IN-1重组单链抗体基因的克隆和序列分析

http://www.100md.com 四平市中心人民医院；中国医科大学第一临床学院神经外科 辽宁沈阳110001 王勇；郑伟；吴安华；方谨；邵春波

IN-1重组单链抗体|基因合成|克隆

    参见附件(63kb)。

     四平市中心人民医院；中国医科大学第一临床学院神经外科 辽宁沈阳110001 王勇；郑伟；吴安华；方谨；邵春波；刘恒威；李志刚；王运杰

    关键词：IN-1重组单链抗体；基因合成；克隆

    摘要：目的 应用基因工程技术获得人工设计的IN - 1重组单链抗体 (IN - 1-scFv)的cDNA克隆。方法 参照 genebank中发表的IN - 1抗体的轻链重链序列 ,重新设计适于在大肠杆菌中表达的目的基因片段 ,将该基因双链分成 3 5个小片段合成 ,经退火、复性连接成目的片段后 ,克隆到经过BamHI和HindIII双酶切的克隆载体pUC18中 ,并转化大肠杆菌DH5a,抽提重组子 pUC18/744进行克隆PCR、酶切鉴定及测序分析。结果 测序结果证明获得的基因序列与实验设计仅差一个碱基。结论 正确设计并合成了IN - 1重组单链抗体 (IN - 1-scFv)的cDNA ,为深入研究其生物活性奠定了基础...

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