薄层扫描法测定菊花中龙脑的含量
作者：周蒂 施菁
单位：
关键词：菊花；挥发油；龙脑；薄层扫描
中国现代应用药学000411 摘要 目的：为了更好的进行菊花的综合利用，有必要对菊花中的各种 成分作更为明确的了解。方法：本文采用薄层扫描法测定了菊花中龙脑 的含量。结果：菊花中龙脑的含量与挥发油含量高低变化呈一致趋势。 结论：在菊花样品量较少时，可用测定龙脑的含量以代替测定挥发油总 量，从而来评价菊花中挥发油含量。为了更好的进行菊花的综合利用，有必要对菊花中的各种 成分作更为明确的了解。方法：本文采用薄层扫描法测定了菊花中龙脑 的含量。结果：菊花中龙脑的含量与挥发油含量高低变化呈一致趋势。 结论：在菊花样品量较少时，可用测定龙脑的含量以代替测定挥发油总 量，从而来评价菊花中挥发油含量。
Thin-layer chromatographic scanning determination of camphol in chrysa nthemum
, 百拇医药
Zhou Di(Zhou D)，Shi Qing(Shi Q)
(Hainan Yangshengtang Pharmaceutical Co.Ltd.)
ABSTRACT OBJECTIVE：To promote comprehensive utilization of chrysan themum，a specific knowledge of its components is necessary.METHOD:We adopt thin-layer scanning to determine camphol content of chrysanthemum. RESULTS:There is a coincident tendency between camphol and volatile oil in chrysanthemum.CONCLUSION:If there is little chrysanthemum sample in hand，the determination of camphol can be used instead of the determination of v olatile oil to measure the volatile oil of chrysanthemum.
, 百拇医药
KEY WORDS thin-layer chromatographic scanning，camphol，chrysanthemum
菊花为菊科植物菊Chrysanthemum morifolium Ramat.的干燥头状花序 ，具疏风、清热、明目、解毒等功效，其主要成分为挥发油，而油中所含成分主为龙脑、樟 脑[1]等，因其挥发油含量约为0.13%[2]，用常法挥发油测定器测定其中 挥发油的含量所需样品量较大。本文以薄层扫描法测定菊花中龙脑含量，样品用量少(仅需1 g)，且方法稳定性、精密度回收率等均符合要求，测定结果重现性好，而龙脑的含量几与挥 发油含量成正比，因此可借龙脑含量的高低评价菊花中的挥发油含量。
1 药材、对照品及实验仪器
菊花A：购于浙江省桐乡灵安镇；菊花B：购于桐乡医药公司；菊花C：购于杭州市食品商店 (产地桐乡)。
, 百拇医药
上述菊花经浙江大学药学院天然药物教研室鉴定，均为菊科植物菊Chrysant hemum morifolium Ramat.的干燥头状花序。对照品龙脑购自中国药品生物制品检定所。
挥发油测定器：160型薄层扫描仪(上海第三分析仪器厂)。
2 实验方法
2.1 样品制备及薄层条件
2.1.1 对照品溶液的配制 精密称取龙脑对照品3.9mg，于1ml容量瓶中，加 醋酸乙酯适量，充分振摇使其溶解，定容至刻度，备用。
2.1.2 样品液的制备 精密称取菊花样品1g，用30ml乙醚保温回流 提取三次，每次1h，提取液过滤入烧瓶中，然后加微热回收乙醚至干，浓缩物置于冰箱内， 用时以适量醋酸乙酯溶解并定容于5ml容量瓶中。
, 百拇医药
2.1.3 薄层板的制备 称取硅胶G 2g，加0.5% CMC-Na 10ml，于研钵中 研细，铺于10×10cm玻板上，阴干后于105℃活化0.5h，冷却后存放于干燥器中。
2.1.4 层折条件及扫描参数 展开剂为石油醚-醋酸乙酯(5∶1)展开方 式为上行9cm，扫描参数为λs=570nm，反射锯齿形扫描，线性参数Sx=3，灵敏度为3，铗缝为 0.3×6mm。
2.2 薄层层析
分别将3μl龙脑对照品溶液与10μl菊花样 品溶液点于同一硅胶G板上，以石油醚-醋酸乙酯(5∶1)展开，取出凉干，以10%磷钼酸乙醇 液显色，加微热后显蓝色清晰斑点，如图。
2.3 扫描波长确定
将对照品斑点进行光谱扫描，测得最大吸收波长为570nm。
, http://www.100md.com
1-对照品：龙脑；2-样品：菊花
2.4 稳定性试验
精密吸取龙脑对照品液6μl，点于薄层板 上，按前述条件展开，取出，显色，扫描，0.5h以前斑点极不稳定，为使斑点相对稳定，并 有足够时间进行操作，点样后放置0.5h后开始扫描，以后每隔一定时间扫描一次，结果如表 1，从测得的结果可知，展开后0.5～4h斑点面积相对稳定。
表1 稳定性试验 时间
峰面积/mm2
RSD/%
0.5
15820
1.0
, 百拇医药
15564
1.5
15768
2.75
2.0
16660
3.0
16216
4.0
16521
2.5 精密度试验
精密吸取龙脑对照品溶液6μl，在同一块薄板上点4个 样点，按上述条件展开、扫描，得斑点峰面积如表2-1；同一斑点扫描四次，结果如表2-2； 用对照品溶液4μl在不同薄板上点四个点，再按上述步骤得斑点峰面积，结果如表2-3。表2-1 精密度试验 次 号
, 百拇医药
峰面积/mm2
RSD/%
1
5981
2
6181
3
5849
2.23
4
6118
5
5953
, 百拇医药
6
5868
表2-2 精密度试验 次 号
峰面积/mm2
RSD/%
1
3218
2
3228
1.398
3
3274
4
, http://www.100md.com
3317
2.6 回收率测定表2-3 精密度试验 次 号
峰面积/mm2
RSD/%
1
3840
2
3964
2.60
3
4030
4
, http://www.100md.com 4079
见表3。
表3 回收率测定结果 样品体积/μl
样品量/μg
对 照品体积/μl
对照品量/μg
峰面积/mm
回收率/%
平均回收率/%
RSD/%
2
7.716
, 百拇医药 2
10.577
3008
104.56
2
7.716
4
21.154
4766
100.52
4
15.432
3
, 百拇医药
14.203
4993
101.98
100.53
2.80
3
8.09
3
15.490
4296
101.39
3
8.09
, 百拇医药
4
19.544
5182
97.78
2
6.502
3
15.490
3761
96.94
2.7 标准曲线
用定量毛细管分别吸取标准溶液1，2，4，6，8μl，点 于同一薄层板上展开，显色后取出放30min，然后扫描测定(表5)，用最小二乘法进行回归分 析，点样量与峰面积积分值呈线性相关，回归方程为：A=980.0305*V-835.9451， r=0.9976。表5 点样量与峰面积 V/μl
, 百拇医药
1
2
4
6
8
A/mm2
1790
2561
4381
6245
7478
2.8 样品中龙脑含量测定
将样溶液6μl和对照品溶液1，4μl交叉点于 薄层板上，按法展开，扫描，采用外标两点法，计算样品中龙脑的含量。结果如表6。表6 菊花中龙脑含量/% 样 品
, http://www.100md.com
重量/g
峰面积/mm2
含量/%
菊花A
1.0
2936
1.1350
菊花B
1.0
2152
0.8392
菊花C
1.0
, http://www.100md.com
1959
0.7573
3 菊花中挥发油含量
称取菊花粉末200g，置圆底烧瓶中，加水至浸没药材，用挥发油提取器回流5h，从刻度管上 读取挥发油量，结果见表7。
表7 菊花中挥发油含量/% 样 品
挥发油含量/%
菊花A
0.12
菊花B
0.09
菊花C
, 百拇医药
0.06
4 结果与讨论
以薄层扫描法测定龙脑的含量所得结果表明，其含量的高低几与挥发油含量高低变化呈一致 趋势，另外，由于挥发油测定器读数的限制，挥发油含量越低误差越大，因此可能本法测定 的精确性更高，故本文认为以龙脑含量来评价菊花中挥发油可能更为准确，合理。
参考文献
[1]江苏新医学院.中药大辞典.上海人民出版社，1977∶2 008.
[2]中国医学科学院药用植物资源开发研究所，等.中药志. 人民卫生出版社，1994∶312.
收稿日期：1999-10-28, 百拇医药
单位：
关键词：菊花；挥发油；龙脑；薄层扫描
中国现代应用药学000411 摘要 目的：为了更好的进行菊花的综合利用，有必要对菊花中的各种 成分作更为明确的了解。方法：本文采用薄层扫描法测定了菊花中龙脑 的含量。结果：菊花中龙脑的含量与挥发油含量高低变化呈一致趋势。 结论：在菊花样品量较少时，可用测定龙脑的含量以代替测定挥发油总 量，从而来评价菊花中挥发油含量。为了更好的进行菊花的综合利用，有必要对菊花中的各种 成分作更为明确的了解。方法：本文采用薄层扫描法测定了菊花中龙脑 的含量。结果：菊花中龙脑的含量与挥发油含量高低变化呈一致趋势。 结论：在菊花样品量较少时，可用测定龙脑的含量以代替测定挥发油总 量，从而来评价菊花中挥发油含量。
Thin-layer chromatographic scanning determination of camphol in chrysa nthemum
, 百拇医药
Zhou Di(Zhou D)，Shi Qing(Shi Q)
(Hainan Yangshengtang Pharmaceutical Co.Ltd.)
ABSTRACT OBJECTIVE：To promote comprehensive utilization of chrysan themum，a specific knowledge of its components is necessary.METHOD:We adopt thin-layer scanning to determine camphol content of chrysanthemum. RESULTS:There is a coincident tendency between camphol and volatile oil in chrysanthemum.CONCLUSION:If there is little chrysanthemum sample in hand，the determination of camphol can be used instead of the determination of v olatile oil to measure the volatile oil of chrysanthemum.
, 百拇医药
KEY WORDS thin-layer chromatographic scanning，camphol，chrysanthemum
菊花为菊科植物菊Chrysanthemum morifolium Ramat.的干燥头状花序 ，具疏风、清热、明目、解毒等功效，其主要成分为挥发油，而油中所含成分主为龙脑、樟 脑[1]等，因其挥发油含量约为0.13%[2]，用常法挥发油测定器测定其中 挥发油的含量所需样品量较大。本文以薄层扫描法测定菊花中龙脑含量，样品用量少(仅需1 g)，且方法稳定性、精密度回收率等均符合要求，测定结果重现性好，而龙脑的含量几与挥 发油含量成正比，因此可借龙脑含量的高低评价菊花中的挥发油含量。
1 药材、对照品及实验仪器
菊花A：购于浙江省桐乡灵安镇；菊花B：购于桐乡医药公司；菊花C：购于杭州市食品商店 (产地桐乡)。
, 百拇医药
上述菊花经浙江大学药学院天然药物教研室鉴定，均为菊科植物菊Chrysant hemum morifolium Ramat.的干燥头状花序。对照品龙脑购自中国药品生物制品检定所。
挥发油测定器：160型薄层扫描仪(上海第三分析仪器厂)。
2 实验方法
2.1 样品制备及薄层条件
2.1.1 对照品溶液的配制 精密称取龙脑对照品3.9mg，于1ml容量瓶中，加 醋酸乙酯适量，充分振摇使其溶解，定容至刻度，备用。
2.1.2 样品液的制备 精密称取菊花样品1g，用30ml乙醚保温回流 提取三次，每次1h，提取液过滤入烧瓶中，然后加微热回收乙醚至干，浓缩物置于冰箱内， 用时以适量醋酸乙酯溶解并定容于5ml容量瓶中。
, 百拇医药
2.1.3 薄层板的制备 称取硅胶G 2g，加0.5% CMC-Na 10ml，于研钵中 研细，铺于10×10cm玻板上，阴干后于105℃活化0.5h，冷却后存放于干燥器中。
2.1.4 层折条件及扫描参数 展开剂为石油醚-醋酸乙酯(5∶1)展开方 式为上行9cm，扫描参数为λs=570nm，反射锯齿形扫描，线性参数Sx=3，灵敏度为3，铗缝为 0.3×6mm。
2.2 薄层层析
分别将3μl龙脑对照品溶液与10μl菊花样 品溶液点于同一硅胶G板上，以石油醚-醋酸乙酯(5∶1)展开，取出凉干，以10%磷钼酸乙醇 液显色，加微热后显蓝色清晰斑点，如图。
2.3 扫描波长确定
将对照品斑点进行光谱扫描，测得最大吸收波长为570nm。
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1-对照品：龙脑；2-样品：菊花
2.4 稳定性试验
精密吸取龙脑对照品液6μl，点于薄层板 上，按前述条件展开，取出，显色，扫描，0.5h以前斑点极不稳定，为使斑点相对稳定，并 有足够时间进行操作，点样后放置0.5h后开始扫描，以后每隔一定时间扫描一次，结果如表 1，从测得的结果可知，展开后0.5～4h斑点面积相对稳定。
表1 稳定性试验 时间
峰面积/mm2
RSD/%
0.5
15820
1.0
, 百拇医药
15564
1.5
15768
2.75
2.0
16660
3.0
16216
4.0
16521
2.5 精密度试验
精密吸取龙脑对照品溶液6μl，在同一块薄板上点4个 样点，按上述条件展开、扫描，得斑点峰面积如表2-1；同一斑点扫描四次，结果如表2-2； 用对照品溶液4μl在不同薄板上点四个点，再按上述步骤得斑点峰面积，结果如表2-3。表2-1 精密度试验 次 号
, 百拇医药
峰面积/mm2
RSD/%
1
5981
2
6181
3
5849
2.23
4
6118
5
5953
, 百拇医药
6
5868
表2-2 精密度试验 次 号
峰面积/mm2
RSD/%
1
3218
2
3228
1.398
3
3274
4
, http://www.100md.com
3317
2.6 回收率测定表2-3 精密度试验 次 号
峰面积/mm2
RSD/%
1
3840
2
3964
2.60
3
4030
4
, http://www.100md.com 4079
见表3。
表3 回收率测定结果 样品体积/μl
样品量/μg
对 照品体积/μl
对照品量/μg
峰面积/mm
回收率/%
平均回收率/%
RSD/%
2
7.716
, 百拇医药 2
10.577
3008
104.56
2
7.716
4
21.154
4766
100.52
4
15.432
3
, 百拇医药
14.203
4993
101.98
100.53
2.80
3
8.09
3
15.490
4296
101.39
3
8.09
, 百拇医药
4
19.544
5182
97.78
2
6.502
3
15.490
3761
96.94
2.7 标准曲线
用定量毛细管分别吸取标准溶液1，2，4，6，8μl，点 于同一薄层板上展开，显色后取出放30min，然后扫描测定(表5)，用最小二乘法进行回归分 析，点样量与峰面积积分值呈线性相关，回归方程为：A=980.0305*V-835.9451， r=0.9976。表5 点样量与峰面积 V/μl
, 百拇医药
1
2
4
6
8
A/mm2
1790
2561
4381
6245
7478
2.8 样品中龙脑含量测定
将样溶液6μl和对照品溶液1，4μl交叉点于 薄层板上，按法展开，扫描，采用外标两点法，计算样品中龙脑的含量。结果如表6。表6 菊花中龙脑含量/% 样 品
, http://www.100md.com
重量/g
峰面积/mm2
含量/%
菊花A
1.0
2936
1.1350
菊花B
1.0
2152
0.8392
菊花C
1.0
, http://www.100md.com
1959
0.7573
3 菊花中挥发油含量
称取菊花粉末200g，置圆底烧瓶中，加水至浸没药材，用挥发油提取器回流5h，从刻度管上 读取挥发油量，结果见表7。
表7 菊花中挥发油含量/% 样 品
挥发油含量/%
菊花A
0.12
菊花B
0.09
菊花C
, 百拇医药
0.06
4 结果与讨论
以薄层扫描法测定龙脑的含量所得结果表明，其含量的高低几与挥发油含量高低变化呈一致 趋势，另外，由于挥发油测定器读数的限制，挥发油含量越低误差越大，因此可能本法测定 的精确性更高，故本文认为以龙脑含量来评价菊花中挥发油可能更为准确，合理。
参考文献
[1]江苏新医学院.中药大辞典.上海人民出版社，1977∶2 008.
[2]中国医学科学院药用植物资源开发研究所，等.中药志. 人民卫生出版社，1994∶312.
收稿日期：1999-10-28, 百拇医药