HGV对慢性乙型肝炎患者HBV复制的影响
作者：曹 阳 冼建中
单位：广州市第八人民医院(510060)
关键词：RNA病毒；肝炎，病毒性，人；肝炎，乙型；肝炎病毒，乙型；聚合酶链反应
实用医学杂志990812 摘 要 目的：探讨HGV对慢性乙型肝炎患者HBV复制的影响。方法：采用逆转录巢式聚合酶链反应法(RT-nPCR)对150例经血清免疫学检查确诊为慢性乙型肝炎患者进行HGV-RNA检测，并将他们分为单独HBV感染组及HBV、HGV重叠感染组进行HBV-DNA含量及阳性率、HBeAg和抗HBe阳性率及HBV-DNA与HBeAg同时阳性率的对照研究。结果：两组在HBV-DNA含量、HBV-DNA、HBeAg、抗HBe及HBV-DNA与HBeAg同时阳性率方面相比，差异无显著意义(P>0.05)。结论：HGV不抑制慢性乙型肝炎患者HBV复制。
庚型肝炎病毒(HGV)是近年发现的与人类肝炎相关的RNA病毒基因组，随着采用逆转录巢式聚合酶链反应，临床发现乙型肝炎病毒(HBV)与HGV的重叠感染常见。既往研究表明，两种肝炎病毒重叠感染常导致互相干扰的现象。本文就HGV对慢性乙型肝炎患者HBV复制是否有抑制作用进行探讨。
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1 材料和方法
1.1 研究对象 150例慢性乙型肝炎患者均为1997年1月～1998年6月在我院的住院病人，诊断符合1995年5月北京第五次全国传染病、寄生虫病学术会议讨论修订的病毒性肝炎防治方案(试行)[1]。其中男108例，女42例，平均年龄41.2±8.3岁。全部患者经血清免疫学检查而确诊，且无合并甲、丙、丁、戊型病毒性肝炎的证据，无酒精性、药物性、自身免疫性或代谢性肝病。
1.2 方法
1.2.1 HGV-RNA检测 采用本院传染病研究所HGV-RNA RT-nested PCR检测试剂盒，用异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法提取血清标本中的HGV-RNA，进行逆转录巢式聚合酶链反应，两对PCR引物自报道的GBV-C[2]和HGV[3]全基因序列的非编码区中两者的共同序列，产物以EB染色，紫外灯下观察结果，242 bp处有荧光带为阳性，阳性结果复查1次。
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1.2.2 血清HBV-DNA含量检测 采用信号能量引物转移定量聚合酶链反应检测，参照董惠卿等[4]报道的方法进行，并由我院传染病研究所完成。
1.2.3 乙肝两对半检测 用ELISA法检测，试剂由深圳月亮湾生物工程有限公司提供。
1.3 统计学分析 所测值以
±s表示，采用t检验，率比较用χ2检验，P>0.05表示差异无显著性。
2 结果
2.1 两组患者血清HBV-DNA含量比较 单独HBV感染组与HBV、HGV重叠感染组中HBV-DNA含量分别为4.95±2.15拷贝/ml、4.79±2.32拷贝/ml(HBV-DNA含量为对数值)，经统计学t检验(t=0.953)，差异无显著意义(P>0.05)。
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2.2 两组患者血清HBV-DNA(PCR)阳性率比较 单独HBV感染组与HBV、HGV重叠感染组中HBV-DNA阳性率分别为46.56%(61/131)、36.84%(7/19)。经统计学χ2检验(χ2=0.25)，两组HBV-DNA阳性率比较，差异无显著意义(P>0.05)。
2.3 两组患者血清HBeAg阳性率的比较 单独HBV感染组与HBV、HGV重叠感染组中HBeAg阳性率分别为：54.96%(72/131)、52.63%(10/19)，经统计学χ2检验(χ2=0.01)，两组HBeAg阳性率比较，差异无显著意义(P>0.05)。
2.4 两组患者血清抗HBe阳性率的比较 单独HBV感染组与HBV、HGV重叠感染组中抗HBe阳性率分别为：45.04%(72/131)、42.10%(8/19)，经统计学χ2检验(χ2=0.02)，两组抗HBe阳性率比较，差异无显著意义(P>0.05)。
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2.5 两组患者血清HBV-DNA与HBeAg同时阳性率的比较 单独HBV感染组与HBV、HGV重叠感染组中HBV-DNA与HBeAg同时阳性率分别为：44.27%(58/131)、36.84%(7/19)，经统计学χ2检验(χ2=0.15)，两组HBV-DNA与HBeAg同时阳性率比较，差异无显著意义(P>0.05)。
3 讨论
随着HGV的实验诊断不断完善，HGV-RNA检测出来的阳性率日益增高。流行病学研究显示：HBV与HGV均为肠道外传播的病毒[5，6]。因而临床上发现HBV、HGV重叠感染常见。但HBV、HGV重叠感染后，HGV是否抑制慢性乙型肝炎患者HBV的复制，日益引起人们的重视。但这方面的报道有的认为似呈抑制作用[7，8]，而Marrone等[9]认为HGV合并感染对HBV-DNA水平影响不大。本文从150例慢性乙型肝炎患者中检测HGV-RNA，并将其分为单独HBV感染组及HBV、HGV重叠感染组，发现两组在HBV-DNA含量、HBV-DNA阳性率、HBeAg阳性率、抗HBe阳性率及HBV-DNA与HBeAg同时阳性率方面相比，差异无显著意义(P>0.05)。因而，作者认为这两种病毒之间似乎可以和平共处，互不影响，HGV并不抑制慢性乙型肝炎患者HBV的复制，然而，两种病毒间相互作用的机制尚需进一步研究。
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4 参考文献
1 病毒性肝炎防治方案(试行). 中华传染病杂志，1995，13(4)：241.
2 Leary TP,Muerhoff AS,Simons JN,et al. Sequence and genomic organization of GBV-C:a nove1 member of the flaviviridae associated with human non-A-E hepatitis. J Med Virol,1996,48(1):60～67.
3 Linnen J,Wages J,Zhang-Keck ZY,et al. Molecular cloning and disease association of hepatitis G virus:a transfusion-transmissible agent. Science,1996,271(5248):505～508.
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4 董惠卿，张复春，蔡晓莉，等. 定量聚合酶链反应检测血清乙型肝炎病毒DNA及其意义. 广东卫生防疫，1996，22(4)：1.
5 Sallie R,Shaw J,Mutimer D. GBV-C virus and fulminant hepatic failure. Lancet,1996,347(9014):1552.
6 Schmidt B,Korn K,Fleckenstein B. Molecular evidence for transmission of hepatitis G virus by blood transfusion. Lancet,1996,347(9005):909.
7 Yuzo Miyakawa,Makoto Mayumi. Hepatitis G virus:a true hepatitis virus or an accidental tourist? N Eng J Med,1997,336(11):795.
8 赵和平，赵素莲，张玲荣，等. 庚型肝炎病毒与乙型、丙型肝炎病毒重叠感染的临床分析. 中华实验和临床病毒学杂志，1997，11(4)：389.
9 Marrone A，Shih JWK，Nakatsuji Y,et al. Hepatitis G virus (HGV) among patients with chronic hepatitis B. Hepatol,1996,24(4 pt 2):225A., 百拇医药
单位：广州市第八人民医院(510060)
关键词：RNA病毒；肝炎，病毒性，人；肝炎，乙型；肝炎病毒，乙型；聚合酶链反应
实用医学杂志990812 摘 要 目的：探讨HGV对慢性乙型肝炎患者HBV复制的影响。方法：采用逆转录巢式聚合酶链反应法(RT-nPCR)对150例经血清免疫学检查确诊为慢性乙型肝炎患者进行HGV-RNA检测，并将他们分为单独HBV感染组及HBV、HGV重叠感染组进行HBV-DNA含量及阳性率、HBeAg和抗HBe阳性率及HBV-DNA与HBeAg同时阳性率的对照研究。结果：两组在HBV-DNA含量、HBV-DNA、HBeAg、抗HBe及HBV-DNA与HBeAg同时阳性率方面相比，差异无显著意义(P>0.05)。结论：HGV不抑制慢性乙型肝炎患者HBV复制。
庚型肝炎病毒(HGV)是近年发现的与人类肝炎相关的RNA病毒基因组，随着采用逆转录巢式聚合酶链反应，临床发现乙型肝炎病毒(HBV)与HGV的重叠感染常见。既往研究表明，两种肝炎病毒重叠感染常导致互相干扰的现象。本文就HGV对慢性乙型肝炎患者HBV复制是否有抑制作用进行探讨。
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1 材料和方法
1.1 研究对象 150例慢性乙型肝炎患者均为1997年1月～1998年6月在我院的住院病人，诊断符合1995年5月北京第五次全国传染病、寄生虫病学术会议讨论修订的病毒性肝炎防治方案(试行)[1]。其中男108例，女42例，平均年龄41.2±8.3岁。全部患者经血清免疫学检查而确诊，且无合并甲、丙、丁、戊型病毒性肝炎的证据，无酒精性、药物性、自身免疫性或代谢性肝病。
1.2 方法
1.2.1 HGV-RNA检测 采用本院传染病研究所HGV-RNA RT-nested PCR检测试剂盒，用异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法提取血清标本中的HGV-RNA，进行逆转录巢式聚合酶链反应，两对PCR引物自报道的GBV-C[2]和HGV[3]全基因序列的非编码区中两者的共同序列，产物以EB染色，紫外灯下观察结果，242 bp处有荧光带为阳性，阳性结果复查1次。
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1.2.2 血清HBV-DNA含量检测 采用信号能量引物转移定量聚合酶链反应检测，参照董惠卿等[4]报道的方法进行，并由我院传染病研究所完成。
1.2.3 乙肝两对半检测 用ELISA法检测，试剂由深圳月亮湾生物工程有限公司提供。
1.3 统计学分析 所测值以
±s表示，采用t检验，率比较用χ2检验，P>0.05表示差异无显著性。2 结果
2.1 两组患者血清HBV-DNA含量比较 单独HBV感染组与HBV、HGV重叠感染组中HBV-DNA含量分别为4.95±2.15拷贝/ml、4.79±2.32拷贝/ml(HBV-DNA含量为对数值)，经统计学t检验(t=0.953)，差异无显著意义(P>0.05)。
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2.2 两组患者血清HBV-DNA(PCR)阳性率比较 单独HBV感染组与HBV、HGV重叠感染组中HBV-DNA阳性率分别为46.56%(61/131)、36.84%(7/19)。经统计学χ2检验(χ2=0.25)，两组HBV-DNA阳性率比较，差异无显著意义(P>0.05)。
2.3 两组患者血清HBeAg阳性率的比较 单独HBV感染组与HBV、HGV重叠感染组中HBeAg阳性率分别为：54.96%(72/131)、52.63%(10/19)，经统计学χ2检验(χ2=0.01)，两组HBeAg阳性率比较，差异无显著意义(P>0.05)。
2.4 两组患者血清抗HBe阳性率的比较 单独HBV感染组与HBV、HGV重叠感染组中抗HBe阳性率分别为：45.04%(72/131)、42.10%(8/19)，经统计学χ2检验(χ2=0.02)，两组抗HBe阳性率比较，差异无显著意义(P>0.05)。
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2.5 两组患者血清HBV-DNA与HBeAg同时阳性率的比较 单独HBV感染组与HBV、HGV重叠感染组中HBV-DNA与HBeAg同时阳性率分别为：44.27%(58/131)、36.84%(7/19)，经统计学χ2检验(χ2=0.15)，两组HBV-DNA与HBeAg同时阳性率比较，差异无显著意义(P>0.05)。
3 讨论
随着HGV的实验诊断不断完善，HGV-RNA检测出来的阳性率日益增高。流行病学研究显示：HBV与HGV均为肠道外传播的病毒[5，6]。因而临床上发现HBV、HGV重叠感染常见。但HBV、HGV重叠感染后，HGV是否抑制慢性乙型肝炎患者HBV的复制，日益引起人们的重视。但这方面的报道有的认为似呈抑制作用[7，8]，而Marrone等[9]认为HGV合并感染对HBV-DNA水平影响不大。本文从150例慢性乙型肝炎患者中检测HGV-RNA，并将其分为单独HBV感染组及HBV、HGV重叠感染组，发现两组在HBV-DNA含量、HBV-DNA阳性率、HBeAg阳性率、抗HBe阳性率及HBV-DNA与HBeAg同时阳性率方面相比，差异无显著意义(P>0.05)。因而，作者认为这两种病毒之间似乎可以和平共处，互不影响，HGV并不抑制慢性乙型肝炎患者HBV的复制，然而，两种病毒间相互作用的机制尚需进一步研究。
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4 参考文献
1 病毒性肝炎防治方案(试行). 中华传染病杂志，1995，13(4)：241.
2 Leary TP,Muerhoff AS,Simons JN,et al. Sequence and genomic organization of GBV-C:a nove1 member of the flaviviridae associated with human non-A-E hepatitis. J Med Virol,1996,48(1):60～67.
3 Linnen J,Wages J,Zhang-Keck ZY,et al. Molecular cloning and disease association of hepatitis G virus:a transfusion-transmissible agent. Science,1996,271(5248):505～508.
, 百拇医药
4 董惠卿，张复春，蔡晓莉，等. 定量聚合酶链反应检测血清乙型肝炎病毒DNA及其意义. 广东卫生防疫，1996，22(4)：1.
5 Sallie R,Shaw J,Mutimer D. GBV-C virus and fulminant hepatic failure. Lancet,1996,347(9014):1552.
6 Schmidt B,Korn K,Fleckenstein B. Molecular evidence for transmission of hepatitis G virus by blood transfusion. Lancet,1996,347(9005):909.
7 Yuzo Miyakawa,Makoto Mayumi. Hepatitis G virus:a true hepatitis virus or an accidental tourist? N Eng J Med,1997,336(11):795.
8 赵和平，赵素莲，张玲荣，等. 庚型肝炎病毒与乙型、丙型肝炎病毒重叠感染的临床分析. 中华实验和临床病毒学杂志，1997，11(4)：389.
9 Marrone A，Shih JWK，Nakatsuji Y,et al. Hepatitis G virus (HGV) among patients with chronic hepatitis B. Hepatol,1996,24(4 pt 2):225A., 百拇医药