不同频率电针对风湿痹证患者免疫球蛋白及补体含量的影响
作者：张幼美
单位：广州中医药大学针灸推拿学院，广州 510407
关键词：电针；痹证；风湿痹证；免疫球蛋白；补体
安徽中医学院学报000320 中图分类号：R255.2 文献标识码：B 文章编号：1000-2219(2000)03-0031-02
风湿痹证通常被认为是由于机体免疫功能紊乱所导致的一种病理状态。笔者在1996至1998年期间，采用不同频率电针治疗了53例风湿痹证患者，观察了其免疫球蛋白及补体含量的变化，并与体针治疗及健康志愿者进行对照，现报道如下。
1 对象
1.1 一般资料 全部病例均为广州中医药大学第一附属医院针灸专科门诊和台湾省台北市天心中医院针灸门诊的病人。共80例，其中男43例，女37例；年龄18～65岁；病程3d～7年。另设健康对照组20例，男12例，女8例，平均年龄35.25±10.8岁。
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1.2 诊断标准 中医诊断标准：参照国家中医药管理局1994年6月颁布的《中医病证诊断疗效标准》。风湿性关节炎的诊断标准：多有链球菌感染史，急性期可有多发性及游走性关节酸痛，多发生在大关节，可伴有红肿痛或结节或红斑；慢性期可仅感关节酸痛。抗“O”在1∶500以上，或血沉加快；X线检查无骨质损害。
凡符合上述中、西医诊断标准并愿意接受本疗法治疗的患者为研究对象。有下列情况之一者除外：①经检查属类风湿性关节炎；②虽为本病，但长期服用西药或其他药物而不停用者；③年龄在18岁以下或65岁以上者；④妊娠或哺乳期妇女；⑤合并心、肝、肾及造血系统等严重原发性疾病，精神病患者；⑥中医诊断为虚痹的患者。
2 方法
2.1 分组 分为电针频率2Hz和电针频率100Hz、体针治疗组及正常对照组共4组。
2.2 治疗方法 主穴：双侧阳陵泉。辅穴：足三里、阿是穴(疼痛点)；风痹加风池、风府、膈俞、合谷、太冲，寒痹加大椎、命门、太冲、中渚，热痹加风池、合谷、太冲，湿痹加太白、支沟、后溪，膝关节炎加鹤顶、犊鼻。采用30号1.5寸不锈钢毫针，大椎穴向上斜刺0.5～1寸，其他穴位直刺0.5～1寸，电针治疗仪为G6805型，连续波，强度20～30V。体针以平补平泻手法，按针刺常规操作，捻转进针，得气后留针30min，每隔10min以平补平泻手法行针1次。每日治疗1次，12次为1个疗程，连续治疗3个疗程，中间休息3d，然后统计疗效，治疗期不用其他方法。
, 百拇医药
2.3 观察指标及方法
2.3.1 观察指标 外周血血清免疫球蛋白，血清补体C3、C4含量。
2.3.2 主要试剂 琼脂糖，0.05mol/L巴比妥缓冲液(pH8.6)，兔抗人IgG、IgM和IgA血清(由北京市生物制品研究中心生产)。
2.3.3 实验方法 采用单相琼脂扩散法，彩色扩散板来源于北京市医用试剂开发中心。①制备2%琼脂凝胶板：0.05mol/L巴比妥缓冲液(pH 8.6)将琼脂糖配成2%离子凝胶，沸水溶化后分装待用，加入0.01% NaN3，4℃保存备用。②用巴比妥缓冲液将抗血清作最终稀释度的1/2倍稀释，取10ml 50℃预热1min，与等体积的2%琼脂糖凝胶混合，倒板，打孔，样品倍比稀释(1∶50)后加10μl。参考标准血清按需要倍数稀释，定量加入孔内以制作标准曲线。③加样后湿盒内37℃温箱扩散24h。④绘制标准曲线，量取沉淀环，以抗原为横坐标，沉淀环直径为纵坐标，作图，查取样品值。
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补体CH50含量检测：采用CH50溶血实验。先配制50%溶血标准管，按要求在各管中加入反应物，一起放入水浴中温浴，然后将上述所有试管离心，再与50%溶血标准管相接近，两管在721型分光光度计上读取光密度值，以接近50%溶血标准管的一管值，按公式求出所需结果。
2.3.4 统计方法 计量资料均数±标准差表示，自身前后对照用成组t检验。
3 结果
3.1 风湿痹证患者免疫球蛋白的改变 见表1。由表可知，电针2Hz、100Hz对风湿痹证患者免疫球蛋白有一定的影响，其中治疗后IgM、IgG明显降低，IgE有一定程度的降低，IgA有一定程度的升高。
3.2 各组血清补体水平的变化 见表2。
表1 各组免疫球蛋白的改变情况(mg/L，
±s) 组 别
, 百拇医药
n
IgM
IgA
IgG
IgE
电针2Hz
治前
27
156.2±40.31
39.19±18.16
154.12±39.79
246.50±86.90
, http://www.100md.com 治后
142.62±47.01*
45.31±17.23
141.47±41.24*
198.37±70.03
电针100Hz
治前
26
158.31±42.08
38.98±19.23
156.74±43.19
, http://www.100md.com
223.09±70.18
治后
137.98±50.09**
47.27±20.01
136.34±48.71**
201.19±71.19
体 针
治前
27
154.39±41.3
38.42±18.76
, http://www.100md.com
155.47±41.29
232.28±74.23
治后
148.17±43.23
46.14±19.81
149.39±40.45
205.49±73.08
与治疗前比较，*P<0.05，**P<0.01(下同)
表2 各组血清补体水平的变化(±s) 组 别
n
, 百拇医药
CH50
(kU/L)
C3
(g/L)
C4
(g/L)
正常组
20
138.50±15.40
1.27±0.59
0.76±0.28
电针2Hz
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治前
27
130.09±49.50
1.10±0.57
0.09±0.42
治后
148.30±38.19
1.30±0.61
0.71±0.38
电针100Hz
治前
26
, 百拇医药
127.80±32.47
1.19±0.70
0.62±0.31
治后
151.90±37.97
1.48±0.71*
0.74±0.47
体 针
治前
27
132.43±50.09
1.23±0.63
, 百拇医药
0.57±0.41
治后
149.97±42.92
1.31±0.59
0.69±0.27
4 讨论
风湿痹证被认为是机体免疫功能紊乱所致的疾病。正常情况下，机体能通过淋巴系统来防止将“自身”成分识别为抗原，一旦这种机制遭到破坏，“自己”被视为“异己”，于是自身抗原刺激B细胞，产生自身抗体，抗原抗体结合从而引起机体的损伤。风湿痹证的体液免疫主要表现在三个方面：首先是抗体的形成，其次是细胞毒反应，再者是免疫复合物的反应。
罹患慢性炎症的所有组织均可产生抗体，经激发可产生高水平的IgG，但其余免疫球蛋白的形成则相对较低。此外，浆细胞可产生参与细胞毒反应的抗体多属IgG。IgG与靶细胞上的抗原(或半抗原)相结合，IgM与抗原结合成抗原抗体复合物，吸附于靶细胞表面，而后通过激活整个补体系统，产生直接的膜损伤，使细胞溶解。此外，还可通过巨噬细胞裂解靶细胞，通过K细胞活化，杀伤靶细胞，导致组织损伤。参与免疫复合物变态反应的抗体也多为IgG，此外还有IgM和IgA。抗原抗体复合物在血流中形成可溶性复合物，这种复合物形成后，可引起血小板及嗜碱性粒细胞释放组织胺、5-羟色胺等血管活性物质，使血管通透性增加，这时免疫复合物分子便留在血管基底膜上，沉积后可激活补体，吸附中性粒细胞向沉积部位进行吞噬，在吞噬过程中释放溶酶体等，损伤基底膜及邻近组织，可使血小板聚集，形成出血或血栓，同时由于血管活性肽的释放，使血管通透性增加，可引起局部渗出、水肿等病理改变。
, 百拇医药
本研究结果显示，风湿痹证患者治疗前IgA、IgM、IgE、IgG水平明显高于正常值，血清补体水平与正常组比较均偏低。经2Hz、100Hz电针治疗后，患者IgM、IgG水平明显降低(P<0.05，P<0.01)，IgE有下降的趋势，而IgA有一定程度升高。体针治疗前后比较，IgM、IgG水平无明显改变(P>0.05)。经100Hz电针治疗后，血清补体C3水平明显升高(P<0.05)，其它治疗组虽然有所升高，但治疗前后比较无显著性差异(P>0.05)。以上结果表明，电针治疗风湿痹证患者可升高其血清补体C3含量，降低免疫球蛋白IgM、IgG水平，抑制其亢进的体液免疫，从而起到治疗作用。其中又以100Hz电针治疗效果为最佳。
作者简介：张幼美(1947-)，女，博士研究生，台湾省台北市天心中医院院长。
(2000-04-02收稿), 百拇医药
单位：广州中医药大学针灸推拿学院，广州 510407
关键词：电针；痹证；风湿痹证；免疫球蛋白；补体
安徽中医学院学报000320 中图分类号：R255.2 文献标识码：B 文章编号：1000-2219(2000)03-0031-02
风湿痹证通常被认为是由于机体免疫功能紊乱所导致的一种病理状态。笔者在1996至1998年期间，采用不同频率电针治疗了53例风湿痹证患者，观察了其免疫球蛋白及补体含量的变化，并与体针治疗及健康志愿者进行对照，现报道如下。
1 对象
1.1 一般资料 全部病例均为广州中医药大学第一附属医院针灸专科门诊和台湾省台北市天心中医院针灸门诊的病人。共80例，其中男43例，女37例；年龄18～65岁；病程3d～7年。另设健康对照组20例，男12例，女8例，平均年龄35.25±10.8岁。
, http://www.100md.com
1.2 诊断标准 中医诊断标准：参照国家中医药管理局1994年6月颁布的《中医病证诊断疗效标准》。风湿性关节炎的诊断标准：多有链球菌感染史，急性期可有多发性及游走性关节酸痛，多发生在大关节，可伴有红肿痛或结节或红斑；慢性期可仅感关节酸痛。抗“O”在1∶500以上，或血沉加快；X线检查无骨质损害。
凡符合上述中、西医诊断标准并愿意接受本疗法治疗的患者为研究对象。有下列情况之一者除外：①经检查属类风湿性关节炎；②虽为本病，但长期服用西药或其他药物而不停用者；③年龄在18岁以下或65岁以上者；④妊娠或哺乳期妇女；⑤合并心、肝、肾及造血系统等严重原发性疾病，精神病患者；⑥中医诊断为虚痹的患者。
2 方法
2.1 分组 分为电针频率2Hz和电针频率100Hz、体针治疗组及正常对照组共4组。
2.2 治疗方法 主穴：双侧阳陵泉。辅穴：足三里、阿是穴(疼痛点)；风痹加风池、风府、膈俞、合谷、太冲，寒痹加大椎、命门、太冲、中渚，热痹加风池、合谷、太冲，湿痹加太白、支沟、后溪，膝关节炎加鹤顶、犊鼻。采用30号1.5寸不锈钢毫针，大椎穴向上斜刺0.5～1寸，其他穴位直刺0.5～1寸，电针治疗仪为G6805型，连续波，强度20～30V。体针以平补平泻手法，按针刺常规操作，捻转进针，得气后留针30min，每隔10min以平补平泻手法行针1次。每日治疗1次，12次为1个疗程，连续治疗3个疗程，中间休息3d，然后统计疗效，治疗期不用其他方法。
, 百拇医药
2.3 观察指标及方法
2.3.1 观察指标 外周血血清免疫球蛋白，血清补体C3、C4含量。
2.3.2 主要试剂 琼脂糖，0.05mol/L巴比妥缓冲液(pH8.6)，兔抗人IgG、IgM和IgA血清(由北京市生物制品研究中心生产)。
2.3.3 实验方法 采用单相琼脂扩散法，彩色扩散板来源于北京市医用试剂开发中心。①制备2%琼脂凝胶板：0.05mol/L巴比妥缓冲液(pH 8.6)将琼脂糖配成2%离子凝胶，沸水溶化后分装待用，加入0.01% NaN3，4℃保存备用。②用巴比妥缓冲液将抗血清作最终稀释度的1/2倍稀释，取10ml 50℃预热1min，与等体积的2%琼脂糖凝胶混合，倒板，打孔，样品倍比稀释(1∶50)后加10μl。参考标准血清按需要倍数稀释，定量加入孔内以制作标准曲线。③加样后湿盒内37℃温箱扩散24h。④绘制标准曲线，量取沉淀环，以抗原为横坐标，沉淀环直径为纵坐标，作图，查取样品值。
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补体CH50含量检测：采用CH50溶血实验。先配制50%溶血标准管，按要求在各管中加入反应物，一起放入水浴中温浴，然后将上述所有试管离心，再与50%溶血标准管相接近，两管在721型分光光度计上读取光密度值，以接近50%溶血标准管的一管值，按公式求出所需结果。
2.3.4 统计方法 计量资料均数±标准差表示，自身前后对照用成组t检验。
3 结果
3.1 风湿痹证患者免疫球蛋白的改变 见表1。由表可知，电针2Hz、100Hz对风湿痹证患者免疫球蛋白有一定的影响，其中治疗后IgM、IgG明显降低，IgE有一定程度的降低，IgA有一定程度的升高。
3.2 各组血清补体水平的变化 见表2。
表1 各组免疫球蛋白的改变情况(mg/L，
±s) 组 别, 百拇医药
n
IgM
IgA
IgG
IgE
电针2Hz
治前
27
156.2±40.31
39.19±18.16
154.12±39.79
246.50±86.90
, http://www.100md.com 治后
142.62±47.01*
45.31±17.23
141.47±41.24*
198.37±70.03
电针100Hz
治前
26
158.31±42.08
38.98±19.23
156.74±43.19
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223.09±70.18
治后
137.98±50.09**
47.27±20.01
136.34±48.71**
201.19±71.19
体 针
治前
27
154.39±41.3
38.42±18.76
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155.47±41.29
232.28±74.23
治后
148.17±43.23
46.14±19.81
149.39±40.45
205.49±73.08
与治疗前比较，*P<0.05，**P<0.01(下同)
表2 各组血清补体水平的变化(
±s) 组 别n
, 百拇医药
CH50
(kU/L)
C3
(g/L)
C4
(g/L)
正常组
20
138.50±15.40
1.27±0.59
0.76±0.28
电针2Hz
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治前
27
130.09±49.50
1.10±0.57
0.09±0.42
治后
148.30±38.19
1.30±0.61
0.71±0.38
电针100Hz
治前
26
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127.80±32.47
1.19±0.70
0.62±0.31
治后
151.90±37.97
1.48±0.71*
0.74±0.47
体 针
治前
27
132.43±50.09
1.23±0.63
, 百拇医药
0.57±0.41
治后
149.97±42.92
1.31±0.59
0.69±0.27
4 讨论
风湿痹证被认为是机体免疫功能紊乱所致的疾病。正常情况下，机体能通过淋巴系统来防止将“自身”成分识别为抗原，一旦这种机制遭到破坏，“自己”被视为“异己”，于是自身抗原刺激B细胞，产生自身抗体，抗原抗体结合从而引起机体的损伤。风湿痹证的体液免疫主要表现在三个方面：首先是抗体的形成，其次是细胞毒反应，再者是免疫复合物的反应。
罹患慢性炎症的所有组织均可产生抗体，经激发可产生高水平的IgG，但其余免疫球蛋白的形成则相对较低。此外，浆细胞可产生参与细胞毒反应的抗体多属IgG。IgG与靶细胞上的抗原(或半抗原)相结合，IgM与抗原结合成抗原抗体复合物，吸附于靶细胞表面，而后通过激活整个补体系统，产生直接的膜损伤，使细胞溶解。此外，还可通过巨噬细胞裂解靶细胞，通过K细胞活化，杀伤靶细胞，导致组织损伤。参与免疫复合物变态反应的抗体也多为IgG，此外还有IgM和IgA。抗原抗体复合物在血流中形成可溶性复合物，这种复合物形成后，可引起血小板及嗜碱性粒细胞释放组织胺、5-羟色胺等血管活性物质，使血管通透性增加，这时免疫复合物分子便留在血管基底膜上，沉积后可激活补体，吸附中性粒细胞向沉积部位进行吞噬，在吞噬过程中释放溶酶体等，损伤基底膜及邻近组织，可使血小板聚集，形成出血或血栓，同时由于血管活性肽的释放，使血管通透性增加，可引起局部渗出、水肿等病理改变。
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本研究结果显示，风湿痹证患者治疗前IgA、IgM、IgE、IgG水平明显高于正常值，血清补体水平与正常组比较均偏低。经2Hz、100Hz电针治疗后，患者IgM、IgG水平明显降低(P<0.05，P<0.01)，IgE有下降的趋势，而IgA有一定程度升高。体针治疗前后比较，IgM、IgG水平无明显改变(P>0.05)。经100Hz电针治疗后，血清补体C3水平明显升高(P<0.05)，其它治疗组虽然有所升高，但治疗前后比较无显著性差异(P>0.05)。以上结果表明，电针治疗风湿痹证患者可升高其血清补体C3含量，降低免疫球蛋白IgM、IgG水平，抑制其亢进的体液免疫，从而起到治疗作用。其中又以100Hz电针治疗效果为最佳。
作者简介：张幼美(1947-)，女，博士研究生，台湾省台北市天心中医院院长。
(2000-04-02收稿), 百拇医药