化疗对晚期肺癌患者细胞免疫功能的影响
作者：李明 于学军 王秀问 张锑 扈东艳
单位：山东医科大学附属医院 山东济南250012
关键词：
山东医药001810 为了观察化疗对晚期肿瘤患者细胞免疫功能的影响，我们应用流式细胞仪对36例晚期肺癌患者化疗前后外周血T细胞亚群和NK细胞数量进行了动态观察。现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 本组晚期肺癌患者36例中，男28例，女8例；中位年龄52岁。其中鳞癌15例，腺癌13例，小细胞未分化癌8例。分别于化疗前及化疗2周期后抽取空腹静脉血3ml(肝素防凝)。另取20例健康查体者为正常对照，男12例，女8例；中位年龄49岁。免疫荧光抗体 CD4―FITC/CD8―PE/CD3―CY5，IMMUNOTECH产品。IgG1―FITC/IgG1―PE/CD45―PE―CY5(阴性对照)，IMMUNOTECH产品。CD3/CD16+CD56，由BECTON―DICKINSON公司提供。溶血素FACS Lysing Soloution，BECTON―DICKINSON公司提供。仪器FACS Vantage，BECTON―DICKINSON公司生产。
, 百拇医药
1.2 试验方法 取肝素抗凝血100μl，加入相应的荧光标记抗体15μl，放置避光处30分钟，加入溶血素2ml混匀，10分钟后离心，用PBS离心(2500r/min)10分钟，洗涤2次，弃上清，加入0.5mlPBS将细胞悬浮，上机检测。结果作统计学分析，用t检验。
2 结果
2.1 晚期肺癌患者细胞免疫功能低下，表现为CD3、CD4、CD4/CD8明显降低(P<0.01)，CD8升高(P<0.05)，CD3?/CD16++CD56+细胞升高(P<0.05)，见表1。
2.2 化疗2周期后CD4、CD4/CD8显著升高(P<0.01)，CD8降低(P<0.05)，CD3变化不大(P>0.05)，见表2。
, 百拇医药
表1 晚期肺癌患者外周血T细胞亚群及NK细胞数量(x±s) 分 组
CD3
CD4
CD8
CD4/CD8
NK
肺癌组(n=36)
对照组(n=20)
52.11±9.37△
58.32±10.32
, 百拇医药
24.87±6.21△
40.20±7.91〓
26.52±10.93※
23.73±10.53〓
0.94±0.46△
1.69±0.57〓
22.71±8.
18.03±7.43
注：与正常对照组比较，△P<0.01，※P<0.05
, 百拇医药
表2 晚期肺癌患者化疗前后T细胞亚群及NK细胞数量的变化(x±s) 分 组
CD3
CD4
CD8
CD4/CD8
NK
化疗前(n=36)
化疗后(n=36)
对照组(n=20)
52.11±9.37△
, 百拇医药
56.51±9.74★
58.32±10.32〓
24.87±6.21△
29.05±7.17△△
40.20±7.91
26.52±10.93※
22.64±9.36※
23.73±10.53〓
0.94±0.46△
, 百拇医药
1.28±0.53△
1.69±0.57〓
22.71±8.27〓
21.83±7.61★
18.03±7.43〓
注：与对照组比较，△P<0.01，※P<0.05；与化疗前比较，△△P<0.01，※※P<0.05，★P>0.05
3 讨论
细胞免疫是肿瘤免疫的主导形式，对肿瘤的发生、发展、预后有非常重要的作用。化疗对肿瘤患者细胞免疫功能的影响至今尚无定论。施靖华等研究认为化疗能使胃癌患者细胞免疫功能降低。胡觉文等研究发现肺癌患者化疗后CD3、CD4无明显变化，CD8显著降低。周天鸿等观察了头颈鳞癌诱导化疗前后T细胞亚群的变化，认为化疗可解除机体的免疫抑制状态，从而增强细胞免疫功能。本组观察则表明，晚期肺癌患者存在着非常明显的免疫抑制，CD3、CD4、CD4/CD8都明显降低(P<0.01)，CD8升高(P<0.01)，化疗后免疫功能不但没有降低，反而升高，表现为CD4、CD4/CD8显著升高(P<0.01)，CD8降低(P<0.05)，CD3变化不大(P>0.05)。由此我们认为，化疗对机体的免疫功能可能有双重作用，一方面肿瘤通过释放免疫抑制因子，抑制机体的免疫功能，化疗可以杀伤肿瘤细胞，解除肿瘤对机体的免疫抑制；另一方面化疗药物的非选择性杀伤作用，对增殖活跃的淋巴系统杀伤较明显。这两个方面哪一个占主导地位，决定了化疗后免疫功能状态的变化。晚期肺癌患者与早期肿瘤患者相比，机体的免疫状态不同，晚期肿瘤患者在化疗前细胞免疫功能已明显受抑制，化疗一般不会再加重抑制，相反，可以通过杀伤肿瘤细胞促使免疫功能恢复。
, 百拇医药
CD3?/CD16++CD56+细胞是NK细胞的主要成分，常以此代表NK细胞数量。我们发现肺癌患者CD3?/CD16++CD56+细胞明显高于正常人，化疗后变化不大。肿瘤患者NK细胞活性降低，已是人们的共识，为什么会出现NK细胞数量与功能的背离呢？Eskinazi认为可能是肿瘤细胞产生的可溶性因子诱导所致。
参考文献
1，施靖华，陈腾，连兆瑞.手术及化疗对胃癌患者免疫功能的影响.第二军医大学学报，1995，16(5)：454.
2，胡觉文，王晓玲.肺癌患者化疗前后的T细胞亚群及SIL-2R动态观察.中国肿瘤临床，1995，22(11)：768.
3，周天鸿，曾宗渊，吴焕然.头颈鳞癌患者诱导化疗T细胞亚群的检测.中华耳鼻喉科杂志，1996，31(3)：189.
4，Eskinazi DP.Mononuclear cell subsetsin patients with oral cancer.Cancer，1987，60：376.
(2000-04-11收稿), 百拇医药
单位：山东医科大学附属医院 山东济南250012
关键词：
山东医药001810 为了观察化疗对晚期肿瘤患者细胞免疫功能的影响，我们应用流式细胞仪对36例晚期肺癌患者化疗前后外周血T细胞亚群和NK细胞数量进行了动态观察。现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 本组晚期肺癌患者36例中，男28例，女8例；中位年龄52岁。其中鳞癌15例，腺癌13例，小细胞未分化癌8例。分别于化疗前及化疗2周期后抽取空腹静脉血3ml(肝素防凝)。另取20例健康查体者为正常对照，男12例，女8例；中位年龄49岁。免疫荧光抗体 CD4―FITC/CD8―PE/CD3―CY5，IMMUNOTECH产品。IgG1―FITC/IgG1―PE/CD45―PE―CY5(阴性对照)，IMMUNOTECH产品。CD3/CD16+CD56，由BECTON―DICKINSON公司提供。溶血素FACS Lysing Soloution，BECTON―DICKINSON公司提供。仪器FACS Vantage，BECTON―DICKINSON公司生产。
, 百拇医药
1.2 试验方法 取肝素抗凝血100μl，加入相应的荧光标记抗体15μl，放置避光处30分钟，加入溶血素2ml混匀，10分钟后离心，用PBS离心(2500r/min)10分钟，洗涤2次，弃上清，加入0.5mlPBS将细胞悬浮，上机检测。结果作统计学分析，用t检验。
2 结果
2.1 晚期肺癌患者细胞免疫功能低下，表现为CD3、CD4、CD4/CD8明显降低(P<0.01)，CD8升高(P<0.05)，CD3?/CD16++CD56+细胞升高(P<0.05)，见表1。
2.2 化疗2周期后CD4、CD4/CD8显著升高(P<0.01)，CD8降低(P<0.05)，CD3变化不大(P>0.05)，见表2。
, 百拇医药
表1 晚期肺癌患者外周血T细胞亚群及NK细胞数量(x±s) 分 组
CD3
CD4
CD8
CD4/CD8
NK
肺癌组(n=36)
对照组(n=20)
52.11±9.37△
58.32±10.32
, 百拇医药
24.87±6.21△
40.20±7.91〓
26.52±10.93※
23.73±10.53〓
0.94±0.46△
1.69±0.57〓
22.71±8.
18.03±7.43
注：与正常对照组比较，△P<0.01，※P<0.05
, 百拇医药
表2 晚期肺癌患者化疗前后T细胞亚群及NK细胞数量的变化(x±s) 分 组
CD3
CD4
CD8
CD4/CD8
NK
化疗前(n=36)
化疗后(n=36)
对照组(n=20)
52.11±9.37△
, 百拇医药
56.51±9.74★
58.32±10.32〓
24.87±6.21△
29.05±7.17△△
40.20±7.91
26.52±10.93※
22.64±9.36※
23.73±10.53〓
0.94±0.46△
, 百拇医药
1.28±0.53△
1.69±0.57〓
22.71±8.27〓
21.83±7.61★
18.03±7.43〓
注：与对照组比较，△P<0.01，※P<0.05；与化疗前比较，△△P<0.01，※※P<0.05，★P>0.05
3 讨论
细胞免疫是肿瘤免疫的主导形式，对肿瘤的发生、发展、预后有非常重要的作用。化疗对肿瘤患者细胞免疫功能的影响至今尚无定论。施靖华等研究认为化疗能使胃癌患者细胞免疫功能降低。胡觉文等研究发现肺癌患者化疗后CD3、CD4无明显变化，CD8显著降低。周天鸿等观察了头颈鳞癌诱导化疗前后T细胞亚群的变化，认为化疗可解除机体的免疫抑制状态，从而增强细胞免疫功能。本组观察则表明，晚期肺癌患者存在着非常明显的免疫抑制，CD3、CD4、CD4/CD8都明显降低(P<0.01)，CD8升高(P<0.01)，化疗后免疫功能不但没有降低，反而升高，表现为CD4、CD4/CD8显著升高(P<0.01)，CD8降低(P<0.05)，CD3变化不大(P>0.05)。由此我们认为，化疗对机体的免疫功能可能有双重作用，一方面肿瘤通过释放免疫抑制因子，抑制机体的免疫功能，化疗可以杀伤肿瘤细胞，解除肿瘤对机体的免疫抑制；另一方面化疗药物的非选择性杀伤作用，对增殖活跃的淋巴系统杀伤较明显。这两个方面哪一个占主导地位，决定了化疗后免疫功能状态的变化。晚期肺癌患者与早期肿瘤患者相比，机体的免疫状态不同，晚期肿瘤患者在化疗前细胞免疫功能已明显受抑制，化疗一般不会再加重抑制，相反，可以通过杀伤肿瘤细胞促使免疫功能恢复。
, 百拇医药
CD3?/CD16++CD56+细胞是NK细胞的主要成分，常以此代表NK细胞数量。我们发现肺癌患者CD3?/CD16++CD56+细胞明显高于正常人，化疗后变化不大。肿瘤患者NK细胞活性降低，已是人们的共识，为什么会出现NK细胞数量与功能的背离呢？Eskinazi认为可能是肿瘤细胞产生的可溶性因子诱导所致。
参考文献
1，施靖华，陈腾，连兆瑞.手术及化疗对胃癌患者免疫功能的影响.第二军医大学学报，1995，16(5)：454.
2，胡觉文，王晓玲.肺癌患者化疗前后的T细胞亚群及SIL-2R动态观察.中国肿瘤临床，1995，22(11)：768.
3，周天鸿，曾宗渊，吴焕然.头颈鳞癌患者诱导化疗T细胞亚群的检测.中华耳鼻喉科杂志，1996，31(3)：189.
4，Eskinazi DP.Mononuclear cell subsetsin patients with oral cancer.Cancer，1987，60：376.
(2000-04-11收稿), 百拇医药