CZ-1澄清剂在中草药制剂中的应用
作者：何丹鸿 黄 涛 夏志林
单位：
何丹鸿 黄 涛 福建医科大学附属第一医院；夏志林 福建省医学科学研究所
关键词：
海峡药学990229 本文采用CZ-1型澄清剂法与水提醇沉法生产复方头痛口服液作对比，考察CZ-1型澄清剂在本口服液生产中的应用情况及对制剂成品质量影响结果和临床等效性观察，现将结果报道如下。
1 仪器与试药
1.1 仪器 UV-2100型分光光度计(日本岛津)；751-GW型分光光度计(上海分析仪器厂)。
1.2 试药 CZ-1型澄清剂(福建省医学科学研究所)；天麻素、黄芪甲甙(中国药品生物制品检定所)；天麻、黄芪、川芎等均符合《中国药典》1995年版(一部)规定：硅胶G(青岛海洋化工厂，200目，批号920626)；羟甲基纤维素钠(上海化学试剂采购供应站)，其它试剂均为AR规格。
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2 方法与结果
2.1 处方组成 天麻、黄芪、川芎、柴胡、七叶莲。
2.2 制备工艺 制法一：按处方组成称取各药，置反应锅中，浸泡1 h，第一次煎煮1.5 h，第二次煎煮1 h，合并煎煮液，滤过，将滤液浓缩至1 ml相当于生药2 g，加95%乙醇至浓度约为70%为止，搅拌后静置过夜，滤过，蒸馏回收乙醇，余液加0.04%甜菊素，再加水至足量，搅拌均匀，封装，100℃、30 min流通蒸气灭菌，得A液。制法二：按制法一至“……将滤液浓缩至1 ml相当于生药2 g”后，加10% CZ-1澄清剂，搅拌后静置过夜，滤过去除滤渣，余液加0.04%甜菊素，加水至足量，搅拌均匀，封装，100℃、30 min流通蒸气灭菌，得B液。
2.2 黄芪甲甙的TLC定性分析 供试液的制备：样品液 分别取上述制备工艺的A液、B液适量，于水浴中加热浓缩2倍，放冷，备用。黄芪甲甙对照液 精密称取黄芪甲甙5 mg，置5 ml量瓶中，用氯仿适量溶解，加乙醇适量，用水稀释至刻度，备用。阴性对照液 取各单味草药，按处方配比、工艺，不加被测成分药材，制成阴性对照液。展开剂的比例 石油醚-氯仿-冰醋酸(5∶9∶1)。薄层板的制备 按0.5%比例称取CMC-Na溶于适量水中，另取硅胶G5 g，加0.5%CMC-Na l5 ml制成糊状，并将其铺成大小5 cm×20 cm，厚0.3 mm的薄板，晾干，经110℃活化0.5 h，置干燥器中备用。薄层层析 照薄层色谱法(《中国药典》1995年版一部附录37页)试验，吸取浓缩2倍的样品液30 μl，阴性对照液30 μl，黄芪甲甙对照液5 μl，分别点样于硅胶GCMC-Na薄层板上，于层析缸中用展开剂以倾斜上行法展开(展距为15 cm)，取出晾干后，置碘蒸气显色。结果显示，样品液色谱中，在与对照品液色谱相应位置上，显相同的黄色斑点，阴性对照液无干扰。
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2.3 天麻素的含量测定 供试液制备 按处方比例分别配制复方头痛口服液(含天麻400 mg/ml)，天麻水提取液(400 mg/ml)和去天麻的空白液(含生药1.35 g/ml)。取上述3种溶液各0.3 ml，以水稀释至100 ml。另取天麻素对照品配成15 μg/ml的水溶液。波长的选择 取上述4种溶液分别测定零阶吸收光谱和二阶导数吸收光谱。结果表明，在200 nm～250 nm波长范围内，零阶光谱处方中的其它成分有吸收，会干扰天麻素测定；而二阶导数光谱，天麻素在233 nm波长处有一导数吸收峰，在此波长其它成分无干扰，因此在233 nm波长处，用基线一峰法量取振幅值D作为定量信息，测定天麻素的含量。
2.3.3 标准曲线的绘制 精密称取天麻素对照品适量，配成浓度为5，10，15，20，25 μg/ml的系列溶液，在200～250 nm波长范围扫描二阶导数光谱，并量取233 nm波长处的振幅值D，经线性回归，得回归方程D＝0.003851C-0.0022，r＝0.9993(n＝5)。样品的测定 分别量取用两法制备的复方头痛口服液3 ml，置100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，过滤，精密量取滤液5 ml，置50 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，以水为空白，在200～250 nm波长范围扫描二阶导数光谱，并量取233 nm波长处的振幅值D，代入回归方程计算成品中天麻素含量，结果(见表1)。
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表1 样品含量测定结果 批 号
澄清剂法
水提醇沉法
百分标示量(%)
百分标示量(%)
980523
93.97
91.11
980611
94.33
94.32
980817
, http://www.100md.com
94.12
93.81
980927
94.78
93.01
x±s
94.30±0.35
93.06±1.41
RSD
0.37%
1.52%
检查项目结果比较 取经两法制备并放置3 d的样品在灯光下观察性状；取样品1 ml加碘试液1滴，观察溶液颜色；按规定进行重金属及细菌检查，结果比较(见表2)。
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表2 检查项目结果比较 项目
性状
鉴别
重金属
细菌检查
A液
棕色液体，有微量沉淀
溶液呈紫色
符合规定
符合规定
B液
棕色液体，无沉淀
溶液呈紫色
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符合规定
符合规定
3 临床药效性观察
选择经确诊为血管性头痛的病人87例，分为治疗组，一组63例，用B液治疗，另一组24例，用A液治疗；治疗方法，口服，每日2次，每次10 ml，疗程均为1周。A液组和B液组的治愈、好转，无效例数分别为14、9、1和36、22、5，两组治愈率及总有效率经卡方检验，均无显著性差异(P>0.5)。
4 讨论
4.1 从TCL色谱图看，复方头痛口服液的A、B液中各种色斑及黄芪甲甙的色斑基本是一致的，提示CZ-1澄清剂不会与药物有效成分发生反应。
4.2 从天麻素的含量测定结果看，B液的含量要略高于A液，且测定的数值较稳定，提示CZ-1澄清剂法较水提醇沉法的工艺是更稳定，更能保证制剂的质量。本品经菌检均符合有关规定。
4.3 CZ-1澄清剂属食品添加剂，安全、无毒，用其替代中草药口服液制剂生产工艺中的水提醇沉法，具有澄清速度快，降低制剂成本。从检查项目结果比较看，澄清剂法在制剂成品的性状上有所改善，其它项目均符合规定，因此我们认为用CZ-1澄清剂来替代在中草药口服液制剂生产工艺的水提醇沉法中乙醇较为理想。
4.4 经临床等效性观察表明，两种工艺制得的制剂，在治愈率及总有效率上均无显著差异。, http://www.100md.com
单位：
何丹鸿 黄 涛 福建医科大学附属第一医院；夏志林 福建省医学科学研究所
关键词：
海峡药学990229 本文采用CZ-1型澄清剂法与水提醇沉法生产复方头痛口服液作对比，考察CZ-1型澄清剂在本口服液生产中的应用情况及对制剂成品质量影响结果和临床等效性观察，现将结果报道如下。
1 仪器与试药
1.1 仪器 UV-2100型分光光度计(日本岛津)；751-GW型分光光度计(上海分析仪器厂)。
1.2 试药 CZ-1型澄清剂(福建省医学科学研究所)；天麻素、黄芪甲甙(中国药品生物制品检定所)；天麻、黄芪、川芎等均符合《中国药典》1995年版(一部)规定：硅胶G(青岛海洋化工厂，200目，批号920626)；羟甲基纤维素钠(上海化学试剂采购供应站)，其它试剂均为AR规格。
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2 方法与结果
2.1 处方组成 天麻、黄芪、川芎、柴胡、七叶莲。
2.2 制备工艺 制法一：按处方组成称取各药，置反应锅中，浸泡1 h，第一次煎煮1.5 h，第二次煎煮1 h，合并煎煮液，滤过，将滤液浓缩至1 ml相当于生药2 g，加95%乙醇至浓度约为70%为止，搅拌后静置过夜，滤过，蒸馏回收乙醇，余液加0.04%甜菊素，再加水至足量，搅拌均匀，封装，100℃、30 min流通蒸气灭菌，得A液。制法二：按制法一至“……将滤液浓缩至1 ml相当于生药2 g”后，加10% CZ-1澄清剂，搅拌后静置过夜，滤过去除滤渣，余液加0.04%甜菊素，加水至足量，搅拌均匀，封装，100℃、30 min流通蒸气灭菌，得B液。
2.2 黄芪甲甙的TLC定性分析 供试液的制备：样品液 分别取上述制备工艺的A液、B液适量，于水浴中加热浓缩2倍，放冷，备用。黄芪甲甙对照液 精密称取黄芪甲甙5 mg，置5 ml量瓶中，用氯仿适量溶解，加乙醇适量，用水稀释至刻度，备用。阴性对照液 取各单味草药，按处方配比、工艺，不加被测成分药材，制成阴性对照液。展开剂的比例 石油醚-氯仿-冰醋酸(5∶9∶1)。薄层板的制备 按0.5%比例称取CMC-Na溶于适量水中，另取硅胶G5 g，加0.5%CMC-Na l5 ml制成糊状，并将其铺成大小5 cm×20 cm，厚0.3 mm的薄板，晾干，经110℃活化0.5 h，置干燥器中备用。薄层层析 照薄层色谱法(《中国药典》1995年版一部附录37页)试验，吸取浓缩2倍的样品液30 μl，阴性对照液30 μl，黄芪甲甙对照液5 μl，分别点样于硅胶GCMC-Na薄层板上，于层析缸中用展开剂以倾斜上行法展开(展距为15 cm)，取出晾干后，置碘蒸气显色。结果显示，样品液色谱中，在与对照品液色谱相应位置上，显相同的黄色斑点，阴性对照液无干扰。
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2.3 天麻素的含量测定 供试液制备 按处方比例分别配制复方头痛口服液(含天麻400 mg/ml)，天麻水提取液(400 mg/ml)和去天麻的空白液(含生药1.35 g/ml)。取上述3种溶液各0.3 ml，以水稀释至100 ml。另取天麻素对照品配成15 μg/ml的水溶液。波长的选择 取上述4种溶液分别测定零阶吸收光谱和二阶导数吸收光谱。结果表明，在200 nm～250 nm波长范围内，零阶光谱处方中的其它成分有吸收，会干扰天麻素测定；而二阶导数光谱，天麻素在233 nm波长处有一导数吸收峰，在此波长其它成分无干扰，因此在233 nm波长处，用基线一峰法量取振幅值D作为定量信息，测定天麻素的含量。
2.3.3 标准曲线的绘制 精密称取天麻素对照品适量，配成浓度为5，10，15，20，25 μg/ml的系列溶液，在200～250 nm波长范围扫描二阶导数光谱，并量取233 nm波长处的振幅值D，经线性回归，得回归方程D＝0.003851C-0.0022，r＝0.9993(n＝5)。样品的测定 分别量取用两法制备的复方头痛口服液3 ml，置100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，过滤，精密量取滤液5 ml，置50 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，以水为空白，在200～250 nm波长范围扫描二阶导数光谱，并量取233 nm波长处的振幅值D，代入回归方程计算成品中天麻素含量，结果(见表1)。
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表1 样品含量测定结果 批 号
澄清剂法
水提醇沉法
百分标示量(%)
百分标示量(%)
980523
93.97
91.11
980611
94.33
94.32
980817
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94.12
93.81
980927
94.78
93.01
x±s
94.30±0.35
93.06±1.41
RSD
0.37%
1.52%
检查项目结果比较 取经两法制备并放置3 d的样品在灯光下观察性状；取样品1 ml加碘试液1滴，观察溶液颜色；按规定进行重金属及细菌检查，结果比较(见表2)。
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表2 检查项目结果比较 项目
性状
鉴别
重金属
细菌检查
A液
棕色液体，有微量沉淀
溶液呈紫色
符合规定
符合规定
B液
棕色液体，无沉淀
溶液呈紫色
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符合规定
符合规定
3 临床药效性观察
选择经确诊为血管性头痛的病人87例，分为治疗组，一组63例，用B液治疗，另一组24例，用A液治疗；治疗方法，口服，每日2次，每次10 ml，疗程均为1周。A液组和B液组的治愈、好转，无效例数分别为14、9、1和36、22、5，两组治愈率及总有效率经卡方检验，均无显著性差异(P>0.5)。
4 讨论
4.1 从TCL色谱图看，复方头痛口服液的A、B液中各种色斑及黄芪甲甙的色斑基本是一致的，提示CZ-1澄清剂不会与药物有效成分发生反应。
4.2 从天麻素的含量测定结果看，B液的含量要略高于A液，且测定的数值较稳定，提示CZ-1澄清剂法较水提醇沉法的工艺是更稳定，更能保证制剂的质量。本品经菌检均符合有关规定。
4.3 CZ-1澄清剂属食品添加剂，安全、无毒，用其替代中草药口服液制剂生产工艺中的水提醇沉法，具有澄清速度快，降低制剂成本。从检查项目结果比较看，澄清剂法在制剂成品的性状上有所改善，其它项目均符合规定，因此我们认为用CZ-1澄清剂来替代在中草药口服液制剂生产工艺的水提醇沉法中乙醇较为理想。
4.4 经临床等效性观察表明，两种工艺制得的制剂，在治愈率及总有效率上均无显著差异。, http://www.100md.com