补肾方药对地塞米松所致实验性骨质疏松大鼠卵巢功能的影响
作者：安胜军 李恩 赵京山
单位：安胜军(河北医科大学中西医结合基础理论研究室(石家庄050017))；李恩(河北医科大学中西医结合基础理论研究室(石家庄050017))；赵京山(河北医科大学中西医结合基础理论研究室(石家庄050017))
关键词：补肾中药；地塞米松；骨质疏松；卵巢功能
中国中西医结合杂志000117 内容提要 目的：探讨补肾中药对地塞米松(DXM)所致实验性骨质疏松(OP)大鼠卵巢功能的影响。方法：采用放射免疫分析方法对正常对照组、病理对照组、中药治疗组大鼠生长激素(GH)、黄体生成素(LH)、卵胞生成素(FSH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)和泌乳素(PRL)的水平进行比较。并对三组大鼠卵巢、子宫分别称湿重和进行组织形态学观察。结果：病理对照组与正常对照组大鼠比较GH、LH、FSH、E2和P的水平明显降低(P<0.05)，子宫和卵巢重量减轻(P<0.05)。中药治疗组与病理对照组相比GH、LH、FSH、E2和P的水平显著增高(P<0.05)，子宫和卵巢重量增加(P<0.05)。各组间T和PRL无显著性变化(P>0.05)。组织形态学观察可见补肾中药能明显改善病理状态下大鼠卵巢和子宫的形态结构。结论：补肾中药能提高大鼠体内GH、LH、FSH、E2和P的水平，使子宫、卵巢重量增加，组织形态改善。说明补肾中药对DXM所致实验性骨质疏松大鼠有治疗作用。
, 百拇医药
Effect of Kidney-Replenishing Herbs on Ovarian Function of Dexamethasone-Induced Osteoporosis in Rats
AN Shengjun, LI En, ZHAO Jingshan
( Department of TCM-WM Basic Theory, Hebei Medical University, Shijiazhuang (050017))
Objective: To investigate the effect of Kidney-replenishing herbs (KRH) on ovarian function of experimental rats with dexamethasone-induced osteoporosis (OP). Methods: Radioimmunoassay was used to analyse blood level of growth hormone (GH), luteinizing hormone (LH), follicle-stimulating hormone (FSH), estradiol (E2), progesterone (P), testosterone (T) and prolactin (PRL) of animals and data of three groups, the normal control group, the pathologic control group (non-treated OP model) and the treated group (model rats treated with KRH) were compared. Weight and histomorphological features of ovary and uterus of the rats were also observed. Results: As compared with the normal control group, levels of GH, LH, FSH, E2 and P in the pathologic control group were significantly lowered (P<0.05), and the weight of ovary and uterus decreased (P<0.05). In comparison of the treated group and the pathologic group, GH, LH, FSH, E2 and P levels were significantly higher and weight of ovary and uterus heavier in the treated group (P<0.05). No obvious changes occurred in T and PRL levels. KRH showed markedly improving effect on the ovarian and uterine morphological construction of rats. Conclusions: KRH could elevate the level of GH, LH, FSH, E2 and P, increase the weight and improve the histomorphologic features of ovary and uterus in OP rats, it demonstrated that KRH has therapeutic effect in treating dexamethasone-induced OP rats.
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Key words Kidney-replenishing herbs, dexamethasone, osteoporosis, function of ovary
临床研究证实，雌激素缺乏是绝经后骨质疏松发生发展的主要因素(1)，实验表明：切除子宫及一侧卵巢后血清雌二醇(E2)水平下降，引起骨钙素(BGP)上升，骨密度(BMD)下降，发生骨质疏松(2，3)。观察发现，绝经后妇女骨质疏松发病率可高达25%～50%，并随年龄增大发病率增高，绝经20年以上者可达53.62%～57.89%，平均为56.76%(4)。骨质疏松的最大危害是发生骨折，如髋骨骨折的发生率为17%～33%(5)，因此骨质疏松的防治研究已成为中老年人保健的重要课题。本实验用地塞米松(DXM)造成雌性大鼠骨质疏松模型，根据传统医学肾主骨、主生殖功能理论，运用补肾方药(熟地、山茱萸、山药、茯苓、淫羊藿等)观察卵巢功能的变化，通过中药对下丘脑-垂体—卵巢功能轴的调节，改善卵巢功能，提高体内雌激素的水平，进一步探讨补肾中药对绝经后骨质疏松的治疗机制，为绝经后骨质疏松的中药治疗提供可靠的理论依据。
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材料和方法
1 动物造模及分组 选用3月龄健康雌性SD大鼠60只，体重180～200g(河北省实验动物中心提供)。将大鼠分为3组：正常对照组，病理对照组，中药治疗组，每组20只，分笼喂养。模型制造：病理对照组和中药治疗组每周两次肌肉注射DXM 0.1mg/100g。5周后实验性骨质疏松病理模型造成。
2 中药制剂 补肾中药——抗骨松冲剂(熟地16g 山茱萸8g 山药8g 淫羊藿16g 茯苓6g 菟丝子8g等)浓缩膏剂(由河北省邯郸制药厂生产，我室监制)，相当于生药浓度1.6g/ml。
3 给药方法 DXM为市售针剂，2mg/ml(仙居制药股份有限公司生产，批号：950304)。为准确用量，用前生理盐水稀释4倍。病理对照组继续肌肉注射DXM每周两次；中药治疗组除继续肌肉注射DXM每周两次外，每日灌胃中药1次，5ml/kg，给药时间为8周。于给药第8周每日进行阴道涂片检查动物性周期，选用间情期的大鼠用于实验，8周后股动脉取血处死动物。
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4 观察指标及方法
4.1 激素测定 观察大鼠血清中的生长激素(GH)、黄体生成素(LH)、卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)和泌乳素(PRL)等激素水平的变化，对卵巢、子宫称湿重并观察二者的形态学变化。激素测定：放射免疫试剂盒均由中国医学科学院核医学技术中心提供，根据试剂盒说明书采用放射免疫法(6)测定大鼠血清激素水平。
4.2 组织形态学观察：处死动物，无菌条件下取双侧卵巢及子宫，称湿重后分别用4%甲醛固定，常规石蜡包埋，6μm切片，HE染色，光镜观察。
结 果
1 补肾中药对DXM所致实验性骨质疏松大鼠生殖激素的影响 见表1。病理对照组GH、LH、FSH、E2和P的水平与正常对照组相比明显降低(P<0.05)，中药治疗组各激素的水平与病理对照组相比显著增高(P<0.05)，而与正常对照组无显著性差异(P>0.05)，说明补肾中药能够使病理状态下的卵巢功能恢复至接近正常。
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表1 各组生殖激素测定结果 (
±s) 组 别
鼠数
GH(ng/ml)
FSH
LH
E2(pg/ml)
P
T
PRL
(mIU/ml)
(ng/ml)
, http://www.100md.com
正常对照
20
4.65±1.02*
22.15±6.11*
24.83±5.89*
130.66±22.78*
10.36±1.42*
0.12±1.93
12.11±0.96
病理对照
, http://www.100md.com 19
2.52±0.76
12.26±2.13
13.62±2.96
70.72±10.12
6.89±1.24
0.86±0.96
10.81±6.23
中药治疗
20
4.53±1.03*
20.86±5.83*
, http://www.100md.com
22.33±4.83*
128.23±21.71**
9.96±1.25*
0.09±1.67
11.77±5.78
注：与病理对照组比较，*P<0.05，**P<0.01 2 补肾中药对DXM所致实验性骨疏松大鼠卵巢和子宫湿重的影响 见表2。病理对照组卵巢和子宫湿重与正常对照组相比明显减轻(P<0.05)；中药治疗组卵巢和子宫湿重与病理对照组相比显著增加(P<0.05)。
表2 各组大鼠体重、卵巢和子宫湿重的比较 (g，±s) 组 别
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鼠数
体重
卵巢
子宫
治疗前
治疗后
正常对照
20
192.00±1.12
253.00±7.27
0.20±0.02*
0.48±0.11*
, http://www.100md.com
病理对照
19
198.00±1.34
210.00±7.59
0.14±0.01
0.35±0.04
中药治疗
20
201.00±1.14
238.00±7.71*
0.19±0.02*
, http://www.100md.com 0.51±0.04*
注：与病理对照组比较，*P<0.05 3 补肾中药对DXM所致实验性骨质疏松大鼠卵巢和子宫形态学的影响 正常对照组卵巢的光镜形态(20×10)：可见原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡，黄体数目较多。有的可见新鲜血黄体，间质少，间质腺少见。病理对照组卵巢的光镜形态(20×10)：可见原始卵泡，未见初级卵泡和次级卵泡，闭锁卵泡较多，可见较多间质腺及陈旧黄体。中药治疗组卵巢的光镜形态(20×10)：可见原始卵泡及大量初级卵泡、次级卵泡和接近成熟的卵泡，黄体较多，间质少，间质腺少见。
正常对照组子宫的光镜形态(20×10)：粘膜厚，占子宫壁的2/3，上皮以分泌细胞为主，胞质中有大量分泌泡，固有层有大量子宫腺，腺腔大，腔内有分泌物，结缔组织疏松，其中有丰富的毛细血管及小动、静脉。病理对照组子宫光镜形态(20×10)：粘膜薄， 占子宫壁的1/3， 上皮为柱状细胞为主，胞质中分泌泡少，固有层结缔组织分布广泛，纤维成分较多，子宫腺少，腺腔小。中药治疗组子宫的光镜形态(20×10)：粘膜厚，占子宫壁的1/3～1/2，上皮单层柱状，分泌细胞多，固有层结缔组织疏松，子宫腺多、长，血管丰富。综上结果可以看出，经过补肾中药治疗后，中药治疗组与病理对照组相比，雌激素水平显著增高，卵巢、子宫重量增加，形态学观察显著改善(图略)。
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讨 论
资料表明，DXM通过两种方式影响性腺功能(7)，即控制垂体促性腺激素的分泌直接影响卵巢功能。体外细胞培养显示：抑制卵泡刺激激素诱导的雌激素的产生和减少黄体生成素释放激素引起的黄体生成素的分泌(8)；另一方面DXM尚可通过抑制促肾上腺皮质激素(ACTH)使肾上腺皮质萎缩，使肾上腺产生雄烷二酮的量减少，使循环血中雄烷二酮和雌二醇水平降低。雌激素缺乏是诱发绝经后OP的主要原因(9)，因此，本实验用DXM造成大鼠骨质疏松模型。
健康成年雌性大鼠的动情周期为4或5天，在不同的时期如动情期和间情期其生殖内分泌有很大差异，因此本实验动物处死日均选择在同一时相即间情期，从实验结果可以看出，病理对照组及中药治疗组生殖激素有显著差异，说明补肾中药有提高DXM所致实验性骨质疏松大鼠卵巢功能的作用，通过本实验证明此种作用是通过改善下丘脑-垂体-卵巢轴功能实现的。
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1 补肾中药有影响垂体促性腺功能的作用。卵巢的周期性变化受垂体前叶的控制。GH是成人垂体含量最多的激素约5～10mg，免疫组化证实人卵巢内有GH存在，这与卵巢本身能合成该激素有关。同时在卵巢颗粒细胞，卵母细胞及黄体细胞上均有GH受体，GH对青春期后卵巢具有多种作用：(1)增加FSH诱导的P合成，(2)增加FSH诱导的颗粒细胞上绒毛膜促性腺激素/卵胞生成素(hcG/LH)受体数量，而对受体的亲合力无影响，(3)对人卵巢颗粒细胞的E2合成有增强作用。FSH是促进卵巢颗粒细胞功能性分化及卵泡发育成熟的重要因子，卵巢颗粒细胞功能性分化的重要指标有E2、P、抑制素等卵泡激素的分泌及芳香化酶活性等，LH在卵巢周期中期能促使已经成熟的卵泡排卵，卵的排出和LH的作用使排卵后的卵泡变成黄体，排卵后FSH和LH皆迅速下降，但仍维持一定的低水平，仍足以促使黄体发育成熟，FSH和LH二者协同作用的结果使：(1)卵泡分泌雌激素，(2)排卵后的卵泡变成黄体，(3)促使黄体继续发育成熟，(4)促使成熟的黄体分泌雌激素和孕激素。我们的实验结果表明，中药治疗组大鼠体内血清GH，FSH、LH的浓度明显高于病理对照组，接近正常对照组。说明补肾中药可促进垂体促性腺激素的分泌，从而使卵巢、子宫重量增加，形态学发生改变，提高雌激素水平，达到治疗骨质疏松的目的。
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2 补肾中药直接影响卵巢生殖激素的代谢和补肾中药本身具有拟雌激素样作用。实验结果表明，中药治疗组与病理对照组相比，E2、P显著增高，接近正常对照组，说明补肾中药具有提高DXM所至实验性骨质疏松大鼠雌激素水平的作用，文献报道，补肾中药对多囊卵巢小鼠有明显的类雌激素样作用(10)。能使切除卵巢大鼠体内E2水平增高，子宫、卵巢重量增加，所以补肾中药可能通过两种途径提高实验大鼠体内的雌激素水平：(1)通过调理下丘脑-垂体-卵巢轴系统的功能，使卵巢功能恢复正常状态；(2)补肾中药本身具有拟雌激素样作用，由此可以看出，补肾中药对卵巢功能的作用不是单一的，而是多方面的多位点的集合作用。
3 补肾中药对DXM所致实验性骨质疏松的治疗机制。组织培养发现，大量雌激素阻断甲状旁腺素(PTH)的骨吸收作用，同时加强降钙素的分泌，抑制骨溶解。目前，国外给绝经后妇女适时补充雌激素，骨质疏松发病率明显下降。但采用终身雌激素替代疗法会有很大的副作用，我们根据中医肾主生殖，主骨生髓的理论，采用补肾中药治疗原发性骨质疏松取得满意的效果，实验表明，补肾中药对DXM所致实验性骨质疏松大鼠的下丘脑-垂体-卵巢轴具有多源性作用，提高大鼠体内的雌激素水平，具有拟雌激素样作用。补肾中药是调动作用，调节作用，而无毒副作用，对骨质疏松的防治提供了有效合理的途径。
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国家自然科学基金资助课题(No.39422001)
参 考 文 献
1，刘忠厚主编.骨质疏松症.北京：化学工业出版社，1992∶264—268.
2，许传芳.洪 颖，顾莜英，等.骨钙素RIA在妇科几种疾病的初步探讨.放射免疫杂志1993； 6(8)∶283—285.
3，Martin MC, Block JE, Sanchez SD, et al. Menopause without synptems. The endocrinology of menopause among iuralmayan inaians. Am J Obsiet Gynecol1993；168∶1839—1842.
4，李 恩，闫淑云，谷丽敏，等.原发性骨质疏松发病的相关因素.中国骨质疏松杂志1997；3(2)∶1—3.
, 百拇医药
5，刘忠厚.骨骼生长衰老规律和原发性骨质疏松症预诊的研究.中国骨质疏松杂志1995；1(1)∶1—7.
6，李振甲.激素的放射免疫分析.北京：科学技术出版社，1985∶10—13.
7，Lulon JP. Reversible gonadotrip in deficiency in male Cushing′s disease. J Clin Endocrinol Metab1977；45∶488—491.
8，Sakakura M. Mhibition of luteinizing hormone secertion induced by synthetic LRH by long-term treatment with lucoco-rticoids in human subjects. J Clin Endocrinoi Melab1975；40∶774—778.
9，Crilly RG. Hormonal status in normal. osteoporotic and cortic osteroid-treated postm enopausal women. J R Sco Med1989;71∶733—737.
10，俞 瑾，陈红英，王秋芝，等.肾主生殖的实验研究.中西医结合杂志1989;9(9)∶548—551.
收稿：1998-05-29
修回：1998-09-25, http://www.100md.com
单位：安胜军(河北医科大学中西医结合基础理论研究室(石家庄050017))；李恩(河北医科大学中西医结合基础理论研究室(石家庄050017))；赵京山(河北医科大学中西医结合基础理论研究室(石家庄050017))
关键词：补肾中药；地塞米松；骨质疏松；卵巢功能
中国中西医结合杂志000117 内容提要 目的：探讨补肾中药对地塞米松(DXM)所致实验性骨质疏松(OP)大鼠卵巢功能的影响。方法：采用放射免疫分析方法对正常对照组、病理对照组、中药治疗组大鼠生长激素(GH)、黄体生成素(LH)、卵胞生成素(FSH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)和泌乳素(PRL)的水平进行比较。并对三组大鼠卵巢、子宫分别称湿重和进行组织形态学观察。结果：病理对照组与正常对照组大鼠比较GH、LH、FSH、E2和P的水平明显降低(P<0.05)，子宫和卵巢重量减轻(P<0.05)。中药治疗组与病理对照组相比GH、LH、FSH、E2和P的水平显著增高(P<0.05)，子宫和卵巢重量增加(P<0.05)。各组间T和PRL无显著性变化(P>0.05)。组织形态学观察可见补肾中药能明显改善病理状态下大鼠卵巢和子宫的形态结构。结论：补肾中药能提高大鼠体内GH、LH、FSH、E2和P的水平，使子宫、卵巢重量增加，组织形态改善。说明补肾中药对DXM所致实验性骨质疏松大鼠有治疗作用。
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Effect of Kidney-Replenishing Herbs on Ovarian Function of Dexamethasone-Induced Osteoporosis in Rats
AN Shengjun, LI En, ZHAO Jingshan
( Department of TCM-WM Basic Theory, Hebei Medical University, Shijiazhuang (050017))
Objective: To investigate the effect of Kidney-replenishing herbs (KRH) on ovarian function of experimental rats with dexamethasone-induced osteoporosis (OP). Methods: Radioimmunoassay was used to analyse blood level of growth hormone (GH), luteinizing hormone (LH), follicle-stimulating hormone (FSH), estradiol (E2), progesterone (P), testosterone (T) and prolactin (PRL) of animals and data of three groups, the normal control group, the pathologic control group (non-treated OP model) and the treated group (model rats treated with KRH) were compared. Weight and histomorphological features of ovary and uterus of the rats were also observed. Results: As compared with the normal control group, levels of GH, LH, FSH, E2 and P in the pathologic control group were significantly lowered (P<0.05), and the weight of ovary and uterus decreased (P<0.05). In comparison of the treated group and the pathologic group, GH, LH, FSH, E2 and P levels were significantly higher and weight of ovary and uterus heavier in the treated group (P<0.05). No obvious changes occurred in T and PRL levels. KRH showed markedly improving effect on the ovarian and uterine morphological construction of rats. Conclusions: KRH could elevate the level of GH, LH, FSH, E2 and P, increase the weight and improve the histomorphologic features of ovary and uterus in OP rats, it demonstrated that KRH has therapeutic effect in treating dexamethasone-induced OP rats.
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Key words Kidney-replenishing herbs, dexamethasone, osteoporosis, function of ovary
临床研究证实，雌激素缺乏是绝经后骨质疏松发生发展的主要因素(1)，实验表明：切除子宫及一侧卵巢后血清雌二醇(E2)水平下降，引起骨钙素(BGP)上升，骨密度(BMD)下降，发生骨质疏松(2，3)。观察发现，绝经后妇女骨质疏松发病率可高达25%～50%，并随年龄增大发病率增高，绝经20年以上者可达53.62%～57.89%，平均为56.76%(4)。骨质疏松的最大危害是发生骨折，如髋骨骨折的发生率为17%～33%(5)，因此骨质疏松的防治研究已成为中老年人保健的重要课题。本实验用地塞米松(DXM)造成雌性大鼠骨质疏松模型，根据传统医学肾主骨、主生殖功能理论，运用补肾方药(熟地、山茱萸、山药、茯苓、淫羊藿等)观察卵巢功能的变化，通过中药对下丘脑-垂体—卵巢功能轴的调节，改善卵巢功能，提高体内雌激素的水平，进一步探讨补肾中药对绝经后骨质疏松的治疗机制，为绝经后骨质疏松的中药治疗提供可靠的理论依据。
, 百拇医药
材料和方法
1 动物造模及分组 选用3月龄健康雌性SD大鼠60只，体重180～200g(河北省实验动物中心提供)。将大鼠分为3组：正常对照组，病理对照组，中药治疗组，每组20只，分笼喂养。模型制造：病理对照组和中药治疗组每周两次肌肉注射DXM 0.1mg/100g。5周后实验性骨质疏松病理模型造成。
2 中药制剂 补肾中药——抗骨松冲剂(熟地16g 山茱萸8g 山药8g 淫羊藿16g 茯苓6g 菟丝子8g等)浓缩膏剂(由河北省邯郸制药厂生产，我室监制)，相当于生药浓度1.6g/ml。
3 给药方法 DXM为市售针剂，2mg/ml(仙居制药股份有限公司生产，批号：950304)。为准确用量，用前生理盐水稀释4倍。病理对照组继续肌肉注射DXM每周两次；中药治疗组除继续肌肉注射DXM每周两次外，每日灌胃中药1次，5ml/kg，给药时间为8周。于给药第8周每日进行阴道涂片检查动物性周期，选用间情期的大鼠用于实验，8周后股动脉取血处死动物。
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4 观察指标及方法
4.1 激素测定 观察大鼠血清中的生长激素(GH)、黄体生成素(LH)、卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)和泌乳素(PRL)等激素水平的变化，对卵巢、子宫称湿重并观察二者的形态学变化。激素测定：放射免疫试剂盒均由中国医学科学院核医学技术中心提供，根据试剂盒说明书采用放射免疫法(6)测定大鼠血清激素水平。
4.2 组织形态学观察：处死动物，无菌条件下取双侧卵巢及子宫，称湿重后分别用4%甲醛固定，常规石蜡包埋，6μm切片，HE染色，光镜观察。
结 果
1 补肾中药对DXM所致实验性骨质疏松大鼠生殖激素的影响 见表1。病理对照组GH、LH、FSH、E2和P的水平与正常对照组相比明显降低(P<0.05)，中药治疗组各激素的水平与病理对照组相比显著增高(P<0.05)，而与正常对照组无显著性差异(P>0.05)，说明补肾中药能够使病理状态下的卵巢功能恢复至接近正常。
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表1 各组生殖激素测定结果 (
±s) 组 别鼠数
GH(ng/ml)
FSH
LH
E2(pg/ml)
P
T
PRL
(mIU/ml)
(ng/ml)
, http://www.100md.com
正常对照
20
4.65±1.02*
22.15±6.11*
24.83±5.89*
130.66±22.78*
10.36±1.42*
0.12±1.93
12.11±0.96
病理对照
, http://www.100md.com 19
2.52±0.76
12.26±2.13
13.62±2.96
70.72±10.12
6.89±1.24
0.86±0.96
10.81±6.23
中药治疗
20
4.53±1.03*
20.86±5.83*
, http://www.100md.com
22.33±4.83*
128.23±21.71**
9.96±1.25*
0.09±1.67
11.77±5.78
注：与病理对照组比较，*P<0.05，**P<0.01 2 补肾中药对DXM所致实验性骨疏松大鼠卵巢和子宫湿重的影响 见表2。病理对照组卵巢和子宫湿重与正常对照组相比明显减轻(P<0.05)；中药治疗组卵巢和子宫湿重与病理对照组相比显著增加(P<0.05)。
表2 各组大鼠体重、卵巢和子宫湿重的比较 (g，
±s) 组 别, 百拇医药
鼠数
体重
卵巢
子宫
治疗前
治疗后
正常对照
20
192.00±1.12
253.00±7.27
0.20±0.02*
0.48±0.11*
, http://www.100md.com
病理对照
19
198.00±1.34
210.00±7.59
0.14±0.01
0.35±0.04
中药治疗
20
201.00±1.14
238.00±7.71*
0.19±0.02*
, http://www.100md.com 0.51±0.04*
注：与病理对照组比较，*P<0.05 3 补肾中药对DXM所致实验性骨质疏松大鼠卵巢和子宫形态学的影响 正常对照组卵巢的光镜形态(20×10)：可见原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡，黄体数目较多。有的可见新鲜血黄体，间质少，间质腺少见。病理对照组卵巢的光镜形态(20×10)：可见原始卵泡，未见初级卵泡和次级卵泡，闭锁卵泡较多，可见较多间质腺及陈旧黄体。中药治疗组卵巢的光镜形态(20×10)：可见原始卵泡及大量初级卵泡、次级卵泡和接近成熟的卵泡，黄体较多，间质少，间质腺少见。
正常对照组子宫的光镜形态(20×10)：粘膜厚，占子宫壁的2/3，上皮以分泌细胞为主，胞质中有大量分泌泡，固有层有大量子宫腺，腺腔大，腔内有分泌物，结缔组织疏松，其中有丰富的毛细血管及小动、静脉。病理对照组子宫光镜形态(20×10)：粘膜薄， 占子宫壁的1/3， 上皮为柱状细胞为主，胞质中分泌泡少，固有层结缔组织分布广泛，纤维成分较多，子宫腺少，腺腔小。中药治疗组子宫的光镜形态(20×10)：粘膜厚，占子宫壁的1/3～1/2，上皮单层柱状，分泌细胞多，固有层结缔组织疏松，子宫腺多、长，血管丰富。综上结果可以看出，经过补肾中药治疗后，中药治疗组与病理对照组相比，雌激素水平显著增高，卵巢、子宫重量增加，形态学观察显著改善(图略)。
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讨 论
资料表明，DXM通过两种方式影响性腺功能(7)，即控制垂体促性腺激素的分泌直接影响卵巢功能。体外细胞培养显示：抑制卵泡刺激激素诱导的雌激素的产生和减少黄体生成素释放激素引起的黄体生成素的分泌(8)；另一方面DXM尚可通过抑制促肾上腺皮质激素(ACTH)使肾上腺皮质萎缩，使肾上腺产生雄烷二酮的量减少，使循环血中雄烷二酮和雌二醇水平降低。雌激素缺乏是诱发绝经后OP的主要原因(9)，因此，本实验用DXM造成大鼠骨质疏松模型。
健康成年雌性大鼠的动情周期为4或5天，在不同的时期如动情期和间情期其生殖内分泌有很大差异，因此本实验动物处死日均选择在同一时相即间情期，从实验结果可以看出，病理对照组及中药治疗组生殖激素有显著差异，说明补肾中药有提高DXM所致实验性骨质疏松大鼠卵巢功能的作用，通过本实验证明此种作用是通过改善下丘脑-垂体-卵巢轴功能实现的。
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1 补肾中药有影响垂体促性腺功能的作用。卵巢的周期性变化受垂体前叶的控制。GH是成人垂体含量最多的激素约5～10mg，免疫组化证实人卵巢内有GH存在，这与卵巢本身能合成该激素有关。同时在卵巢颗粒细胞，卵母细胞及黄体细胞上均有GH受体，GH对青春期后卵巢具有多种作用：(1)增加FSH诱导的P合成，(2)增加FSH诱导的颗粒细胞上绒毛膜促性腺激素/卵胞生成素(hcG/LH)受体数量，而对受体的亲合力无影响，(3)对人卵巢颗粒细胞的E2合成有增强作用。FSH是促进卵巢颗粒细胞功能性分化及卵泡发育成熟的重要因子，卵巢颗粒细胞功能性分化的重要指标有E2、P、抑制素等卵泡激素的分泌及芳香化酶活性等，LH在卵巢周期中期能促使已经成熟的卵泡排卵，卵的排出和LH的作用使排卵后的卵泡变成黄体，排卵后FSH和LH皆迅速下降，但仍维持一定的低水平，仍足以促使黄体发育成熟，FSH和LH二者协同作用的结果使：(1)卵泡分泌雌激素，(2)排卵后的卵泡变成黄体，(3)促使黄体继续发育成熟，(4)促使成熟的黄体分泌雌激素和孕激素。我们的实验结果表明，中药治疗组大鼠体内血清GH，FSH、LH的浓度明显高于病理对照组，接近正常对照组。说明补肾中药可促进垂体促性腺激素的分泌，从而使卵巢、子宫重量增加，形态学发生改变，提高雌激素水平，达到治疗骨质疏松的目的。
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2 补肾中药直接影响卵巢生殖激素的代谢和补肾中药本身具有拟雌激素样作用。实验结果表明，中药治疗组与病理对照组相比，E2、P显著增高，接近正常对照组，说明补肾中药具有提高DXM所至实验性骨质疏松大鼠雌激素水平的作用，文献报道，补肾中药对多囊卵巢小鼠有明显的类雌激素样作用(10)。能使切除卵巢大鼠体内E2水平增高，子宫、卵巢重量增加，所以补肾中药可能通过两种途径提高实验大鼠体内的雌激素水平：(1)通过调理下丘脑-垂体-卵巢轴系统的功能，使卵巢功能恢复正常状态；(2)补肾中药本身具有拟雌激素样作用，由此可以看出，补肾中药对卵巢功能的作用不是单一的，而是多方面的多位点的集合作用。
3 补肾中药对DXM所致实验性骨质疏松的治疗机制。组织培养发现，大量雌激素阻断甲状旁腺素(PTH)的骨吸收作用，同时加强降钙素的分泌，抑制骨溶解。目前，国外给绝经后妇女适时补充雌激素，骨质疏松发病率明显下降。但采用终身雌激素替代疗法会有很大的副作用，我们根据中医肾主生殖，主骨生髓的理论，采用补肾中药治疗原发性骨质疏松取得满意的效果，实验表明，补肾中药对DXM所致实验性骨质疏松大鼠的下丘脑-垂体-卵巢轴具有多源性作用，提高大鼠体内的雌激素水平，具有拟雌激素样作用。补肾中药是调动作用，调节作用，而无毒副作用，对骨质疏松的防治提供了有效合理的途径。
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国家自然科学基金资助课题(No.39422001)
参 考 文 献
1，刘忠厚主编.骨质疏松症.北京：化学工业出版社，1992∶264—268.
2，许传芳.洪 颖，顾莜英，等.骨钙素RIA在妇科几种疾病的初步探讨.放射免疫杂志1993； 6(8)∶283—285.
3，Martin MC, Block JE, Sanchez SD, et al. Menopause without synptems. The endocrinology of menopause among iuralmayan inaians. Am J Obsiet Gynecol1993；168∶1839—1842.
4，李 恩，闫淑云，谷丽敏，等.原发性骨质疏松发病的相关因素.中国骨质疏松杂志1997；3(2)∶1—3.
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5，刘忠厚.骨骼生长衰老规律和原发性骨质疏松症预诊的研究.中国骨质疏松杂志1995；1(1)∶1—7.
6，李振甲.激素的放射免疫分析.北京：科学技术出版社，1985∶10—13.
7，Lulon JP. Reversible gonadotrip in deficiency in male Cushing′s disease. J Clin Endocrinol Metab1977；45∶488—491.
8，Sakakura M. Mhibition of luteinizing hormone secertion induced by synthetic LRH by long-term treatment with lucoco-rticoids in human subjects. J Clin Endocrinoi Melab1975；40∶774—778.
9，Crilly RG. Hormonal status in normal. osteoporotic and cortic osteroid-treated postm enopausal women. J R Sco Med1989;71∶733—737.
10，俞 瑾，陈红英，王秋芝，等.肾主生殖的实验研究.中西医结合杂志1989;9(9)∶548—551.
收稿：1998-05-29
修回：1998-09-25, http://www.100md.com