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编号:10282409
川木通中齐墩果酸的含量测定
http://www.100md.com 《成都中医药大学学报》 2000年第2期
     作者:唐声武 裴瑾 郭力

    单位:成都中医药大学 药学院,四川 成都 610075

    关键词:川木通;齐墩果酸;薄层扫描

    成都中医药大学学报000228摘 要:采用薄层扫描法测定了川木通的4种植物茎水解液中齐墩果酸的含量,结果为:小木通为0.0649%,粗齿铁线莲为0.0389%,钝萼铁线莲0.1063%,绣球藤0.0682%。首次从粗齿铁线莲、钝萼铁线莲的水解液中检出了齐墩果酸。

    中图分类号:R284.1;R282.5 文献标识码:A 文章编号:1004-0668(2000)02-0053-02

    作者简介:唐声武,男,1943年3月生;副教授,硕士生导师;研究方向:质量与中药品种和鉴别。

, 百拇医药     川木通为常用中药,《中国药典》1995年版收载为毛莨科铁线莲属植物小木通Clematis armandii Franch. 或锈球藤C. Montana buch-Ham干燥根茎,具有清热利尿,通经下乳等功能。临床用于水肿、淋病、小便不通、关节痹痛、经闭乳少等症。据报道,其含有三萜皂甙,经水解后生成齐墩果酸及葡萄糖等[1]。目前作川木通入药的铁线莲属植物有10余种。四川、重庆产川木通的主流品种为小木通C. armandii、粗齿铁线莲C. argentilucida和钝萼铁线莲C. peterae,而药典收载品种绣球藤C. montana的茎在商品药材中很难发现[2]。我们对上述 4种植物的茎进行了齐墩果酸的定性鉴别及含量测定,现报道如下。

    1 材料

    小木通、粗齿铁线莲、钝萼铁线莲和锈球藤分别采自都江堰市青城山、达州地区宣汉县、都江堰市青城山、四川省峨眉山。
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    2 薄层鉴别

    分别取药材粉末2 g,加1 mol/L的盐酸20 mL和氯仿20 mL,加热回流,萃取氯仿层,浓缩点样,以环己烷-乙酸乙酯(7:3)为展开剂上行展开,用10%硫酸乙醇液喷雾,90℃加热8 min显色,在与齐墩果酸对照品相应位置上均有紫红色斑点(见图1)。

    3 齐墩果酸含量测定

    3.1 仪器与试药

    CS-930薄层扫描仪(日本岛津),硅胶G(青岛海洋化工厂),所用试剂均为分析纯,齐墩果酸对照品(中国药品生物制品检验所)。

    图1 川木通水解液TLC图

    3.2 实验条件
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    薄层层析吸附剂:硅胶G-CMCNa薄层板,105℃活化1 h;展开剂:环己烷-乙酸乙酯(7∶3),上行展开,展距8 cm;显色剂:10%硫酸乙醇液;显色条件:喷雾后90℃加热8 min。

    扫描条件:双波长反射法锯齿扫描,测定波长λS=530 nm,参比波长λR=680 nm,线性参数SX=3,背景调至ON,灵敏度×2,ΔY=0.2,最小峰面积500。

    在选定条件下,分别吸取齐墩果酸对照品(0.75 mg/μL)1.0、2.0、3.0、4.0、7.0 μL点于硅胶板上,间距1.5 cm,展开,显色,扫描,测定吸光积分值,以吸光度积分值为纵坐标,齐墩果酸点样量为横坐标,绘制标准曲线,齐墩果酸在0.75~5.25 mg范围内线性关系良好。作回归方程Y=5987.168X-450.753,相关系数r=0.9971。由于不通过原点,所以选择两点外坐标法进行定量测定(见图2)。
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    3.3 实验样品溶液的制备

    3.3.1 水解酸浓度的考察

    取样品粉末约2 g,精密称定,分别加入0.5、1.0、1.5 mmol/L的盐酸约20 mL,加热回流3 h,萃取氯仿层,再用氯仿萃取2次,每次20 mL,合并氯仿 液,回收氯仿后,再用氯仿定容至5 mL,点样,依法显色扫描测定。结果表明,用0.5 mol/L的盐酸水解,齐墩果酸的测得量很低,而1.0 mol/L与1.5 mol/L的盐酸几乎无明显差异,故采用1.0 mol/L的盐酸水解样品。

    图2 标准曲线

    3.3.2 水解时间的考察

    取样品粉末约2 g,精密称定,加入1.0的盐酸约20 mL和氯仿20 mL,分别加热回流1 h、2 h、3 h、4 h,依法萃取定容、点样、显色、扫描测定。结果表明,水解3 h、4 h时测得量较高且无明显差异,故选择水解时间为3 h。
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    3.4 稳定性试验

    精密称取对照品溶液2 μL和供试品10 μL点于薄层板上,依法显色,每隔30 min扫描1次。结果表明,对照品的吸光度积分值在2 h内基本稳定,RSD为1.96%,供试品的吸光度积分值在2 h内亦基本稳定,RSD为2.81%。

    3.5 精密度试验

    (1)同板精密度试验:取对照品溶液和同一供试品溶液,相同点样量,点于同一薄层板上,依法显色扫描测定,对照品RSD为1.50%,供试品RSD为3.54%。

    (2)异板精密度试验:对照品溶液和同一供试品溶液各取相同点样量,点于3块薄层板上,依法显色扫描测定,对照品RSD为3.27%,供试品RSD为3.32%。

    3.6 加样回收试验
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    取含量已知的钝萼铁线莲水解液6份,加入一定量的齐墩果酸(3种水平,各2份,见表1),氯仿萃取3次,合并萃取液,浓缩定容至10 mL,点样,显色,测定,计算回收率(回收率=(测定量-药材中含量)(mg)/添加对照品量(mg)×100%),结果见表1。

    表1 回收率试验结果 测定次数

    1

    2

    3

    4

    5

    6

    药材中OLA量(mg)

    0.2142
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    0.1922

    0.2298

    0.2454

    0.2032

    0.1906

    加入OLA量(mg)

    0.1504

    0.1528

    0.1996

    0.1973

    0.2307

    0.2321
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    测得量(mg)

    0.3587

    0.3469

    0.4183

    0.4376

    0.4392

    0.4137

    回收率(%)

    96.1

    97.9

    94.1

    97.4

    102.2
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    96.1

    平均回收率

    97.3

    RSD

    2.81

    3.7样品含量测定

    精密吸取供试品溶液10 μL,对照品2μL、4μL,分别交叉点样于薄层板上,依法显色测定。结果见表2。表2 齐墩果酸含量测定结果(n=3)

    品 种

    含量(%)

    RSD(%)

    小木通
, 百拇医药
    0.0649

    2.68

    粗齿铁线莲

    0.0389

    3.08

    钝萼铁线莲

    0.1063

    3.26

    乡球藤

    0.0682

    1.97

    4 讨论

    我们通过TLC证实了小木通和绣球藤中齐墩果酸已结合成甙,经酸水解后能得到游离甙元。液,并且在粗齿铁线莲和钝萼铁线莲水解液中首次检出了齐墩果酸。
, 百拇医药
    采用薄层扫描法测定4种川木通水解液中剂墩果酸的含量,通过方法学考察认为最佳水解的条件为:1mol/L盐酸加热回流3小时。其含量高低依次为钝萼铁线莲、绣球藤、小木通、粗齿铁线莲。钝萼铁线莲的含量明显高于其它3种。值得进一步进行药效学研究,为扩大药源奠定基础。

    5 致谢

    薄层扫描测定由本校万丽老师指导,特此致谢。

    参考文献

    1 楼之岑.常用中药材品种整理和质量研究(2)[M]北京:北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社,1996.48

    2 唐声武,李仿尧.川木通的原植物和药材性状鉴定[J]中药材料 :1989,12(1):26

    3 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志第28卷[M].科学出版社,1980.75-196

    (收稿日期:2000-01-16), 百拇医药


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