茶多酚对家犬的长期毒性作用
作者：赵亚男 柯永胜 郑青山 桂常青
单位：赵亚男 柯永胜 郑青山(皖南医学院弋矶山医院，芜湖 241001)；桂常青(药理教研室，芜湖 241001)
关键词：茶多酚；长期毒性；家犬
中国临床药理学与治疗学000112
目的 观察用药90 d及停药2 kw后，茶多酚(TP)对家犬的长期毒性反应。方法 家犬以650、65、6.5 mg.kg-1.d-1 3个剂量分别连续饲服TP 90 d及停药2 kw后，观察动物的一般情况、检查动物的心电图、血尿常规、血脂、血糖、凝血时间、肝肾功能等生化指标。结果 用药组体重增加情况与对照组无显著性差异(P>0.05)；用药前、服药中、停药后家犬的活动情况、毛发、粪便、心电图、血尿常规、各项生化指标均未见异常，用药前后比较无显著性差异(P>0.05)；大、中、小剂量组血清胆固醇水平进行性降低。结论 TP按650 mg.kg-1.d-1饲服90 d对家犬未见明显毒性作用。
, http://www.100md.com
中图分类号 R285.1
Chronic toxicity of tea polyphenols in dogs
ZHAO Ya-Nan KE Yong-Sheng ZHENG Qing-Shan
(Yijishan Hospital)
GUI Chang-Qing
(Department of Pharmacology,Wannan Medical College,Wuhu 241001)
Aim The chronic toxicity of tea polyphenols(TP) in dogs was observed.Methods 18 dogs were randomly divided into high,middle and low dose TP groups and one control group.When TP was given(po) by 650 mg.kg-1.d-1,65 mg.kg-1.d-1,6.5 mg.kg-1.d-1 respectively for 90 d and after TP was stopped for two weeks,the general conditions,ECG,blood routine,urine routine,serum lipids,blood sugar,coagulation time,and hepatic and kidney function were detected respectively.Results These mdices were not different from each other among the 4 groups before,during and after administration of TP.The level of serum total cholesterol was progressively decreased in TP groups.Conclusion TP has no toxic effect on dogs and can decrease the level of serum total cholesterol in normal dogs.
, 百拇医药
Key Words tea polyphenols; chronic poisoning; dogs
茶多酚(tea polyhenols,TP)是从茶叶中提取的多酚类物质，研究表明TP具有抗氧化、抗动脉硬化、抗肿瘤及降血脂等药理作用[1～3]。但TP对家犬的长期毒性反应未见报道。本实验采用TP对家犬连续口服90 d，观察用药期间毒性反应及停药2 wk后的恢复情况，为临床用药安全性提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 动物 杂种家犬18只，体重(11.1±2.06) kg，雌雄不拘，由皖南医学院动物中心提供。经检疫、驱虫、驯饲2 wk后，随机分为4组，分栏饲养。饲养环境为室温(22±2)℃,相对湿度65%～70%，食物为本院动物中心自制颗粒饲料及过滤自来水。
1.2 药物 TP药粉(皖南医学院心血管疾病研究所提供，批号GTP-103-95)纯度为95%,溶于生理盐水中配制成65%、6.5%、0.65%的溶液。
, 百拇医药
1.3 分组与给药方法[4] 正常对照组:饲服生理盐水1 ml.kg-1.d-1；大剂量TP组：饲服65% TP溶液1 ml.kg-1.d-1；中剂量TP组：饲服6.5% TP 溶液1 ml.kg-1.d-1；小剂量TP组：饲服0.65% TP溶液1 ml.kg-1.d-1。用注射器抽取所需的药物或生理盐水后置精饲料中，搅匀后饲服，用药90 d后半数动物处死解剖，余半数动物继续饲养普通食物2 wk。
1.4 一般情况观察 每日观察记录实验前后及停药期间各组动物外观体征、活动度、食量、毛发及粪便形状等，每周称重1次。
1.4.1 检查指标 给药前、给药45 d、90 d检查以下各项项目：(1) 血液学检查：包括血常规、血小板计数(BPC)和凝血时间(CT)等。(2) 血液生化学检查：包括天门冬氨酸氨基转换酶(AST) 、丙氨酸氨基转换酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)、总胆红素(T-BIL)、肌酐(Cr)和总胆固醇(TC)。(3) 尿常规检查。(4) 系统尸检和病理组织检查：每组2～3只动物在90 d处死观察各脏器变化。取心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、甲状腺、睾丸、子宫、脑、前列腺，削去周围组织称重，计算脏器重量系数(重量占体重的百分比)；留取肾上腺、胰腺、十二指肠、回肠、结肠、垂体、前列腺、脑、脊髓、心、脾、胸骨及骨髓、肾、肝、肺、淋巴结、膀胱、子宫、卵巢、胃、甲状腺、胸腺、睾丸、视神经标本，做病理切片，HE染色，观察组织学变化。(5) 停药后观察： 每组2只动物停止用药并继续观察2 wk,检查指标同前。
, 百拇医药
1.5 统计学处理 实验结果以
±s表示，采用t检验和χ2分析进行组间显著性分析。
2 结果
2.1 一般情况 大、中、小剂量组家犬连续口服TP 90 d，未见任何异常反应，饮食、粪便、心电图检查均与对照组无异常变化；每周测量动物体重，各组动物均见体重增加，其增加值各组间差异无显著性，结果见表1。
表1 TP对家犬体重的影响(±s,kg) 组别
用药前
用药时间/wk
1
, 百拇医药
2
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
, 百拇医药
对照组
11.5
11.3
11.1
10.7
11.1
11.5
11.4
11.5
11.6
11.8
12.1
, 百拇医药
12.4
12.4
12.5
12.7
(n=5)
s
2.0
2.2
2.0
2.0
2.0
2.3
1.8
, 百拇医药
1.7
1.5
1.3
1.5
1.8
1.9
1.9
1.9
TP大剂量组
10.3
10.5
10.5
, http://www.100md.com
9.8
10.8
10.5
10.5
11.3
11.4
12.0
11.7
12.3
11.9
12.5
12.7
(n=4)
, http://www.100md.com
s
2.5
2.7
2.7
2.5
2.3
2.5
1.6
1.7
1.8
1.9
2.3
1.7
, 百拇医药
1.5
1.4
1.6
TP中剂量组
12.3
12.3
12.5
12.0
12.3
12.9
12.9
13.0
, 百拇医药
13.3
13.5
13.6
13.4
13.6
13.0
13.5
(n=4)
s
1.0
1.3
1.3
1.3
, 百拇医药
1.5
1.4
1.3
0.9
1.2
1.1
0.9
1.2
0.9
1.0
1.4
TP小剂量组
, http://www.100md.com
10.0
10.1
10.2
9.9
10.7
10.1
11.1
1.7
11.9
11.2
11.6
12.1
12.1
, 百拇医药
12.4
12.1
(n=5)
s
1.3
1.7
1.8
1.3
1.7
1.9
2.0
1.8
1.9
, 百拇医药
2.0
1.2
1.1
0.9
0.8
0.5
2.2 血、尿常规、脏器系数变化 各用药组与对照组的各项指标均在正常范围内，见表2、表3。表2 TP对家犬血、尿常规的影响 组别
时间
/d
n
红细胞数
/1012.L-1
, 百拇医药
血红蛋白数
/g.L-1
白细胞数
/109.L-1
白细胞分类%
血小板数
/109.L-1
凝血时间
/min
N
L
E
, 百拇医药
M
NS对照组
0
5
7.3±0.67
125±7
8.0±1.0
7.0±5.3
25.6±3.2
1.0±0.7
1.4±1.9
190±52
1.3±0.2
, 百拇医药
45
5
7.3±0.56
125±7
8.1±0.7
72.0±3.8
27.0±3.8
0.8±0.4
0.6±0.5
179±35
1.3±0.3
90
, 百拇医药 5
7.2±0.67
121±1
8.1±1.2
69.8±2.3
26.4±0.9
1.8±1.3
2.0±2.3
175±27
1.1±0.2
TP大剂量组
0
4
, http://www.100md.com
6.9±1.31
103±19
7.5±1.5
66.4±3.3
31.0±5.1
2.0±0.8
1.3±1.9
129±36
1.1±0.1
45
4
6.9±0.74
, http://www.100md.com
105±20
8.7±1.6
69.5±1.9
26.3±2.4
2.5±1.9
1.8±1.5
121±36
1.1±0.3
90
4
7.0±0.82
108±21
, http://www.100md.com
7.5±1.5
69.5±1.9
28.0±1.6
1.8±0.9
1.0±0.5
127±21
0.9±0.1
TP中剂量组
0
4
7.6±0.87
126±5
, 百拇医药 7.6±1.3
72.5±2.1
24.7±0.9
1.5±1.3
1.3±1.5
144±33
1.3±0.3
45
4
7.5±0.68
124±5
8.1±1.9
, http://www.100md.com 68.5±3.0
27.5±4.7
2.0±1.4
2.0±1.4
161±33
1.1±0.3
90
4
7.8±0.50
125±6
8.0±1.0
71.0±2.6
, 百拇医药 29.2±5.4
1.8±0.9
0.5±0.6
152±21
1.1±0.3
TP小剂量组
0
5
7.5±0.96
121±9
7.4±1.2
71.2±2.3
24.6±1.7
, http://www.100md.com
2.8±1.3
1.4±0.5
180±19
0.9±0.1
45
5
7.5±0.66
122±8
7.1±0.4
71.8±2.9
23.6±1.7
3.0±1.0
, http://www.100md.com
1.6±0.5
168±21
1.1±0.2
90
5
7.6±0.82
123±7
8.1±1.6
1.4±5.8
26.4±5.5
1.4±0.4
0.8±0.4
, http://www.100md.com 179±19
0.9±0.1
表3 TP长期毒性试验动物解剖脏器系数 脏器名称
NMS对照组(n=5)
TP大剂量组(n=4)
TP中剂量组(n=4)
TP小剂量组(n=5)
重量/g
系数/%
重量/g
系数/%
重量/g
, 百拇医药
系数/%
重量/g
系数/%
心
122.0±27.5
0.94±0.15
108.8±16.5
0.86±0.14
141.3±20.2
1.03±0.05
119.0±18.5
0.97±0.14
, 百拇医药
肝
348.0±35.6
2.77±0.57
351.3±48.7
2.74±0.19
333.8±14.9
2.45±0.26
315.0±34.6
2.58±0.23
脾
58.0±14.4
0.54±0.07
, 百拇医药
5.03±8.9
0.39±0.06
76.3±11.1
0.56±0.03
61.0±9.6
0.50±0.06
肺
143.0±33.1
1.12±0.22
190.0±53.5
1.64±0.28
198.8±14.54
, 百拇医药
1.46±0.11
210.0±15.8
1.73±0.15
肾
77.0±13.9
0.61±0.12
70.0±10.8
0.56±0.06
90.0±7.1
0.67±0.10
70.0±7.9
0.58±0.06
, http://www.100md.com
肾上腺
7.0±2.4
0.05±0.02
5.5±1.3
0.04±0.02
5.9±0.8
0.04±0.01
6.7±1.7
0.06±0.02
胸腺
6.4±2.7
0.05±0.02
, 百拇医药
6.3±1.7
0.05±0.02
6.5±0.4
0.05±0.01
7.0±1.6
0.06±0.01
甲状腺
13.9±2.61
0.11±0.02
16.3±2.6
0.13±0.014
17.2±2.7
, http://www.100md.com
0.13±0.03
16.0±3.5
0.13±0.03
睾丸
14.0±2.8
0.16±0.05
11.5±0.1
0.08±0.01
15.5±4.9
0.12±0.04
13.3±3.0
0.11±0.03
, http://www.100md.com
子宫
16.7±4.16±9.0±0.0
0.12±0.03
11.5±2.1
0.09±0.01
17.5±2.1
0.13±0.01
13.0±4.2
0.11±0.05
前列腺
9.0±0.0
0.08±0.01
, 百拇医药
5.0±1.4
0.04±0.014
8.5±2.1
0.06±0.01
6.3±1.53
0.05±0.02
脑
123.6±30.9
0.95±0.14
100.0±24.8
0.81±0.25
148.7±79.6
, 百拇医药
1.08±0.14
127.0±19.24
0.05±0.02
体重/kg
12.8±1.7
12.8±24.8
148.7±79.6
12.2±0.6
2.3 血液生化 用药45 d，大剂量TP组有1条家犬(♀)血清AST升至114 U.L-1,继续给药，第55 d (发现后10 d)血清AST为80U.L-1,第65 d(发现后20 d)血清AST恢复正常(血清AST为29 U.L-1),其他各项指标均在正常范围内，见表4。表4 TP对犬血液生化指标的影响(±s) 组别
, 百拇医药
天数/d
n
AST
/U.L-1
ALT
/U.L-1
ALP
/U.L-1
BUN
/mmol.L-1
TP
, 百拇医药
/g.L-1
ALB
/g.L-1
GLU
/mmol.L-1
T-BIL
/μmol.L-1
Gr
/μmol.L-1
T-CHO
, 百拇医药
/mmol.L-1
NS对照
0
5
21.3±7.6
22.2±10.1
65.4±25.1
4.4±1.5
59.1±10.4
32.9±7.5
4.4±0.8
7.3±7.2
, http://www.100md.com
51.7±7.3
3.6±0.9
45
5
24.6±6.5
24.6±4.5
63.6±20.7
4.6±1.2
57.6±8.8
32.9±3.4
4.2±0.3
5.4±3.9
, http://www.100md.com
48.9±5.1
3.3±0.7
90
5
26.2±6.1
18.8±5.6
61.6±15.21
4.2±0.7
58.9±2.3
32.3±1.3
4.3±0.4
5.9±2.9
, 百拇医药
55.5±6.2
3.6±0.8
TP大剂量
0
4
21.0±9.6
21.8±6.8
57.8±24.2
5.6±0.9
59.4±3.2
28.8±3.4
4.7±0.5
, 百拇医药
7.7±3.9
43.6±10.0
3.7±0.8
45
4
32.3±8.5
23.3±5.9
53.5±23.0
5.9±0.9
59.9±2.5
31.0±3.7
4.6±0.5
, 百拇医药
8.1±4.7
43.3±7.7
2.4±0.6
90
4
25.8±4.+9
23.3±8.3
51.8±16.7
5.3±1.1
57.6±2.8
32.4±2.1
4.5±0.5
, http://www.100md.com
7.7±3.7
44.7±3.3
2.4±0.4
TP中剂量
0
4
23.3±7.0
20.0±6.7
55.3±18.9
4.7±0.9
60.5±7.0
29.8±4.1
, 百拇医药
3.8±0.36
11.8±3.9
41.3±10.9
4.3±1.1
45
4
22.3±3.5
21.8±4.6
69.0±13.6
4.9±1.0
56.3±5.7
30.9±3.4
, 百拇医药
4.1±0.2
12.3±4.9
40.4±5.6
3.2±0.3
90
4
23.5±4.0
24.5±4.7
72.0±12.0
4.9±0.9
57.3±5.7
31.5±1.7
, 百拇医药
4.3±0.6
17.3±5.7
41.7±8.1
2.7±0.4
TP小剂量
0
5
15.2±11.5
22.8±5.7
60.6±12.8
4.1±1.1
61.4±5.3
, 百拇医药
30.0±3.5
4.2±0.6
4.4±1.2
48.9±9.0
4.3±0.8
45
5
23.2±4.9
23.0±4.1
60.2±14.0
4.4±0.9
56.9±6.8
, 百拇医药
29.2±3.8
4.5±0.5
5.4±2.7
45.4±5.2
2.9±1.3
90
5
24.2±3.1
21.0±2.8
61.0±8.9
4.0±0.6
59.2±5.4
, 百拇医药
30.5±3.0
4.8±0.6
7.3±3.6
46.6±4.9
21.6±0.4
2.4 病理组织学检查 4组动物主要脏器无明显变性坏死，结构无破坏；大剂量TP组动物小肠绒毛间质中慢性炎性细胞浸润较多，对照组亦有此现象，可能与喂养过程中致慢性肠炎有关；2例雌性动物心肌间质中有少量脂肪浸润，可能是该动物肥胖，不是病变的关键；大剂量TP组动物肺部淤血现象重于其他组，可能与处死动物方式有关。
2.5 停药后检查 停药2 wk，动物活动、饮食正常，各项生化检验指标与停药时无显著性变化，见表5，表6。表5 TP用药90 d、停药2 wk后家犬血、尿常规的变化 组别
, http://www.100md.com
n
红细胞数
/1012.L-1
血红蛋白数
/g.L-1
白细胞数
/109.L-1
N
/%
L
/%
, http://www.100md.com
E
/%
M
/%
血小板数
/109.L-1
凝血时间
/min
NS对照组
4
8.2
130
8.2
, http://www.100md.com
73
27
185
1
5
7.2
120
7.1
68
30
1
1
191
1
, 百拇医药
TP大剂量组
8
7.6
120
9.6
65
30
2
3
145
1
9
7.0
120
, http://www.100md.com
6.6
72
27
1
155
1
TP中剂量组
12
7.3
120
6.8
68
31
, 百拇医药 1
154
1
13
8.2
120
9.0
72
36
1
1
145
1
TP小剂量组
, http://www.100md.com
17
8.4
130
8.0
80
19
1
180
1
18
6.6
110
7.2
72
, http://www.100md.com
27
1
150
1
表6 TP用药90d、停药2wk后家犬血液化指标的影响 组别
n
AST
/U.L-1
ALT
/U.L-1
ALP
/U.L-1
, http://www.100md.com
BUN
/mmo.L-1
TP
/g.L-1
ALB
/g.L-1
GLU
/mmo.L-1
T-BIL
/μmol.L-1
, 百拇医药
Cr
/μmol.L-1
T-CHO
/mmo.L-1
NS对照组
4
27
21
30
4.2
59
32
, 百拇医药
4.1
8.0
57.2
4.7
5
23
16
70
4.5
61
33
5.0
6.2
, 百拇医药 60.1
3.2
TP大剂量组
8
26
17
60
4.4
60
32
5.1
9.4
44.3
, 百拇医药 2.6
9
32
29
43
5.6
62
34
4.2
7.0
52.1
2.9
TP中剂量组
12
, http://www.100md.com
23
29
72
5.1
58
29
4.1
24.0
43.5
3.0
13
17
21
, 百拇医药 60
5.3
59
32
4.1
17.0
32.5
3.3
TP小剂量组
17
20
31
69
, http://www.100md.com 3.1
50
26
4.8
10.1
39.2
2.9
18
24
19
57
4.2
62
34
, http://www.100md.com
3.9
7.2
54.1
3.4
3 讨论
小鼠口服TP的LD1及LD5分别为0.379、0.478 g.kg-1,按动物系数折算狗的LD1及LD5大致为94.7 mg.kg-1、119.5 mg.kg-1，该药临床小范围试用有效量为150 mg.(70 kg)-1,以此标准折算成大鼠及鹌鹑的用药量，药效学实验取得阳性结果，则狗的有效量可能为6.5 mg.kg-1·d-1,结合预实验结果，以此为家犬的小剂量，它的10、100倍用药量分别为中、大剂量，大剂量组的剂量已超过估算的LD5，原期望能使一些动物死亡。受试3组及对照组连续观察90 d，动物一般行为，体重，血尿常规，脏器系数，病理检查等各项指标在对照组、中、小剂量TP组未见任何异常，大剂量TP组有2例雌性动物心肌少量脂肪浸润及肺淤血，其中1例伴AST异常，但不中断用药20 d 后即恢复正常。由此可见，相对成人用药量的10、100倍剂量给家犬口服90 d，毒性极低，提示茶多酚为一安全药物。大、中、小剂量TP组用药后血清TC水平均进行性降低，提示茶多酚对正常动物血清TC也有降低作用。
, 百拇医药
赵亚男，女，主管药师。
参考文献
1，陈为钧，万圣勤.茶多酚药效研究概况.中草药，1993；24(9)：493
2，柯永胜,曹蘅,徐晓华,等.茶多酚对原发性高血压患者氧自由基和血液流变学的影响.中国中西医结合杂志，1997;17(4):221
3，Ke Yongsheng,Liu Zhaofang,Zhao Zhendong.Effect of Theo-polyphenols(茶多酚) on function of trans-membranous signal system of acute ischemic myocardium in rats.CJIM 1999;5(3):214
4，中华人民共和国卫生部药政局.中药新药研究指南：205
收稿日期：2000-01-03, 百拇医药
单位：赵亚男 柯永胜 郑青山(皖南医学院弋矶山医院，芜湖 241001)；桂常青(药理教研室，芜湖 241001)
关键词：茶多酚；长期毒性；家犬
中国临床药理学与治疗学000112
目的 观察用药90 d及停药2 kw后，茶多酚(TP)对家犬的长期毒性反应。方法 家犬以650、65、6.5 mg.kg-1.d-1 3个剂量分别连续饲服TP 90 d及停药2 kw后，观察动物的一般情况、检查动物的心电图、血尿常规、血脂、血糖、凝血时间、肝肾功能等生化指标。结果 用药组体重增加情况与对照组无显著性差异(P>0.05)；用药前、服药中、停药后家犬的活动情况、毛发、粪便、心电图、血尿常规、各项生化指标均未见异常，用药前后比较无显著性差异(P>0.05)；大、中、小剂量组血清胆固醇水平进行性降低。结论 TP按650 mg.kg-1.d-1饲服90 d对家犬未见明显毒性作用。
, http://www.100md.com
中图分类号 R285.1
Chronic toxicity of tea polyphenols in dogs
ZHAO Ya-Nan KE Yong-Sheng ZHENG Qing-Shan
(Yijishan Hospital)
GUI Chang-Qing
(Department of Pharmacology,Wannan Medical College,Wuhu 241001)
Aim The chronic toxicity of tea polyphenols(TP) in dogs was observed.Methods 18 dogs were randomly divided into high,middle and low dose TP groups and one control group.When TP was given(po) by 650 mg.kg-1.d-1,65 mg.kg-1.d-1,6.5 mg.kg-1.d-1 respectively for 90 d and after TP was stopped for two weeks,the general conditions,ECG,blood routine,urine routine,serum lipids,blood sugar,coagulation time,and hepatic and kidney function were detected respectively.Results These mdices were not different from each other among the 4 groups before,during and after administration of TP.The level of serum total cholesterol was progressively decreased in TP groups.Conclusion TP has no toxic effect on dogs and can decrease the level of serum total cholesterol in normal dogs.
, 百拇医药
Key Words tea polyphenols; chronic poisoning; dogs
茶多酚(tea polyhenols,TP)是从茶叶中提取的多酚类物质，研究表明TP具有抗氧化、抗动脉硬化、抗肿瘤及降血脂等药理作用[1～3]。但TP对家犬的长期毒性反应未见报道。本实验采用TP对家犬连续口服90 d，观察用药期间毒性反应及停药2 wk后的恢复情况，为临床用药安全性提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 动物 杂种家犬18只，体重(11.1±2.06) kg，雌雄不拘，由皖南医学院动物中心提供。经检疫、驱虫、驯饲2 wk后，随机分为4组，分栏饲养。饲养环境为室温(22±2)℃,相对湿度65%～70%，食物为本院动物中心自制颗粒饲料及过滤自来水。
1.2 药物 TP药粉(皖南医学院心血管疾病研究所提供，批号GTP-103-95)纯度为95%,溶于生理盐水中配制成65%、6.5%、0.65%的溶液。
, 百拇医药
1.3 分组与给药方法[4] 正常对照组:饲服生理盐水1 ml.kg-1.d-1；大剂量TP组：饲服65% TP溶液1 ml.kg-1.d-1；中剂量TP组：饲服6.5% TP 溶液1 ml.kg-1.d-1；小剂量TP组：饲服0.65% TP溶液1 ml.kg-1.d-1。用注射器抽取所需的药物或生理盐水后置精饲料中，搅匀后饲服，用药90 d后半数动物处死解剖，余半数动物继续饲养普通食物2 wk。
1.4 一般情况观察 每日观察记录实验前后及停药期间各组动物外观体征、活动度、食量、毛发及粪便形状等，每周称重1次。
1.4.1 检查指标 给药前、给药45 d、90 d检查以下各项项目：(1) 血液学检查：包括血常规、血小板计数(BPC)和凝血时间(CT)等。(2) 血液生化学检查：包括天门冬氨酸氨基转换酶(AST) 、丙氨酸氨基转换酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)、总胆红素(T-BIL)、肌酐(Cr)和总胆固醇(TC)。(3) 尿常规检查。(4) 系统尸检和病理组织检查：每组2～3只动物在90 d处死观察各脏器变化。取心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、甲状腺、睾丸、子宫、脑、前列腺，削去周围组织称重，计算脏器重量系数(重量占体重的百分比)；留取肾上腺、胰腺、十二指肠、回肠、结肠、垂体、前列腺、脑、脊髓、心、脾、胸骨及骨髓、肾、肝、肺、淋巴结、膀胱、子宫、卵巢、胃、甲状腺、胸腺、睾丸、视神经标本，做病理切片，HE染色，观察组织学变化。(5) 停药后观察： 每组2只动物停止用药并继续观察2 wk,检查指标同前。
, 百拇医药
1.5 统计学处理 实验结果以
±s表示，采用t检验和χ2分析进行组间显著性分析。2 结果
2.1 一般情况 大、中、小剂量组家犬连续口服TP 90 d，未见任何异常反应，饮食、粪便、心电图检查均与对照组无异常变化；每周测量动物体重，各组动物均见体重增加，其增加值各组间差异无显著性，结果见表1。
表1 TP对家犬体重的影响(
±s,kg) 组别用药前
用药时间/wk
1
, 百拇医药
2
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
, 百拇医药
对照组
11.5
11.3
11.1
10.7
11.1
11.5
11.4
11.5
11.6
11.8
12.1
, 百拇医药
12.4
12.4
12.5
12.7
(n=5)
s
2.0
2.2
2.0
2.0
2.0
2.3
1.8
, 百拇医药
1.7
1.5
1.3
1.5
1.8
1.9
1.9
1.9
TP大剂量组
10.3
10.5
10.5
, http://www.100md.com
9.8
10.8
10.5
10.5
11.3
11.4
12.0
11.7
12.3
11.9
12.5
12.7
(n=4)
, http://www.100md.com
s
2.5
2.7
2.7
2.5
2.3
2.5
1.6
1.7
1.8
1.9
2.3
1.7
, 百拇医药
1.5
1.4
1.6
TP中剂量组
12.3
12.3
12.5
12.0
12.3
12.9
12.9
13.0
, 百拇医药
13.3
13.5
13.6
13.4
13.6
13.0
13.5
(n=4)
s
1.0
1.3
1.3
1.3
, 百拇医药
1.5
1.4
1.3
0.9
1.2
1.1
0.9
1.2
0.9
1.0
1.4
TP小剂量组
, http://www.100md.com
10.0
10.1
10.2
9.9
10.7
10.1
11.1
1.7
11.9
11.2
11.6
12.1
12.1
, 百拇医药
12.4
12.1
(n=5)
s
1.3
1.7
1.8
1.3
1.7
1.9
2.0
1.8
1.9
, 百拇医药
2.0
1.2
1.1
0.9
0.8
0.5
2.2 血、尿常规、脏器系数变化 各用药组与对照组的各项指标均在正常范围内，见表2、表3。表2 TP对家犬血、尿常规的影响 组别
时间
/d
n
红细胞数
/1012.L-1
, 百拇医药
血红蛋白数
/g.L-1
白细胞数
/109.L-1
白细胞分类%
血小板数
/109.L-1
凝血时间
/min
N
L
E
, 百拇医药
M
NS对照组
0
5
7.3±0.67
125±7
8.0±1.0
7.0±5.3
25.6±3.2
1.0±0.7
1.4±1.9
190±52
1.3±0.2
, 百拇医药
45
5
7.3±0.56
125±7
8.1±0.7
72.0±3.8
27.0±3.8
0.8±0.4
0.6±0.5
179±35
1.3±0.3
90
, 百拇医药 5
7.2±0.67
121±1
8.1±1.2
69.8±2.3
26.4±0.9
1.8±1.3
2.0±2.3
175±27
1.1±0.2
TP大剂量组
0
4
, http://www.100md.com
6.9±1.31
103±19
7.5±1.5
66.4±3.3
31.0±5.1
2.0±0.8
1.3±1.9
129±36
1.1±0.1
45
4
6.9±0.74
, http://www.100md.com
105±20
8.7±1.6
69.5±1.9
26.3±2.4
2.5±1.9
1.8±1.5
121±36
1.1±0.3
90
4
7.0±0.82
108±21
, http://www.100md.com
7.5±1.5
69.5±1.9
28.0±1.6
1.8±0.9
1.0±0.5
127±21
0.9±0.1
TP中剂量组
0
4
7.6±0.87
126±5
, 百拇医药 7.6±1.3
72.5±2.1
24.7±0.9
1.5±1.3
1.3±1.5
144±33
1.3±0.3
45
4
7.5±0.68
124±5
8.1±1.9
, http://www.100md.com 68.5±3.0
27.5±4.7
2.0±1.4
2.0±1.4
161±33
1.1±0.3
90
4
7.8±0.50
125±6
8.0±1.0
71.0±2.6
, 百拇医药 29.2±5.4
1.8±0.9
0.5±0.6
152±21
1.1±0.3
TP小剂量组
0
5
7.5±0.96
121±9
7.4±1.2
71.2±2.3
24.6±1.7
, http://www.100md.com
2.8±1.3
1.4±0.5
180±19
0.9±0.1
45
5
7.5±0.66
122±8
7.1±0.4
71.8±2.9
23.6±1.7
3.0±1.0
, http://www.100md.com
1.6±0.5
168±21
1.1±0.2
90
5
7.6±0.82
123±7
8.1±1.6
1.4±5.8
26.4±5.5
1.4±0.4
0.8±0.4
, http://www.100md.com 179±19
0.9±0.1
表3 TP长期毒性试验动物解剖脏器系数 脏器名称
NMS对照组(n=5)
TP大剂量组(n=4)
TP中剂量组(n=4)
TP小剂量组(n=5)
重量/g
系数/%
重量/g
系数/%
重量/g
, 百拇医药
系数/%
重量/g
系数/%
心
122.0±27.5
0.94±0.15
108.8±16.5
0.86±0.14
141.3±20.2
1.03±0.05
119.0±18.5
0.97±0.14
, 百拇医药
肝
348.0±35.6
2.77±0.57
351.3±48.7
2.74±0.19
333.8±14.9
2.45±0.26
315.0±34.6
2.58±0.23
脾
58.0±14.4
0.54±0.07
, 百拇医药
5.03±8.9
0.39±0.06
76.3±11.1
0.56±0.03
61.0±9.6
0.50±0.06
肺
143.0±33.1
1.12±0.22
190.0±53.5
1.64±0.28
198.8±14.54
, 百拇医药
1.46±0.11
210.0±15.8
1.73±0.15
肾
77.0±13.9
0.61±0.12
70.0±10.8
0.56±0.06
90.0±7.1
0.67±0.10
70.0±7.9
0.58±0.06
, http://www.100md.com
肾上腺
7.0±2.4
0.05±0.02
5.5±1.3
0.04±0.02
5.9±0.8
0.04±0.01
6.7±1.7
0.06±0.02
胸腺
6.4±2.7
0.05±0.02
, 百拇医药
6.3±1.7
0.05±0.02
6.5±0.4
0.05±0.01
7.0±1.6
0.06±0.01
甲状腺
13.9±2.61
0.11±0.02
16.3±2.6
0.13±0.014
17.2±2.7
, http://www.100md.com
0.13±0.03
16.0±3.5
0.13±0.03
睾丸
14.0±2.8
0.16±0.05
11.5±0.1
0.08±0.01
15.5±4.9
0.12±0.04
13.3±3.0
0.11±0.03
, http://www.100md.com
子宫
16.7±4.16±9.0±0.0
0.12±0.03
11.5±2.1
0.09±0.01
17.5±2.1
0.13±0.01
13.0±4.2
0.11±0.05
前列腺
9.0±0.0
0.08±0.01
, 百拇医药
5.0±1.4
0.04±0.014
8.5±2.1
0.06±0.01
6.3±1.53
0.05±0.02
脑
123.6±30.9
0.95±0.14
100.0±24.8
0.81±0.25
148.7±79.6
, 百拇医药
1.08±0.14
127.0±19.24
0.05±0.02
体重/kg
12.8±1.7
12.8±24.8
148.7±79.6
12.2±0.6
2.3 血液生化 用药45 d，大剂量TP组有1条家犬(♀)血清AST升至114 U.L-1,继续给药，第55 d (发现后10 d)血清AST为80U.L-1,第65 d(发现后20 d)血清AST恢复正常(血清AST为29 U.L-1),其他各项指标均在正常范围内，见表4。表4 TP对犬血液生化指标的影响(
±s) 组别, 百拇医药
天数/d
n
AST
/U.L-1
ALT
/U.L-1
ALP
/U.L-1
BUN
/mmol.L-1
TP
, 百拇医药
/g.L-1
ALB
/g.L-1
GLU
/mmol.L-1
T-BIL
/μmol.L-1
Gr
/μmol.L-1
T-CHO
, 百拇医药
/mmol.L-1
NS对照
0
5
21.3±7.6
22.2±10.1
65.4±25.1
4.4±1.5
59.1±10.4
32.9±7.5
4.4±0.8
7.3±7.2
, http://www.100md.com
51.7±7.3
3.6±0.9
45
5
24.6±6.5
24.6±4.5
63.6±20.7
4.6±1.2
57.6±8.8
32.9±3.4
4.2±0.3
5.4±3.9
, http://www.100md.com
48.9±5.1
3.3±0.7
90
5
26.2±6.1
18.8±5.6
61.6±15.21
4.2±0.7
58.9±2.3
32.3±1.3
4.3±0.4
5.9±2.9
, 百拇医药
55.5±6.2
3.6±0.8
TP大剂量
0
4
21.0±9.6
21.8±6.8
57.8±24.2
5.6±0.9
59.4±3.2
28.8±3.4
4.7±0.5
, 百拇医药
7.7±3.9
43.6±10.0
3.7±0.8
45
4
32.3±8.5
23.3±5.9
53.5±23.0
5.9±0.9
59.9±2.5
31.0±3.7
4.6±0.5
, 百拇医药
8.1±4.7
43.3±7.7
2.4±0.6
90
4
25.8±4.+9
23.3±8.3
51.8±16.7
5.3±1.1
57.6±2.8
32.4±2.1
4.5±0.5
, http://www.100md.com
7.7±3.7
44.7±3.3
2.4±0.4
TP中剂量
0
4
23.3±7.0
20.0±6.7
55.3±18.9
4.7±0.9
60.5±7.0
29.8±4.1
, 百拇医药
3.8±0.36
11.8±3.9
41.3±10.9
4.3±1.1
45
4
22.3±3.5
21.8±4.6
69.0±13.6
4.9±1.0
56.3±5.7
30.9±3.4
, 百拇医药
4.1±0.2
12.3±4.9
40.4±5.6
3.2±0.3
90
4
23.5±4.0
24.5±4.7
72.0±12.0
4.9±0.9
57.3±5.7
31.5±1.7
, 百拇医药
4.3±0.6
17.3±5.7
41.7±8.1
2.7±0.4
TP小剂量
0
5
15.2±11.5
22.8±5.7
60.6±12.8
4.1±1.1
61.4±5.3
, 百拇医药
30.0±3.5
4.2±0.6
4.4±1.2
48.9±9.0
4.3±0.8
45
5
23.2±4.9
23.0±4.1
60.2±14.0
4.4±0.9
56.9±6.8
, 百拇医药
29.2±3.8
4.5±0.5
5.4±2.7
45.4±5.2
2.9±1.3
90
5
24.2±3.1
21.0±2.8
61.0±8.9
4.0±0.6
59.2±5.4
, 百拇医药
30.5±3.0
4.8±0.6
7.3±3.6
46.6±4.9
21.6±0.4
2.4 病理组织学检查 4组动物主要脏器无明显变性坏死，结构无破坏；大剂量TP组动物小肠绒毛间质中慢性炎性细胞浸润较多，对照组亦有此现象，可能与喂养过程中致慢性肠炎有关；2例雌性动物心肌间质中有少量脂肪浸润，可能是该动物肥胖，不是病变的关键；大剂量TP组动物肺部淤血现象重于其他组，可能与处死动物方式有关。
2.5 停药后检查 停药2 wk，动物活动、饮食正常，各项生化检验指标与停药时无显著性变化，见表5，表6。表5 TP用药90 d、停药2 wk后家犬血、尿常规的变化 组别
, http://www.100md.com
n
红细胞数
/1012.L-1
血红蛋白数
/g.L-1
白细胞数
/109.L-1
N
/%
L
/%
, http://www.100md.com
E
/%
M
/%
血小板数
/109.L-1
凝血时间
/min
NS对照组
4
8.2
130
8.2
, http://www.100md.com
73
27
185
1
5
7.2
120
7.1
68
30
1
1
191
1
, 百拇医药
TP大剂量组
8
7.6
120
9.6
65
30
2
3
145
1
9
7.0
120
, http://www.100md.com
6.6
72
27
1
155
1
TP中剂量组
12
7.3
120
6.8
68
31
, 百拇医药 1
154
1
13
8.2
120
9.0
72
36
1
1
145
1
TP小剂量组
, http://www.100md.com
17
8.4
130
8.0
80
19
1
180
1
18
6.6
110
7.2
72
, http://www.100md.com
27
1
150
1
表6 TP用药90d、停药2wk后家犬血液化指标的影响 组别
n
AST
/U.L-1
ALT
/U.L-1
ALP
/U.L-1
, http://www.100md.com
BUN
/mmo.L-1
TP
/g.L-1
ALB
/g.L-1
GLU
/mmo.L-1
T-BIL
/μmol.L-1
, 百拇医药
Cr
/μmol.L-1
T-CHO
/mmo.L-1
NS对照组
4
27
21
30
4.2
59
32
, 百拇医药
4.1
8.0
57.2
4.7
5
23
16
70
4.5
61
33
5.0
6.2
, 百拇医药 60.1
3.2
TP大剂量组
8
26
17
60
4.4
60
32
5.1
9.4
44.3
, 百拇医药 2.6
9
32
29
43
5.6
62
34
4.2
7.0
52.1
2.9
TP中剂量组
12
, http://www.100md.com
23
29
72
5.1
58
29
4.1
24.0
43.5
3.0
13
17
21
, 百拇医药 60
5.3
59
32
4.1
17.0
32.5
3.3
TP小剂量组
17
20
31
69
, http://www.100md.com 3.1
50
26
4.8
10.1
39.2
2.9
18
24
19
57
4.2
62
34
, http://www.100md.com
3.9
7.2
54.1
3.4
3 讨论
小鼠口服TP的LD1及LD5分别为0.379、0.478 g.kg-1,按动物系数折算狗的LD1及LD5大致为94.7 mg.kg-1、119.5 mg.kg-1，该药临床小范围试用有效量为150 mg.(70 kg)-1,以此标准折算成大鼠及鹌鹑的用药量，药效学实验取得阳性结果，则狗的有效量可能为6.5 mg.kg-1·d-1,结合预实验结果，以此为家犬的小剂量，它的10、100倍用药量分别为中、大剂量，大剂量组的剂量已超过估算的LD5，原期望能使一些动物死亡。受试3组及对照组连续观察90 d，动物一般行为，体重，血尿常规，脏器系数，病理检查等各项指标在对照组、中、小剂量TP组未见任何异常，大剂量TP组有2例雌性动物心肌少量脂肪浸润及肺淤血，其中1例伴AST异常，但不中断用药20 d 后即恢复正常。由此可见，相对成人用药量的10、100倍剂量给家犬口服90 d，毒性极低，提示茶多酚为一安全药物。大、中、小剂量TP组用药后血清TC水平均进行性降低，提示茶多酚对正常动物血清TC也有降低作用。
, 百拇医药
赵亚男，女，主管药师。
参考文献
1，陈为钧，万圣勤.茶多酚药效研究概况.中草药，1993；24(9)：493
2，柯永胜,曹蘅,徐晓华,等.茶多酚对原发性高血压患者氧自由基和血液流变学的影响.中国中西医结合杂志，1997;17(4):221
3，Ke Yongsheng,Liu Zhaofang,Zhao Zhendong.Effect of Theo-polyphenols(茶多酚) on function of trans-membranous signal system of acute ischemic myocardium in rats.CJIM 1999;5(3):214
4，中华人民共和国卫生部药政局.中药新药研究指南：205
收稿日期：2000-01-03, 百拇医药