不同透析膜对透析患者血小板功能的影响
作者：曾红兵 孙世澜
单位：同济医科大学附属同济医院内科，武汉 430030
关键词：肾功能衰竭，慢性；血液透析；血小板功能
同济医科大学学报000433 摘要 为探讨不同透析膜对尿毒症患者血小板功能的影响，将20例尿毒症患者随机分为2组，A组12 例用聚甲基丙烯酸甲酯膜(PMMA)、B组8例用酮仿膜(CU)透析器进行血液透析，用流式细 胞仪测定透析前、后血小板膜糖蛋白GPⅠb及GPⅡb/Ⅲa的改变。结果发现：CU组透析后 血小板GPⅠb及GPⅡb/Ⅲa(未活化)较透析前明显增高(分别为2.58±0.33与2.87±0. 46 ，P<0.05； 1.65±0.28与2.29±0.81， P<0.05),而PMMA组透析后与 透析前GPⅠb及GPⅡb/Ⅲa(未活化)相比无显著性差异(分别为2.85±0.48与2.96±0. 42， P>0.05；1.66±0.19与2.13±0.63，P>0.05)，透析后患者血小板 用ADP 活化后，其GPⅡb/Ⅲa的表达量较透析前有所下降，以CU 组为重。结论：使用 CU 透 析器进行血透治疗，在治疗过程中可导致部分血小板活化，GPⅠb及GPⅡb/Ⅲa表达增高，而 PMMA膜则不易导致血小板活化。
, 百拇医药
中图法分类号 R692.5， R459.5， R558
Effect of Different Dialysis Membrane on Platelet
Function in Hemodialysis Patients
Zeng Hongbing Sun Shilan
(Department of Internal Medicine, Tongji Hospital, Tong ji Medical University, Wuhan 430030)
Abstract In order to investigate the effect of different hemodi alysis (HD) membrane on platelet function, 20 patients with uremia undergoing c hronic HD were randomly divided into two groups. Two kinds of membranes were used: polymethy lmethacrylate (PMMA, n=8 in group A) and cuprophane (CU, n=12 in group B ). Flow cytometric technique with special monoclonal antibodies was applied to detect the changes in platelet glycoproteins GPⅠb (CD42) and GPⅡb/Ⅲa (C D41) before and after HD. The results showed that after HD, expression of GPⅠ b and GPⅡb/Ⅲ was significantly increased in the group B as compared with that before HD (GPⅠb: 2.58±0.33 vs 2.87±0.46, P<0.05; GPⅡb/Ⅲ: 1.65±0.28 vs 2. 29±0.81, P<0.05, respectively). In contrast, only a slight increase of exp ression of GPⅠb and GPⅡb/Ⅲa was observed in group A without significant dif ference before and after HD (GPⅠb: 2.85±0.48 vs 2.96±0.42, P>0.05; GPⅡ b/Ⅲ: 1.66±0.19 vs 2.13±0.63, P>0.05, respectively ). The platelet of the patients after HD was activated by ADP, the expression of GPⅡb/Ⅲa was decreas ed in both groups, especially in group B.Hemodialysis using CU could cause plate let activation, increase the expression of GPⅠb and GPⅡb/Ⅲ during HD.
, http://www.100md.com
Key words
慢性肾功能衰竭(CRF)患者常有出、凝血功能紊乱， 临床上表现为出血倾向或血栓 栓塞现象。血液透析治疗后，CRF患者出血倾向显著好转，但仍有一些慢性血透患者出现自 发性乃至危及生命的出血。其发生的机制可能涉及止凝血过程的多个环节。有学者观察到血 液透析本身可激活血小板[1]， 造成血小板功能的破坏。我们对20例HD患者分别用 两种不 同的透析膜进行HD，测定了血小板聚集及血小板膜糖蛋白等参数，旨在观察不同透析膜对血 小板功能的影响。
1 材料与方法
1.1 对象
患者20例，男13例， 女7 例， 年龄21～61岁，平均39.7岁，每周透析2次 ，每次4.5h，碳酸氢盐透析，肝素钠抗凝，2周内无输血和服用影响血小板功能药物。随机 将患者分为两组，A组8例，应用聚甲基丙烯酸甲酯膜(PMMA)，B组12例，用酮仿膜(CU) 。均为首次应用中空纤维透析器。正常献血员13名作为对照，男7例，女6例，平均32.8岁 。二周内未服用任何药物。
, http://www.100md.com
1.2 测定指标
用Chrono-log血小板聚集仪(USA)，ADP、胶原诱聚，血小板聚集能力用最大聚集 率表示。采用抗血小板GPⅠb单抗CD42或抗血小板GPⅡb/Ⅲa的单抗CD41(均为北京邦定生物 医学公司产品)，间接免疫荧光法，用流式细胞仪测定，GPⅠb及GPⅡb/Ⅲa的量以荧光强度 的平均对数表示。
1.3 统计学处理
正常对照与HD患者之间的比较用非配对资料t检验， 透析前后比较用 配对资料t检验。
2 结果
结果见表1，2。
表1 血透患者与对照组血小板功能比较 分组
例数
, 百拇医药
血小板聚集
血小板
GPⅠb
血小板GPⅡb/Ⅲa
血浆
Fg(g/L)
ADP诱聚
胶原诱聚
未活化
ADP活化
对照
13
64.77± 7.41
, http://www.100md.com
55.08±11.93
2.59±0.33
1.59 ±0.16
3.05±0.28
2.46±0.96
透前
20
39.98± 9.80**
28.50±16.64**
2.69±0.41
1.66±0.24
, 百拇医药
3.05±0.61
2.74±0.38
透后
20
45.15±14.03Δ
30.15±11.49
2.91±0.44Δ
2. 22±0.63Δ
2.75±0.56
2.37±0.70
与对照组比较 **P<0.01; 与透前比较 ΔP<0.05表2 不同透析膜对血小板膜糖蛋白的影响 分组
, 百拇医药
例
数
GPⅠb
GPⅡb/Ⅲa
(未活化)
GPⅡb/Ⅲ a
(ADP活化)
A组
透前
8
2.85±0.48
1.66±0.19
2.99± 0.53
, 百拇医药
透后
8
2.96±0.42
2.13±0.63
2.87±0 .78
B组
透前
12
2.58±0.33
1.65±0.28
3.08±0.6 8
透后
12
, http://www.100md.com
2.87±0.46*
2.29±0.81*
2.67±0 .35
与透析前比较 *P<0.053 讨论
除凝血因子和血管因素外，血小板在尿毒症患者中的止血障碍中起关键性作用 [1]。尿毒症患者多存在血小板功能障碍，透析并不能完全纠正其血小板功能， 我们 的实验 也证实，尿毒症患者透析后的血小板聚集较透析前好转，但仍明显低于正常对照。已有学者 研究表明，血液透析过程中，血小板与透析膜表面接触本身可引起血小板活化、脱颗粒及血 小板膜糖蛋白的丢失[1～4]。
Hernandez[6]等应用醋酸纤维膜透析器进行观察，直接测定了血小板与白 细胞形 成的异型聚集体，结果提示，虽然透析后患者血小板表达GPⅡb/Ⅲa 的能力与透析前无显著 性差异，但血小板-白细胞异型聚集体增高，提示血小板群体在体外循环中被活化，并与白 细胞相互活化。本组患者透析后的GPⅠb及GPⅡb/Ⅲa较透前明显增高，A组(PMMA膜)透析 前后的血小板GPⅠb和GPⅡ b/Ⅲa无显著性差异，而B组(CU)有显著性差异。提示透析中 有部分血小板活化，使内部池的GPⅠb和GPⅡb /Ⅲa表达于血小板表面，导致GPⅠb和GPⅡb/ Ⅲa的升高，CU较PMMA膜更容易导致血小板的活化。患者透析后的血小板再以ADP活化，其表 达GPⅡb/Ⅲa的量有所降低，尤以B组降低的更多，说明经透析后，患者的血小板表达GPⅡb /Ⅲa的能力有所下降， 但无统计学差异。我们未检测血小板-白细胞聚集体， 由Hernande z的结果可推测，由于在体外循环下，血小板被活化，并与白细胞形成异聚集体，而在用流 式细胞仪进行单个血小板分析时不能测到GPⅡb/Ⅲa的表达， 而不能得出有统计学差异的结 果。
, http://www.100md.com
以上结果表明，尿毒症长期血透患者的出、凝血功能紊乱可能部分与透析膜的 生物相容性有关，在治疗过程中采用生物相容性较好的透析器进行治疗，可能对改善血透患 者的出、凝血功能有益。
曾红兵，女，1966年生，主治医师
参 考 文 献
1，Saqripanti A,Barsotti G.Bleeding and thrombosis in chronic uremi a. Nephron, 1997,75: 125
2，Schulman G.A reveiew of the concept of biocomparibility. Kidney Inern, 1993, 43(S41):S209
3，Hakim R M, Schafer A I. Hemodialysis-Associated platelet activa tion and thrombocytopenia. Am J Med, 1985,78:575
, 百拇医药
4，Cases A, Reverter J C, Escolar G et al. Platelet activati on on hemodialysis: Influence of dialysis membr anes. Kidney Inern, 1993, 43(S41): S217
5，Hernandez M R, Galan A M, Lozano M et al. Platelet-Leukocyte activation during hemodialysis detected with a monoclonal antibody to leukoc yte Integrin CD11. Nephron, 1998,80:197
(1999-11-04 收稿), 百拇医药
单位：同济医科大学附属同济医院内科，武汉 430030
关键词：肾功能衰竭，慢性；血液透析；血小板功能
同济医科大学学报000433 摘要 为探讨不同透析膜对尿毒症患者血小板功能的影响，将20例尿毒症患者随机分为2组，A组12 例用聚甲基丙烯酸甲酯膜(PMMA)、B组8例用酮仿膜(CU)透析器进行血液透析，用流式细 胞仪测定透析前、后血小板膜糖蛋白GPⅠb及GPⅡb/Ⅲa的改变。结果发现：CU组透析后 血小板GPⅠb及GPⅡb/Ⅲa(未活化)较透析前明显增高(分别为2.58±0.33与2.87±0. 46 ，P<0.05； 1.65±0.28与2.29±0.81， P<0.05),而PMMA组透析后与 透析前GPⅠb及GPⅡb/Ⅲa(未活化)相比无显著性差异(分别为2.85±0.48与2.96±0. 42， P>0.05；1.66±0.19与2.13±0.63，P>0.05)，透析后患者血小板 用ADP 活化后，其GPⅡb/Ⅲa的表达量较透析前有所下降，以CU 组为重。结论：使用 CU 透 析器进行血透治疗，在治疗过程中可导致部分血小板活化，GPⅠb及GPⅡb/Ⅲa表达增高，而 PMMA膜则不易导致血小板活化。
, 百拇医药
中图法分类号 R692.5， R459.5， R558
Effect of Different Dialysis Membrane on Platelet
Function in Hemodialysis Patients
Zeng Hongbing Sun Shilan
(Department of Internal Medicine, Tongji Hospital, Tong ji Medical University, Wuhan 430030)
Abstract In order to investigate the effect of different hemodi alysis (HD) membrane on platelet function, 20 patients with uremia undergoing c hronic HD were randomly divided into two groups. Two kinds of membranes were used: polymethy lmethacrylate (PMMA, n=8 in group A) and cuprophane (CU, n=12 in group B ). Flow cytometric technique with special monoclonal antibodies was applied to detect the changes in platelet glycoproteins GPⅠb (CD42) and GPⅡb/Ⅲa (C D41) before and after HD. The results showed that after HD, expression of GPⅠ b and GPⅡb/Ⅲ was significantly increased in the group B as compared with that before HD (GPⅠb: 2.58±0.33 vs 2.87±0.46, P<0.05; GPⅡb/Ⅲ: 1.65±0.28 vs 2. 29±0.81, P<0.05, respectively). In contrast, only a slight increase of exp ression of GPⅠb and GPⅡb/Ⅲa was observed in group A without significant dif ference before and after HD (GPⅠb: 2.85±0.48 vs 2.96±0.42, P>0.05; GPⅡ b/Ⅲ: 1.66±0.19 vs 2.13±0.63, P>0.05, respectively ). The platelet of the patients after HD was activated by ADP, the expression of GPⅡb/Ⅲa was decreas ed in both groups, especially in group B.Hemodialysis using CU could cause plate let activation, increase the expression of GPⅠb and GPⅡb/Ⅲ during HD.
, http://www.100md.com
Key words
慢性肾功能衰竭(CRF)患者常有出、凝血功能紊乱， 临床上表现为出血倾向或血栓 栓塞现象。血液透析治疗后，CRF患者出血倾向显著好转，但仍有一些慢性血透患者出现自 发性乃至危及生命的出血。其发生的机制可能涉及止凝血过程的多个环节。有学者观察到血 液透析本身可激活血小板[1]， 造成血小板功能的破坏。我们对20例HD患者分别用 两种不 同的透析膜进行HD，测定了血小板聚集及血小板膜糖蛋白等参数，旨在观察不同透析膜对血 小板功能的影响。
1 材料与方法
1.1 对象
患者20例，男13例， 女7 例， 年龄21～61岁，平均39.7岁，每周透析2次 ，每次4.5h，碳酸氢盐透析，肝素钠抗凝，2周内无输血和服用影响血小板功能药物。随机 将患者分为两组，A组8例，应用聚甲基丙烯酸甲酯膜(PMMA)，B组12例，用酮仿膜(CU) 。均为首次应用中空纤维透析器。正常献血员13名作为对照，男7例，女6例，平均32.8岁 。二周内未服用任何药物。
, http://www.100md.com
1.2 测定指标
用Chrono-log血小板聚集仪(USA)，ADP、胶原诱聚，血小板聚集能力用最大聚集 率表示。采用抗血小板GPⅠb单抗CD42或抗血小板GPⅡb/Ⅲa的单抗CD41(均为北京邦定生物 医学公司产品)，间接免疫荧光法，用流式细胞仪测定，GPⅠb及GPⅡb/Ⅲa的量以荧光强度 的平均对数表示。
1.3 统计学处理
正常对照与HD患者之间的比较用非配对资料t检验， 透析前后比较用 配对资料t检验。
2 结果
结果见表1，2。
表1 血透患者与对照组血小板功能比较 分组
例数
, 百拇医药
血小板聚集
血小板
GPⅠb
血小板GPⅡb/Ⅲa
血浆
Fg(g/L)
ADP诱聚
胶原诱聚
未活化
ADP活化
对照
13
64.77± 7.41
, http://www.100md.com
55.08±11.93
2.59±0.33
1.59 ±0.16
3.05±0.28
2.46±0.96
透前
20
39.98± 9.80**
28.50±16.64**
2.69±0.41
1.66±0.24
, 百拇医药
3.05±0.61
2.74±0.38
透后
20
45.15±14.03Δ
30.15±11.49
2.91±0.44Δ
2. 22±0.63Δ
2.75±0.56
2.37±0.70
与对照组比较 **P<0.01; 与透前比较 ΔP<0.05表2 不同透析膜对血小板膜糖蛋白的影响 分组
, 百拇医药
例
数
GPⅠb
GPⅡb/Ⅲa
(未活化)
GPⅡb/Ⅲ a
(ADP活化)
A组
透前
8
2.85±0.48
1.66±0.19
2.99± 0.53
, 百拇医药
透后
8
2.96±0.42
2.13±0.63
2.87±0 .78
B组
透前
12
2.58±0.33
1.65±0.28
3.08±0.6 8
透后
12
, http://www.100md.com
2.87±0.46*
2.29±0.81*
2.67±0 .35
与透析前比较 *P<0.053 讨论
除凝血因子和血管因素外，血小板在尿毒症患者中的止血障碍中起关键性作用 [1]。尿毒症患者多存在血小板功能障碍，透析并不能完全纠正其血小板功能， 我们 的实验 也证实，尿毒症患者透析后的血小板聚集较透析前好转，但仍明显低于正常对照。已有学者 研究表明，血液透析过程中，血小板与透析膜表面接触本身可引起血小板活化、脱颗粒及血 小板膜糖蛋白的丢失[1～4]。
Hernandez[6]等应用醋酸纤维膜透析器进行观察，直接测定了血小板与白 细胞形 成的异型聚集体，结果提示，虽然透析后患者血小板表达GPⅡb/Ⅲa 的能力与透析前无显著 性差异，但血小板-白细胞异型聚集体增高，提示血小板群体在体外循环中被活化，并与白 细胞相互活化。本组患者透析后的GPⅠb及GPⅡb/Ⅲa较透前明显增高，A组(PMMA膜)透析 前后的血小板GPⅠb和GPⅡ b/Ⅲa无显著性差异，而B组(CU)有显著性差异。提示透析中 有部分血小板活化，使内部池的GPⅠb和GPⅡb /Ⅲa表达于血小板表面，导致GPⅠb和GPⅡb/ Ⅲa的升高，CU较PMMA膜更容易导致血小板的活化。患者透析后的血小板再以ADP活化，其表 达GPⅡb/Ⅲa的量有所降低，尤以B组降低的更多，说明经透析后，患者的血小板表达GPⅡb /Ⅲa的能力有所下降， 但无统计学差异。我们未检测血小板-白细胞聚集体， 由Hernande z的结果可推测，由于在体外循环下，血小板被活化，并与白细胞形成异聚集体，而在用流 式细胞仪进行单个血小板分析时不能测到GPⅡb/Ⅲa的表达， 而不能得出有统计学差异的结 果。
, http://www.100md.com
以上结果表明，尿毒症长期血透患者的出、凝血功能紊乱可能部分与透析膜的 生物相容性有关，在治疗过程中采用生物相容性较好的透析器进行治疗，可能对改善血透患 者的出、凝血功能有益。
曾红兵，女，1966年生，主治医师
参 考 文 献
1，Saqripanti A,Barsotti G.Bleeding and thrombosis in chronic uremi a. Nephron, 1997,75: 125
2，Schulman G.A reveiew of the concept of biocomparibility. Kidney Inern, 1993, 43(S41):S209
3，Hakim R M, Schafer A I. Hemodialysis-Associated platelet activa tion and thrombocytopenia. Am J Med, 1985,78:575
, 百拇医药
4，Cases A, Reverter J C, Escolar G et al. Platelet activati on on hemodialysis: Influence of dialysis membr anes. Kidney Inern, 1993, 43(S41): S217
5，Hernandez M R, Galan A M, Lozano M et al. Platelet-Leukocyte activation during hemodialysis detected with a monoclonal antibody to leukoc yte Integrin CD11. Nephron, 1998,80:197
(1999-11-04 收稿), 百拇医药