细菌内毒素检查法对诺氟沙星葡萄糖注射液热原限度探讨
作者：张春福
单位：解放军第123医院安徽 蚌埠233015
关键词：细菌内毒素检查法；热原；诺氟沙星葡萄糖注射液
淮海医药000164
【中国图书分类号】 R 927.12
诺氟沙星葡萄糖注射液热原检查常用家兔法，剂量按家兔体重每公斤注射样品12 ml，升温应符合《中国药典》九五版二部附录规定。笔者经过长期临床观察，对照试验，制定应用细菌内毒素检查法代替家兔法对该品进行热原检查，结果可靠，操作简单，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料 鲎试剂(TAL)，批号为971124，灵敏度0.5 EU/ml。细菌内毒素工作标准品，批号为970610，10 EU/支。鲎试剂溶解水，批号为971108。以上三种试剂均为福州东方鲎试剂厂生产。诺氟沙星葡萄糖注射液为本院制剂，制法按《中国人民解放军制剂规范》九一版增补本配制。
1.2 方法
1.2.1 鲎试剂灵敏度复核 按照《中国药典》九五版二部进行操作，见表1。计算结果，实际标定值为0.5 EU/ml。
表1 鲎试剂灵敏度复核 内毒素浓度
1.0
0.5
0.25
0.125
阴性对照
EU/ml
------------
1.2.2 药品内毒细菌内毒素限值的确定 因药品内毒素检查为限度试验，所以必须确定内毒素限值。当供试品低于这个限值时，按规定的给药途径，就不会引发热原反应；相反就有可能引起热原反应，根据公式，L＝K/M，K为按规定的给药途径，临床无任何不良反应的内毒素剂量为5 EU/ml，M为热原检查用量或人用最大剂量，即按人用量计算为L＝5/250/60＝1.2 EU/ml。或按热原检查用量计算为L＝5/12＝0.42 EU/ml。在鲎试剂标示值的范围内(1.0 EU～0.25 EU/ml)
1.2.3 干扰试验 为了证明样品对鲎试剂是否存在干扰因素，在什么样浓度范围内可以克服干扰因素，又能客观反应内毒素的量，在符合规定的限度内，根据样品内毒素的限值，将内毒素工作标准品，按比例稀释成1.0 EU/ml，0.5 EU/ml，0.25 EU/ml，0.125 EU/ml四个浓度，每个浓度平均做4管，并同时做标准对照，具体做法为首先在每个管中加入0.1 ml无热原蒸馏水，然后在每个试管加入0.1 ml样品，测定结果见表2。表2 干扰试验 内毒素浓度
1.0
0.5
0.25
0.125
阴性
阳性
Eμ/ml0.1 ml
加样品0.1 ml
------------
溶解水0.1ml
------------
2 结果
实验共做6批，空白对照管与样品管完全吻合，说明样品在此浓度下，不存在干扰作用。
3 讨论
以实验可以看出，样品可以用细菌内毒素检查法做热原检查，我们采用2个不同厂家生产的鲎试剂，以及3个不同厂家生产的药品，做同样试验，结果一致。说明结果可靠，1998年我院共生产6批，首先用兔法做热原检查，然后用鲎试剂做热原检查，结果一致，因此笔者认为用细菌内毒素检查法代替兔法对诺氟沙星葡萄糖注射液进行热原检查是可行的。, 百拇医药
单位：解放军第123医院安徽 蚌埠233015
关键词：细菌内毒素检查法；热原；诺氟沙星葡萄糖注射液
淮海医药000164
【中国图书分类号】 R 927.12
诺氟沙星葡萄糖注射液热原检查常用家兔法，剂量按家兔体重每公斤注射样品12 ml，升温应符合《中国药典》九五版二部附录规定。笔者经过长期临床观察，对照试验，制定应用细菌内毒素检查法代替家兔法对该品进行热原检查，结果可靠，操作简单，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料 鲎试剂(TAL)，批号为971124，灵敏度0.5 EU/ml。细菌内毒素工作标准品，批号为970610，10 EU/支。鲎试剂溶解水，批号为971108。以上三种试剂均为福州东方鲎试剂厂生产。诺氟沙星葡萄糖注射液为本院制剂，制法按《中国人民解放军制剂规范》九一版增补本配制。
1.2 方法
1.2.1 鲎试剂灵敏度复核 按照《中国药典》九五版二部进行操作，见表1。计算结果，实际标定值为0.5 EU/ml。
表1 鲎试剂灵敏度复核 内毒素浓度
1.0
0.5
0.25
0.125
阴性对照
EU/ml
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1.2.2 药品内毒细菌内毒素限值的确定 因药品内毒素检查为限度试验，所以必须确定内毒素限值。当供试品低于这个限值时，按规定的给药途径，就不会引发热原反应；相反就有可能引起热原反应，根据公式，L＝K/M，K为按规定的给药途径，临床无任何不良反应的内毒素剂量为5 EU/ml，M为热原检查用量或人用最大剂量，即按人用量计算为L＝5/250/60＝1.2 EU/ml。或按热原检查用量计算为L＝5/12＝0.42 EU/ml。在鲎试剂标示值的范围内(1.0 EU～0.25 EU/ml)
1.2.3 干扰试验 为了证明样品对鲎试剂是否存在干扰因素，在什么样浓度范围内可以克服干扰因素，又能客观反应内毒素的量，在符合规定的限度内，根据样品内毒素的限值，将内毒素工作标准品，按比例稀释成1.0 EU/ml，0.5 EU/ml，0.25 EU/ml，0.125 EU/ml四个浓度，每个浓度平均做4管，并同时做标准对照，具体做法为首先在每个管中加入0.1 ml无热原蒸馏水，然后在每个试管加入0.1 ml样品，测定结果见表2。表2 干扰试验 内毒素浓度
1.0
0.5
0.25
0.125
阴性
阳性
Eμ/ml0.1 ml
加样品0.1 ml
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溶解水0.1ml
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2 结果
实验共做6批，空白对照管与样品管完全吻合，说明样品在此浓度下，不存在干扰作用。
3 讨论
以实验可以看出，样品可以用细菌内毒素检查法做热原检查，我们采用2个不同厂家生产的鲎试剂，以及3个不同厂家生产的药品，做同样试验，结果一致。说明结果可靠，1998年我院共生产6批，首先用兔法做热原检查，然后用鲎试剂做热原检查，结果一致，因此笔者认为用细菌内毒素检查法代替兔法对诺氟沙星葡萄糖注射液进行热原检查是可行的。, 百拇医药