不孕妇女衣原体及支原体感染对性交后试验的影响
作者：李艳萍 周庆娥 张作青
单位：湖南医科大学附属湘雅医院妇产科 410008
关键词：不孕；衣原体；支原体；性交后试验
中国现代医学杂志001120 目的：探讨不孕妇女生殖道沙眼衣原体(CT)及解脲支原体(UU)感染对 性交后试验(PCT)的影响。方法：本研究用PCR方法检测了203例不孕妇女性交后宫颈粘液分 泌物中CT及UU-DNA表达。结果：PCT不良组CT及UU-DNA阳性率分别为30.3%和28.3%，显著高 于PCT正常组(P<0.05)。结论：CT及UU感染改变宫颈粘液性状，阻止精子从宫颈穿过是 导致不孕的原因之一。
分类号 R374+.3 R375+.3
近年来，由沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)造成的生殖道感染已 受 到人们高度重视，它不仅可以引起广泛的生殖道感染，且导致不孕不育甚至反复流产。本研 究 采用PCR技术研究不孕妇女性交后宫颈分泌物中CT及UU感染情况，以探讨其对性交后试验(PC T)的影响。
, 百拇医药
1 资料与方法1.1 研究对象
不孕症门诊不孕妇女203例，其中原发不孕118例，继发不孕85例，子宫发育正常，月经周期 规则，经2个周期B超卵泡监测及宫颈粘液检查表明有正常排卵，丈夫性功能正常，精液常规 检查正常。
1.2 研究方法
1.2.1 PCT方法及标本采集 在预计排卵期每天B超监测卵泡发育及作宫颈 粘液检查，当卵泡最大直径≥18mm，宫颈外口充分扩张，充满稀薄粘液，评分>8分为性交 后试验日，夫妇在所定PCT日性交(预先禁性生活5～7d)，3h后取宫颈粘液0.1～0.2ml，立 即将粘液作湿滴片，压20mm×20mm盖玻片后置于24～37℃温度下镜检，同时用无菌棉拭子插 入宫颈管内1cm，停留10s，旋转拭子采集分泌物，将分泌物收集于1.5ml离心管内(含生理盐 水1ml)，置-20℃备检。
1.2.2 CT-DNA及UU-DNA检测 将浸出液室温下15?000r/min离心10min，弃 去上清液，加上40ul裂解液混匀，100℃水浴5min，10?000r/min离心2min分别取3ul清液作 为CT和UU的PCR反应模板；PCR试剂盒由厦门长城生物工程公司提供，CTPCR引物对扩增产生4 10bp片段产物，UUPCR引物对扩增产生450bp片段产物；DNA扩增按说明要求配制反应体系。9 4℃预变性2min，94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸60s,循环35匀次。结果观察：取10 ～15ul扩增物经2.5%琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察有无特异性扩增带，同时设置阳性和阴 性对照。
, 百拇医药
1.2.3 PCT结果判断及分组 粘液中每高倍视野活动精子数≥20为PCT阳性 ，作为PCT正常组，粘液中每高倍视野活动精子数<20为PCT阴性[1]，作为PCT不 良组。
2 结果2.1 PCT结果
203例不孕妇女中，PCT阳性104例，PCT阴性99例。
2.2 CT-DNA检测结果
PCT正常组中CT-DNA阳性13例，阳性率12.5%，PCT不良组中，CT-DNA阳性30例，阳性率30.3% ，两组比较阳性率有显著性差异(P<0.05)。
2.3 UU-DNA检测结果
PCT正常组中UU-DNA阳性14例，占13.5%，合并CT-DNA阳性3例，占2.8%，PCT不良组中UU -DNA 阳性28例，占28.3%，合并CT-DNA阳性10例，占10.1%，PCT不良组阳性率显著高于正常组( P<0.05)，见附表。
, 百拇医药
附表 两组宫颈粘液中CT及UU-DNA阳性率表 例(%)
组别
例数
CT-DNA
UU-DNA
CT、UU-DNA
PCT正常组
104
13(12.5)
14(13.5)
3(2.8)
PCT不良组
, 百拇医药
99
30(30.3)
28(28.3)
10(10.1)
注：χ2检验，P<0.05
3 讨论
生殖道CT及UU感染可导致不孕不育，这方面的研究报道较多，其机理因CT及UU可粘附在精子 表面，引起精子膜受损[2]，且对睾丸和附睾有直接感染作用或女方引起子宫内膜 炎，盆腔炎，输卵管炎[3，4]等，本研究表明不孕妇女宫颈CT及UU感染，明显影 响精子穿透，其原因有：CT及UU寄生于宫颈柱状上皮内，引起宫颈炎，使宫颈局部糜烂，分 泌物增多改变宫颈粘液PH，影响精子从宫颈穿过；CT及UU引起生殖道感染，生殖道粘膜损 伤 使免疫细胞有可能直接接触到精子，从而产生抗精子抗体导致免疫性不孕[5]。在 人类精子通过女性生殖道到达受精部位的路程中，宫颈-宫颈粘液是第一道具有选择功能的 屏障。PCT用以检验精子在通过这道屏障过程中是否存在异常，是不孕症常用检查方法之 一 。在行PCT同时，检测其宫颈粘液中的CT及UU-DNA，不仅能反映患者本人感染情况，并且由 于CT及UU可附于精子上经性交携带至女性生殖道，故可同时检测其丈夫的感染情况，发现异 常 经双方治疗，使CT及UU-DNA转阴，PCT转为正常，本研究PCT不良组患者共58例，经过双方治 疗，有17例CT-DNA或UU-DNA转为阴性，复查PCT转为阳性，9例妊娠。由此可见，这是一种简 便可行的方法，对不孕症的病因诊断提供参考依据，提高不孕症防治效率。
, http://www.100md.com
参 考 文 献
1，乐 杰主编.妇产科学.第4版.北京：人民卫生出版社，1996：372
2，徐 晨，王青华，谢文英，等. 溶脲脲原体引起男性不育的机理研究.男性学杂 志，1992；4：174
3，陆 静，梁占充，韩享研.输卵管性不孕与沙眼衣原体，淋病双球菌及解脲脲原 体的感染关系.中华妇产科杂志，1998；33(16)：371
4，谭立志，吴移谋.衣原体性非淋菌性尿道炎混合感染和临床治疗的实验研究. 中国现代医学杂志，1998；8(4)：11～14
5，Witkinn SS.Detection of chlamydia trachomatis in semen by the po lymerase chain reaction in male members of infertile couples.Am J Obstet Gynecol ,1993;168:1457
(2000-02-18收稿), http://www.100md.com
单位：湖南医科大学附属湘雅医院妇产科 410008
关键词：不孕；衣原体；支原体；性交后试验
中国现代医学杂志001120 目的：探讨不孕妇女生殖道沙眼衣原体(CT)及解脲支原体(UU)感染对 性交后试验(PCT)的影响。方法：本研究用PCR方法检测了203例不孕妇女性交后宫颈粘液分 泌物中CT及UU-DNA表达。结果：PCT不良组CT及UU-DNA阳性率分别为30.3%和28.3%，显著高 于PCT正常组(P<0.05)。结论：CT及UU感染改变宫颈粘液性状，阻止精子从宫颈穿过是 导致不孕的原因之一。
分类号 R374+.3 R375+.3
近年来，由沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)造成的生殖道感染已 受 到人们高度重视，它不仅可以引起广泛的生殖道感染，且导致不孕不育甚至反复流产。本研 究 采用PCR技术研究不孕妇女性交后宫颈分泌物中CT及UU感染情况，以探讨其对性交后试验(PC T)的影响。
, 百拇医药
1 资料与方法1.1 研究对象
不孕症门诊不孕妇女203例，其中原发不孕118例，继发不孕85例，子宫发育正常，月经周期 规则，经2个周期B超卵泡监测及宫颈粘液检查表明有正常排卵，丈夫性功能正常，精液常规 检查正常。
1.2 研究方法
1.2.1 PCT方法及标本采集 在预计排卵期每天B超监测卵泡发育及作宫颈 粘液检查，当卵泡最大直径≥18mm，宫颈外口充分扩张，充满稀薄粘液，评分>8分为性交 后试验日，夫妇在所定PCT日性交(预先禁性生活5～7d)，3h后取宫颈粘液0.1～0.2ml，立 即将粘液作湿滴片，压20mm×20mm盖玻片后置于24～37℃温度下镜检，同时用无菌棉拭子插 入宫颈管内1cm，停留10s，旋转拭子采集分泌物，将分泌物收集于1.5ml离心管内(含生理盐 水1ml)，置-20℃备检。
1.2.2 CT-DNA及UU-DNA检测 将浸出液室温下15?000r/min离心10min，弃 去上清液，加上40ul裂解液混匀，100℃水浴5min，10?000r/min离心2min分别取3ul清液作 为CT和UU的PCR反应模板；PCR试剂盒由厦门长城生物工程公司提供，CTPCR引物对扩增产生4 10bp片段产物，UUPCR引物对扩增产生450bp片段产物；DNA扩增按说明要求配制反应体系。9 4℃预变性2min，94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸60s,循环35匀次。结果观察：取10 ～15ul扩增物经2.5%琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察有无特异性扩增带，同时设置阳性和阴 性对照。
, 百拇医药
1.2.3 PCT结果判断及分组 粘液中每高倍视野活动精子数≥20为PCT阳性 ，作为PCT正常组，粘液中每高倍视野活动精子数<20为PCT阴性[1]，作为PCT不 良组。
2 结果2.1 PCT结果
203例不孕妇女中，PCT阳性104例，PCT阴性99例。
2.2 CT-DNA检测结果
PCT正常组中CT-DNA阳性13例，阳性率12.5%，PCT不良组中，CT-DNA阳性30例，阳性率30.3% ，两组比较阳性率有显著性差异(P<0.05)。
2.3 UU-DNA检测结果
PCT正常组中UU-DNA阳性14例，占13.5%，合并CT-DNA阳性3例，占2.8%，PCT不良组中UU -DNA 阳性28例，占28.3%，合并CT-DNA阳性10例，占10.1%，PCT不良组阳性率显著高于正常组( P<0.05)，见附表。
, 百拇医药
附表 两组宫颈粘液中CT及UU-DNA阳性率表 例(%)
组别
例数
CT-DNA
UU-DNA
CT、UU-DNA
PCT正常组
104
13(12.5)
14(13.5)
3(2.8)
PCT不良组
, 百拇医药
99
30(30.3)
28(28.3)
10(10.1)
注：χ2检验，P<0.05
3 讨论
生殖道CT及UU感染可导致不孕不育，这方面的研究报道较多，其机理因CT及UU可粘附在精子 表面，引起精子膜受损[2]，且对睾丸和附睾有直接感染作用或女方引起子宫内膜 炎，盆腔炎，输卵管炎[3，4]等，本研究表明不孕妇女宫颈CT及UU感染，明显影 响精子穿透，其原因有：CT及UU寄生于宫颈柱状上皮内，引起宫颈炎，使宫颈局部糜烂，分 泌物增多改变宫颈粘液PH，影响精子从宫颈穿过；CT及UU引起生殖道感染，生殖道粘膜损 伤 使免疫细胞有可能直接接触到精子，从而产生抗精子抗体导致免疫性不孕[5]。在 人类精子通过女性生殖道到达受精部位的路程中，宫颈-宫颈粘液是第一道具有选择功能的 屏障。PCT用以检验精子在通过这道屏障过程中是否存在异常，是不孕症常用检查方法之 一 。在行PCT同时，检测其宫颈粘液中的CT及UU-DNA，不仅能反映患者本人感染情况，并且由 于CT及UU可附于精子上经性交携带至女性生殖道，故可同时检测其丈夫的感染情况，发现异 常 经双方治疗，使CT及UU-DNA转阴，PCT转为正常，本研究PCT不良组患者共58例，经过双方治 疗，有17例CT-DNA或UU-DNA转为阴性，复查PCT转为阳性，9例妊娠。由此可见，这是一种简 便可行的方法，对不孕症的病因诊断提供参考依据，提高不孕症防治效率。
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参 考 文 献
1，乐 杰主编.妇产科学.第4版.北京：人民卫生出版社，1996：372
2，徐 晨，王青华，谢文英，等. 溶脲脲原体引起男性不育的机理研究.男性学杂 志，1992；4：174
3，陆 静，梁占充，韩享研.输卵管性不孕与沙眼衣原体，淋病双球菌及解脲脲原 体的感染关系.中华妇产科杂志，1998；33(16)：371
4，谭立志，吴移谋.衣原体性非淋菌性尿道炎混合感染和临床治疗的实验研究. 中国现代医学杂志，1998；8(4)：11～14
5，Witkinn SS.Detection of chlamydia trachomatis in semen by the po lymerase chain reaction in male members of infertile couples.Am J Obstet Gynecol ,1993;168:1457
(2000-02-18收稿), http://www.100md.com