与吸附澄清工艺相近；总固体物含量高于醇沉工艺，略低于吸附澄清工艺。
4.2 3种工艺的比较：见表2。
由表2的比较可见，吸附澄清-高速离心-微滤法工艺省略了醇沉、回收乙醇、冷藏静置、高温灭菌等步骤，生产周期比醇沉法工艺和吸附澄清法工艺大大缩短，可以连续化生产，避免了反复加热、冷却药液对有效成分和制剂稳定性的破坏。 表2 3种工艺比较
工艺
工 艺 步 骤
生产周期
(h)
, 百拇医药
工艺
连续性
醇沉
回收乙醇
冷藏静置
灭菌
醇沉法
有
有
有
有
96
不连续
吸附澄清法
, http://www.100md.com
无
无
有
有
40
不连续
吸附澄清-高速离心-微滤法
无
无
无
无
12
连续生产
, 百拇医药 5 结论
5.1 研究结果表明：吸附澄清-高速离心-微滤法工艺生产菖蒲益智口服液，能够提高制剂的有效成分含量。
5.2 采用吸附澄清-高速离心-微滤法生产中药口服液，可以实现连续化生产，简化了工艺，缩短了生产周期，降低了生产成本。
5.3 吸附澄清-高速离心-微滤法工艺可以更有效地除去杂质，选择性地保留有效成分，提高中药口服液制剂的稳定性。
致谢：承蒙天津药物研究院官利民老师对实验研究给予指导，天津医药集团李朝兴教授审阅文稿，谨致衷心谢意。
参考文献
1 唐青华，等.中成药，1997，19(6)：38
2 杜成安，等.中成药，1993，15(11)：2
, 百拇医药
3 奉建芳，等.中成药，1996，18(12)：7
4 刘洪谦，等.中草药，1996，27(4)：209
5 姚 燕，等.中草药，1989，20(2)：13
6 王统宽.中国博士后论文集.北京：清华大学出版社，1990：104
7 周祖康，等.胶体化学基础.北京：北京大学出版社，1996：164
8 Rautenbach R(王乐夫，译).膜工艺-组件和装置设计基础.北京：化学工业出版社，1998：215
收稿日期：1999-02-9, 百拇医药(崔元璐* 沈 锋 姚康德)
单位：天津大学材料科学与工程学院 300072
关键词：吸附澄清-高速离心-微滤法；醇沉法；吸附澄清法；菖蒲益智口服液
吸附澄清 摘 要 采用吸附澄清-高速离心-微滤法制备菖蒲益智口服液，并与醇沉法和吸附澄清法工艺进行了比较。结果表明，吸附澄清-高速离心-微滤法工艺能够提高制剂的有效成分含量，实现连续化生产，具有简化工艺，缩短生产周期，提高制剂稳定性的优点。
Studies on the Preparation of Chinese Traditional Herbal Oral
Liquid by Adsorption and Clarification-Ultracentrifugation-
, http://www.100md.com
Microfiltration Method
Cui Yuanlu, Shen Feng and Yao Kangde
(College of Materials Sciences and Engineering, Tianjin University, Tianjin 300072)
Abstract The preparation of “Changpuyizhi Oral Liquid”， a traditional Chinese prescription containing acorus calamus and Alpinia oxyphylla by a sequential adsorption-clarification-ultracentrifugation-microfiltration process was studied in comparison with the alcohol-precipitation and adsorption clarification process. Results of the study showed that the sequential process gave a product with better stability and lower cost besides a shorter production cycle.
, 百拇医药
Key words adsorption and clarification-ultracentrifugation-microfiltration method adsorbing-clarifying method alcohol-precipitation method Changpuyizhi Oral Liquid
近年来，药学工作者对传统的中药水提醇沉工艺进行了论述与评价[1]，认为尽管乙醇沉淀法具有澄清药液、减少服用量等优点，但也存在许多不足之处，如对除去成分选择性差，致使中药总固体物及有效成分损失严重，尤其是一些对免疫功能有重要调节作用的多糖类成分几乎损失殆尽，影响了临床疗效；乙醇损耗量大，生产成本较高；工艺周期长，不便于连续化生产；成品稳定性差。为了解决上述问题，发展了吸附澄清法[2]、高速离心法[3]及超滤法[4]等工艺。在此基础上，我们建立了吸附澄清-高速离心-微滤法，使得工艺更为有效，实现了中药口服液的连续无醇化生产。
, 百拇医药
笔者以菖蒲益智口服液(由人参、菖蒲、远志、茯苓等8味中药配伍而成)为例，采用吸附澄清-高速离心-微滤法工艺生产，并与醇沉法和只采用吸附澄清法的工艺进行比较，探讨了工艺的可行性。
1 药材、仪器与试剂
人参、菖蒲、远志、茯苓等药材(购自天津达仁堂药店)。
CS-9000薄层扫描仪(日本岛津公司)；自动点样器(瑞士CAMAG公司)；722分光光度计(上海第三分析仪器厂)；管式离心机(辽阳制药机械厂)；内压式中空纤维滤器：聚偏氟乙烯膜，孔径0.15μm，水通量0.5m3/h，额定工作压力0.20MPa(天津纺织工学院)。
人参皂苷Rg1标准品(中国药品生物制品检定所)；高效硅胶G板(青岛海洋化工厂)；101大孔树脂(南开大学化工厂)；ZTC1+1天然澄清剂(天津正天成澄清技术有限公司)；所用试剂均为分析纯。
, 百拇医药
2 方法
按处方称取人参、菖蒲、远志、茯苓等药材，水浸透，6倍量水煎煮2次，每次1h；4倍量水煎煮1次，0.5 h。合并3次水提液，等分成3份，备用。
2.1 醇沉法制备工艺：将中药水提液浓缩至1g(生药)/mL，冷却。加入95%乙醇至含醇量达60%，4℃冷藏48h，过滤。滤液回收乙醇，加蒸馏水配成0.87g(生药)/mL，加入山梨酸钾，甜菊糖，4℃静置24h后过滤，灌封，灭菌。
2.2 吸附澄清法制备工艺：将中药水提液浓缩至0.65g(生药)/mL，先后加入配制好的ZTC1+1天然澄清剂A组分及B组分，充分搅拌，60℃～80℃保温1h，静置3h，过滤。滤液浓缩至0.87g(生药)/mL，加入山梨酸钾，甜菊糖，4℃静置24 h后过滤，灌封，灭菌。
2.3 吸附澄清-高速离心-微滤法制备工艺：将中药水提液浓缩至适量，先后加入配制好的ZTC1+1天然澄清剂A组分及B组分，充分搅拌，60℃～80℃保温1h，用管式离心机以16 000r/min离心分离清液，调整药液浓度为0.87g(生药)/mL，加入山梨酸钾，甜菊糖，再通过0.15μm孔径的中空纤维滤器微滤，滤液无菌灌封。
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3 含量测定
3.1 人参皂甘Rg1含量测定：精密吸取3个工艺制成的菖蒲益智口服液各10mL，水浴蒸干。用20 mL氨试液(浓氨水40mL，加蒸馏水使成100mL)分次将蒸干后的残留物溶解。以水饱和的正丁醇萃取5次，合并萃取液，用正丁醇饱和的蒸馏水洗涤3次，回收正丁醇至干，以甲醇溶解残留物分别定容于5mL容量瓶中待用。然后将3个工艺的样品及人参皂苷Rg1标准品分别点于同一薄层板上，以正丁醇-异丙醇-乙酸乙酯-水(4∶1.5∶1∶1.1，氨气饱和)为展开剂，进行层析。挥去展开剂的薄层板置于5%硫酸乙醇溶液中浸后立即取出，105℃显色5 min，以薄层扫描法测定样品中人参皂苷Rg1含量。
3.2 总多糖含量测定：精密吸取3个工艺制成的菖蒲益智口服液各1 mL，加10 mL95%乙醇振摇均匀，离心分离沉淀，以10mL蒸馏水溶解，溶液过101大孔树脂柱，收集流出液加1%活性炭煮沸30 min，抽滤，滤液浓缩至2mL，加8倍量95%乙醇醇析，收集沉淀，丙酮洗涤，定容于10 mL容量瓶中待用。以葡萄糖为标准品，按文献[5]方法，用苯酚-硫酸法显色后在490 nm处测定吸收度，计算总多糖含量。
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3.3 总固体物测定：精密吸取3个工艺制成的菖蒲益智口服液各20 mL，置于预先干燥恒重的蒸发皿中，水浴蒸干后置烘箱中105 ℃干燥恒重，取出冷却后称重，计算总固体物百分含量。
4 结果与讨论
4.1 3种工艺生产的菖蒲益智口服液的成分比较：见表1。
表1 不同工艺制备的菖蒲益智口服液成分比较
样 品
人参皂苷Rg1(mg/mL)
总多糖
(mg/mL)
总固体物
, 百拇医药
(%)
醇沉工艺
0.440
7.410
18.8
吸附澄清工艺
0.465
40.685
22.1
吸附澄清-高速离心-微滤工艺
0.467
39.970
21.1
, http://www.100md.com
表1的结果表明，吸附澄清-高速离心-微滤法工艺生产的菖蒲益智口服液中人参皂苷Rg1含量高于醇沉工艺和吸附澄清工艺；总多糖含量比醇沉工艺高出4倍多，与吸附澄清工艺相近；总固体物含量高于醇沉工艺，略低于吸附澄清工艺。
4.2 3种工艺的比较：见表2。
由表2的比较可见，吸附澄清-高速离心-微滤法工艺省略了醇沉、回收乙醇、冷藏静置、高温灭菌等步骤，生产周期比醇沉法工艺和吸附澄清法工艺大大缩短，可以连续化生产，避免了反复加热、冷却药液对有效成分和制剂稳定性的破坏。 表2 3种工艺比较
工艺
工 艺 步 骤
生产周期
(h)
, 百拇医药
工艺
连续性
醇沉
回收乙醇
冷藏静置
灭菌
醇沉法
有
有
有
有
96
不连续
吸附澄清法
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无
无
有
有
40
不连续
吸附澄清-高速离心-微滤法
无
无
无
无
12
连续生产
, 百拇医药 5 结论
5.1 研究结果表明：吸附澄清-高速离心-微滤法工艺生产菖蒲益智口服液，能够提高制剂的有效成分含量。
5.2 采用吸附澄清-高速离心-微滤法生产中药口服液，可以实现连续化生产，简化了工艺，缩短了生产周期，降低了生产成本。
5.3 吸附澄清-高速离心-微滤法工艺可以更有效地除去杂质，选择性地保留有效成分，提高中药口服液制剂的稳定性。
致谢：承蒙天津药物研究院官利民老师对实验研究给予指导，天津医药集团李朝兴教授审阅文稿，谨致衷心谢意。
参考文献
1 唐青华，等.中成药，1997，19(6)：38
2 杜成安，等.中成药，1993，15(11)：2
, 百拇医药
3 奉建芳，等.中成药，1996，18(12)：7
4 刘洪谦，等.中草药，1996，27(4)：209
5 姚 燕，等.中草药，1989，20(2)：13
6 王统宽.中国博士后论文集.北京：清华大学出版社，1990：104
7 周祖康，等.胶体化学基础.北京：北京大学出版社，1996：164
8 Rautenbach R(王乐夫，译).膜工艺-组件和装置设计基础.北京：化学工业出版社，1998：215
收稿日期：1999-02-9, 百拇医药(崔元璐* 沈 锋 姚康德)