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编号:10281706
不同类型肠梗阻血清中丙二醛的测定和细菌移位的实验研究
http://www.100md.com 《广东医学院学报》 1999年第3期
     作者:陈明 吴江 袁汉尧 吴兰 黄庆荣1

    单位:陈明、吴江、黄庆荣:广东医学院 袁汉尧:附院小儿外科 吴兰:附院检验科 生化教研室,湛江524001

    关键词:肠梗阻;自由基;细菌移位;疾病模型;动物

    广东医学院学报990304 摘要 目的:比较在不同类型肠梗阻中和不同范围绞窄性肠梗阻中丙二醛(MDA)的差异和细菌移位情况;并观察MDA和细菌移位的相互关系。方法:健康1月龄新西兰小兔40只,随机分成三组并制成不同的模型:(1)绞窄性肠梗阻组(简称A组)。(2)单纯性肠梗阻组(简称B组)。(3)对照组(简称C组)。测定各种肠梗阻前和梗阻12h后血清中MDA的含量,并行血细菌培养。 结果:A组MDA明显高于B组和C组(P<0.05和P<0.01);而B组和 C组无差异;绞窄肠袢范围大者MDA高于范围小者(P<0.05)。A+B组细菌 移位发生率高于C组(P<0.05);A组细菌移位发生率高于B组(P<0. 01 ),B组与C组无差异,肠袢绞窄范围大小与细菌移位发生率无关。结论:自由基的测定和细菌移位的监测在临床上对肠梗阻类型的诊断、绞窄肠袢范围的判断、治疗方案和手术时机的选择及预后估计都具有指导意义。
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    中图分类号 R 574.2

    An experimental study of serum malondialdehyde content

    and bacterial translocation in various kinds of

    bowel obstruction

    Chen Ming,Wu Jiang,Yuan Hanyao,et al

    (Affiliated Hospital of Guangdong Med ical College,Zhan jiang 524001)

    Abstract Objective:To compare se r um malondialdehyde(MDA) content and bac terial translocation in various kind s of bowel obstruction and in those with different lengths of intestinal loop strangulated.The relation betw een serum MDA content and the incide nce of bacterial translocation was a lso studied.Methods:40 h ealthy N ew Zealand rabbits were divided into 3 g roups and made to be different kinds of mode:Group A with strangulated b owel obstruction;Group B with simple obstruction and Group C as control.S erum MDA content were measured 12 ho urs after obstruction and blood cult ures also taken.Results: Serum M DA contents in Group A were markedly hig her than those in Group B and Group C(P<0.05 and P<0.01),whilst there wa s no difference between Group B and Group C.Regarding to Group A itself, there were higher MDA contents in Gr oup A100 with the long strangulated bowel loop than those in Group A40 with the short one (P<0.05).The inc idence of bacterial translocation in which no difference was seen betwee n Group B and Group C,was higher in Group A + Group B than in Group C(P< 0.05),was higher in Group A than in Group B(P<0.01).Between the length o f bowel strangulated and this incide nce no correlation could be found.Conclusious:In clinical point of v iew it is of significance to monitor fre e radical and to watch for bacterial translocation for establishing a pr ecise diagnosis of bowel obstraction in detail,evaluating the relative l ength of bowel loop strangulated,dec iding what kind of and when the surg ical procedure to perform and at las t for the prognosis forecasting.
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    Key words:intestinal obs truction;free radical; bacterial translocation;disease mode ls,animal

    肠梗阻是外科常见的病症。在临床上对不同类型的肠梗阻能否及时、准确地做出诊断和相应的治疗措施仍是临床上一个需要解决的课题。我们通过对动物制成不同类型的肠梗阻和不同范围的绞窄性肠梗阻的模型,测定其血清中MDA(丙二醛)含量的变化;并通过血细菌培养,比较在不同类型肠梗阻和不同范围绞窄性肠梗阻中MDA的差异和细菌移位情况,并了解MDA和细菌移位两者之间变化的关系,以便今后指导临床工作。现将结果报道如下:

    1 材料和方法

    1.1 材料 (1)健康1月龄新西兰小白兔40只,体重为(350±20)g,随机分为三组:A组16只(绞窄性肠梗阻组)、B组16只(单纯性肠梗阻组)、C组8只(对照组);其中A组又分为A40组(绞窄肠袢范围40cm)及A100(绞窄肠袢范围100cm)。(2)3%戍巴比妥钠溶液;南京建成生物工程研究所产的MDA测定试剂盒。(3)手术包、消毒微血管夹、无菌注射器和无菌试管若干。(4)细菌培养设备。
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    1.2 实验方法与步骤 (1)麻醉:用3%戍巴比妥钠溶液按1mL/kg,耳缘静脉注射麻醉。(2)第一次手术:严格按无菌操作,取中腹部正中切口,打开腹腔。A40组在距回盲部约20cm以上处取一段回肠袢约40cm,用丝线结扎肠袢两端,游离供应该肠袢的肠系膜血管,用微血管夹夹闭,肠袢回纳腹 腔后关腹。A100组取回肠袢100cm,用同样方法操作,造成二种不同范围的绞窄性肠梗阻。B组在距回盲部约20cm处用丝线结扎肠管,造成单纯性肠梗阻。C组打开腹腔后找到回盲部后,不行肠管结扎也不行血管结扎,理顺肠 管回纳腹腔关腹。(3)第二次手术:第一次手术后12h进行,麻醉按步骤(1),严格无菌操作,按原切口入腹。我们发现A组肠管绞窄符合A40和A100组的范围。B组梗阻近端肠管扩张明显,但无明显绞窄。C组肠管稍扩张,无缺血表现。A组给予解除梗阻和除去肠系膜微血管夹;B组给予解除梗阻;C组 按上方法找到回盲部。(4)标本采集与检测:第1次手术入腹后用无菌注射器予 各组抽取门静脉血2份,每份2mL。第2次手术入腹后给予A、B组解除梗阻 及A组除去肠系膜微血管夹后30min和C组同时抽门静脉血2份,每份2mL。把1份标本分离血清,用试剂盒测定MDA的含量。另一份标本做血细菌培养。
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    1.3 统计学处理 计量资料用方差分析和q检验;计数资料两组间比较用χ2检验。

    2 结果

    2.1 MDA的测定(1)在肠梗阻前测定A、B、C三组血清MDA,各组间 差异无显著性(P>0.05)。(2)肠梗后12h后,测定A(含A40 与A100)、B、C三组血清MDA含量的结果:见表1。

    表1 不同类型肠梗阻血清中MDA测定结果(±s)

    组别

    例数

    MDA(c/(nmol.mL-1))
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    A(A40+A100)

    16

    0.560±0.156

    A40

    8

    0.463±0.105

    A100

    8

    0.658±0.148

    B

    16

    0.329±0.166
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    C

    8

    0.297±0.067

    ①Avs B∶P<0.05 ②Avs C∶P<0.01

    ③A100vs C∶P<0.01 ④A40vs C∶P<0.01

    ⑤A100vs B∶P<0.05 ⑥A40vs B∶P>0.05

    ⑦B vs C∶P>0.05 ⑧A40vs A1 00∶P<0.05

    2.2 血细菌培养 (1)移位细菌按出现频度高低依次为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枸橼酸杆菌、表皮葡萄球菌、肠链球菌、不动杆菌等。(2)在肠梗阻前, A、B、C三组抽取门静脉血行细菌培养均为阴性。(3)肠梗阻12 h后,门静脉血培养各组细菌生产情况和各组间比较的结果:见表2。
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    表2 不同类型肠梗阻血菌培 养发生率比较

    组别

    阳性

    (例)

    阴性

    (例)

    总数

    (例)

    阳性率

    /%

    A(A40+A100)

    16
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    0

    16

    100.00

    B

    9

    7

    16

    56.25

    C

    2

    6

    8

    25.00

    ① A+Bvs C∶P<0.05 ②Avs B∶P<0 .01
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    ③ Bvs C∶P>0.05 ④A40vs A100∶P>0.05

    3 讨论

    3.1 肠梗阻与自由基的关系 在各种病理过程中,体内自由基的产生超过清除能力时,未被清除的氧自由基可导致一系列的连锁反应,对生物分子有极大的破坏作用,主要使核酸主链断裂、碱基降解、蛋白质交联或多肽键断裂及脂质过氧化等,这些都是许多疾病的病理基础[1]。MDA是机体受自由基损害的病理过程中产生的过氧化物。其在体内的含量高低可间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度。近年来有研究表明大量氧自由基生成在肠缺血——再灌注(I/R)损伤中发挥了重要的作用[2]。本资料表明,在不同类型的肠梗阻的血清中自由基的含量(即MDA的含量)也不同。在绞窄性肠梗阻A100组中MDA明显高于单纯性肠梗阻及对照组,这点与IvanovA和Otamiri在临床肠梗阻病例观察中的结果相符[3,4]。而A40组与B组之间差异无显著性,可能与A40标本量少有关。本实验发现不同范围的绞窄性肠梗阻中绞窄肠袢范围与自由基含量成正相关系。由此可见,绞窄性肠梗阻自由基对机体的损害比单纯性肠梗阻严重,绞窄肠袢范围越大自由基对机体损伤越严重。
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    3.2 肠梗阻与细菌移位的关系 目前认为细菌移位可能是导致内源性感染难以控制的重要原因。肠道菌群生态平衡被破坏、细菌过度生长和肠粘膜屏障破坏是细菌移位的两大因素。肠道内需氧菌、兼性厌氧菌和专性厌氧菌,菌群之间在正常情况下保持着生态平衡。Berg和wells在动物实验中证实肠道内源性菌群生态平衡破坏,某种细菌在肠道内水平增高,可促使细菌由胃肠道向肠系膜淋巴结和全身内脏器官移位,当某种细菌水平达107~109CFu/g时,即使正常动物也能发生细菌移位[5]。张斌等通过动物实验也证实了这一点,并对肠梗阻时限和血运与细菌移位进行研究,认为单纯性机械性肠梗阻时间延长,细菌移位发生率越高,肠绞窄短时间即可造成严重细菌移位[6]。本实验也证明了绞窄性肠梗阻细菌移位严重于单纯性肠梗阻。完整的肠粘膜屏障可阻止肠腔内大量细 菌及毒素移位到肠外。Morehouse等经动物研究证实,当肠粘膜屏障受破 坏时,肠道细菌即可移位至内脏器官和组织,造成严重的内源性感染[7]。本组动物实验表明:(1)肠梗阻可导致细菌移位。(2)绞窄性肠梗阻细菌移位严重 于单纯性肠梗阻,即肠梗阻严重程度与细菌移位发生率成正相关系。(3)细菌移位发生率与绞窄性肠梗阻肠袢绞窄范围无关。(4)单纯性肠梗阻与对照组细菌移位发生率无差异,说明细菌移位不只限于机械性肠梗组,其它腹部手术对消化道的干扰和打击同样可导致细菌移位,这点应值得我们注意。(5)移位细菌以革兰氏阴 性肠杆菌为主,与文献报告一致[4]
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    3.3 自由基和细菌移位的关系 本组实验表明,在不同类型肠梗阻中,自由基的含量与细菌移位发生率成正比。肠梗阻程度越严重,血清自由基含量越高。自由基在肠缺血——再灌注(I/R)中对肠损伤越严重,导致肠粘膜屏障破坏越严重,故有利于细菌移位至肠外组织器官。而细菌的过度生长、移位对机体的侵害,又导致机体内自由机增多。二者相辅相承,在机体的病理过程中起着重要的作用。

    我们认为自由基的测定和细菌移位的监测在临床上具有积极的指导意义:(1)肠梗阻类型(绞窄或单纯)的诊断。(2)绞窄性肠梗阻肠袢绞窄范围的判断。(3) 治疗方案和手术时机的选择。(4)预后估计。

    4 参考文献

    1 方允中,李文杰主编.自由基与酶.北京:科学出版社出版,1989.111

    2 Zimmerman BJ,Granger DN.Reperfusion injury.Surg Clin North Am,1992,72:65
, 百拇医药
    3 Ivanov A,Khinev S,Koinova G,et al.Thedetermi-nation of plasma malondia ldehyde in patients with obstruction of the small intestine.Khirurgiia ( Sofiia),1995,48(4):38~40

    4 Otamiri TA,Tagesson C,Sjodahl R.In creased plasma malondialdehyde in pa tients with small intestinal strangu lation obstruction.Acta Chir Scand,1998,154(4):283~5

    5 Deitch EA,Maejima K,Berg RD.Effect of oral antibiotics and bacterial o vergrowth on the translocation of th e GI tract microflora in burned rats. J Trauma,1985,25:385

    6 张斌,周为,薛崇德,等.机械性肠梗阻时限和血运与细菌移位关系的动物实 验研究.中华小儿外科杂志,1996,17:34

    7 Morehouse JL,Specian RD,Stewart JJ, et al.Translocation of indigenous ba cteria from the gastrointestinal tra ct of mice after oral ricinoleic acid treatment.Gastroenterology,1986,91 :673

    收稿日期:1999-01-29, 百拇医药