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编号:10282594
蓖麻油引产餐对妊娠大鼠体内前列腺素E2合成的影响
http://www.100md.com 《中华妇产科杂志》 1999年第3期
     作者:高杰 孙念怙 王凤云 郝娜

    单位:100730 中国医学科学院 中国协和医科大学 北京协和医院妇产科

    关键词:蓖麻油;地诺前列酮;引产;大鼠

    中华妇产科杂志990306 【摘要】 目的 了解蓖麻油引产餐和蓖麻油中活性成分蓖麻酸对妊娠大鼠体内前列腺素E2(PGE2)合成的影响,探讨蓖麻油引产餐的引产机理。方法 将妊娠18天的Wistar大鼠分实验组和对照组各8只,实验组大鼠每天两次灌服引产餐,灌服4次后剖杀大鼠,收集门静脉、末梢血,胎盘、羊膜组织及制备羊膜细胞进行体外培养。另外,在培养介质中加入不同浓度蓖麻酸和消炎痛,利用放射免疫方法测定PGE2水平。结果 实验组大鼠门静脉PGE2水平升高,外周血PGE2水平无变化;实验组大鼠肠粘膜、胎盘、羊膜组织和羊膜细胞PGE2合成明显升高;蓖麻酸刺激肠粘膜、胎盘、羊膜等组织和细胞PGE2合成,其刺激合成能力与蓖麻酸浓度及其作用时间呈正相关。消炎痛抑制PGE2体外合成。结论 蓖麻油引产餐引起宫内组织PGE2合成变化是其引产的关键,而蓖麻酸可能是蓖麻油引产餐的活性成分。
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    Effects of Castor Oil-diet on the Synthesis of Prostaglandin E2 in Pregnant Rats GAO Jie, SUN Nianhu, WANG Fengyun, et al. Chinese Academy of Medical Sciences, Peking Union Medical College Peking Union Medical College Hospital, Beijing 100730

    【Abstract】 Objective To determine effects of castor oil-diet on the synthesis of prostaglandin E2 (PGE2) and explore the mechanism of labor induced by castor oil-diet in pregnant rats.Methods Pregnant rats were gavaged castor oil-diet in 18 and 19 days of gestation. At the time of death, blood of portal and peripheral veins, intestinal mucosa, amnion, amniotic cells and placenta were collected, and the tissues were cultured in the presences of ricinoleic acid or indomethacin. The concentrations of PGE2 in the media or blood were measured by RIA methods. Results The PGE2 levels in the portal vein increased, while the PGE2 levels in peripheral blood had no changes significantly, the PGE2 levels in the tissues of the intestinal mucosa, placenta, amnion and amniotic cells were increased significantly; Ricinoleic acid stimulated the synthesis of PGE2 in the above tissues invitro, which had the positive correlations with the dose of ricinoleic acid and its lasting time. Indomethacin inhibited the synthesis of PGE2 in-vitro.Conclusion The increased synthesis of PGE2 in the intrauterine tissues is a key of the initination of labor induced by castor oil-diet, and ricinoleic acid in castor oil-diet might be the active component which induced the initiator of labor.
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    【Key words】 Castor oil Dinoprostone Labor, incluced Rats

    蓖麻油引产作为一种妊娠晚期的引产方法已在我国普遍开展,但其引产机理尚不清楚。本研究通过蓖麻油引产餐灌服妊娠大鼠、组织体外培养等,探讨引产餐中蓖麻油活性成分——蓖麻酸对妊娠大鼠血浆、肠粘膜、胎盘和羊膜等组织前列腺素E2(PGE2)合成的影响,以探讨蓖麻油引产餐的引产机理。

    材料及方法

    一、动物及蓖麻油引产餐

    实验组和对照组为妊娠18天的Wistar大鼠各8只。实验组大鼠于每天早晨9时、下午5时灌服蓖麻油引产餐2 ml,共灌服4次,于最后一次灌服4小时后,乙醚麻醉剖杀大鼠。灌服引产餐前后禁食禁水3小时。
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    蓖麻油引产餐为蓖麻油30 ml加生鸡蛋1个,混匀煎熟制成匀浆。

    二、标本采集

    1.血浆:取门静脉、尾静脉血各2 ml,加入100 μl消炎痛-肝素混合液,置半小时后离心分离血浆,-20℃保存待提取PGE2

    2.肠粘膜组织:取空肠10 cm,生理盐水及磷酸盐缓冲液冲洗后纵行剪开肠管,冲净肠内粘液,手术刀轻刮取粘膜组织,剪碎加入RPMI-1640培养液制成悬液,接种培养板,每孔30 g/L。

    3.胎盘组织:取母体面胎盘组织,用磷酸盐缓冲液洗净血液,剪碎加入RPMI-1640培养液制成悬液,接种培养板,每孔30 g/L。

    4.羊膜组织:取出胎膜组织,分离无血管羊膜组织,其余处理同胎盘取材。
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    5.羊膜细胞:取出胎盘组织加入胰蛋白酶-乙二胺四乙酸钠消化液,37℃消化1小时。200目筛网过滤细胞,加入含10%胎牛血清RPMI-1640培养液终止消化,离心去上清液。利用含10%胎牛血清RPMI-1640培养液制成细胞悬液培养,间隔24、48小时换液,至80%铺满后换成不含血清的RPMI-1640培养液进行培养。

    6.培养条件:37℃,空气和二氧化碳之比为95∶5,相对湿度为100%。实验组和对照组肠粘膜、胎盘和羊膜细胞等培养18小时,同时对照组肠粘膜、胎盘和羊膜细胞培养液中加入5 ng/L、10 ng/L、15 ng/L蓖麻酸或100 ng/L消炎痛培养18小时。此外,另在羊膜细胞中加入10 ng/L蓖麻酸或100 ng/L消炎痛及空白对照等进行培养。

    7.PGE2测定:采用中国医学科学院基础所药理室PGE2放射免疫测定药盒,测定方法见文献[1]。蛋白测定采用考马斯亮蓝比色测定法,方法见文献[2]。
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    三、统计分析

    测定数据经方差齐性检验和t检验,进行显著性差异分析。

    结 果

    一、血浆PGE2测定结果

    实验组大鼠门静脉血浆PGE2水平为(1 157±151) ng/L,对照组大鼠门静脉血浆PGE2水平(561±41) ng/L,两组比较,差异有极显著性(P<0.01);实验组大鼠外周循环中PGE2水平为(569±68) ng/L,对照组大鼠外周血中PGE2水平为(525±65) ng/L,两组比较,差异无显著性(P>0.05)。

    二、肠粘膜组织PGE2测定结果
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    实验组肠粘膜PGE2水平明显高于对照组(P<0.01)。培养介质中加入5 ng/L、10 ng/L、15 ng/L 3种浓度蓖麻酸,均可见蓖麻酸刺激肠粘膜组织PGE2合成,并与蓖麻酸浓度呈正相关。培养介质中加入100 ng/L消炎痛后,肠粘膜PGE2合成被抑制。见表1。

    表1 两组大鼠肠粘膜、胎盘组织和羊膜细胞培养18小时后PGE2水平(ng/L,±s) 组别

    肠粘膜组织

    胎盘组织

    羊膜细胞

    实验组

, 百拇医药     11 400.83±1 744.70*

    489.00±100.20**

    对照组

    3 606.14±418.60

    378.14±34.50

    1 111.88±121.06

    蓖麻酸

    5ng/L

    8 303.50±547.22

    522.71±40.04

    4 523.70±495.80
, 百拇医药
    10ng/L

    10 838.83±1 355.42

    861.43±69.46

    6 327.42±591.22

    15ng/L

    16 570.57±2 163.28

    1 087.86±98.11

    8 110.50±494.32

    消炎痛100ng/L

    490.33±59.68

    67.00±16.48
, 百拇医药
    342.29±42.65

    注:与对照组比较,*P<0.01 **P<0.05

    三、羊膜和胎盘组织PGE2测定结果

    实验组羊膜组织PGE2水平为4 708±791 ng/L,对照组羊膜组织PGE2水平为2 895±338 ng/L,实验组羊膜组织PGE2水平明显高于对照组(P<0.01)。另外,实验组胎盘组织PGE2水平明显高于对照组,胎盘组织培养介质中加入5 ng/L、10 ng/L、15 ng/L 3种浓度蓖麻酸,可见蓖麻酸刺激组织PGE2合成,并与蓖麻酸浓度呈正相关。消炎痛抑制胎盘组织PGE2体外合成,见表1。

, http://www.100md.com     四、羊膜细胞PGE2测定结果

    羊膜细胞培养介质中加入5 ng/L、10 ng/L、15 ng/L等3种浓度蓖麻酸和100 ng/L消炎痛,可见蓖麻酸刺激羊膜细胞PGE2合成,并与蓖麻酸浓度呈正相关,同时,PGE2合成被消炎痛抑制。羊膜细胞培养介质中加入10 ng/L蓖麻酸、100 ng/L消炎痛和对照培养0.5、1、3、6等小时后,可见蓖麻酸刺激羊膜细胞PGE2合成作用与时间成正比,消炎痛抑制羊膜细胞PGE2合成。见表1,2。

    表2 两组大鼠羊膜细胞培养不同时间PGE2水平(ng/L,±s) 组别

    例

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    培养时间(小时)

    0.5

    1

    3

    6

    实验组

    蓖麻酸(10 ng/L)

    7

    237.67±30.20*

    517.83±15.73**

    2 325.33±170.24***
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    3 381.33±126.27***

    消炎痛(100 ng/L)

    7

    <25

    <25

    92.5± 11.64

    230.67± 17.69

    对照组

    7

    110.83±11.03

    235.83±23.47

    536.17± 19.14
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    745.00± 33.82

    注:与对照组比较,*P>0.05 **P<0.05 ***P<0.01

    讨 论

    一、蓖麻油与前列腺素

    有研究推测,蓖麻油引产餐引产机理可能与其刺激体内花生四烯酸释放,导致前列腺素(PGs)合成增加有关。据文献有报道,蓖麻油引产致羊水栓塞,认为可能是蓖麻酸刺激体内PGs合成增加,宫缩过强,导致羊水栓塞发生[3,4]

    蓖麻油是一种致泻剂,其中的18碳不饱和脂肪酸占90%,为其致泻的活性成分。口服蓖麻油后,其蓖麻酸可以经肠吸收,再分布于体内组织参与体内代谢活动。如果蓖麻酸在肠内积聚、吸收减少,蓖麻酸刺激肠粘膜上皮细胞,使PGE2合成增加,水、电解质平衡紊乱,可导致腹泻发生[5,6]
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    本研究结果显示,引产餐刺激肠粘膜PGE2合成增加,与有关蓖麻油致泻机理类似。有报道,妊娠晚期妇女服用引产餐后,外周血PGE2水平无变化[7]。本实验结果显示,外周血PGE2水平亦无明显变化,但门静脉PGE2水平明显升高,这可能是蓖麻酸刺激肠粘膜PGE2合成,门静脉收集肠管血流间接引起门静脉PGE2水平升高,但PGE2经局部组织、肝、肺等代谢降解,不影响循环中PGE2水平变化。

    二、宫内组织与前列腺素

    目前认为,PGs与分娩启动密切相关,引起分娩启动和调节子宫收缩的PGs,主要来源于宫内组织。胎盘、羊膜、蜕膜和子宫肌等均合成PGs,但羊膜组织是PGE2的主要合成场所。体外培养发现,催产素、大戟二萜醇(PMA)和一些细胞因子等,可促进羊膜细胞PGE2合成释放。PMA是致泻剂巴豆油的活性物质,同蓖麻酸一样,PMA亦刺激肠粘膜PGE2合成、释放,导致水、电解质平衡紊乱引起腹泻[5,8]
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    本研究发现,灌服蓖麻油引产餐的妊娠大鼠,羊膜和胎盘等组织PGE2水平明显升高。蓖麻油活性成分蓖麻酸刺激胎盘组织和羊膜细胞PGE2合成增加,并与蓖麻酸的浓度和作用时间成正相关,提示蓖麻油引产餐引起宫内组织PGE2合成变化,是其引产的主要作用机理。此外,蓖麻油引产餐临床应用发现,服用引产餐后腹泻的孕妇引产效果不好,反之则引产成功率高[5]。这一现象间接提示,发生腹泻为蓖麻酸肠内积聚、肠吸收减少,刺激宫内组织PGE2合成能力下降,引产不易成功;不腹泻的孕妇蓖麻酸肠吸收增加刺激宫内组织PGE2合成变化明显,从而导致分娩启动。

    综上所述,蓖麻油引产餐引产机理可能是其活性物质蓖麻酸作用于羊膜、胎盘等,影响PGs合成,进而诱发分娩启动。

    参考文献
, 百拇医药
    1 程锦轩,段金红,韩凤云,等.前列腺素E2(PGE2)放射免疫测定法.中国医学科学院学报,1987,14:229-232.

    2 Marion MM. A rapid and sensitive method for the quantation of microgram quantites of protein ntilizing: the principle of protein-dye binding. Anal Biochem, 1976, 72:248-254.

    3 王秋娟,徐蕴华,盖铭英.营养饮食引产的临床观察.中国医学科学院学报,1995,17:64-66.

    4 Jay SS, Lopez T, Teres D, et al. Amniotic fluid embolism, asspciated with castor oil ingestion. Crit Care Med, 1988,16:642-643.
, 百拇医药
    5 Beubler E, Anderea SD. Stimulation of enterocyte protein kinase C by laxative in-vitro. J Pharm Pharmacol, 1993, 45:433-435.

    6 王清,徐蕴华.营养饮食引产产妇血清前列腺素分析.中国医学科学院学报,1992,14:433-435.

    7 Lutton FD, Mitchell MD. Phorbol ester-induced stimulation of prostaglandin biosythesis in human amnion cells. Biochemica Biophysica Acta, 1988, 959:399-401.

    8 Watson WC, Gordon RS. Study on the digestion, absorption and metabolism of castor oil. Biochem Pharmacol, 1962, 11:229-236.

    (收稿:1998-04-23 修回:1998-09-20), http://www.100md.com


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