长苞香蒲花粉(蒲黄)黄酮类成分的研究①
作者：王实强 张水寒 杨永华
单位：王实强 张水寒 杨永华(湖南省中医药研究院 长沙410006)
关键词：长苞香蒲；黄酮甙；异鼠李素-3-0-新橙皮糖甙
湖南中医学院学报/990103 提要 从长苞香蒲Typha angustata Bory et Chaub的干燥花粉中分离得到一黄酮甙化合物，经UV、IR、FAB-MS、1HNMR、13CNMR、1H-1HCOSY、13C-1H COSY谱及水解试验鉴定其结构为异鼠李素-3-0-α-L-鼠李糖(1→2)-β-D-葡萄糖甙，即异鼠李素-3-0-新橙皮糖甙(isorhamnetin-3-0-neohesperidoside,I)。
中国图书分类号 R284.2
, 百拇医药
长苞香蒲Typha angustata Bory et Chaub为香蒲科植物，在我国大部分地区都有分布
[1]，其干燥花粉入药为中药蒲黄。我们曾对长苞香蒲的化学成分进行过研究报道[2～4]，从中分离得到了异鼠李素、槲皮素、黄酮甙等化合物。在进一步研究中，又从中分离得到一黄酮甙化合物，经光谱解析，结构确定为异鼠李素-3-0-新橙皮糖甙(isorhamnetin-3-0-neohesperidoside,I)。现报告如下。
1 仪器和材料
熔点用WC-1型显微熔点测定仪测定，温度未经校正，四川大学分析仪器厂；紫外光谱用PE-16型紫外分光光度仪测定，PE公司；红外光谱用Nicolet型红外光谱仪测定(Nicolet公司)；质谱用Platform-ESI型质谱仪测定(Platform公司)；核磁共振谱用JNM-GX400型核磁共振仪测定(JNM公司)；以TMS为内标，DMSO-d6作溶剂；长苞香蒲采自湖南省南县湖区。
, 百拇医药
2 方法与结果
2.1 提取分离
取长苞香蒲花粉加80%乙醇加热回流提取5次，合并乙醇提取液，减压回收乙醇，用乙醚萃取5次，弃去乙醚液；水溶液再用水饱和的正丁醇萃取5次，合并正丁醇液，减压浓缩，放冷，滤取析出的黄色沉淀物，干燥后得总黄酮。总黄酮用乙醇溶解，加入适量聚酰胺拌匀，干燥后，进行聚酰胺柱层析分离(总黄酮与聚酰胺比为1∶30～1∶50)，先用水进行冲洗，再分别用10%和30%乙醇进行洗脱，30%乙醇的洗脱液，用硅胶薄层进行检查，合并相同部分，减压浓缩至干，残渣用适量乙醇溶解，过滤，放置后析出结晶，再用乙醇进行重结晶，得到异鼠李素-3-0-新橙皮糖甙。
2.2 结构鉴定
化合物I为黄色针晶(EtOH)，熔点184～185℃，易溶于水、甲醇、乙醇。盐酸镁粉反应呈桔红色，锆盐反应呈鲜黄色，加柠檬酸褪去；Molish反应出现棕色环。I的快速原子轰击质谱(FAB-MS)给出m/e 625(M++H)峰。用0.1 mol/L盐酸水解所得甙元，经UV、IR、1HNMR和MS光谱数据证明为异鼠李素，薄层层析其比移值与异鼠李素的标准品完全相同。酸水解液用纸层析检出有L-鼠李糖和D-葡萄糖。
, 百拇医药
I的1HNMR谱中，δ6.21和δ6.44分别为6位和8位氢质子，在13C-1H COSY谱中分别与δ98.7和δ93.7的碳相关；δ6.91和δ7.49分别为5′位和6′位氢质子，在1H-1H COSY谱 中 两 者 相关，在13C-1H COSY谱 中 分 别 与 δ115.2 和 δ121.8的碳相关；δ7.96为2′位氢质子，在13C-1H COSY谱中与δ113.5的碳相关。
I在甲醇中的紫外光谱λmax254，266，352nm，示3位取代的黄酮醇；加入甲醇钠后，带I红移52nm，示4′位为游离羟基；加入乙酸钠后，带II红移17nm，示7位为游离羟基；加入三氯化铝后，带I红移了50nm，加盐酸后峰位基本不变，示5位为游离羟基[5]。I的核磁共振氢谱进一步证明，母核A环5、7位，B环4′位为游离羟基。根据以上数据，推断I为异鼠李素的3位糖甙。
, http://www.100md.com
I的快速原子轰击质谱除给出(M++H)峰外，还给出失去一个鼠李糖基的碎片峰(479)及失去一个鼠李糖基和葡萄糖基的碎片峰(317)，即甙元峰。表明I的结构中糖的连接顺序为异鼠李素-D-葡萄糖-L-鼠李糖。
I的1HNMR谱中，在δ5.02处有一个双峰信号，13C-1H COSY谱中与δ100.7的碳相关，为鼠李糖端基质子，根据其偶合常数为1.5Hz，推断其为α-构型；δ0.64的双峰信号为鼠李糖的甲基质子，并与δ17.0的碳相关。在δ5.76处的双峰信号为3位葡萄糖基的相应的端基质子，13C-1H COSY谱中与δ98.3的碳相关，偶合常数为7.3Hz，推断为β-构型。
根据以上数据证明，I的结构为异鼠李素-3-0-α-L-鼠李糖(1→2)-β-D-葡萄糖甙，即异鼠李素-3-0-新橙皮糖甙(isorhamnetin-3-0-neohesperidoside)。与文献报道的该化合物的光谱数据基本一致[6]。结构式如下：
, 百拇医药
2.3 理化性质及光谱数据
化合物I为黄色针状结晶(EtOH)；熔点184～185℃；I易溶于水、甲醇，可溶于乙醇；盐酸-镁粉反应呈桔红色；锆盐试验呈鲜黄色，加柠檬酸黄色褪去；Molish反应出现棕色环。紫外光谱：λmax(MeOH):254，266，352。λmax(MeOH+AlCl3)：269，299，360，402。λmax(MeOH+AlCl3+HCl)：269，299，352，398。λmax(MeOH+NaOAc)：271，314，364。λmax(MeOH+NaOCH3)：270，328，404。红外光谱：3393，2928，1663，1608，1499，1356，1289，1206，1128，1055，980，806cm-1。快速原子轰击质谱(FAB-MS)：m/e 625(M++1)，479，317。分子式为C28H32O16。
, 百拇医药
核磁共振氢谱(400 MHz，DMSO-d6)：δ0.64(d，3H，J＝6.3Hz，鼠李糖-CH3)，3.86(s，3H，-OCH3)，5.02(d，1H，J＝1.5Hz，α-鼠李糖C1-H)，5.76(d，1H，J＝7.3Hz，β-葡萄糖C1-H)，6.21(d，1H，J＝1.5Hz，H-6)，6.44(d，1H，J＝2.0Hz，H-8)，6.91(d，1H，J＝8.8Hz，H-
5′)，7.49(dd，1H，J＝8.3，2Hz，H-6′)，7.96(d，1H，J＝2.4Hz，H-2′)
核磁共振碳谱见附表。
附表 核磁共振碳谱(100 MHz，DMSO-d6，ppm) C
δ
, 百拇医药
C
δ
C
δ
2
156.3
1′
121.0
5′′
77.1
3
132.5
2′
, 百拇医药 113.5
6′′
60.5
4
177.3
3′
149.3
1′′′
100.7
5
161.2
4′
146.8
, http://www.100md.com
2′′′
70.6
6
98.7
5′
115.2
3′′′
70.1
7
164.1
6′
121.8
4′′′
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71.7
8
93.7
1′′
98.3
5′′′
68.3
9
156.1
2′′
77.6
6′′′
17.0
, 百拇医药
10
104.0
3′′
77.4
OCH3
55.7
4′′
70.6
3 小结 长苞香蒲为临床常用活血化瘀中药，我们对其进行分离获得一黄酮甙化合物，这一物质经
UV、IR、FAB-MS、1HNMR、13CNMR、1H-1HCOSY、13C-1HCOSY谱及水解试验鉴定其结构为异鼠李素-3-0-新橙皮糖甙(isorhamnetin-3-0-neohesperidoside,I)。
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①国家九五攻关课题“蒲黄药材质量标准规范化研究”
参考文献
[1] 中国科学院北京植物研究所.中国高等植物图鉴.第五册.北京：科学出版社，1974，1～2
[2] 杨永华，柳克铃，董志立.长苞香蒲黄酮类化合物的研究.中草药，1983，14(1)：11
[3] 杨永华，柳克铃，董志文.蒲黄中的新成份——香蒲新甙的鉴定.湖南中医杂志，1990，6(2)：53
[4] 柳克铃，杨永华，刘桂焕.长苞香蒲化学成分的研究.湖南中医杂志，1987，3(1)：40
[5] 中国科学院上海药物研究所植化室编译.黄酮体化合物鉴定手册.北京：科学出版社，1981.615
[6] 贾世山，刘永隆，马超美.狭叶香蒲花粉(蒲黄)黄酮类成分的研究.药学学报，1986，21(6)：441
(收稿日期 1998-11-25), http://www.100md.com
单位：王实强 张水寒 杨永华(湖南省中医药研究院 长沙410006)
关键词：长苞香蒲；黄酮甙；异鼠李素-3-0-新橙皮糖甙
湖南中医学院学报/990103 提要 从长苞香蒲Typha angustata Bory et Chaub的干燥花粉中分离得到一黄酮甙化合物，经UV、IR、FAB-MS、1HNMR、13CNMR、1H-1HCOSY、13C-1H COSY谱及水解试验鉴定其结构为异鼠李素-3-0-α-L-鼠李糖(1→2)-β-D-葡萄糖甙，即异鼠李素-3-0-新橙皮糖甙(isorhamnetin-3-0-neohesperidoside,I)。
中国图书分类号 R284.2
, 百拇医药
长苞香蒲Typha angustata Bory et Chaub为香蒲科植物，在我国大部分地区都有分布
[1]，其干燥花粉入药为中药蒲黄。我们曾对长苞香蒲的化学成分进行过研究报道[2～4]，从中分离得到了异鼠李素、槲皮素、黄酮甙等化合物。在进一步研究中，又从中分离得到一黄酮甙化合物，经光谱解析，结构确定为异鼠李素-3-0-新橙皮糖甙(isorhamnetin-3-0-neohesperidoside,I)。现报告如下。
1 仪器和材料
熔点用WC-1型显微熔点测定仪测定，温度未经校正，四川大学分析仪器厂；紫外光谱用PE-16型紫外分光光度仪测定，PE公司；红外光谱用Nicolet型红外光谱仪测定(Nicolet公司)；质谱用Platform-ESI型质谱仪测定(Platform公司)；核磁共振谱用JNM-GX400型核磁共振仪测定(JNM公司)；以TMS为内标，DMSO-d6作溶剂；长苞香蒲采自湖南省南县湖区。
, 百拇医药
2 方法与结果
2.1 提取分离
取长苞香蒲花粉加80%乙醇加热回流提取5次，合并乙醇提取液，减压回收乙醇，用乙醚萃取5次，弃去乙醚液；水溶液再用水饱和的正丁醇萃取5次，合并正丁醇液，减压浓缩，放冷，滤取析出的黄色沉淀物，干燥后得总黄酮。总黄酮用乙醇溶解，加入适量聚酰胺拌匀，干燥后，进行聚酰胺柱层析分离(总黄酮与聚酰胺比为1∶30～1∶50)，先用水进行冲洗，再分别用10%和30%乙醇进行洗脱，30%乙醇的洗脱液，用硅胶薄层进行检查，合并相同部分，减压浓缩至干，残渣用适量乙醇溶解，过滤，放置后析出结晶，再用乙醇进行重结晶，得到异鼠李素-3-0-新橙皮糖甙。
2.2 结构鉴定
化合物I为黄色针晶(EtOH)，熔点184～185℃，易溶于水、甲醇、乙醇。盐酸镁粉反应呈桔红色，锆盐反应呈鲜黄色，加柠檬酸褪去；Molish反应出现棕色环。I的快速原子轰击质谱(FAB-MS)给出m/e 625(M++H)峰。用0.1 mol/L盐酸水解所得甙元，经UV、IR、1HNMR和MS光谱数据证明为异鼠李素，薄层层析其比移值与异鼠李素的标准品完全相同。酸水解液用纸层析检出有L-鼠李糖和D-葡萄糖。
, 百拇医药
I的1HNMR谱中，δ6.21和δ6.44分别为6位和8位氢质子，在13C-1H COSY谱中分别与δ98.7和δ93.7的碳相关；δ6.91和δ7.49分别为5′位和6′位氢质子，在1H-1H COSY谱 中 两 者 相关，在13C-1H COSY谱 中 分 别 与 δ115.2 和 δ121.8的碳相关；δ7.96为2′位氢质子，在13C-1H COSY谱中与δ113.5的碳相关。
I在甲醇中的紫外光谱λmax254，266，352nm，示3位取代的黄酮醇；加入甲醇钠后，带I红移52nm，示4′位为游离羟基；加入乙酸钠后，带II红移17nm，示7位为游离羟基；加入三氯化铝后，带I红移了50nm，加盐酸后峰位基本不变，示5位为游离羟基[5]。I的核磁共振氢谱进一步证明，母核A环5、7位，B环4′位为游离羟基。根据以上数据，推断I为异鼠李素的3位糖甙。
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I的快速原子轰击质谱除给出(M++H)峰外，还给出失去一个鼠李糖基的碎片峰(479)及失去一个鼠李糖基和葡萄糖基的碎片峰(317)，即甙元峰。表明I的结构中糖的连接顺序为异鼠李素-D-葡萄糖-L-鼠李糖。
I的1HNMR谱中，在δ5.02处有一个双峰信号，13C-1H COSY谱中与δ100.7的碳相关，为鼠李糖端基质子，根据其偶合常数为1.5Hz，推断其为α-构型；δ0.64的双峰信号为鼠李糖的甲基质子，并与δ17.0的碳相关。在δ5.76处的双峰信号为3位葡萄糖基的相应的端基质子，13C-1H COSY谱中与δ98.3的碳相关，偶合常数为7.3Hz，推断为β-构型。
根据以上数据证明，I的结构为异鼠李素-3-0-α-L-鼠李糖(1→2)-β-D-葡萄糖甙，即异鼠李素-3-0-新橙皮糖甙(isorhamnetin-3-0-neohesperidoside)。与文献报道的该化合物的光谱数据基本一致[6]。结构式如下：
, 百拇医药
2.3 理化性质及光谱数据
化合物I为黄色针状结晶(EtOH)；熔点184～185℃；I易溶于水、甲醇，可溶于乙醇；盐酸-镁粉反应呈桔红色；锆盐试验呈鲜黄色，加柠檬酸黄色褪去；Molish反应出现棕色环。紫外光谱：λmax(MeOH):254，266，352。λmax(MeOH+AlCl3)：269，299，360，402。λmax(MeOH+AlCl3+HCl)：269，299，352，398。λmax(MeOH+NaOAc)：271，314，364。λmax(MeOH+NaOCH3)：270，328，404。红外光谱：3393，2928，1663，1608，1499，1356，1289，1206，1128，1055，980，806cm-1。快速原子轰击质谱(FAB-MS)：m/e 625(M++1)，479，317。分子式为C28H32O16。
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核磁共振氢谱(400 MHz，DMSO-d6)：δ0.64(d，3H，J＝6.3Hz，鼠李糖-CH3)，3.86(s，3H，-OCH3)，5.02(d，1H，J＝1.5Hz，α-鼠李糖C1-H)，5.76(d，1H，J＝7.3Hz，β-葡萄糖C1-H)，6.21(d，1H，J＝1.5Hz，H-6)，6.44(d，1H，J＝2.0Hz，H-8)，6.91(d，1H，J＝8.8Hz，H-
5′)，7.49(dd，1H，J＝8.3，2Hz，H-6′)，7.96(d，1H，J＝2.4Hz，H-2′)
核磁共振碳谱见附表。
附表 核磁共振碳谱(100 MHz，DMSO-d6，ppm) C
δ
, 百拇医药
C
δ
C
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2
156.3
1′
121.0
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77.1
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132.5
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60.5
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177.3
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149.3
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161.2
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146.8
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70.6
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115.2
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164.1
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121.8
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93.7
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98.3
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156.1
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77.6
6′′′
17.0
, 百拇医药
10
104.0
3′′
77.4
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55.7
4′′
70.6
3 小结 长苞香蒲为临床常用活血化瘀中药，我们对其进行分离获得一黄酮甙化合物，这一物质经
UV、IR、FAB-MS、1HNMR、13CNMR、1H-1HCOSY、13C-1HCOSY谱及水解试验鉴定其结构为异鼠李素-3-0-新橙皮糖甙(isorhamnetin-3-0-neohesperidoside,I)。
, http://www.100md.com
①国家九五攻关课题“蒲黄药材质量标准规范化研究”
参考文献
[1] 中国科学院北京植物研究所.中国高等植物图鉴.第五册.北京：科学出版社，1974，1～2
[2] 杨永华，柳克铃，董志立.长苞香蒲黄酮类化合物的研究.中草药，1983，14(1)：11
[3] 杨永华，柳克铃，董志文.蒲黄中的新成份——香蒲新甙的鉴定.湖南中医杂志，1990，6(2)：53
[4] 柳克铃，杨永华，刘桂焕.长苞香蒲化学成分的研究.湖南中医杂志，1987，3(1)：40
[5] 中国科学院上海药物研究所植化室编译.黄酮体化合物鉴定手册.北京：科学出版社，1981.615
[6] 贾世山，刘永隆，马超美.狭叶香蒲花粉(蒲黄)黄酮类成分的研究.药学学报，1986，21(6)：441
(收稿日期 1998-11-25), http://www.100md.com