凝聚胺试验与常用检测不完全抗体方法的敏感性比较
作者：杨世明 杨枨林 陈莉
单位：杨世明(第四军医大学唐都医院输血科,陕西 西安 710038)；杨枨林(第四军医大学唐都医院输血科,陕西 西安 710038)；陈莉(第四军医大学唐都医院输血科,陕西 西安 710038)
关键词：检查；血清学；凝聚胺试验
第四军医大学学报000467 中图号:R392.7 文献标识码:B
文章编号：1000-2790(2000)04-S0064- 02
0 引言
凝聚胺试验(MPT)是一种快速检测不完全抗体的方法,具有敏感 性高, 操作简单、快速等优点. 为了在国内广泛推广应用,我们对MPT，PEG-IAT 及传统抗 人球法检测产前IgG抗-A，IgG抗-B、新生儿溶血病(HDN)、 自身免疫性溶血性贫血免疫性 抗体的敏感性、特异性进行比较,报告如下.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 试剂 台湾东耀生物技术有限公司生产的MPT试剂盒(由LIM、凝聚胺溶液和 重悬浮液组成),抗人球蛋白试剂、抗-D、抗-E、抗-C Rh 定型血清及谱细胞购自上海市 输血研究所,PEG试 剂日本进口天津秦精细化学品有限公司分装,批号930109,平均分子量6000～8500,用pH 7.2 PBS将PEG配成25 g.L-1溶液,ABO RBC悬液本室配置,当日使用.
1.2 对象 夫妇ABO或Rh血型不合,有流产史或输血史的孕、产妇28例,出 生后有进行性黄疸、胆红素升高的患儿21例,输血反应5例,溶血性贫血6例.
1.3 方法 ①传统法:产前IgG抗-A、抗-B、抗-D、抗-E、抗-C效价 测定,不完全抗体筛检与鉴定,HDN患儿做直接抗人球蛋白试验、间接抗人球蛋白试验 (游离)、抗体 释放试验;②MPT法:用MPT试剂代替抗人球蛋白试剂操作,即:被检血清用2-Me(2-巯基乙醇) 处理后倍比稀释,加相应RBC再加MPT试剂做IgG抗-A、抗-B效价测定,HDN患儿RBC洗涤3次 后加MPT试剂做直接抗人球蛋白 试验,患儿血清加相应RBC再加MPT试剂做间接抗人球蛋白试验;③PEG-IAT法:被检血清加相 应RBC或谱细胞,再加PEG溶液4滴,放37℃水浴5～10 min,洗涤3次后加抗人球蛋白试剂,3000 r.min-1离心15 s观察结果, 如为溶血性贫血患者的标本,将其RBC洗涤3次后做广谱 抗人球蛋白试验, 阳性结果再做抗-IgG和抗-C3测定. 上述试验结果判定及抗体效价积分 计算方法均按文献[1]执行.
, 百拇医药
2 结果
2.1 MPT法、PEG-IAT法及抗人球法对不完全抗体的检测结果 见表1.
表 1 3种方法检测不完全抗体的结果 检测项目
例数
阳 性 例 数
MPT法
PEG-IAT法
抗人球法
产前IgG效价
28
16.
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16.
16.
抗体筛检
28
3
3
3
ABO HDN
21
12
12
12
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Rh HDN
2
2
2
2
输血反应
5
2
2
2
溶血性贫血
6
2
2
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2
.效价>64.2.2 MPT法、PEG-IAT法及抗人球法对抗-A、抗-B和Rh抗体效价测定结果 见表2.
表 2 3种方法测定抗体效价/积分的比较 抗体种类
MPT法
PEG-IAT法
抗人球法
抗-A
128/85
128/85
128/85
抗-B
, 百拇医药
256/93
256/93
256/93
抗-D
256/95
256/95
128/85
抗-E
256/95
256/95
128/85
抗-C
128/85
, 百拇医药
128/85
64/53
3 讨论
临床输血中发生溶血性输血反应的原因,多数 是由于输血前仅用盐水介质交叉配血,致使 有妊娠史、输血史或输血反应史的受血者血型IgG抗体漏检而引起. 传统检测血型IgG抗体的 方法有酶法和抗人球法,由于其操作方法繁琐、费时, 难以在输血前检测尤其是急诊输血中 常规应用. 凝聚胺(Polybrene) 是一种多价阳离子溴化己二甲胺多聚物,具有中和肝素的作 用,溶解后产生的正电荷可中和红细胞表面唾液酸所带的负电荷,使红细胞的zeta电位降低, 诱使红细胞产生可逆性的非特异性凝聚. 重悬浮液具有中和凝聚胺的作用, 使由凝聚胺诱发 的红细胞之间的非特异性凝集重新散开,而由抗原抗体反应所致的特异性凝集的红细胞不能 重新散开. 因此,MPT 法的敏感性除Kell血型系统外均高于抗人球法[2].
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我们应用MPT法和PEG-IAT法及抗人球法对产前免疫性抗体及 HDN患儿进行检测,结果显 示 ,对IgG抗-A、抗-B效价测定3种方法的敏感性相似,MPT法对HDN患儿的游离试验阳性率低于 抗 人球法,对Rh血型系统抗体效价测定,MPT法和PEG-IAT法的敏感性均高于抗人球法. 用MPT法 、PEG-IAT法及抗人球法对输血反应和溶血性贫血患者进行不完全抗体筛检与鉴定,结果在5 例输血反应中检出IgG抗-D抗体2例,在6例溶血性贫血患者中检出自身抗体/或伴同种抗体2 例 ,并同时用上述3种方法对检出的阳性标本进行检出率比较,结果完全一致,表明MPT法除用于 交叉配血试验外,还可代替抗人球法对溶血性输血反应和溶血性贫血患者进行不完全抗体或 自身抗体的筛检与鉴定[3]. MPT法不需做抗人球法交叉配血试验,就能检出大多数 有意义的 意外血型抗体,避免ABO血型不合和其他血型系统不合的血液输注,为安全输血提供了保证. 因此MPT法是一种为安全输入RBC提供指导的灵敏、快速、简便的试验方法[4],值得 在医院输 血科交叉配血试验、不完全抗体筛检与鉴定、溶血性输血反应及溶血性贫血等血型血清学快 速检测中推广应用.
, http://www.100md.com
作者简介:杨世明(1955-),男(苗族),湖北省宣恩县人. 主管技师. Tel.(0 29)3577166
参考文献：
[1] 肖星甫. 输血技术手册[M]. 成都:四川科学技术出版社,1992:87-8 9.
[2] 陈 忠,王雪明. 手工凝聚胺技术的应用[J]. 临床检验杂志,1997;15(1): 61-62.
[3] Owen I,Hows J. Evaluation of manual hexadimethrine bromide(Polybre ne) technique in the investigation of autoimmune hemolytic anemia[J]. Transfu sion,1990;30(9):814-818.
[4] 杨世英. 手工凝聚胺(polybrene)技术在输血前检查中应用与进展[J]. 中 国输血杂志,1996;9(增刊):9-11.
收稿日期:1999-03-29; 修回日期:1999-10-14, 百拇医药
单位：杨世明(第四军医大学唐都医院输血科,陕西 西安 710038)；杨枨林(第四军医大学唐都医院输血科,陕西 西安 710038)；陈莉(第四军医大学唐都医院输血科,陕西 西安 710038)
关键词：检查；血清学；凝聚胺试验
第四军医大学学报000467 中图号:R392.7 文献标识码:B
文章编号：1000-2790(2000)04-S0064- 02
0 引言
凝聚胺试验(MPT)是一种快速检测不完全抗体的方法,具有敏感 性高, 操作简单、快速等优点. 为了在国内广泛推广应用,我们对MPT，PEG-IAT 及传统抗 人球法检测产前IgG抗-A，IgG抗-B、新生儿溶血病(HDN)、 自身免疫性溶血性贫血免疫性 抗体的敏感性、特异性进行比较,报告如下.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 试剂 台湾东耀生物技术有限公司生产的MPT试剂盒(由LIM、凝聚胺溶液和 重悬浮液组成),抗人球蛋白试剂、抗-D、抗-E、抗-C Rh 定型血清及谱细胞购自上海市 输血研究所,PEG试 剂日本进口天津秦精细化学品有限公司分装,批号930109,平均分子量6000～8500,用pH 7.2 PBS将PEG配成25 g.L-1溶液,ABO RBC悬液本室配置,当日使用.
1.2 对象 夫妇ABO或Rh血型不合,有流产史或输血史的孕、产妇28例,出 生后有进行性黄疸、胆红素升高的患儿21例,输血反应5例,溶血性贫血6例.
1.3 方法 ①传统法:产前IgG抗-A、抗-B、抗-D、抗-E、抗-C效价 测定,不完全抗体筛检与鉴定,HDN患儿做直接抗人球蛋白试验、间接抗人球蛋白试验 (游离)、抗体 释放试验;②MPT法:用MPT试剂代替抗人球蛋白试剂操作,即:被检血清用2-Me(2-巯基乙醇) 处理后倍比稀释,加相应RBC再加MPT试剂做IgG抗-A、抗-B效价测定,HDN患儿RBC洗涤3次 后加MPT试剂做直接抗人球蛋白 试验,患儿血清加相应RBC再加MPT试剂做间接抗人球蛋白试验;③PEG-IAT法:被检血清加相 应RBC或谱细胞,再加PEG溶液4滴,放37℃水浴5～10 min,洗涤3次后加抗人球蛋白试剂,3000 r.min-1离心15 s观察结果, 如为溶血性贫血患者的标本,将其RBC洗涤3次后做广谱 抗人球蛋白试验, 阳性结果再做抗-IgG和抗-C3测定. 上述试验结果判定及抗体效价积分 计算方法均按文献[1]执行.
, 百拇医药
2 结果
2.1 MPT法、PEG-IAT法及抗人球法对不完全抗体的检测结果 见表1.
表 1 3种方法检测不完全抗体的结果 检测项目
例数
阳 性 例 数
MPT法
PEG-IAT法
抗人球法
产前IgG效价
28
16.
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16.
16.
抗体筛检
28
3
3
3
ABO HDN
21
12
12
12
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Rh HDN
2
2
2
2
输血反应
5
2
2
2
溶血性贫血
6
2
2
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2
.效价>64.2.2 MPT法、PEG-IAT法及抗人球法对抗-A、抗-B和Rh抗体效价测定结果 见表2.
表 2 3种方法测定抗体效价/积分的比较 抗体种类
MPT法
PEG-IAT法
抗人球法
抗-A
128/85
128/85
128/85
抗-B
, 百拇医药
256/93
256/93
256/93
抗-D
256/95
256/95
128/85
抗-E
256/95
256/95
128/85
抗-C
128/85
, 百拇医药
128/85
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3 讨论
临床输血中发生溶血性输血反应的原因,多数 是由于输血前仅用盐水介质交叉配血,致使 有妊娠史、输血史或输血反应史的受血者血型IgG抗体漏检而引起. 传统检测血型IgG抗体的 方法有酶法和抗人球法,由于其操作方法繁琐、费时, 难以在输血前检测尤其是急诊输血中 常规应用. 凝聚胺(Polybrene) 是一种多价阳离子溴化己二甲胺多聚物,具有中和肝素的作 用,溶解后产生的正电荷可中和红细胞表面唾液酸所带的负电荷,使红细胞的zeta电位降低, 诱使红细胞产生可逆性的非特异性凝聚. 重悬浮液具有中和凝聚胺的作用, 使由凝聚胺诱发 的红细胞之间的非特异性凝集重新散开,而由抗原抗体反应所致的特异性凝集的红细胞不能 重新散开. 因此,MPT 法的敏感性除Kell血型系统外均高于抗人球法[2].
, http://www.100md.com
我们应用MPT法和PEG-IAT法及抗人球法对产前免疫性抗体及 HDN患儿进行检测,结果显 示 ,对IgG抗-A、抗-B效价测定3种方法的敏感性相似,MPT法对HDN患儿的游离试验阳性率低于 抗 人球法,对Rh血型系统抗体效价测定,MPT法和PEG-IAT法的敏感性均高于抗人球法. 用MPT法 、PEG-IAT法及抗人球法对输血反应和溶血性贫血患者进行不完全抗体筛检与鉴定,结果在5 例输血反应中检出IgG抗-D抗体2例,在6例溶血性贫血患者中检出自身抗体/或伴同种抗体2 例 ,并同时用上述3种方法对检出的阳性标本进行检出率比较,结果完全一致,表明MPT法除用于 交叉配血试验外,还可代替抗人球法对溶血性输血反应和溶血性贫血患者进行不完全抗体或 自身抗体的筛检与鉴定[3]. MPT法不需做抗人球法交叉配血试验,就能检出大多数 有意义的 意外血型抗体,避免ABO血型不合和其他血型系统不合的血液输注,为安全输血提供了保证. 因此MPT法是一种为安全输入RBC提供指导的灵敏、快速、简便的试验方法[4],值得 在医院输 血科交叉配血试验、不完全抗体筛检与鉴定、溶血性输血反应及溶血性贫血等血型血清学快 速检测中推广应用.
, http://www.100md.com
作者简介:杨世明(1955-),男(苗族),湖北省宣恩县人. 主管技师. Tel.(0 29)3577166
参考文献：
[1] 肖星甫. 输血技术手册[M]. 成都:四川科学技术出版社,1992:87-8 9.
[2] 陈 忠,王雪明. 手工凝聚胺技术的应用[J]. 临床检验杂志,1997;15(1): 61-62.
[3] Owen I,Hows J. Evaluation of manual hexadimethrine bromide(Polybre ne) technique in the investigation of autoimmune hemolytic anemia[J]. Transfu sion,1990;30(9):814-818.
[4] 杨世英. 手工凝聚胺(polybrene)技术在输血前检查中应用与进展[J]. 中 国输血杂志,1996;9(增刊):9-11.
收稿日期:1999-03-29; 修回日期:1999-10-14, 百拇医药