云南红豆杉中的非紫杉烷类化合物△
作者：项伟 姚娉 张宏杰 孙汉董 李良
单位：项伟 云南省林业科学院(昆明 650204)；姚娉(贵州省中医研究所)；张宏杰 孙汉董(中国科学院昆明植物研究所)；李良(云南大学)
关键词：云南红豆杉；非紫杉烷类化合物；木脂素；甾醇
中草药000403 摘 要 从怒江产云南红豆杉 Taxus yunnanensis中分得5个非紫杉烷类化合物：3β-hydroxy-5α，8α-epidioxyergosta-6，22 diene (Ⅰ)，β-谷甾醇(β-sitosterol，Ⅱ)，pluviatilol (Ⅲ)，α-conidendrin (Ⅳ)和secoisolariciresinol (Ⅴ)。其中Ⅰ是首次从红豆杉科植物中得到。我们利用核磁共振波谱与质谱等技术确定了它们的结构。
Studies on Some Non-Taxane Constituents in Yunnan Yew
, 百拇医药
(Taxus yunnanensis) Root
Yunnan Academy of Forestry (Kunming 650204) Xiang Wei
Guizhou Institute of TCM Yao Ping
Kunming Institute of Plant, Chinese Academy of Sciences Zhang Hongjie and Sun Handong
Yunnan University Li Liang
Abstract Studies on the root of Taxus yunnanensis Cheng et L. K. Fu, grown in Nujiang area, Yunnan Province, resulted in the isolation of 5 non-taxanes: 3β-hydroxy-5α, 8α-epidioxyergosta-6，22-diene, β-sitosterol, pluviatilol, α-conidendrin and secoisolariciresinol. One of them (3β-hydroxy-5α, 8α-epi-dioxyergosta-6，22-diene) was obtained from Taxus L. for the first time. Their structures were confirmed by modern spectral analysis (NMR, MS， etc.)
, 百拇医药
Key words Taxus yunnanensis Cheng et L. K. Fu non-taxanoid compounds lignans sterols
红豆杉属植物Taxus L.全世界约有11 种，我国有4 种和1 变种。其中主产于我省的云南红豆杉Taxus yunnanensis Cheng et L. K. Fu，因为紫杉醇(paclitaxel)含量可高达万分之五，成为其中最具价值的一种。另外，与其它红豆杉属植物一样，云南红豆杉中除我们已经知道含有丰富的紫杉烷类化合物(其中有一些有较高抗癌活性)外，还含有木脂素等其它非紫杉烷类化学成分。现简要报道从怒江产云南红豆杉T. yunnanensis根中分离鉴定的5 个非紫杉烷类化合物：3β-hydroxy-5α，8α-epidioxyergosta-6，22-diene、β-谷甾醇(β-sitosterol)，pluviatilol，α-conidendrin，secoisolariciresinol。其中3β-hydroxy-5α，8α-epidioxyergosta-6，22-diene是首次从红豆杉科植物中得到。
, 百拇医药
1 材料和仪器
云南红豆杉根样品(40 kg)采自云南省怒江州泸水县。旋光用Dip-360 旋光仪测定；红外光谱以PE-577 型(KBr压片)；质谱用VG Auto Spec-3000 测定；核磁共振谱用Bruker AM-400(或AM500)测定。硅胶是青岛海洋化工厂的硅胶G。
2 提取与分离
云南红豆杉根样品(40 kg)干燥并粉碎。用乙醚浸提，得650 g粗提物，经2 kg(0.04～0.063 mm)硅胶柱层析，以CHCl3-Me2CO梯度洗脱。在CHCl3-Me2CO=10∶1段得样品第24～28部分(总重14.60 g)。该洗脱部位再经多次硅胶柱层析得到了5 个非紫杉烷类化合物。
3 结构鉴定
, http://www.100md.com
化合物Ⅰ：3β-hydroxy-5α，8α-epidioxyergosta-6，22-diene，无色针状结晶，mp173 ℃，[α]D25=-27.0°(c，0.2，吡啶)，由高分辨EI-MS得分子式为C28H44O3；EIMS m/z：428[M]+(30%)，410[M-H2O]+(35%)，396[M-O2]+(100%)，376，363，337，327，303，285，267，251，237，227，209，197，183，175，152，135，107，95。1HNMR(500 Hz，CDCl3)δ：3.97(1H，m，H-3)，2.10(1H，m，H-4a)，1.90(1H，m，H-4b)，6.24(1H，d，J=8.6，H-6)，6.50(1H，d，J=8.4，H-7)，1.51(1H，t，m，H-9)，1.59(1H，m，H-14)，1.23(1H，m，H-17)，0.82(3H，s，H-18)，0.90(3H，s，H-19)，1.22(1H，m，H-20)，1.00(3H，d，J=6.6，H-21)，5.14(1H，dd，J=15.3，8.3，H-22)，5.22(1H，dd，J=15.3，7.6，H-23)，1.85(1H，m，H-24)，1.50(1H，m，H-25)，0.83(3H，d，J=7.0，H-26)，0.82(3H，d，J=6.8，H-27)，0.91(3H，d，J=6.8，H-28)。13CNMR(100 MHz，CDCl3)δ：34.7(C-1)，30.1(C-2)，66.5(C-3)，37.0(C-4)，82.2(C-5)，135.4(C-6)，130.8(C-7)，79.3(C-8)，51.1(C-9)，37.0(C-10)，23.4(C-11)，39.4(C-12)，44.6(C-13)，51.7(C-14)，20.6(C-15)，28.6(C-16)，56.2(C-17)，12.9(C-18)，118.2(C-19)，39.7(C-20)，20.9(C-21)，135.2(C-22)，132.3(C-23)，42.8(C-24)，33.1(C-25)，19.6(C-26)，19.9(C-27)，17.5(C-28)。依据光谱数据分析，确定化合物Ⅰ为3β-hydroxy-5α，8α-epidioxyergosta-6，22-diene[1，2]。过去有人曾在海洋有机物中发现有微量的此化合物[1，2]。
, 百拇医药
化合物Ⅱ：白色粉末，[α]25D=-33.6°(c，0.6，CHCl3)，EIMS，1H、13CNMR光谱数据分析，确定Ⅱ为β-谷甾醇[3，4]。
化合物Ⅲ：pluviatilol，白色粉末，[α]25D=-122.0°(c，1.0，CHCl3)，由高分辨EIMS得分子式为C20H20O6；EIMS m/z：356[M]+(98%)，151[4-hydroxy-3-methoxybenzoy]+(100%)，149(70%)，83(81%)，1HNMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.75～6.95(1H，m，H-2)，6.75～6.95(1H，m，H-5)，6.75～6.95(1H，m，H-6)，4.81(1H，d，J=5.2，H-7)，3.28(1H，m，H-8)，3.80(1H，m，H-9α)，4.08(1H，d，J=9.4，H-9β)，6.75～6.95(1H，m，H-2′)，6.75～6.95(1H，m，H-5′)，6.75～6.95(1H，m，H-6′)，4.37(1H，d，J=7.2，H-7′)，2.86(1H，q，J=7.1，H-8′)，3.84(1H，m，H-9′α)，3.28(1H，m，H-9′β)，5.94(2H，s，-OCH2O-)，3.86(3H，s，-OCH3)。13CNMR(100 MHz，CDCl3)δ：133.1(C-1)，108.7(C-2)，146.7(C-3)，145.4(C-4)，114.3(C-5)，119.2(C-6)，87.7(C-7)，54.5(C-8)，69.6(C-9)，132.3(C-1′)，106.4(C-2′)，146.6(C-3′)，147.6(C-4′)，108.1(C-5′)，118.7(C-6′)，82.1(C-7′)，50.2(C-8′)，71.0(C-9′)，55.9(OCH3)，100.9(-OCH2O-)。依据光谱数据分析，确定化合物Ⅲ为pluviatilol[5]。
, 百拇医药
化合物Ⅳ：α-conidendrin，白色粉末，[α]25D=-17.7°(c，1.2，pyridine)，由高分辨EIMS得分子式为C20H20O6(不饱和度为11)；EIMS m/z：356[M]+(100%)，339，271，255，241，175，137；1HNMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.11(1H，brs，H-2)，6.46(1H，s，H-5)，2.95(1H，dd，J=15.0，J=4.36，H-7a)，2.73(1H，dd，J=15.2，J=10.4，H-7b)，2.37(1H，m，H-8)，6.36(1H，brs，H-2′)，6.58(1H，d，J=8.0，H-5′)，6.42(1H，d，J=1.64，H-6′)，3.63(2H，d，J=8.4，H-7′)，2.37(1H，m，H-8′)，3.84(1H，t，J=10.2，H-9′α)，4.01(1H，dd，J=8.8，J=6.1，H-9′β)，3.64(3H，s，-OCH3)，3.58(3H，s，-OCH3)。13CNMR(100 MHz，CDCl3)δ：126.3(C-1)，112.4(C-2)，146.7(C-3)，145.6(C-4)，116.1(C-5)，132.0(C-6)，29.4(C-7)，50.1(C-8)，178.5(C-9)，134.4(C-1′)，111.5(C-2′)，148.2(C-3′)，144.9(C-4′)，116.1(C-5′)，121.6(C-6′)，47.9(C-7′)，42.3(C-8′)，72.6(C-9′)，56.1(OCH3)，56.1(OCH3)。依据光谱数分析，确定化合物Ⅳ为α-conidendrin[6]。
, 百拇医药
化合物Ⅴ：secoisolariciresinol，白色粉末，[α]25D=-36.2°(c，0.7，CH3OH)，由高分辨EIMS得分子式为C20H20O6；EIMS m/z：362[M]+(100%)，344[M-H2O]+20%，327，219，157，137；1HNMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.59(1H，d，J=1.8，H-2)，6.65(1H，d，J=8.0，H-5)，6.54(1H，dd，J=8.0，1.8，H-6)，2.65(1H，ABdd，J=13.8，6.9，H-7a)，2.54(1H，Abdd，J=13.7，J=7.7，H-7b)，1.89(1H，m，H-8)，3.58(1H，m，H-9a)，3.58(1H，m，H-9b)，6.59(1H，m，H-2′)，6.65(1H，m，H-5′)，6.54(1H，dd，J=8.0，1.8，H-6′)，2.65(1H，ABdd，J=13.8，6.9，H-7′a)，2.54(1H，Abdd，J=13.7，7.7，H-7′b)，1.89(1H，m，H-8′)，3.58(1H，m，H-9′a)，3.58(1H，m，H-9′b)，3.72(3H，s，-OCH3)。13CNMR(100 MHz，CDCl3)δ：133.9(C-1)，113.6(C-2)，148.8(C-3)，145.5(C-4)，115.8(C-5)，122.7(C-6)，36.1(C-7)，44.2(C-8)，62.2(C-9)，133.9(C-1′)，113.6(C-2′)，148.8(C-3′)，145.4(C-4′)，115.8(C-5′)，122.7(C-6′)，36.1(C-7′)，44.2(C-8′)，62.2(C-9′)，56.3(OCH3)。依据光谱数据分析，确定化合物Ⅴ为secoisolariciresinol[7]。
, 百拇医药
致谢：光谱数据由中国科学院昆明植物研究所测定。本文得到 云南省森林植物培育与开发利用实验室支持。
本研究得到国家自然科学基金(NO39500181)，中国科学院生物科学与技术研究特别支持(STZ-1-11)和云南省中青年学术和技术带头人培养经费等资助
参考文献
1，马伟光，等.云南植物研究，1994，16(2)：196
2，Leslic G A, et al. J Org Chem,1981,46:3860
3，Altas of Spectral and Physical Constants for Organic Compounds 2nd, Edition, CRC press 1975, vol 111:393
4，许云龙，等.云南植物研究，1988，10(2)：238
5，Yang M, et al. 中草药，1989，20：441
6，Miller R W, et al. J Nat Prod,1982,45:78
7，Fonseca S F, et al. Phytochemistry,1978,17:499
(1999-03-02收稿), http://www.100md.com
单位：项伟 云南省林业科学院(昆明 650204)；姚娉(贵州省中医研究所)；张宏杰 孙汉董(中国科学院昆明植物研究所)；李良(云南大学)
关键词：云南红豆杉；非紫杉烷类化合物；木脂素；甾醇
中草药000403 摘 要 从怒江产云南红豆杉 Taxus yunnanensis中分得5个非紫杉烷类化合物：3β-hydroxy-5α，8α-epidioxyergosta-6，22 diene (Ⅰ)，β-谷甾醇(β-sitosterol，Ⅱ)，pluviatilol (Ⅲ)，α-conidendrin (Ⅳ)和secoisolariciresinol (Ⅴ)。其中Ⅰ是首次从红豆杉科植物中得到。我们利用核磁共振波谱与质谱等技术确定了它们的结构。
Studies on Some Non-Taxane Constituents in Yunnan Yew
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(Taxus yunnanensis) Root
Yunnan Academy of Forestry (Kunming 650204) Xiang Wei
Guizhou Institute of TCM Yao Ping
Kunming Institute of Plant, Chinese Academy of Sciences Zhang Hongjie and Sun Handong
Yunnan University Li Liang
Abstract Studies on the root of Taxus yunnanensis Cheng et L. K. Fu, grown in Nujiang area, Yunnan Province, resulted in the isolation of 5 non-taxanes: 3β-hydroxy-5α, 8α-epidioxyergosta-6，22-diene, β-sitosterol, pluviatilol, α-conidendrin and secoisolariciresinol. One of them (3β-hydroxy-5α, 8α-epi-dioxyergosta-6，22-diene) was obtained from Taxus L. for the first time. Their structures were confirmed by modern spectral analysis (NMR, MS， etc.)
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Key words Taxus yunnanensis Cheng et L. K. Fu non-taxanoid compounds lignans sterols
红豆杉属植物Taxus L.全世界约有11 种，我国有4 种和1 变种。其中主产于我省的云南红豆杉Taxus yunnanensis Cheng et L. K. Fu，因为紫杉醇(paclitaxel)含量可高达万分之五，成为其中最具价值的一种。另外，与其它红豆杉属植物一样，云南红豆杉中除我们已经知道含有丰富的紫杉烷类化合物(其中有一些有较高抗癌活性)外，还含有木脂素等其它非紫杉烷类化学成分。现简要报道从怒江产云南红豆杉T. yunnanensis根中分离鉴定的5 个非紫杉烷类化合物：3β-hydroxy-5α，8α-epidioxyergosta-6，22-diene、β-谷甾醇(β-sitosterol)，pluviatilol，α-conidendrin，secoisolariciresinol。其中3β-hydroxy-5α，8α-epidioxyergosta-6，22-diene是首次从红豆杉科植物中得到。
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1 材料和仪器
云南红豆杉根样品(40 kg)采自云南省怒江州泸水县。旋光用Dip-360 旋光仪测定；红外光谱以PE-577 型(KBr压片)；质谱用VG Auto Spec-3000 测定；核磁共振谱用Bruker AM-400(或AM500)测定。硅胶是青岛海洋化工厂的硅胶G。
2 提取与分离
云南红豆杉根样品(40 kg)干燥并粉碎。用乙醚浸提，得650 g粗提物，经2 kg(0.04～0.063 mm)硅胶柱层析，以CHCl3-Me2CO梯度洗脱。在CHCl3-Me2CO=10∶1段得样品第24～28部分(总重14.60 g)。该洗脱部位再经多次硅胶柱层析得到了5 个非紫杉烷类化合物。
3 结构鉴定
, http://www.100md.com
化合物Ⅰ：3β-hydroxy-5α，8α-epidioxyergosta-6，22-diene，无色针状结晶，mp173 ℃，[α]D25=-27.0°(c，0.2，吡啶)，由高分辨EI-MS得分子式为C28H44O3；EIMS m/z：428[M]+(30%)，410[M-H2O]+(35%)，396[M-O2]+(100%)，376，363，337，327，303，285，267，251，237，227，209，197，183，175，152，135，107，95。1HNMR(500 Hz，CDCl3)δ：3.97(1H，m，H-3)，2.10(1H，m，H-4a)，1.90(1H，m，H-4b)，6.24(1H，d，J=8.6，H-6)，6.50(1H，d，J=8.4，H-7)，1.51(1H，t，m，H-9)，1.59(1H，m，H-14)，1.23(1H，m，H-17)，0.82(3H，s，H-18)，0.90(3H，s，H-19)，1.22(1H，m，H-20)，1.00(3H，d，J=6.6，H-21)，5.14(1H，dd，J=15.3，8.3，H-22)，5.22(1H，dd，J=15.3，7.6，H-23)，1.85(1H，m，H-24)，1.50(1H，m，H-25)，0.83(3H，d，J=7.0，H-26)，0.82(3H，d，J=6.8，H-27)，0.91(3H，d，J=6.8，H-28)。13CNMR(100 MHz，CDCl3)δ：34.7(C-1)，30.1(C-2)，66.5(C-3)，37.0(C-4)，82.2(C-5)，135.4(C-6)，130.8(C-7)，79.3(C-8)，51.1(C-9)，37.0(C-10)，23.4(C-11)，39.4(C-12)，44.6(C-13)，51.7(C-14)，20.6(C-15)，28.6(C-16)，56.2(C-17)，12.9(C-18)，118.2(C-19)，39.7(C-20)，20.9(C-21)，135.2(C-22)，132.3(C-23)，42.8(C-24)，33.1(C-25)，19.6(C-26)，19.9(C-27)，17.5(C-28)。依据光谱数据分析，确定化合物Ⅰ为3β-hydroxy-5α，8α-epidioxyergosta-6，22-diene[1，2]。过去有人曾在海洋有机物中发现有微量的此化合物[1，2]。
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化合物Ⅱ：白色粉末，[α]25D=-33.6°(c，0.6，CHCl3)，EIMS，1H、13CNMR光谱数据分析，确定Ⅱ为β-谷甾醇[3，4]。
化合物Ⅲ：pluviatilol，白色粉末，[α]25D=-122.0°(c，1.0，CHCl3)，由高分辨EIMS得分子式为C20H20O6；EIMS m/z：356[M]+(98%)，151[4-hydroxy-3-methoxybenzoy]+(100%)，149(70%)，83(81%)，1HNMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.75～6.95(1H，m，H-2)，6.75～6.95(1H，m，H-5)，6.75～6.95(1H，m，H-6)，4.81(1H，d，J=5.2，H-7)，3.28(1H，m，H-8)，3.80(1H，m，H-9α)，4.08(1H，d，J=9.4，H-9β)，6.75～6.95(1H，m，H-2′)，6.75～6.95(1H，m，H-5′)，6.75～6.95(1H，m，H-6′)，4.37(1H，d，J=7.2，H-7′)，2.86(1H，q，J=7.1，H-8′)，3.84(1H，m，H-9′α)，3.28(1H，m，H-9′β)，5.94(2H，s，-OCH2O-)，3.86(3H，s，-OCH3)。13CNMR(100 MHz，CDCl3)δ：133.1(C-1)，108.7(C-2)，146.7(C-3)，145.4(C-4)，114.3(C-5)，119.2(C-6)，87.7(C-7)，54.5(C-8)，69.6(C-9)，132.3(C-1′)，106.4(C-2′)，146.6(C-3′)，147.6(C-4′)，108.1(C-5′)，118.7(C-6′)，82.1(C-7′)，50.2(C-8′)，71.0(C-9′)，55.9(OCH3)，100.9(-OCH2O-)。依据光谱数据分析，确定化合物Ⅲ为pluviatilol[5]。
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化合物Ⅳ：α-conidendrin，白色粉末，[α]25D=-17.7°(c，1.2，pyridine)，由高分辨EIMS得分子式为C20H20O6(不饱和度为11)；EIMS m/z：356[M]+(100%)，339，271，255，241，175，137；1HNMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.11(1H，brs，H-2)，6.46(1H，s，H-5)，2.95(1H，dd，J=15.0，J=4.36，H-7a)，2.73(1H，dd，J=15.2，J=10.4，H-7b)，2.37(1H，m，H-8)，6.36(1H，brs，H-2′)，6.58(1H，d，J=8.0，H-5′)，6.42(1H，d，J=1.64，H-6′)，3.63(2H，d，J=8.4，H-7′)，2.37(1H，m，H-8′)，3.84(1H，t，J=10.2，H-9′α)，4.01(1H，dd，J=8.8，J=6.1，H-9′β)，3.64(3H，s，-OCH3)，3.58(3H，s，-OCH3)。13CNMR(100 MHz，CDCl3)δ：126.3(C-1)，112.4(C-2)，146.7(C-3)，145.6(C-4)，116.1(C-5)，132.0(C-6)，29.4(C-7)，50.1(C-8)，178.5(C-9)，134.4(C-1′)，111.5(C-2′)，148.2(C-3′)，144.9(C-4′)，116.1(C-5′)，121.6(C-6′)，47.9(C-7′)，42.3(C-8′)，72.6(C-9′)，56.1(OCH3)，56.1(OCH3)。依据光谱数分析，确定化合物Ⅳ为α-conidendrin[6]。
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化合物Ⅴ：secoisolariciresinol，白色粉末，[α]25D=-36.2°(c，0.7，CH3OH)，由高分辨EIMS得分子式为C20H20O6；EIMS m/z：362[M]+(100%)，344[M-H2O]+20%，327，219，157，137；1HNMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.59(1H，d，J=1.8，H-2)，6.65(1H，d，J=8.0，H-5)，6.54(1H，dd，J=8.0，1.8，H-6)，2.65(1H，ABdd，J=13.8，6.9，H-7a)，2.54(1H，Abdd，J=13.7，J=7.7，H-7b)，1.89(1H，m，H-8)，3.58(1H，m，H-9a)，3.58(1H，m，H-9b)，6.59(1H，m，H-2′)，6.65(1H，m，H-5′)，6.54(1H，dd，J=8.0，1.8，H-6′)，2.65(1H，ABdd，J=13.8，6.9，H-7′a)，2.54(1H，Abdd，J=13.7，7.7，H-7′b)，1.89(1H，m，H-8′)，3.58(1H，m，H-9′a)，3.58(1H，m，H-9′b)，3.72(3H，s，-OCH3)。13CNMR(100 MHz，CDCl3)δ：133.9(C-1)，113.6(C-2)，148.8(C-3)，145.5(C-4)，115.8(C-5)，122.7(C-6)，36.1(C-7)，44.2(C-8)，62.2(C-9)，133.9(C-1′)，113.6(C-2′)，148.8(C-3′)，145.4(C-4′)，115.8(C-5′)，122.7(C-6′)，36.1(C-7′)，44.2(C-8′)，62.2(C-9′)，56.3(OCH3)。依据光谱数据分析，确定化合物Ⅴ为secoisolariciresinol[7]。
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致谢：光谱数据由中国科学院昆明植物研究所测定。本文得到 云南省森林植物培育与开发利用实验室支持。
本研究得到国家自然科学基金(NO39500181)，中国科学院生物科学与技术研究特别支持(STZ-1-11)和云南省中青年学术和技术带头人培养经费等资助
参考文献
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7，Fonseca S F, et al. Phytochemistry,1978,17:499
(1999-03-02收稿), http://www.100md.com