糙苏化学成分的研究
作者：赵静 杨秀伟** 付宏征 李荣芷
单位：北京医科大学药学院(100083)
关键词：糙苏；黄花香茶菜丙素；晶体X-衍射分析
中草药/990204
摘 要 从云南产糙苏Phlomis umbrosa地上全草中分得9个化合物，鉴定了它们的化学结构，分别是：β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅰ)、熊果酸(ursolic acid,Ⅱ)、黄花香茶菜甲素(sculponeatin A,Ⅲ)、黄花香茶菜丙素(sculponeatin C,Ⅳ)、2α-羟基熊果酸(2α-hydroxyursolic acid,V)、委陵菜酸(tormentic acid,Ⅵ)、ent-7α，16β，17-三羟基贝壳杉烷(ent-7α,16β,17-trihydroxykaurane,Ⅶ)、β-谷甾醇葡萄糖苷(β-sitosteryl-glucoside,Ⅷ)和葡萄糖(glucose,Ⅸ)。这些化合物为首次从该植物中分得，并对黄花香茶菜丙素的晶体结构进行了X-衍射分析。
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糙苏系唇形科药用植物Phlomis umbrosa Turcz.的地上全草或根，具有祛风活络、强筋壮骨、消肿之功效，主治风湿性关节炎、腰痛、跌打损伤和疮疖肿毒〔1〕。有关糙苏化学成分的研究甚少，Chung等从糙苏根分离出8-O-乙酰基山栀苷(8-O-acetylshanzh-iside,umbroside)〔2〕、山栀苷甲酯(shanzhiside meester)〔3〕，朱等从糙苏地上部分分得琥珀酸和水苏素(bentonicine)〔4〕。为阐明糙苏发挥药效的物质基础，我们首先对其化学成分进行了研究。
糙苏乙醇溶性部分的水悬浮液连续用乙酸乙酯和正丁醇萃取，分别得乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物。将其经硅胶柱层析，分别得化合物Ⅰ～Ⅸ。
根据理化性质和光谱分分析，鉴定它们的结构分别为：β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅰ)、熊果酸(ursolic acid,Ⅱ)、黄花香茶菜甲素(sculponeatin A,Ⅲ)、黄花香茶菜丙素(sculponeatin C,Ⅳ)、2α-羟基熊果酸(2α-hydroxyursolic acid,Ⅴ)、委陵菜酸(tormentic acid,Ⅵ)、ent-7α，16β，17-三羟基贝壳杉烷(ent-7α,16β,17-trihydroxykaurane,Ⅶ)、β-谷甾醇葡萄糖苷(β-sitosteryl-glucoside,Ⅷ)和葡萄糖(glucose,Ⅸ)。这些化合物为首次从该植物地上全草中分得。
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化合物Ⅳ为淡黄色粗针晶，mp 299℃～302℃，EI-MS给出分子离子峰为362[M+]，其晶体的Ⅹ-衍射分析给出正确分子式为C20H26O6，由六环骈合而成，六元环A为椅式，六元环D为半椅式，六元环E为船式，五元环B、C、F均呈信封式。各环的稠合方式为：A/B顺式，B/C顺式，A/C反式，A/D反式，D/E顺式。分子间存在氢键联系：O3 O4(-1+x,y,z)：2.802A；O4 O1(0.5+x,0.5-y,1-z):2.7921A，以此维系晶态下结构的稳定。
图1为分子相对构型图，图2为分子立体结构投影图。
图1 化合物Ⅲ，Ⅳ和Ⅶ的化学结构式
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图2 化合物Ⅳ的分子立体结构投影图
1 材料和仪器
糙苏(地上全草)1993年8月采自云南省，经鉴定为Phlomis umbrosa Turcz.
熔点用X4型显微熔点测定仪测定(温度计未校正)，红外光谱(IR)用美国Perkin-Elmer 983红外光谱仪测定：1H NMR和13C NMR用Varian Gemini 300(1H，300 MHz;13 C,75 MHz)、JEOL GX-400(1H，400MH，13 C，100MHz)和Varian Unity plus 500(1H，500 MHz；13C，125 MHz)核磁共振仪测定，TMS为内标。1H-1H相关谱(COSY)、1H-13C COSY、HMQC和HMBC用标准脉冲序列。EI-MS和用JEOL JMS-AX 505 HAD和JEOL JMS-DX 300L质谱仪测定。X-衍射仪为CAD4四圆衍射仪。
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薄层层析和柱层析硅胶系青岛海洋化工厂产品。
2 提取和分离
糙苏(地上部分)粗粉20 kg用95%乙醇冷浸。滤取乙醇液，减压回收乙醇后得乙醇提取物(PUEE)1.3 kg。将PUEE(650 g)均匀地悬浮在水中，用乙醇乙酯萃取后得到乙酸乙酯提取物267.7 g和水溶性部分。将水溶性部分再用正丁醇萃取，得到正丁醇提取物(124 g)和水层残留物。乙酸乙酯提取物(267.7 g)经常压硅胶柱层析，环己烷-乙酸乙酯、乙酸乙酸和乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱，TLC检测，得到组分E1～E4。再分别经柱层析分离，从E1中得到化合物Ⅰ；从E2中分别得到化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ；从E3中得到化合物Ⅶ，从E4中得到化合物Ⅷ。从正丁醇提取物中得到化合物Ⅷ和Ⅸ。
3 鉴定
化合物Ⅰ：无色板状结晶(乙醇)，mp 140℃；EI-MS：m/z 414[M+]。其IR光谱数据与标准样品β-谷甾醇的完全一致。
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化合物Ⅱ：白色粉末，EI-MS：m/z 456[M+]，438[M+-H2O]；其IR、1HNMR、13CNMR光谱数据与标准样品熊果酸的完全一致。
化合物Ⅲ：无色棱晶(丙酮-环已烷)，mp 245℃～248℃；IRνmax(KBr)：3 517(OH)，1 700，1 662 cm-1；元素分析：C20H26O5(计算值：C 69.34，H 7.57；实测值：C 69.59，H 7.61)。1H NMR(400 MHz,C5D5N)δppm：1.05(3 H，s,C18-Me)，1.45(1 H，dd,J＝4.9，13.4 Hz,C3-H)，1.51(2 H，dd,J＝5.4，5.4 Hz,C12-H×2)，1.55(1 H，dd,J＝6.1，9.2 Hz,C14-H)，1.64(1 H，dt,J＝3.4，15.2 Hz,C3-H)，1.68(1 H，dd,J＝4.9，12.0 Hz,C11-Ha)，1.89(2 H，m, C2-H×2)，2.03(1 H，d,J＝11.7 Hz,C11-Hb)，2.15(1 H，dd,J＝8.3，12.0 Hz,C14-H)，2.45(1 H，d,J＝5.4 Hz,C5-H)，2.71(1 H，dd,J＝5.4，8.1 Hz,C13-H)，2.78(1 H，dd,J＝5.4，13.7 Hz,C9-H)，3.43(1 H，d,J＝8.8 Hz,C19-Hb)，3.97(1 H，d,J＝8.8 Hz,C19-Ha)，4.17(1 H，d,J＝9.0 Hz,C20-Hb)，4.35(1 H，d,J＝9.0 Hz,C20-Ha)，4.72(1 H，dd,J＝5.9，11.0 Hz,C1-H)，5.20(1 H，s,C15-H)，6.02(1 H，d,J＝4.9 Hz,C6-H)。13CNMR(100 MHz，C5D5N)δppm：75.9 d(C1)、23.3 t(C2)、29.3 t(C3)、41.4 s(C4)、53.4 d(C5)、111.4 d(C6)、175.8 s(C7)、52.9 s(C8)、35.9 d(C9)、50.8 s(C10)、33.2 t(C11)、18.6 t(C12)、37.0 d(C13)、32.8 t(C14)、78.5 d(C15)、159.3 s(C16)、108.6 t(C17)、30.4 q(C18)、77.0 t(C19)、72.7 t(C20)。
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化合物Ⅲ的结构与从黄花香茶菜R. sculponeata分离出的黄花香茶菜甲素〔5〕一致。
化合物Ⅳ：淡黄色粗针晶(丙酮-环己烷)，mp 299℃～302℃；EI-MS：m/z 362[M+]，344[M+-H2O]；IRνmax(KBr)：3 410(OH)，1 724，1 698，1 658 cm-1；1H NMR(500 MHz，C5D5N)δppm：1.06(3 H，s,C18-Me)，1.59(1 H，d,J＝3.3 Hz，C3-Ha)，1.61(1 H,dd,J＝3.3，3.3 Hz,C3-Hb)，1.78～1.82(2 H，m,C2-Ha,C2-Hb)，1.85(1 H，dd,J＝4.2，12.6 Hz,C14-Hb)，1.92(1 H，d,J＝6.0，14.7 Hz,C12-Hb)，2.42(1 H，dd,J＝6.0，14.7 Hz,C12-Ha)，2.75(1 H，d,J＝3.9 Hz,C9-H)，2.90(1 H，dd,J＝5.4，9.6 Hz,C13-H)，2.97(1 H，d,J＝5.4 Hz,C5-H)，3.14(1 H，d,J＝11.4 Hz,C14-Ha)，3.44(1 H，d,J＝9.0 Hz,C19-Hb)，4.02(1 H，d,J＝9.0 Hz,C19-Ha)，4.24(1 H，d,J＝8.7 Hz,C20-Hb)，4.48(1 H，d,J＝3.6 Hz,C11-H)，4.49(1 H，d,J＝8.7 Hz,C20-Ha)，5.21(1 H，d,J＝3.0 Hz,C17-Hb)，5.50(1 H，drs,C17-Ha)，5.68(1 H，s,C15-H)，5.86(1 H，dd,J＝4.8，12.2 Hz,C1-H)，6.12(1 H，d,J＝5.4 Hz,C6-H)，6.48(1 H，s,C11-OH)。13C NMR(125MHz,C5D5N)δppm：78.4 d(C1)、23.5 t(C2)、29.6 t(C3)、41.7 s(C4)、54.1 d(C5)、111.6 d(C6)、175.7 s(C7)、52.2 s(C8)、40.0 d(C9)、50.3 s(C10)、65.1 d(C11)、45.2 t(C12)、37.5 d(C13)、34.0 t(C14)、79.9 d(C15)、159.5 s(C16)、108.4 t(C17)、30.8 q(C18)、77.0 t(C19)、72.6 t(C20)。
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晶体X-衍射分析：浅黄色粗针晶(丙酮-环己烷)，属正交晶系，空间群为P212121，晶胞参数为a＝7.789(5)，b＝12.148(1)，c＝18.425(2)，晶胞内分子数为Z＝4，计算晶体密度DX＝1.384 g/cm3。正确分子式为C20H26O6。用CAD4四圆衍射仪收集衍射强度数据，MoKα辐射，石墨单色器，2θ/ω扫描方式，2θ范围3～50，独立衍射点1 755个，可观察点(｜F｜≥3σ｜F｜)1 342个。在微机上用直接法(SHELXS-86)解析分子结构，从E图上获得全部26个非氢原子位置，用最小二乘法修正结构参数并判断碳、氧原子种类，再经最小二乘法修正坐标参数和原子热运动参数，用几何计算法与Fourier综合法获得全部氢原子坐标，最终可靠因子Rf＝0.044,Rw＝0.046。
, 百拇医药 化合物Ⅳ的结构与从黄花香茶菜R.sculponeata分离出的黄花香茶菜丙素〔5〕一致。
化合物Ⅴ：白色粉末；EI-MS:m/z472〔M+〕。其IR、1HNMR、13C NMR光谱数据与文献〔6～8〕报道的2α-羟基熊果酸完全一致。
化合物Ⅳ：无色针晶(乙酸乙酯-甲醇)，mp 265℃～267℃；EI-MS:m/z 488[M+]，470[M+-H2O]，442[M+-COOH-H]；其IR、1H NMR、13C NMR光谱数据与标准样品委陵菜酸的完全一致。
化合物Ⅶ：无色针晶(甲醇-水), mp 205℃～207℃；IRνmax(KBr)：3 465，3 271(OH)cm-1；EI-MS:m/z 304[M+-H2O]，291(100)，273，255，230；1H NMR(400 MHz，C5D5N)δppm:0.85(3 H,s,C19-Me),0.92(3 H,s,C18-Me),1.06(3 H,s,C20-Me),1.20(1 H,dd,J＝4.3，12.1 Hz,C3-Ha)，1.38(1 H，dd,J＝4.3,12.1 Hz，C3-Hb)，1.41(1 H,m,C11-Ha)，1.59(1 H,dd,J＝4.0，4.3 Hz,C2-Ha)，1.67(1 H,m,C11-Hb)，1.69(1 H,dd,J＝2.7，8.1 Hz,C12-Hb)，1.70(1 H,dd,J＝2.7，2.7 Hz,C6-Hb)，1.74(1 H,brs,C9-H)，1.77(1 H,dd,J＝4.0，4.3 Hz,C2-Hb)，1.78(2 H,dd,J＝4.0，9.4 Hz,C1-Ha,b)，1.84(1 H,dt,J＝2.7，13.5 Hz,C6-Ha)，1.93(1 H,m,C12-Ha)，1.94(1 H,brs,C5-H)，1.97(1 H,dd,J＝5.5，9.9 Hz,C14-Hb)，2.03(1 H,d,J＝14.8 Hz,C15-Hb)，2.16(1 H,dd,J＝3.8，10.8 Hz,C14-Ha)，2.54(1 H,m,C13-H)，2.56(1 H,d,J＝14.8 Hz,C15-Ha)，4.03(1 H,brs,C7α-H)。13C NMR(100 MHz,C5D5N)δppm：40.5 t(C1)、18.4 t(C2)、42.4 t(C3)、32.9 s(C4)、40.0 d(C5)、28.6 t(C6)、76.7 d(C7)、48.4 s(C8)、51.6 d(C9)、39.4 s(C10)、19.0 t(C11)、27.3 t(C12)、45.8 d(C13)、36.8 t(C14)、50.7 t(C15)、81.4 t(C16)、66.3 t(C17)、33.5 q(C18)、21.9 q(C19)、18.0 q(C20)。以上数据与文献〔9〕报道的ent-7α，16β，17-三羟基贝壳杉烷的完全一致。
, 百拇医药
化合物Ⅷ：白色粉末，其IR、1HNMR、13 CNMR光谱数据与标准样品β-谷甾醇葡萄糖苷的完全一致。
化合物Ⅸ：无色棱晶(甲醇-水)。其IR、1HNMR、13CNMR光谱数据和纸层析行为与标准样品葡萄糖的完全一致。
致谢：中国医学科学院*中国协和医科大学药物研究所吴楠、吕扬、郑启泰老师代测X-衍射光谱。
*Address:Zhao Jing ,College of Pharmacy ,Beijing University of Medical Sciences ,Beijing
参 考 文 献
[1] 谢宗万主编.全国中草药汇编(下册).第二版.北京：人民卫生出版社，1996：678
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[2] Chung B S, et al.Saengyak Hakhoe Chi，1981，12(2)：82
[3] Chung B S, et al.Saengyak Hakhoe Chi，1983，14(1)：5
[4] 朱大公，等.中草药，1984，15(8)：380
[5] 王先荣，等.中草药，1982，13(11)：11
[6] Yamagishi T, et al.Phytochemistry，1988，27：3213
[7] Kojima H, et al.Phytochemistry, 1989,28:1703
[8] Seo B S, et al.J Chem Soc Chem Commun,1975:954
[9] Elliger C A, et al.J Nat Prod, 1992,55(10):147
[10] Fraga B M, et al.Phytochemistry， 1994，37(3)：717
(1998-01-12收稿), http://www.100md.com(赵静 杨秀伟** 付宏征 李荣芷)
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关键词：糙苏；黄花香茶菜丙素；晶体X-衍射分析
中草药/990204
摘 要 从云南产糙苏Phlomis umbrosa地上全草中分得9个化合物，鉴定了它们的化学结构，分别是：β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅰ)、熊果酸(ursolic acid,Ⅱ)、黄花香茶菜甲素(sculponeatin A,Ⅲ)、黄花香茶菜丙素(sculponeatin C,Ⅳ)、2α-羟基熊果酸(2α-hydroxyursolic acid,V)、委陵菜酸(tormentic acid,Ⅵ)、ent-7α，16β，17-三羟基贝壳杉烷(ent-7α,16β,17-trihydroxykaurane,Ⅶ)、β-谷甾醇葡萄糖苷(β-sitosteryl-glucoside,Ⅷ)和葡萄糖(glucose,Ⅸ)。这些化合物为首次从该植物中分得，并对黄花香茶菜丙素的晶体结构进行了X-衍射分析。
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糙苏系唇形科药用植物Phlomis umbrosa Turcz.的地上全草或根，具有祛风活络、强筋壮骨、消肿之功效，主治风湿性关节炎、腰痛、跌打损伤和疮疖肿毒〔1〕。有关糙苏化学成分的研究甚少，Chung等从糙苏根分离出8-O-乙酰基山栀苷(8-O-acetylshanzh-iside,umbroside)〔2〕、山栀苷甲酯(shanzhiside meester)〔3〕，朱等从糙苏地上部分分得琥珀酸和水苏素(bentonicine)〔4〕。为阐明糙苏发挥药效的物质基础，我们首先对其化学成分进行了研究。
糙苏乙醇溶性部分的水悬浮液连续用乙酸乙酯和正丁醇萃取，分别得乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物。将其经硅胶柱层析，分别得化合物Ⅰ～Ⅸ。
根据理化性质和光谱分分析，鉴定它们的结构分别为：β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅰ)、熊果酸(ursolic acid,Ⅱ)、黄花香茶菜甲素(sculponeatin A,Ⅲ)、黄花香茶菜丙素(sculponeatin C,Ⅳ)、2α-羟基熊果酸(2α-hydroxyursolic acid,Ⅴ)、委陵菜酸(tormentic acid,Ⅵ)、ent-7α，16β，17-三羟基贝壳杉烷(ent-7α,16β,17-trihydroxykaurane,Ⅶ)、β-谷甾醇葡萄糖苷(β-sitosteryl-glucoside,Ⅷ)和葡萄糖(glucose,Ⅸ)。这些化合物为首次从该植物地上全草中分得。
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化合物Ⅳ为淡黄色粗针晶，mp 299℃～302℃，EI-MS给出分子离子峰为362[M+]，其晶体的Ⅹ-衍射分析给出正确分子式为C20H26O6，由六环骈合而成，六元环A为椅式，六元环D为半椅式，六元环E为船式，五元环B、C、F均呈信封式。各环的稠合方式为：A/B顺式，B/C顺式，A/C反式，A/D反式，D/E顺式。分子间存在氢键联系：O3 O4(-1+x,y,z)：2.802A；O4 O1(0.5+x,0.5-y,1-z):2.7921A，以此维系晶态下结构的稳定。
图1为分子相对构型图，图2为分子立体结构投影图。
图1 化合物Ⅲ，Ⅳ和Ⅶ的化学结构式
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图2 化合物Ⅳ的分子立体结构投影图
1 材料和仪器
糙苏(地上全草)1993年8月采自云南省，经鉴定为Phlomis umbrosa Turcz.
熔点用X4型显微熔点测定仪测定(温度计未校正)，红外光谱(IR)用美国Perkin-Elmer 983红外光谱仪测定：1H NMR和13C NMR用Varian Gemini 300(1H，300 MHz;13 C,75 MHz)、JEOL GX-400(1H，400MH，13 C，100MHz)和Varian Unity plus 500(1H，500 MHz；13C，125 MHz)核磁共振仪测定，TMS为内标。1H-1H相关谱(COSY)、1H-13C COSY、HMQC和HMBC用标准脉冲序列。EI-MS和用JEOL JMS-AX 505 HAD和JEOL JMS-DX 300L质谱仪测定。X-衍射仪为CAD4四圆衍射仪。
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薄层层析和柱层析硅胶系青岛海洋化工厂产品。
2 提取和分离
糙苏(地上部分)粗粉20 kg用95%乙醇冷浸。滤取乙醇液，减压回收乙醇后得乙醇提取物(PUEE)1.3 kg。将PUEE(650 g)均匀地悬浮在水中，用乙醇乙酯萃取后得到乙酸乙酯提取物267.7 g和水溶性部分。将水溶性部分再用正丁醇萃取，得到正丁醇提取物(124 g)和水层残留物。乙酸乙酯提取物(267.7 g)经常压硅胶柱层析，环己烷-乙酸乙酯、乙酸乙酸和乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱，TLC检测，得到组分E1～E4。再分别经柱层析分离，从E1中得到化合物Ⅰ；从E2中分别得到化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ；从E3中得到化合物Ⅶ，从E4中得到化合物Ⅷ。从正丁醇提取物中得到化合物Ⅷ和Ⅸ。
3 鉴定
化合物Ⅰ：无色板状结晶(乙醇)，mp 140℃；EI-MS：m/z 414[M+]。其IR光谱数据与标准样品β-谷甾醇的完全一致。
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化合物Ⅱ：白色粉末，EI-MS：m/z 456[M+]，438[M+-H2O]；其IR、1HNMR、13CNMR光谱数据与标准样品熊果酸的完全一致。
化合物Ⅲ：无色棱晶(丙酮-环已烷)，mp 245℃～248℃；IRνmax(KBr)：3 517(OH)，1 700，1 662 cm-1；元素分析：C20H26O5(计算值：C 69.34，H 7.57；实测值：C 69.59，H 7.61)。1H NMR(400 MHz,C5D5N)δppm：1.05(3 H，s,C18-Me)，1.45(1 H，dd,J＝4.9，13.4 Hz,C3-H)，1.51(2 H，dd,J＝5.4，5.4 Hz,C12-H×2)，1.55(1 H，dd,J＝6.1，9.2 Hz,C14-H)，1.64(1 H，dt,J＝3.4，15.2 Hz,C3-H)，1.68(1 H，dd,J＝4.9，12.0 Hz,C11-Ha)，1.89(2 H，m, C2-H×2)，2.03(1 H，d,J＝11.7 Hz,C11-Hb)，2.15(1 H，dd,J＝8.3，12.0 Hz,C14-H)，2.45(1 H，d,J＝5.4 Hz,C5-H)，2.71(1 H，dd,J＝5.4，8.1 Hz,C13-H)，2.78(1 H，dd,J＝5.4，13.7 Hz,C9-H)，3.43(1 H，d,J＝8.8 Hz,C19-Hb)，3.97(1 H，d,J＝8.8 Hz,C19-Ha)，4.17(1 H，d,J＝9.0 Hz,C20-Hb)，4.35(1 H，d,J＝9.0 Hz,C20-Ha)，4.72(1 H，dd,J＝5.9，11.0 Hz,C1-H)，5.20(1 H，s,C15-H)，6.02(1 H，d,J＝4.9 Hz,C6-H)。13CNMR(100 MHz，C5D5N)δppm：75.9 d(C1)、23.3 t(C2)、29.3 t(C3)、41.4 s(C4)、53.4 d(C5)、111.4 d(C6)、175.8 s(C7)、52.9 s(C8)、35.9 d(C9)、50.8 s(C10)、33.2 t(C11)、18.6 t(C12)、37.0 d(C13)、32.8 t(C14)、78.5 d(C15)、159.3 s(C16)、108.6 t(C17)、30.4 q(C18)、77.0 t(C19)、72.7 t(C20)。
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化合物Ⅲ的结构与从黄花香茶菜R. sculponeata分离出的黄花香茶菜甲素〔5〕一致。
化合物Ⅳ：淡黄色粗针晶(丙酮-环己烷)，mp 299℃～302℃；EI-MS：m/z 362[M+]，344[M+-H2O]；IRνmax(KBr)：3 410(OH)，1 724，1 698，1 658 cm-1；1H NMR(500 MHz，C5D5N)δppm：1.06(3 H，s,C18-Me)，1.59(1 H，d,J＝3.3 Hz，C3-Ha)，1.61(1 H,dd,J＝3.3，3.3 Hz,C3-Hb)，1.78～1.82(2 H，m,C2-Ha,C2-Hb)，1.85(1 H，dd,J＝4.2，12.6 Hz,C14-Hb)，1.92(1 H，d,J＝6.0，14.7 Hz,C12-Hb)，2.42(1 H，dd,J＝6.0，14.7 Hz,C12-Ha)，2.75(1 H，d,J＝3.9 Hz,C9-H)，2.90(1 H，dd,J＝5.4，9.6 Hz,C13-H)，2.97(1 H，d,J＝5.4 Hz,C5-H)，3.14(1 H，d,J＝11.4 Hz,C14-Ha)，3.44(1 H，d,J＝9.0 Hz,C19-Hb)，4.02(1 H，d,J＝9.0 Hz,C19-Ha)，4.24(1 H，d,J＝8.7 Hz,C20-Hb)，4.48(1 H，d,J＝3.6 Hz,C11-H)，4.49(1 H，d,J＝8.7 Hz,C20-Ha)，5.21(1 H，d,J＝3.0 Hz,C17-Hb)，5.50(1 H，drs,C17-Ha)，5.68(1 H，s,C15-H)，5.86(1 H，dd,J＝4.8，12.2 Hz,C1-H)，6.12(1 H，d,J＝5.4 Hz,C6-H)，6.48(1 H，s,C11-OH)。13C NMR(125MHz,C5D5N)δppm：78.4 d(C1)、23.5 t(C2)、29.6 t(C3)、41.7 s(C4)、54.1 d(C5)、111.6 d(C6)、175.7 s(C7)、52.2 s(C8)、40.0 d(C9)、50.3 s(C10)、65.1 d(C11)、45.2 t(C12)、37.5 d(C13)、34.0 t(C14)、79.9 d(C15)、159.5 s(C16)、108.4 t(C17)、30.8 q(C18)、77.0 t(C19)、72.6 t(C20)。
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晶体X-衍射分析：浅黄色粗针晶(丙酮-环己烷)，属正交晶系，空间群为P212121，晶胞参数为a＝7.789(5)，b＝12.148(1)，c＝18.425(2)，晶胞内分子数为Z＝4，计算晶体密度DX＝1.384 g/cm3。正确分子式为C20H26O6。用CAD4四圆衍射仪收集衍射强度数据，MoKα辐射，石墨单色器，2θ/ω扫描方式，2θ范围3～50，独立衍射点1 755个，可观察点(｜F｜≥3σ｜F｜)1 342个。在微机上用直接法(SHELXS-86)解析分子结构，从E图上获得全部26个非氢原子位置，用最小二乘法修正结构参数并判断碳、氧原子种类，再经最小二乘法修正坐标参数和原子热运动参数，用几何计算法与Fourier综合法获得全部氢原子坐标，最终可靠因子Rf＝0.044,Rw＝0.046。
, 百拇医药 化合物Ⅳ的结构与从黄花香茶菜R.sculponeata分离出的黄花香茶菜丙素〔5〕一致。
化合物Ⅴ：白色粉末；EI-MS:m/z472〔M+〕。其IR、1HNMR、13C NMR光谱数据与文献〔6～8〕报道的2α-羟基熊果酸完全一致。
化合物Ⅳ：无色针晶(乙酸乙酯-甲醇)，mp 265℃～267℃；EI-MS:m/z 488[M+]，470[M+-H2O]，442[M+-COOH-H]；其IR、1H NMR、13C NMR光谱数据与标准样品委陵菜酸的完全一致。
化合物Ⅶ：无色针晶(甲醇-水), mp 205℃～207℃；IRνmax(KBr)：3 465，3 271(OH)cm-1；EI-MS:m/z 304[M+-H2O]，291(100)，273，255，230；1H NMR(400 MHz，C5D5N)δppm:0.85(3 H,s,C19-Me),0.92(3 H,s,C18-Me),1.06(3 H,s,C20-Me),1.20(1 H,dd,J＝4.3，12.1 Hz,C3-Ha)，1.38(1 H，dd,J＝4.3,12.1 Hz，C3-Hb)，1.41(1 H,m,C11-Ha)，1.59(1 H,dd,J＝4.0，4.3 Hz,C2-Ha)，1.67(1 H,m,C11-Hb)，1.69(1 H,dd,J＝2.7，8.1 Hz,C12-Hb)，1.70(1 H,dd,J＝2.7，2.7 Hz,C6-Hb)，1.74(1 H,brs,C9-H)，1.77(1 H,dd,J＝4.0，4.3 Hz,C2-Hb)，1.78(2 H,dd,J＝4.0，9.4 Hz,C1-Ha,b)，1.84(1 H,dt,J＝2.7，13.5 Hz,C6-Ha)，1.93(1 H,m,C12-Ha)，1.94(1 H,brs,C5-H)，1.97(1 H,dd,J＝5.5，9.9 Hz,C14-Hb)，2.03(1 H,d,J＝14.8 Hz,C15-Hb)，2.16(1 H,dd,J＝3.8，10.8 Hz,C14-Ha)，2.54(1 H,m,C13-H)，2.56(1 H,d,J＝14.8 Hz,C15-Ha)，4.03(1 H,brs,C7α-H)。13C NMR(100 MHz,C5D5N)δppm：40.5 t(C1)、18.4 t(C2)、42.4 t(C3)、32.9 s(C4)、40.0 d(C5)、28.6 t(C6)、76.7 d(C7)、48.4 s(C8)、51.6 d(C9)、39.4 s(C10)、19.0 t(C11)、27.3 t(C12)、45.8 d(C13)、36.8 t(C14)、50.7 t(C15)、81.4 t(C16)、66.3 t(C17)、33.5 q(C18)、21.9 q(C19)、18.0 q(C20)。以上数据与文献〔9〕报道的ent-7α，16β，17-三羟基贝壳杉烷的完全一致。
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化合物Ⅷ：白色粉末，其IR、1HNMR、13 CNMR光谱数据与标准样品β-谷甾醇葡萄糖苷的完全一致。
化合物Ⅸ：无色棱晶(甲醇-水)。其IR、1HNMR、13CNMR光谱数据和纸层析行为与标准样品葡萄糖的完全一致。
致谢：中国医学科学院*中国协和医科大学药物研究所吴楠、吕扬、郑启泰老师代测X-衍射光谱。
*Address:Zhao Jing ,College of Pharmacy ,Beijing University of Medical Sciences ,Beijing
参 考 文 献
[1] 谢宗万主编.全国中草药汇编(下册).第二版.北京：人民卫生出版社，1996：678
, 百拇医药
[2] Chung B S, et al.Saengyak Hakhoe Chi，1981，12(2)：82
[3] Chung B S, et al.Saengyak Hakhoe Chi，1983，14(1)：5
[4] 朱大公，等.中草药，1984，15(8)：380
[5] 王先荣，等.中草药，1982，13(11)：11
[6] Yamagishi T, et al.Phytochemistry，1988，27：3213
[7] Kojima H, et al.Phytochemistry, 1989,28:1703
[8] Seo B S, et al.J Chem Soc Chem Commun,1975:954
[9] Elliger C A, et al.J Nat Prod, 1992,55(10):147
[10] Fraga B M, et al.Phytochemistry， 1994，37(3)：717
(1998-01-12收稿), http://www.100md.com(赵静 杨秀伟** 付宏征 李荣芷)