江门市120例静脉毒瘾者HBV，HCV，HGV感染状况调查分析
作者：胡长征 葛炳任 李刚
单位：胡长征(529070 广东省江门市中心医院)；葛炳任(529000 广东省江门市戒毒所)；李刚(510630 广州市，中山医科大学第三附属医院传染科)
关键词：物质滥用，静脉内；肝炎病毒；肝炎，病毒性
实用医学杂志000521 摘 要 目的：了解静脉毒瘾者乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)及庚型肝炎病毒(HGV)的感染状况。方法：对广东省江门市120例静脉毒瘾者血浆HBV，HCV和HGV的标记物进行检测，采用ELISA法检测HBsAg，HBeAg，抗HBcAb，抗HBeAb，抗HBsAb，抗HCV抗体；逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HGV RNA。结果：120例静脉毒瘾者中HBsAg阳性13例(10.83%)，抗HBsAb阳性41例(34.17%)，单项抗HBcAb阳性7例(5.83%)，抗HCV抗体阳性89例(74.17%)，HGV RNA阳性28例(23.33%)。13例HBsAg阳性中9例抗HCV阳性，3例HGV RNA阳性；7例单项抗HBcAb阳性中5例抗HCV抗体阳性，2例HGV RNA阳性；28例HGV RNA阳性中20例抗HCV抗体阳性；2例HBsAg、抗HCV抗体、HGV RNA同时阳性。结论：静脉毒瘾者是HCV和HGV的高感染人群；HBV，HCV和HGV三种病毒的感染之间在静脉毒瘾者中无相关性。
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近年来，广东省江门市的静脉吸毒者有增加趋势，特别在青少年中更加明显。HBV，HCV和HGV均是胃肠外传播的肝炎病毒，而相当一部分吸毒者有共用注射器的历史，使上述肝炎病毒在他们之间传播。为了解江门市静脉毒瘾者中这三种肝炎病毒的感染状况，本文对其中的120例进行了流行病学调查和分析。
1 资料与方法
1.1 标本来源 所有血清标本取自广东省江门市戒毒所静脉毒瘾者，共120例，其中男76例，女44例，年龄14～51岁。所有病例均无输注血制品史，吸毒时间均超过2个月。标本在1997年10月～1998年9月采集，-20℃以下保存。
1.2 HBV标志物及抗HCV抗体检测 HBsAg，HBeAg，抗HBsAb，抗HBeAb，抗HBcAb采用广东中山生物工程公司生产的ELISA试剂盒检测，根据试剂盒说明进行操作及判定结果；抗HCV抗体检测采用上海科华生物技术有限公司生产的ELISA试剂盒，包被抗原含HCV结构蛋白核心区和非结构蛋白NS3区多肽，根据试制盒说明进行操作及制定结果。
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1.3 RT-PCR检测HGV RNA 采用酶消化热变性方法提取血浆标本中的RNA[1]，取待检血浆标本100 μ l，加入裂解液10 μ l(主要成分为2-巯基乙醇和蛋白酶K)，55℃ 30 min，95℃ 15 min，10 000r/min离心5 min，吸裂解上清液10 μ l进行逆转录，逆转录反应体积20 μ l，内含AMV逆转录酶10 U，0.25 mmol/L dNTP 2 μ l，RNasin(RNA酶抑制剂)40 U，10×buffer 2 μ l，负链外引物100 μ g(序列为：5’TAGGTGGCCCCA TGCATTTCC 3’，引物设计及所在位置参见文献2)，逆转录在42℃ 45 min进行。第1次PCR反应体积为40 μ l，含上述逆转录液20 μ l，负链外引物100 μ g，正链外引物100 μ g(序列为：5’ATGCGTGAT GACAGGGTTGG 3’)，0.25 mmol/L dNTP 4 μ l，10×buffer 4 μ l，Taq DNA聚合酶2 U，在94℃ 30 s，55℃ 30 s，72℃ 40 s，循环30次。第2次PCR反应体积为50 μ l，内含第一次PCR反应液10 μ l，正链内引物100 μ g(序列为：5’ GGTAGCCACTATAGGTGGGT 3’)，负链内引物100 μ g(序列为：5’CACTGGTCCTTGTCA ACTCG 3’)，0.25 mmol/L dNTP 5 μ l，10×buffer 5 μ l，Taq DNA聚合酶2 U，循环条件同第一次PCR。取10 μ l扩增产物在含溴化乙锭的2%琼脂糖凝胶中电泳，紫外线下观察结果，与标准分子量及阳性标本作对照，若238 bp处出现一特异性条带判为阳性。
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1.4 统计学处理 采用卡方检验及修正卡方检验。
2 结果
120例静脉毒瘾者中HBsAg阳性13例(10.83%)，抗HBsAb阳性41例(34.17%)，单项抗HBcAb阳性7例，抗HBeAb和抗HBcAb阳性4例，HBsAg，HBeAg，抗HBeAb，抗HBcAb，抗HBsAb五项均阴性55例。抗HCV抗体阳性89例(74.17%)，HGV RNA阳性28例(23.33%)。13例HBsAg阳性中9例抗HCV抗体阳性，3例HGV RNA阳性。7例单项抗HBcAb阳性中5例抗HCV抗体阳性，2例HGV RNA阳性。28例HGV RNA阳性中20例抗HCV抗体阳性。120例静脉毒瘾者中2例HBsAg、抗HCV抗体、HGV RNA同时阳性。三种病毒合并感染情况见表1、表2。
表1 静脉毒瘾者HBsAg阳性与HCV，HGV感染的关系(例)
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抗HCV抗体
HGV RNA
合计
+
-
+
-
HBsAg +
9
4
3
10
13
, http://www.100md.com -
80
27
25
82
107
合计
89
31
28
92
120
注：HBsAg与抗HCV抗体，χ2=0.1854，P>0.05；HBsAg与HGV RNA，χ2=0.0005，P>0.05表2 静脉毒瘾者HGV感染与HCV感染的关系(例)
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抗HCV抗体
+
-
HGV RNA +
20
8
-
69
23
注：χ2=0.1429，P>0.05
根据表中统计分析发现，HBsAg阳性与HBsAg阴性者中抗HCV抗体的阳性率和HGV RNA的阳性率均无差异，说明HCV感染或HGV感染与是否存在HBV感染无关。同样，HGV RNA阳性与HGV RNA阴性者中，抗HCV抗体的阳性率无差异，说明HCV感染与是否存在HGV感染无关。另外，统计学分析发现，男性和女性吸毒者的HBV，HCV，HGV感染率差异无显著性。
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3 讨论
静脉吸毒者是一个特殊的人群，他们中的大部分有共用针头的经历，使一些传染病在他们中相互传播。HBV，HCV和HGV是胃肠外传播的三种肝炎病毒，针刺是传播途径之一。为了解现阶段3种肝炎病毒在静脉毒瘾者中的感染状况，作者对江门市120例静脉毒瘾者进行了流行病学调查。结果发现，HBsAg的阳性率为10.83%，单项抗HBcAb阳性率为5.83%，抗HBsAb阳性率为34.17%，与报道的社区人群感染率相近，表明静脉吸毒者非HBV感染的高危人群，结果与浙江省和广州的调查类似[2，3]，但与广西及云南省的结果不同[4，5]。
120例静脉毒瘾者中89例抗HCV抗体阳性，阳性率为74.17%，与国内外的报道相似[6，7]。结果显示，静脉毒瘾者仍是HCV感染的高危人群，不洁注射是获得HCV感染的重要因素。调查发现HGV RNA在静脉毒瘾者的阳性率为23.33%，远高于社区人群，感染率与以前的报道无明显差异[8，9]，与HCV一样，静脉毒瘾者亦是HGV感染的高危人群。另外，统计学分析提示静脉毒瘾者中HBV，HCV和HGV的感染率在不同性别间均无差别。
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值得注意的是HBsAg阳性与HBsAg阴性静脉毒瘾者之间HCV的感染率无差异；同样，他们之间的HGV感染亦无统计学意义。HGV RNA阳性与HGV RNA阴性静脉毒瘾者之间HCV的感染亦无差异。上述结果提示，HBV，HCV和HGV三种病毒的感染，相互之间并无关联或因果关系，静脉毒瘾者中HCV和HGV的高感染率，HCV与HGV的高混合感染率是由于共用针头或针刺传播造成的。
参考文献
1，高志良，姚集鲁. 热变性HCV RNA模板直接法扩增. 中山医科大学学报，1994，15(3)：68～70.
2，朱 彪，吴南屏，吴灵娇，等. 浙江省吸毒人员HIV、HBV、HCV感染的血清学研究。中国公共卫生，1999，15(5)：415～416.
3，韦莉萍，周 珉，周德润，等. 海洛因依赖者吸毒方式与HIV，HBV，HDV，HCV和HGV感染关系研究. 中国公共卫生，1999，15(5)：413～414.
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4，葛宪民，王树声，黄果勇，等. 广西吸毒成瘾者的(HIV，HBV，HCV和HTLV-1)的血清学研究. 广西预防医学，1996，2(1)：8～11.
5，唐宝璋，佟 力，严其荣，等. 临沧和昆明地区海洛因依赖者HIV及肝炎病毒感染的调查. 中华预防医学杂志，1995，29(4)：228～230.
6，顾士民，蒋伟伦，巫善明，等. 上海地区静脉毒瘾者携带HBV、HCV和HGV的研究. 上海医学，1997，20(11)：652～654.
7，Trisler Z,Seme K,Poljak M,et al. Prevalence of hepatitis C and G virus infections among intravenous drug users in Slovenia and Croatia. Scand J Infect Dis,1999,31(1):33～35.
8，李 刚，陈 青，姚集鲁，等. 静脉毒瘾者84例HGV感染状况. 中华传染病杂志，1998，16(1)：26～28.
9，Vimolket T,Theamboonlers A,Tangkijvanich P,et al. Hepatitis GBV-C infection in intravenous drug users. Southeast Asian J Trop Med Public Health,1998,29(3):491～496., 百拇医药
单位：胡长征(529070 广东省江门市中心医院)；葛炳任(529000 广东省江门市戒毒所)；李刚(510630 广州市，中山医科大学第三附属医院传染科)
关键词：物质滥用，静脉内；肝炎病毒；肝炎，病毒性
实用医学杂志000521 摘 要 目的：了解静脉毒瘾者乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)及庚型肝炎病毒(HGV)的感染状况。方法：对广东省江门市120例静脉毒瘾者血浆HBV，HCV和HGV的标记物进行检测，采用ELISA法检测HBsAg，HBeAg，抗HBcAb，抗HBeAb，抗HBsAb，抗HCV抗体；逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HGV RNA。结果：120例静脉毒瘾者中HBsAg阳性13例(10.83%)，抗HBsAb阳性41例(34.17%)，单项抗HBcAb阳性7例(5.83%)，抗HCV抗体阳性89例(74.17%)，HGV RNA阳性28例(23.33%)。13例HBsAg阳性中9例抗HCV阳性，3例HGV RNA阳性；7例单项抗HBcAb阳性中5例抗HCV抗体阳性，2例HGV RNA阳性；28例HGV RNA阳性中20例抗HCV抗体阳性；2例HBsAg、抗HCV抗体、HGV RNA同时阳性。结论：静脉毒瘾者是HCV和HGV的高感染人群；HBV，HCV和HGV三种病毒的感染之间在静脉毒瘾者中无相关性。
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近年来，广东省江门市的静脉吸毒者有增加趋势，特别在青少年中更加明显。HBV，HCV和HGV均是胃肠外传播的肝炎病毒，而相当一部分吸毒者有共用注射器的历史，使上述肝炎病毒在他们之间传播。为了解江门市静脉毒瘾者中这三种肝炎病毒的感染状况，本文对其中的120例进行了流行病学调查和分析。
1 资料与方法
1.1 标本来源 所有血清标本取自广东省江门市戒毒所静脉毒瘾者，共120例，其中男76例，女44例，年龄14～51岁。所有病例均无输注血制品史，吸毒时间均超过2个月。标本在1997年10月～1998年9月采集，-20℃以下保存。
1.2 HBV标志物及抗HCV抗体检测 HBsAg，HBeAg，抗HBsAb，抗HBeAb，抗HBcAb采用广东中山生物工程公司生产的ELISA试剂盒检测，根据试剂盒说明进行操作及判定结果；抗HCV抗体检测采用上海科华生物技术有限公司生产的ELISA试剂盒，包被抗原含HCV结构蛋白核心区和非结构蛋白NS3区多肽，根据试制盒说明进行操作及制定结果。
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1.3 RT-PCR检测HGV RNA 采用酶消化热变性方法提取血浆标本中的RNA[1]，取待检血浆标本100 μ l，加入裂解液10 μ l(主要成分为2-巯基乙醇和蛋白酶K)，55℃ 30 min，95℃ 15 min，10 000r/min离心5 min，吸裂解上清液10 μ l进行逆转录，逆转录反应体积20 μ l，内含AMV逆转录酶10 U，0.25 mmol/L dNTP 2 μ l，RNasin(RNA酶抑制剂)40 U，10×buffer 2 μ l，负链外引物100 μ g(序列为：5’TAGGTGGCCCCA TGCATTTCC 3’，引物设计及所在位置参见文献2)，逆转录在42℃ 45 min进行。第1次PCR反应体积为40 μ l，含上述逆转录液20 μ l，负链外引物100 μ g，正链外引物100 μ g(序列为：5’ATGCGTGAT GACAGGGTTGG 3’)，0.25 mmol/L dNTP 4 μ l，10×buffer 4 μ l，Taq DNA聚合酶2 U，在94℃ 30 s，55℃ 30 s，72℃ 40 s，循环30次。第2次PCR反应体积为50 μ l，内含第一次PCR反应液10 μ l，正链内引物100 μ g(序列为：5’ GGTAGCCACTATAGGTGGGT 3’)，负链内引物100 μ g(序列为：5’CACTGGTCCTTGTCA ACTCG 3’)，0.25 mmol/L dNTP 5 μ l，10×buffer 5 μ l，Taq DNA聚合酶2 U，循环条件同第一次PCR。取10 μ l扩增产物在含溴化乙锭的2%琼脂糖凝胶中电泳，紫外线下观察结果，与标准分子量及阳性标本作对照，若238 bp处出现一特异性条带判为阳性。
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1.4 统计学处理 采用卡方检验及修正卡方检验。
2 结果
120例静脉毒瘾者中HBsAg阳性13例(10.83%)，抗HBsAb阳性41例(34.17%)，单项抗HBcAb阳性7例，抗HBeAb和抗HBcAb阳性4例，HBsAg，HBeAg，抗HBeAb，抗HBcAb，抗HBsAb五项均阴性55例。抗HCV抗体阳性89例(74.17%)，HGV RNA阳性28例(23.33%)。13例HBsAg阳性中9例抗HCV抗体阳性，3例HGV RNA阳性。7例单项抗HBcAb阳性中5例抗HCV抗体阳性，2例HGV RNA阳性。28例HGV RNA阳性中20例抗HCV抗体阳性。120例静脉毒瘾者中2例HBsAg、抗HCV抗体、HGV RNA同时阳性。三种病毒合并感染情况见表1、表2。
表1 静脉毒瘾者HBsAg阳性与HCV，HGV感染的关系(例)
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抗HCV抗体
HGV RNA
合计
+
-
+
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HBsAg +
9
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80
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合计
89
31
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120
注：HBsAg与抗HCV抗体，χ2=0.1854，P>0.05；HBsAg与HGV RNA，χ2=0.0005，P>0.05表2 静脉毒瘾者HGV感染与HCV感染的关系(例)
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抗HCV抗体
+
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HGV RNA +
20
8
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23
注：χ2=0.1429，P>0.05
根据表中统计分析发现，HBsAg阳性与HBsAg阴性者中抗HCV抗体的阳性率和HGV RNA的阳性率均无差异，说明HCV感染或HGV感染与是否存在HBV感染无关。同样，HGV RNA阳性与HGV RNA阴性者中，抗HCV抗体的阳性率无差异，说明HCV感染与是否存在HGV感染无关。另外，统计学分析发现，男性和女性吸毒者的HBV，HCV，HGV感染率差异无显著性。
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3 讨论
静脉吸毒者是一个特殊的人群，他们中的大部分有共用针头的经历，使一些传染病在他们中相互传播。HBV，HCV和HGV是胃肠外传播的三种肝炎病毒，针刺是传播途径之一。为了解现阶段3种肝炎病毒在静脉毒瘾者中的感染状况，作者对江门市120例静脉毒瘾者进行了流行病学调查。结果发现，HBsAg的阳性率为10.83%，单项抗HBcAb阳性率为5.83%，抗HBsAb阳性率为34.17%，与报道的社区人群感染率相近，表明静脉吸毒者非HBV感染的高危人群，结果与浙江省和广州的调查类似[2，3]，但与广西及云南省的结果不同[4，5]。
120例静脉毒瘾者中89例抗HCV抗体阳性，阳性率为74.17%，与国内外的报道相似[6，7]。结果显示，静脉毒瘾者仍是HCV感染的高危人群，不洁注射是获得HCV感染的重要因素。调查发现HGV RNA在静脉毒瘾者的阳性率为23.33%，远高于社区人群，感染率与以前的报道无明显差异[8，9]，与HCV一样，静脉毒瘾者亦是HGV感染的高危人群。另外，统计学分析提示静脉毒瘾者中HBV，HCV和HGV的感染率在不同性别间均无差别。
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值得注意的是HBsAg阳性与HBsAg阴性静脉毒瘾者之间HCV的感染率无差异；同样，他们之间的HGV感染亦无统计学意义。HGV RNA阳性与HGV RNA阴性静脉毒瘾者之间HCV的感染亦无差异。上述结果提示，HBV，HCV和HGV三种病毒的感染，相互之间并无关联或因果关系，静脉毒瘾者中HCV和HGV的高感染率，HCV与HGV的高混合感染率是由于共用针头或针刺传播造成的。
参考文献
1，高志良，姚集鲁. 热变性HCV RNA模板直接法扩增. 中山医科大学学报，1994，15(3)：68～70.
2，朱 彪，吴南屏，吴灵娇，等. 浙江省吸毒人员HIV、HBV、HCV感染的血清学研究。中国公共卫生，1999，15(5)：415～416.
3，韦莉萍，周 珉，周德润，等. 海洛因依赖者吸毒方式与HIV，HBV，HDV，HCV和HGV感染关系研究. 中国公共卫生，1999，15(5)：413～414.
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4，葛宪民，王树声，黄果勇，等. 广西吸毒成瘾者的(HIV，HBV，HCV和HTLV-1)的血清学研究. 广西预防医学，1996，2(1)：8～11.
5，唐宝璋，佟 力，严其荣，等. 临沧和昆明地区海洛因依赖者HIV及肝炎病毒感染的调查. 中华预防医学杂志，1995，29(4)：228～230.
6，顾士民，蒋伟伦，巫善明，等. 上海地区静脉毒瘾者携带HBV、HCV和HGV的研究. 上海医学，1997，20(11)：652～654.
7，Trisler Z,Seme K,Poljak M,et al. Prevalence of hepatitis C and G virus infections among intravenous drug users in Slovenia and Croatia. Scand J Infect Dis,1999,31(1):33～35.
8，李 刚，陈 青，姚集鲁，等. 静脉毒瘾者84例HGV感染状况. 中华传染病杂志，1998，16(1)：26～28.
9，Vimolket T,Theamboonlers A,Tangkijvanich P,et al. Hepatitis GBV-C infection in intravenous drug users. Southeast Asian J Trop Med Public Health,1998,29(3):491～496., 百拇医药