补阳还五汤抗家兔动脉粥样硬化形成的实验研究
作者：刘发益 文志斌 尚改萍 周春生 杨锡平 贺石林 李俊成
单位：刘发益(湖南医科大学生理学教研室 长沙 410078)；文志斌(湖南医科大学生理学教研室 长沙 410078)；尚改萍(湖南医科大学生理学教研室 长沙 410078)；贺石林(湖南医科大学生理学教研室 长沙 410078)；李俊成(湖南医科大学生理学教研室 长沙 410078)；周春生(湖南医科大学附属湘雅医院检验科 长沙 410008)；杨锡平(湖南中医学院动物实验学部长沙 410007)
关键词：黄芪；川芎；补阳还五汤*；动脉粥样硬化；血脂过多；前列环素；von；Willebrand因子；内皮素；兔
湖南医科大学学报000111 摘 要：在家兔动脉粥样硬化的模型上观察补阳还五汤抗动脉粥样硬化的作用。结果表明：该汤剂具有明显的降低血清总胆固醇和甘油三酯的作用，显著延缓主动脉及腹主动脉粥样硬化斑块的形成、减缓冠脉血管受累的数目和程度。还具有升高6-keto-PGF1α和降低vWF的作用，但对血浆中ET的含量并无影响。提示补阳还五汤的抗动脉粥样硬化与抗血栓形成的作用有关。
, 百拇医药
分类号：R543.12 R285.5 R973.2 文献标识码：A
文章编号：1000-5625(2000)01-0033-03
“Bu-yang huanwu tang”① inhibited the pathogentic process of
atherosclerosis induced by cholesterol-rich diet in rabbits
LIU Fa-yi, WEN Zhi-bin, ZHOU Chun-sheng, YANG Xi-ping, SHANG Gai-ping, HE Shi-lin, LI Jun-cheng
(Thrombosis and Hemostasis Research Laboratory, Department of Physiology, Hunan Medical University Changsha 410078)
, 百拇医药
Abstract：Background and objective: “Bu-yang huanwu tang” ①, a decoction of Chinese herbs widely used in the treatment for cardio-and cerebro-vascular diseases, has been demonstrated to be able to inhibit platele t adhesion and aggregation, to lower blood lipids, to regulate vascular tone fr om animal experiments. The aim of this study is to determine whether this decoc tio n inhibits the pathogentic process of atherosclerosis induced by cholesterol -ri ch diet in rabbits. Methods: Three groups of rabbits received the following diff erent diets for 9 weeks: 1. standard diet; 2. atherogenic diet(standard di et plu s 1% cholesterol and 3.3% fat); 3. atherogenic diet plus this decoction(5 g.k g-1.d-1). Plasma lipids, 6-keto-PGF1α, endothelin le vels w ere detected and the histological atherosclerotic changes were evaluated. Result s: This decoction inhibited the progression of aortic and abdominal aort ic intim al plaques and reduced aortic intimal thickening. Conclusion: The anti -atheroge nic mechanism might be related to the decrease of plasma cholesterol and triglyc erides and the increase of PGI2. The facts suggest that “Bu-yang huanwu tang ” has antiatherogenic and antithrombotic effects.
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Key words：astragalus;angelica;ligusticum;“Bu-yang h uanwu tang”;atherosclerosis;hyperlipidemia;prostacylin;von Willebrand factor;endothelin; rabbits▲
动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)系一危害人 类健康的常见病。AS引起的心、脑血管疾病如心肌梗死、中风等是引起人类死亡的首因。目 前虽已认识到高血脂、高血压、血管内皮细胞损伤等因素可促进AS形成，但由于AS病理形 成 过程的复杂性，对其发病机制尚未完全阐明。阻止AS的发生发展，寻找有效的防治药物是一项非常有意义的工作。补阳还五汤为清代名医王清任所创的方剂，具有补气活血、通经活络的功效。近代临床上广泛用于缺血性心、脑血管病的治疗，证明该方为一有效验方。临床观 察和实验研究均表明，补阳还五汤有降血脂、破血栓、扩血管[1～4] 等作用。本实验在家兔AS的模型上研究补阳还五汤对AS形成过程的影响，以寻求抗AS的效 应及探讨其机制。
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1 材料与方法
1.1 药物制备 补阳还五汤依原方组成，其中黄芪40 g，川芎15 g，当 归 15 g，赤芍15 g，桃仁12 g，红花12 g和地龙10 g。将上述药物用水煎煮3次，时间 分别为 1.5 h，1 h和45 min。合并煎煮液后浓缩成含生药相当于2.5 gml-1( 由湖南中 医学院制备)。
1.2 动物分组 选取健康日本雄性大耳白兔36只，体重约1.5 kg，3～4 月龄(本校动物中心提供)。动物在适应性喂养3 d后，随机分为3组：①正常对照组(对照组 )，喂正常饲料；②AS造模组(模型组)，除正常饲料外，每兔每日另加胆固醇1.5 g，猪油 5 g和鸡蛋15 g；③补阳还五汤处理组(补汤组)，所喂饲料同模型组，但同时给予补阳还五 汤煎剂，其中第1～2周通过灌胃给予，以后拌入正常饲料中。每兔每天经上、下午两次给 药 ，日总量相当于含生药5 g.kg-1。上述各组兔均限食量，每兔每日为150 g，分 笼 喂养，自由饮水，共喂养9周。
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1.3 观察方法与指标 所有动物在喂养9周后，心腔内采血。注入空气处死 ，进行下列指标的检测。
1.3.1 AS病理形态学检查 (1)主动脉及腹主动脉AS斑块面积的测量：动 物处死后，立即取主动脉及腹主动脉纵行剪开，平铺在滤纸上，以10%福尔马林固定。经苏 丹Ⅲ染色，观察AS斑块病变，用透明方格纸(1 mm×1 mm)测量每条主动脉及腹主动脉的AS 面积，并计算病变面积占总面积的百分比；同时自主动脉弓取材作石蜡切片，HE染色光镜下 观察主动脉及腹主动脉的形态，用测微尺测量斑块的最大厚度。(2)冠状血管的堵塞情况： 于心脏房室沟直下方，每0.3 cm作一横切面，共切3块，每块厚约0.3 cm，均作HE染色 。光镜下观察病变阻塞血管的分支情况(凡管腔平滑肌仅1～2层者为小支，3～5层者为中支 ，大于5层者为大支)。在每一家兔的心肌切片中数50个动脉，计算AS血管所占的百分率。
1.3.2 血脂测定 采取酶法测定血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)量(湘 雅医院生化检验科测)。
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1.3.3 血浆中von Willebrand因子(vWF)和6-酮-前列腺素F1α(6-ket o-PGF1α)的检测 采用酶联免疫测定法测vWF，用放射免疫测定法测6-keto -PGF1α。上述两测定药盒均由苏州医学院血栓与止血研究所提供。定义稀释正常 人 混合血浆vWF含量为1 U.ml-1。
1.3.4 血浆内皮素(endothelin, ET)的测定 采用放射免疫测定法直接测 量血浆中ET的含量。药盒购自解放军总医院。
1.4 统计学处理 实验数据以均数±标准差(
±s)表示；统计 方法采用方差分析和q检验。
2 结 果
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2.1 主动脉、腹主动脉及冠状动脉病理形态的改变 正常对照组，除1例见 腹主动脉有少许脂斑外，其余主动脉及腹主动脉均未见粥样斑块及脂质斑点，镜下内膜完整 ，内皮下无脂质沉积。模型组和补汤组均见不同程度的AS形成。 在斑块的面积与整条动脉面积比、斑块厚度方面，两组间差异有高度显著性(P<0.01， 表1)。镜下可见，斑块内主要为大量泡沫细胞堆积，严重者泡沫细胞崩解，可见胆固醇结 晶析出，并有平滑肌细胞增生。
除正常对照组外，模型组和补汤组均可见冠状动脉脂质沉着和斑块形成。血管病变多见于中 、小支，出现程度不同的内膜增厚，管腔狭窄。但补汤组的血管狭窄程度和病变的血管数明 显地较模型组为轻为少；两组相比差异有非常显著性(P<0.01，表1)。
表1 三组主动脉、腹主动脉和冠状动脉 的病理检查结果(±s) 组别
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例数
粥样斑 块面积
占总面积的%
粥样斑块的
最大厚度(mm)
AS冠状动脉
所占面积的%
对照组
12
0①
0①
0
, 百拇医药 模型组
12
42.51±15.98
1.21±0.42
21.73±6.18
补汤组
12
17.61±6.19②
0.82±0.35②
12.04±5.46 ②
① 1例可见少许脂质沉着；②与模型组比较P<0.01
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2.2 血清中脂质的变化 模型组和补汤组血清中TC和TG量均升高，与正常 对照组相比，差异具有非常显著性(P<0.01)。但补汤组血清中TC和TG值明显下降，下降 的程度与模型组差异有显著性(P<0.01)。说明补汤具有降TC和TG的作用(表2)。
表2 各组血清(TC)及(TG)的变化(±s) 组别
例数
TC(mmol.L -1)
TG(mmol.L-1)
对照组
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12
0.89±0.25
0.69±0.18
模型组
12
26.60±10.41①
2.72±1.55①
补汤组
12
12.70±6.17②
1.05±0.26②
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①与对照组相比P<0.01；②与模型组相比P<0.01
2.3 血浆vWF,6-keto-PGF1α和ET的变化 模型组血浆vWF浓度较 对照组和补汤组为高，经统计学处 理，其差别有显著性(P<0.01)；但补阳还 五汤处理组 血浆vWF水平与对照组并无统计学意 义(P>0.5)。模型组血浆中6-keto-PGF1 α 明显较对照组和补汤组为低，有统计学差异(P<0.01)；补汤组6-keto-PGF1α 浓度比对照组更高，说明其有明显增加血浆PGI2的作用。三组ET含量差异无显著性(P >0.05)。各实验结果见表3。
表3 各组血浆中vWF,6-keto-PGF1α 和ET的测定结果(±s) 组别
, 百拇医药
例数
vWF
(U .ml-1)
6-keto-PGF1α
(pg.ml-1)
ET
(pg.ml-1)
对照组
12
, http://www.100md.com 2.27±0.58
20.53±5.18
148.19±36.12
模型组
12
3.39±0.67①②
8.53±3.97①②
161.30±25.13④
补汤组
12
2.52±0.77③
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21.81±5.80
149. 25±30.58
①与对照组比P<0.01；②与补汤组比P<0.01；③与对照组比P>0.05； ④与补汤组和对照组比P>0.05
3 讨 论
目前有关AS形成的学说众多，主要有内皮细胞损伤学说、脂质浸润学说及微血栓形成学说， 而内皮细胞损伤学说最受人们所重视。血管内皮系一多机能介面，具有抗AS形成的作用，如 合成和分泌PGI2及NO等多种血管活性物质，参与调节止血与凝血过程，参与脂质代谢等机 能。大量临床观察和动物实验表明，AS形成的早期即可发现内皮细胞受损及机能失调[ 5，6]、血中vWF水平升高、内皮合成的PGI2及NO等扩血管活性物质下降、缩血管活 性物质ET增高等改变。6-keto-PGF1α是PGI2代谢的稳定产物，其血中水平的高 低可反映内皮分泌PGI2的多少。PGI2具有多种生理作用，包括舒张血管、抑制血小板粘 附与聚集、抑制血管内皮下成分的增生等，表现为抗AS形成作用。vWF和ET作为血管受损的 检测物，可反映血管内皮受损的程度。vWF作为血小板与内皮下成分的桥联物，在血栓形成 过程中起重要作用。ET具有引起血管强烈收缩的作用，加重病理状态下血栓形成和AS的发展 。
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本室用高脂高胆固醇喂饲法，成功地复制了AS家兔模型。发现补阳还五汤具有抗AS形成作用 ，表现为受累的血管病变数量减少，程度减轻，粥样斑块面积减小、厚度变薄；同时发现血 脂明显下降。上述结果与赵新先等报道相符[1]。检测3组动物血中的vWF，PGI2 和ET水平，以评估血管内皮细胞的机能状态。发现AS形成后血中vWF增高，PGI2下降，但E T未见变化；同时发现补阳还五汤组中的vWF浓度并不比对照组明显增高，而PGI2不但未下 降却微有增高。
补阳还五汤抗AS形成的机制，笔者认为除降血脂，减轻高血脂对内皮细胞的氧化损伤外，也 与其促进内皮细胞合成与分泌PGI2和NO等生物活性物质有关。本室发现补阳还五汤及其组 分之一川芎嗪对培养的血管内皮细胞有促进释放NO的作用(待发表)。陶经祥等也发现川芎嗪 具有促进培养的血管内皮细胞释放PGI2的作用[8]。贺石林等人的先期工作证明 ，补 阳还五汤组方中的地龙和黄芪具有抗凝作用[2，3]。上述事实均提示补阳还五汤 的抗AS形成机制与防止血管内皮细胞受损和抗血栓形成作用密切相关。故可推测，补阳还五 汤的抗AS形成效应的发挥，系通过降血脂、扩血管、抑制血小板粘附聚集和防止血栓形成等 多方面的药理作用而实现的。然而，补阳还五汤的作用不能用组方中各单味药作用的总和来 解释。本实验未发现AS模型组血中ET水平有明显变化。此结果与Grantham的实验相似[ 10]，与人类糖尿病引起的AS后血中ET升高的情况有别。这种差别可能是人、兔种属间 血管内皮细胞的机能差异。补阳还五汤系一复方汤剂，药理成分有其多样性和作用的复杂性 。它尚可通过何种机制抗AS形成，有待进一步研究。
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基金项目：国家自然科学基金资助项目(39600197)
作者简介：刘发益(1965-)，男，讲师
参考文献：
[1]赵新先，邹恒勤，韦雄，等.补阳还五汤对家兔动脉粥样硬化的 药理研究[J].新中医，1984，1(1)：48-50.
[2]贺石林，彭延古，李安国，等.补阳还五汤对血液凝固影响的实验研究[J].湖南 中医学院学报，1989，9(4)：212-214.
[3]李安国，贺石林，邓常青，等.补阳还五汤对血管壁抗血栓功能的影响[J].中西 医结合杂志，1989，9(9)：545.
[4]张子彬.补阳还五汤对家兔脑血管的扩张作用[J].中成药研究，1983，8：31-33 .
, 百拇医药
[5]Ross R. The pathogenesis of atherosclerosis: a perspective for the 1990S [J]. Nature, 1993,362(29):801-809.
[6]Vanhoutte PM. Hypercholesterolaemia atherosclerosis and release of endoth elium-derived relaxing factor by platelets[J]. Eur Heart J, 1991,12(Suppl E): 25-32.
[7]陶经祥，邵文钊.川芎嗪和硝酸甘油对体外培养的人工血管内皮细胞分泌前列环素 的影响[J].中华神经外科杂志，1987，3(4)：223-226.
[8]Grantham JA, Schirger JA, Williamson EE, et al. Enhanced endothelin- converting enzyme immunoreactivity in early atheroscerosis[J]. J Cardiovasc Ph armacol, 1998,31(Suppl 1):S22-26.
收稿日期：1999-04-26, 百拇医药
单位：刘发益(湖南医科大学生理学教研室 长沙 410078)；文志斌(湖南医科大学生理学教研室 长沙 410078)；尚改萍(湖南医科大学生理学教研室 长沙 410078)；贺石林(湖南医科大学生理学教研室 长沙 410078)；李俊成(湖南医科大学生理学教研室 长沙 410078)；周春生(湖南医科大学附属湘雅医院检验科 长沙 410008)；杨锡平(湖南中医学院动物实验学部长沙 410007)
关键词：黄芪；川芎；补阳还五汤*；动脉粥样硬化；血脂过多；前列环素；von；Willebrand因子；内皮素；兔
湖南医科大学学报000111 摘 要：在家兔动脉粥样硬化的模型上观察补阳还五汤抗动脉粥样硬化的作用。结果表明：该汤剂具有明显的降低血清总胆固醇和甘油三酯的作用，显著延缓主动脉及腹主动脉粥样硬化斑块的形成、减缓冠脉血管受累的数目和程度。还具有升高6-keto-PGF1α和降低vWF的作用，但对血浆中ET的含量并无影响。提示补阳还五汤的抗动脉粥样硬化与抗血栓形成的作用有关。
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分类号：R543.12 R285.5 R973.2 文献标识码：A
文章编号：1000-5625(2000)01-0033-03
“Bu-yang huanwu tang”① inhibited the pathogentic process of
atherosclerosis induced by cholesterol-rich diet in rabbits
LIU Fa-yi, WEN Zhi-bin, ZHOU Chun-sheng, YANG Xi-ping, SHANG Gai-ping, HE Shi-lin, LI Jun-cheng
(Thrombosis and Hemostasis Research Laboratory, Department of Physiology, Hunan Medical University Changsha 410078)
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Abstract：Background and objective: “Bu-yang huanwu tang” ①, a decoction of Chinese herbs widely used in the treatment for cardio-and cerebro-vascular diseases, has been demonstrated to be able to inhibit platele t adhesion and aggregation, to lower blood lipids, to regulate vascular tone fr om animal experiments. The aim of this study is to determine whether this decoc tio n inhibits the pathogentic process of atherosclerosis induced by cholesterol -ri ch diet in rabbits. Methods: Three groups of rabbits received the following diff erent diets for 9 weeks: 1. standard diet; 2. atherogenic diet(standard di et plu s 1% cholesterol and 3.3% fat); 3. atherogenic diet plus this decoction(5 g.k g-1.d-1). Plasma lipids, 6-keto-PGF1α, endothelin le vels w ere detected and the histological atherosclerotic changes were evaluated. Result s: This decoction inhibited the progression of aortic and abdominal aort ic intim al plaques and reduced aortic intimal thickening. Conclusion: The anti -atheroge nic mechanism might be related to the decrease of plasma cholesterol and triglyc erides and the increase of PGI2. The facts suggest that “Bu-yang huanwu tang ” has antiatherogenic and antithrombotic effects.
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Key words：astragalus;angelica;ligusticum;“Bu-yang h uanwu tang”;atherosclerosis;hyperlipidemia;prostacylin;von Willebrand factor;endothelin; rabbits▲
动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)系一危害人 类健康的常见病。AS引起的心、脑血管疾病如心肌梗死、中风等是引起人类死亡的首因。目 前虽已认识到高血脂、高血压、血管内皮细胞损伤等因素可促进AS形成，但由于AS病理形 成 过程的复杂性，对其发病机制尚未完全阐明。阻止AS的发生发展，寻找有效的防治药物是一项非常有意义的工作。补阳还五汤为清代名医王清任所创的方剂，具有补气活血、通经活络的功效。近代临床上广泛用于缺血性心、脑血管病的治疗，证明该方为一有效验方。临床观 察和实验研究均表明，补阳还五汤有降血脂、破血栓、扩血管[1～4] 等作用。本实验在家兔AS的模型上研究补阳还五汤对AS形成过程的影响，以寻求抗AS的效 应及探讨其机制。
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1 材料与方法
1.1 药物制备 补阳还五汤依原方组成，其中黄芪40 g，川芎15 g，当 归 15 g，赤芍15 g，桃仁12 g，红花12 g和地龙10 g。将上述药物用水煎煮3次，时间 分别为 1.5 h，1 h和45 min。合并煎煮液后浓缩成含生药相当于2.5 gml-1( 由湖南中 医学院制备)。
1.2 动物分组 选取健康日本雄性大耳白兔36只，体重约1.5 kg，3～4 月龄(本校动物中心提供)。动物在适应性喂养3 d后，随机分为3组：①正常对照组(对照组 )，喂正常饲料；②AS造模组(模型组)，除正常饲料外，每兔每日另加胆固醇1.5 g，猪油 5 g和鸡蛋15 g；③补阳还五汤处理组(补汤组)，所喂饲料同模型组，但同时给予补阳还五 汤煎剂，其中第1～2周通过灌胃给予，以后拌入正常饲料中。每兔每天经上、下午两次给 药 ，日总量相当于含生药5 g.kg-1。上述各组兔均限食量，每兔每日为150 g，分 笼 喂养，自由饮水，共喂养9周。
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1.3 观察方法与指标 所有动物在喂养9周后，心腔内采血。注入空气处死 ，进行下列指标的检测。
1.3.1 AS病理形态学检查 (1)主动脉及腹主动脉AS斑块面积的测量：动 物处死后，立即取主动脉及腹主动脉纵行剪开，平铺在滤纸上，以10%福尔马林固定。经苏 丹Ⅲ染色，观察AS斑块病变，用透明方格纸(1 mm×1 mm)测量每条主动脉及腹主动脉的AS 面积，并计算病变面积占总面积的百分比；同时自主动脉弓取材作石蜡切片，HE染色光镜下 观察主动脉及腹主动脉的形态，用测微尺测量斑块的最大厚度。(2)冠状血管的堵塞情况： 于心脏房室沟直下方，每0.3 cm作一横切面，共切3块，每块厚约0.3 cm，均作HE染色 。光镜下观察病变阻塞血管的分支情况(凡管腔平滑肌仅1～2层者为小支，3～5层者为中支 ，大于5层者为大支)。在每一家兔的心肌切片中数50个动脉，计算AS血管所占的百分率。
1.3.2 血脂测定 采取酶法测定血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)量(湘 雅医院生化检验科测)。
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1.3.3 血浆中von Willebrand因子(vWF)和6-酮-前列腺素F1α(6-ket o-PGF1α)的检测 采用酶联免疫测定法测vWF，用放射免疫测定法测6-keto -PGF1α。上述两测定药盒均由苏州医学院血栓与止血研究所提供。定义稀释正常 人 混合血浆vWF含量为1 U.ml-1。
1.3.4 血浆内皮素(endothelin, ET)的测定 采用放射免疫测定法直接测 量血浆中ET的含量。药盒购自解放军总医院。
1.4 统计学处理 实验数据以均数±标准差(
±s)表示；统计 方法采用方差分析和q检验。2 结 果
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2.1 主动脉、腹主动脉及冠状动脉病理形态的改变 正常对照组，除1例见 腹主动脉有少许脂斑外，其余主动脉及腹主动脉均未见粥样斑块及脂质斑点，镜下内膜完整 ，内皮下无脂质沉积。模型组和补汤组均见不同程度的AS形成。 在斑块的面积与整条动脉面积比、斑块厚度方面，两组间差异有高度显著性(P<0.01， 表1)。镜下可见，斑块内主要为大量泡沫细胞堆积，严重者泡沫细胞崩解，可见胆固醇结 晶析出，并有平滑肌细胞增生。
除正常对照组外，模型组和补汤组均可见冠状动脉脂质沉着和斑块形成。血管病变多见于中 、小支，出现程度不同的内膜增厚，管腔狭窄。但补汤组的血管狭窄程度和病变的血管数明 显地较模型组为轻为少；两组相比差异有非常显著性(P<0.01，表1)。
表1 三组主动脉、腹主动脉和冠状动脉 的病理检查结果(
±s) 组别, http://www.100md.com
例数
粥样斑 块面积
占总面积的%
粥样斑块的
最大厚度(mm)
AS冠状动脉
所占面积的%
对照组
12
0①
0①
0
, 百拇医药 模型组
12
42.51±15.98
1.21±0.42
21.73±6.18
补汤组
12
17.61±6.19②
0.82±0.35②
12.04±5.46 ②
① 1例可见少许脂质沉着；②与模型组比较P<0.01
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2.2 血清中脂质的变化 模型组和补汤组血清中TC和TG量均升高，与正常 对照组相比，差异具有非常显著性(P<0.01)。但补汤组血清中TC和TG值明显下降，下降 的程度与模型组差异有显著性(P<0.01)。说明补汤具有降TC和TG的作用(表2)。
表2 各组血清(TC)及(TG)的变化(
±s) 组别例数
TC(mmol.L -1)
TG(mmol.L-1)
对照组
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12
0.89±0.25
0.69±0.18
模型组
12
26.60±10.41①
2.72±1.55①
补汤组
12
12.70±6.17②
1.05±0.26②
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①与对照组相比P<0.01；②与模型组相比P<0.01
2.3 血浆vWF,6-keto-PGF1α和ET的变化 模型组血浆vWF浓度较 对照组和补汤组为高，经统计学处 理，其差别有显著性(P<0.01)；但补阳还 五汤处理组 血浆vWF水平与对照组并无统计学意 义(P>0.5)。模型组血浆中6-keto-PGF1 α 明显较对照组和补汤组为低，有统计学差异(P<0.01)；补汤组6-keto-PGF1α 浓度比对照组更高，说明其有明显增加血浆PGI2的作用。三组ET含量差异无显著性(P >0.05)。各实验结果见表3。
表3 各组血浆中vWF,6-keto-PGF1α 和ET的测定结果(
±s) 组别, 百拇医药
例数
vWF
(U .ml-1)
6-keto-PGF1α
(pg.ml-1)
ET
(pg.ml-1)
对照组
12
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20.53±5.18
148.19±36.12
模型组
12
3.39±0.67①②
8.53±3.97①②
161.30±25.13④
补汤组
12
2.52±0.77③
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21.81±5.80
149. 25±30.58
①与对照组比P<0.01；②与补汤组比P<0.01；③与对照组比P>0.05； ④与补汤组和对照组比P>0.05
3 讨 论
目前有关AS形成的学说众多，主要有内皮细胞损伤学说、脂质浸润学说及微血栓形成学说， 而内皮细胞损伤学说最受人们所重视。血管内皮系一多机能介面，具有抗AS形成的作用，如 合成和分泌PGI2及NO等多种血管活性物质，参与调节止血与凝血过程，参与脂质代谢等机 能。大量临床观察和动物实验表明，AS形成的早期即可发现内皮细胞受损及机能失调[ 5，6]、血中vWF水平升高、内皮合成的PGI2及NO等扩血管活性物质下降、缩血管活 性物质ET增高等改变。6-keto-PGF1α是PGI2代谢的稳定产物，其血中水平的高 低可反映内皮分泌PGI2的多少。PGI2具有多种生理作用，包括舒张血管、抑制血小板粘 附与聚集、抑制血管内皮下成分的增生等，表现为抗AS形成作用。vWF和ET作为血管受损的 检测物，可反映血管内皮受损的程度。vWF作为血小板与内皮下成分的桥联物，在血栓形成 过程中起重要作用。ET具有引起血管强烈收缩的作用，加重病理状态下血栓形成和AS的发展 。
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本室用高脂高胆固醇喂饲法，成功地复制了AS家兔模型。发现补阳还五汤具有抗AS形成作用 ，表现为受累的血管病变数量减少，程度减轻，粥样斑块面积减小、厚度变薄；同时发现血 脂明显下降。上述结果与赵新先等报道相符[1]。检测3组动物血中的vWF，PGI2 和ET水平，以评估血管内皮细胞的机能状态。发现AS形成后血中vWF增高，PGI2下降，但E T未见变化；同时发现补阳还五汤组中的vWF浓度并不比对照组明显增高，而PGI2不但未下 降却微有增高。
补阳还五汤抗AS形成的机制，笔者认为除降血脂，减轻高血脂对内皮细胞的氧化损伤外，也 与其促进内皮细胞合成与分泌PGI2和NO等生物活性物质有关。本室发现补阳还五汤及其组 分之一川芎嗪对培养的血管内皮细胞有促进释放NO的作用(待发表)。陶经祥等也发现川芎嗪 具有促进培养的血管内皮细胞释放PGI2的作用[8]。贺石林等人的先期工作证明 ，补 阳还五汤组方中的地龙和黄芪具有抗凝作用[2，3]。上述事实均提示补阳还五汤 的抗AS形成机制与防止血管内皮细胞受损和抗血栓形成作用密切相关。故可推测，补阳还五 汤的抗AS形成效应的发挥，系通过降血脂、扩血管、抑制血小板粘附聚集和防止血栓形成等 多方面的药理作用而实现的。然而，补阳还五汤的作用不能用组方中各单味药作用的总和来 解释。本实验未发现AS模型组血中ET水平有明显变化。此结果与Grantham的实验相似[ 10]，与人类糖尿病引起的AS后血中ET升高的情况有别。这种差别可能是人、兔种属间 血管内皮细胞的机能差异。补阳还五汤系一复方汤剂，药理成分有其多样性和作用的复杂性 。它尚可通过何种机制抗AS形成，有待进一步研究。
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基金项目：国家自然科学基金资助项目(39600197)
作者简介：刘发益(1965-)，男，讲师
参考文献：
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[2]贺石林，彭延古，李安国，等.补阳还五汤对血液凝固影响的实验研究[J].湖南 中医学院学报，1989，9(4)：212-214.
[3]李安国，贺石林，邓常青，等.补阳还五汤对血管壁抗血栓功能的影响[J].中西 医结合杂志，1989，9(9)：545.
[4]张子彬.补阳还五汤对家兔脑血管的扩张作用[J].中成药研究，1983，8：31-33 .
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[7]陶经祥，邵文钊.川芎嗪和硝酸甘油对体外培养的人工血管内皮细胞分泌前列环素 的影响[J].中华神经外科杂志，1987，3(4)：223-226.
[8]Grantham JA, Schirger JA, Williamson EE, et al. Enhanced endothelin- converting enzyme immunoreactivity in early atheroscerosis[J]. J Cardiovasc Ph armacol, 1998,31(Suppl 1):S22-26.
收稿日期：1999-04-26, 百拇医药