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编号:10284349
应用计算机辅助细胞检测系统检测子宫颈涂片中人乳头状瘤病毒感染
http://www.100md.com 《中华妇产科杂志》 1998年第5期
     作者:宋学红 陈晨 宋玉芬 迟闺珠

    单位:100020,首都医科大学附属北京朝阳医院妇产科

    关键词:乳头状瘤病毒;人;肿瘤病毒感染;阴道涂片;诊断;计算机辅助

    中华妇产科杂志980501 【编者按】 巴巴尼古拉细胞染色及分类法施行半个多世纪以来,成千上万妇女的生命得以挽救。作为子宫颈病变及子宫颈癌诊断的细胞学检查,从取样、涂片、染色到镜下检视的各个环节都至关重要,而细胞学结果报告与临床处理的结合,细胞学家和临床医师的联络,起着决定作用。新的细胞学分类法更为合理、更有益于实验室与临床的沟通;细胞学检查新技术也逐渐被关注和应用。本期发表的这组文章,旨在使临床医师更好地理解和使用宫颈及阴道细胞学的新分类和新技术,并不断总结经验。

    【摘要】 目的 评价计算机辅助细胞检测(computer-assisted cytologic test, CCT)系统检测宫颈涂片中人乳头状瘤病毒(human papilloma virus, HPV)感染的敏感性与准确性。方法 对158例外阴尖锐湿疣患者的子宫颈涂片,采用CCT检测技术进行细胞病理学诊断,其诊断标准依据The Bethesda System (TBS)分类法。同期行阴道镜指引下的子宫颈活组织检查和聚合酶链反应(PCR)技术检测宫颈拭子中的HPV DNA。结果 CCT诊断宫颈HPV感染的敏感性:与组织学检查对照,为74.62%;与PCR检测对照,为69.11% 。准确性:与组织学检查对照,为67.72%;与PCR检测对照,为70.88%。结论 CCT作为一种细胞病理学检测技术,用于诊断宫颈HPV感染或亚临床感染,有临床应用价值。
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    Detection of Human Papillomavirus Infection in Cervical Pap Smears by Computer-assisted Cytologic Test Song Xuehong, Chen Chen, Song Yufen, et al. Beijing Chaoyang Hospital, Affiliated to the Capital University of Medical Science, Beijing 100020

    【Abstract】 Objctive The sensitivity and accuracy of cytologic computer-assisted test (CCT) in diagnosis of human papillomavirus (HPV) infection in cervical Pap smear were evaluated. Methods Cervical Pap smears obtained from 158 patients with vulva condyloma acuminata were examined by CCT. The diagnostic criteria were based on The Bethesda System (TBS). Simultaneously HPV DNA in cervical mucus was examined by polymerase chain reaction (PCR) technique and cervical biopsy taken under the guidance of colposcopy for pathological examination.Results The sensitivity and accuracy of CCT in diagnosis of cervical HPV infection were 74.62% and 67.72% compared with pathological results whereas 69.11% and 70.88% compared with PCR results respectively. Conclusion The results indicates that CCT, a cytologic pathological technique, is a useful method in diagnosis of clinical and subclinical cervical HPV infection.
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    【Key words】 Papillomavirus, human Tumor virus infections Vaginal smears Diagnosis, Computer-assisted

    本研究采用The Bethesda System (TBS) 诊断标准[1,2]和计算机辅助细胞检测(computer-assisted cytologic test, CCT)系统[3,4],诊断子宫颈涂片中的人乳头状瘤病毒(HPV)感染。为了评价CCT诊断宫颈HPV感染的敏感性与准确性,我们将检测结果与宫颈活组织检查及HPV DNA分析结果进行了同期对比。现将结果报道如下。

    材料与方法

    一、研究对象

    选择1996年4月至1997年6月在我院妇科生殖道炎症门诊就诊的外阴尖锐湿疣(湿疣)患者158例。选择标准:外生殖器部位的皮肤损害呈典型湿疣特征,并经活组织检查确诊。
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    二、方法

    1.宫颈涂片的取材与检测:指定资深医师做涂片取材。采用瑞典Acellen宫颈细胞双取器或小戟式木制刮板取材。将宫颈管内和鳞柱上皮交界处采集的细胞分上下两处涂在同一张玻片上,然后投入95%酒精中固定20分钟。涂片经巴氏染色后,由PAPNET大型电脑自动化扫描系统(香港新顺国际有限公司)进行检测,并依据TBS诊断标准报告结果。

    2. CCT诊断报告的内容与标准[3,4] :报告含4部分内容: (1) 涂片质量。包括细胞率,即涂片中细胞面积与玻片面积之比,该率<10%视作不满意涂片;有或无柱状上皮或化生细胞;是否为有血抹片及伴有轻、中、重度的炎症。 (2) 微生物项目。包括有或无滴虫、霉菌感染;有或无线索细胞。 (3) 病毒项目。包括有或无疱疹病毒或HPV感染。 (4) 对细胞改变的描述性诊断。包括正常细胞;不典型鳞状上皮细胞(ASCUS),即意义不明的鳞状上皮细胞;部分不典型细胞类似湿疣病变;低度鳞状上皮内瘤变(LSIL),即子宫颈上皮细胞内瘤变(CIN)1~2级伴HPV感染;高度鳞状上皮内瘤变(HSIL),即CIN 2~3级伴HPV感染。挖空细胞(koilocyte)、角化不良细胞(dyskeratocyte)及双嗜染性外底层细胞,是CCT诊断HPV感染的3个基本指标[3,5]。以上ASCUS、LSIL、HSIL的诊断报告均附有该涂片异常细胞图象的彩色打印照片。
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    3. 宫颈活组织学检查:全部病例均在阴道镜指引下取宫颈活组织进行检查,如有异常,自异常区域多点取材;如无异常,则常规取移行带12点与6点两处。病理诊断HPV感染的标准与细胞学相仿。其中挖空细胞的出现,是可靠的诊断标准[5,6 ]。在本研究中,如见到不典型挖空细胞,则诊断为可疑宫颈湿疣。

    4. 子宫颈抹片中的HPV DNA检测:全部病例均在取宫颈活组织之前,常规刷取宫颈分泌物,置于无菌生理盐水试管中,送分子生物学实验室,用聚合酶链反应(PCR)技术检测标本中的HPV DNA。DNA扩增仪为美国Perkin Elmer公司产品。PCR试剂盒与HPV 6/11和16/18两对引物由中山医科大学达安基因诊断中心提供。

    5. 统计学方法:计算准确性及敏感性的公式如下。
, 百拇医药
    结果

    一、CCT检测结果

    标本均为满意涂片,细胞率平均为58%(10%~83%),取到柱状上皮或化生细胞率为81% 。HSIL 2例(1%)。LSIL 38例(24%)。ASCUS 32例(20%)。其中24例的报告为HPV感染或类似湿疣病变。正常或伴一般炎症86例(54%)。

    二、宫颈活组织学检查结果

    原位癌2例(1%),宫颈湿疣及(或)CIN 1~2级75例(47%)。可疑宫颈湿疣7例(4%)及慢性宫颈炎74例(47%)。以宫颈活组织学检查结果为标准,判定CCT检测子宫颈涂片中HPV感染的准确性是67.72%,敏感性是74.62% 。CCT与宫颈病理检查结果的比较见表1。

    三、宫颈HPV DNA的检测结果
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    应用PCR检测158例宫颈拭子HPV DNA,阳性者68例(43%)。将此结果与CCT报告相比较:2例HSIL均为阳性;38例LSIL中,71%为阳性;32例ASCUS中,56%为阳性;86例正常者中,24%为阳性。用PCR结果为标准,判定CCT检测子宫颈涂片中HPV感染的准确性及敏感性,准确性是70.88%,敏感性是69.11% 。CCT与PCR检测HPV DNA结果的比较见表2。

    表1 CCT检测与宫颈病理检查结果的比较 病理诊断

    总例数

    CCT检测结果

    HSIL

    LSIL

    ASCUS

    正常或伴炎症
, 百拇医药
    例数

    百分率(%)

    例数

    百分率

    (%)

    例数

    百分率

    (%)

    例数

    百分率

    (%)

    原位癌

    2

, 百拇医药     1*

    1/2

    1*

    1/2

    0

    0.00

    0

    0.00

    宫颈湿疣及(或)CIN1~2

    75

    1*

    1.33
, 百拇医药
    30*

    0.40

    17*

    22.66

    27

    36.00

    可疑宫颈湿疣

    7

    0

    0.00

    0

    0.00

    5
, 百拇医药
    71.42

    2

    28.57

    宫颈炎

    74

    0

    0.00

    7

    9.45

    10

    13.51

    57**

    77.02
, 百拇医药
    合计

    158

    2

    1.26

    38

    24.05

    32

    20.25

    86

    54.43

    注:*病理检查HPV感染真阳性;**病理检查HPV感染真阴性;△例数少于10,不计算百分比表2 CCT与PCR检测结果的比较 CCT结果

    总例数
, 百拇医药
    PCR结果

    HPV DNA阳性

    HPV DNA阴性

    例数

    百分率

    (%)

    例数

    百分率

    (%)

    HSIL

    2

    2*

    2/2
, 百拇医药
    0

    0

    LSIL

    38

    27*

    71.05

    11

    28.94

    ASCUS

    32

    18*

    56.25

    14
, 百拇医药
    43.75

    正常或炎症

    86

    21

    24.41

    65**

    75.58

    合计

    158

    68

    43.03

    90

    56.96
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    注:*PCR检查HPV感染真阳性;**PCR检查HPV感染真阴性;△例数少于10,不计算百分率讨论

    一、CCT检测子宫颈HPV感染或亚临床感染的临床价值

    HPV可以引起临床、亚临床和潜伏性感染[6~8]。HPV临床感染系指伴有明显湿疣皮损可经肉眼判断的感染,容易识别。亚临床HPV感染需借助醋酸白试验与放大技术相结合才可识别,如阴道镜检查。检测HPV感染后的特异形态学改变,如“挖空细胞”、“角化不良细胞”及“双嗜染性外底层细胞”,是目前公认的细胞学与组织学方法。潜伏性HPV感染因缺乏形态学变化,HPV DNA检测是唯一的诊断方法。

    子宫颈的HPV感染多为亚临床型[6] ,单靠肉眼识别,漏诊率高。国内沿用至今的巴氏5级分类诊断中,只有癌与非癌的诊断,没有HPV感染的细胞学内容,因此临床不能用该法作HPV感染的筛查。以TBS为诊断标准的CCT检测技术为我们用宫颈及(或)阴道细胞学的方法检测HPV临床与亚临床感染提供了可能[3,9,10]。本研究应用CCT技术检测宫颈阴道涂片中的HPV感染,经与组织学和HPV DNA检测结果进行比较,证明CCT检测比较真实地反映了该组妇女子宫颈病变的细胞病理学特征,为我们临床进行HPV感染的筛查提供了一种比较准确、方便、实用的细胞学新技术。
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    二、CCT技术需要临床医师提供合格的细胞学涂片

    宫颈及阴道细胞学诊断的准确性有赖于3个条件,即:标本的采集、染色技术和严格的阅片制度。标本采集的效果显著地影响诊断的准确性。标本采集不满意或数量太少,可造成假阴性诊断。所采集的标本应包括宫颈各部分的上皮,否则可能导致遗漏病变。

    TBS诊断系统与国内巴氏5级诊断标准的不同之处,在于TBS细胞学报告中为临床医师提供有关标本质量的信息、病变的描述、细胞病理学诊断及对处理的建议[2,5]。CCT要求涂片的细胞率应大于10%,并在报告中注明有或无柱状上皮细胞或化生细胞。为了符合涂片要求,本研究的细胞学涂片指定资深医师操作,结果为平均细胞率58%,取得柱状上皮细胞或化生细胞率为81%,为CCT诊断的准确性提供了质量保证。

    三、CCT检测的局限性

    近年来,国外学者报告,CCT检测系统对癌前病变与癌变的涂片显示了极高的敏感性[3,4]。本组资料有2例经组织学证实为原位癌(鳞癌),CCT报告1例为HSIL,另1例为LSIL,后1例经专家会诊,纠正诊断为HSIL。由此可见,尽管CCT为我们提供了统一的自动筛查系统,并为每张涂片提供了含有128个异常细胞的数码磁带,但细胞学诊断最终是由阅读荧屏的专业人员作出的,诊断结果仍然受人的经验与专业水平的限制。
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    ASCUS意为“不典型鳞状上皮”,文献报告[10,11],对这组人群的组织学诊断可有多种不同,如炎症、HPV感染、不同级别的SIL,甚至癌。本组资料32例ASCUS中,宫颈湿疣及或CIN1~2级17例,约占50%,可疑宫颈HPV感染5例,占16%,慢性宫颈炎10例,约占1/3,未从这组人群中发现宫颈癌。ASCUS为临床提供了含糊不清的信息,如何从细胞病理学的诊断中减少这种诊断,或者提供一种较为明确的诊断,还有赖于今后的临床实践去探索。

    参考文献

    1 National Cancer Institute Workshop. The 1988 Bethesda System for reporting cervical/vaginal cytological diagnoses. JAMA, 1989, 262: 931-934.

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    10 Cenci M, Nagar C, Giovagnoli MR, et al. The PAPNET system in cytological rescreening of cervical smears. Minerva Ginecol, 1997, 49: 139-145.

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    (收稿:1997-12-18 修回:1998-02-26), 百拇医药