PAF受体拮抗剂治疗颈髓损伤的早期观察
作者：肖建如 侯铁胜 陆永坚 邵擎东 胡业丰 袁中平 吴可沁 贾连顺 赵定麟
单位：
关键词：脊髓损伤；受体拮抗剂；血小板活化因子
摘要 目的摘要 目的: 探讨全血血小板活化因子(PAF)受体拮抗剂BN52021对颈髓损伤患者早期治疗的效果及其机制。方法: 颈髓损伤患者分为地塞米松组和BN52021组(n=18)，观察两组颈髓损伤患者PAF、血浆血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素1α(6-Keto-PGF1α)含量的变化、多系统器官衰竭(MSOF)发生率及脊髓神经功能恢复状态。结果: BN52021组血液中PAF、TXB2含量、T/K值、伤后MSOF发生率较地塞米松组明显降低，而脊髓神经功能恢复优于地塞米松组。结论: PAF受体拮抗剂对颈髓损伤后神经功能具有较好的保护作用，并且是早期治疗脊髓损伤的潜在理想药物。
, 百拇医药
中国图书资料分类法分类号 R651.205
Inspection of the early treatment effects of PAF receptor antagonist on cervical cord injury
Xiao Jianru, Hou Tiesheng, Lu Yongjian, Shao Qingdong, Hu Yefeng, Yuan Zhongping, Wu Keqing, Jia Lianshun, Zhao Dinglin (Department of Orthopaedics, Changzheng Hospital, Second Military Medical University, Shanghai, 200003)
Abstract Objective: To investigate the early treatment effects of platelet activating factor (PAF) receptor antagonist BN52021 on the patients with cervical cord injury and their machanisms. Methods: The patients with cervical cord injury were divided into two groups, who were treated with PAF receptor antagonist BN52021 or dexamethasone respectively. We investigated the consecutive changes of PAF levels of whole blood, thromboxane B2 (TXB2),6-keto-prostaglandin1α (6-Keto-PGF1α) levels and T/K ratio of plasma, multiple system organ failure (MSOF) morbidity and recovery state of spinal cord neurological function in the patients. Results: The levels of PAF, TXB2, T/K ratio, MSOF morbidity significantly decreased in the BN52021 group as compared with the dexamethasone group, and functional neurologic recovery in the BN52021 group was superior to the dexamethasone group. Conclusion: PAF receptor antagonist BN52021 has the better protective effects on neurological function after cervical cord injury and would be a potentially ideal therapeutic agent for the clinical treatment of spinal cord injury.
, 百拇医药
Key words cervical cord injuries; receptor antagonist; platelet activating factor
血小板活化因子(PAF)被认为是中枢神经损伤后继发性损害的重要启动因子之一[1]。本研究应用PAF受体拮抗剂BN52021早期治疗颈髓损伤，并与地塞米松治疗效果进行综合比较。
1 材料和方法
1.1 临床资料 本组36例急性颈髓损伤患者中，男性32例，女性4例，年龄为18～63岁，平均(37.2±15.4)岁。损伤部位：C4，5骨折脱位伴四肢全瘫4例，不全瘫2例；C5，6骨折脱位伴四肢全瘫2例，不全瘫6例；C5爆裂性骨折伴四肢全瘫2例，不全瘫2例；C6爆裂性骨折伴四肢全瘫2例，不全瘫2例；C6，7骨折脱位伴四肢不全瘫4例；颈髓过伸性损伤10例。
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1.2 脊髓损伤分类 根据Frankle分类系统与外伤性运动神经指标[2]，将36例分为5类。A类：完全性瘫痪10例；B类：不完全性瘫痪，仅有感觉，没有随意运动6例；C类：不完全性瘫痪，有非功能性运动存在10例；D类：有局限性运动功能的不完全性瘫痪10例；E类：感觉存在，运动功能基本正常，可能有异常反射，本组未收集此类病例。常规给予速尿、地塞米松、维生素C等治疗。
1.3 分组及给药方法 入院抽血后，将入院时脊髓功能和损伤节段大致相同的病例，分为地塞米松组和BN52021 组，每组18例。地塞米松组采用常规药物治疗(给予地塞米松20 mg、速尿20 mg、维生素C 2 g静滴，1次/d，前2种药物5 d后停药)。BN52021 组在上述常规治疗药物中除去地塞米松，给予BN52021 120 mg静滴，1次/d，5 d后停药。另根据病情给予抗感染及对症处理。32例行颈前路减压或后路减压复位术, 4例行格氏带牵引术。
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1.4 标本采集和处理 入院后当天、用药后1，3 d分别抽取静脉血5 ml，其中3 ml置于含有2% EDTA Na2 0.5 ml的离心管内，4℃、3 000 r/min离心15 min，取上清液(血浆)。另取2 ml全血迅速放入冷终止反应液 (氯仿∶甲醇∶冰醋酸为1∶2∶0.04 V/V)中作为提取PAF的标本。
1.5 PAF提取及定量分析 采用改良的Eligh-Dyer 方法和薄层层析分离技术[3]提取PAF，采用改良的Lalaukeraly法[4]进行PAF定量生物分析，吹干的样本用50 μl无水乙醇复溶，低温振荡，取10 μl和经洗涤的兔富含血小板悬液0.2 ml加入测定杯中，终容积为210 μl，于PAM-2型PPP自动平衡血小板聚集仪上测定血小板最大聚集率，然后根据PAF标准液的量效曲线推算出PAF的质量浓度，用ng/ml表示。
1.6 TXB2、6-Keto-PGF1α含量的测定 采用放射免疫分析法测定血浆中的TXB2、6-Keto-PGF1α含量，药盒购自苏州医学院血栓与止血研究室，具体操作过程按药盒说明书进行，其质量浓度用pg/ml表示。
, 百拇医药
1.7 脊髓神经功能评定 按Frankel法分别记录两组患者入院时和治疗后3个月脊髓神经功能。
1.8 统计学处理 数据以
±s表示，两组用t检验统计学分析。脊髓神经功能评定经秩和检验统计学分析。
2 结 果
2.1 血液系列脂质炎性介质变化 两组患者入院当天全血PAF、血浆TXB2、6-Keto-PGF1α及T/K值均明显增高，用药后1，3 d，BN52021 组全血PAF、血浆TXB2、6-Keto-PGF1α含量及T/K值均较地塞米松组明显降低(P<0.01,P<0.05,表1)。
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2.2 神经功能恢复状况 术后或伤后3个月随访，BN52021 组A类6例中，4例有改善，进入C类，2例无好转；B类4例，进入C类3例，D类1例；C类5例，进入D类5例；D类5例进入E类4例，1例有改善，但进入E类条件不足。地塞米松组A类5例中，2例有改善，进入C类，1例无好转，2例死亡；B类3例，进入C类1例，D类1例,1例无好转；C类5例，进入D类3例，2例无好转；D类5例，进入E类2例，3例有改善，但进入E类条件不足。经Wilcoxon秩和检验，U>0.05,P<0.05，BN52021 组神经功能恢复优于地塞米松组。
2.3 多系统器官衰竭(MSOF)发生率 BN52021组发生1例MSOF，表现为呼吸功能和心功能衰竭；地塞米松组发生4例MSOF，表现为呼吸和心功能衰竭1例，呼吸功能、心功能及消化道功能衰竭2例，呼吸功能、心功能、消化道功能及肾功能衰竭1例，2例死亡。
表 1 血液脂质炎性介质含量的变化
, 百拇医药
Tab 1 Changes of series lipid inflammatory mediators contents
of blood(n=18，±s)
Group
PAF(ρB/ng*ml-1)
TXB2
(ρB/ng*ml-1)
6-Keto-PGF1α
, 百拇医药
(ρB/ng*ml-1)
T/K
Dexamethasone (t/d)
0
1 267.33±254.55
1 541.50±248.72
85.12±15.36
18.11±2.39
1
1 060.56±204.69*
1 174.98±243.87*
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83.65±15.06
14.04±2.12*
3
846.57±127.51**
924.05±188.35**
78.06±12.21
11.84±1.71**
BN52021 (t/d)
0
1 239.51±256.77
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1 557.29±246.48
84.78±15.11
18.37±2.41
1
767.34±213.73**△
949.27±195.44**△
81.22±14.18
11.68±1.63**△
3
552.45±118.12**△
, 百拇医药
672.74±134.36**△
74.37±12.13
9.04±1.55**△
*P<0.05, **P<0.01 vs same group at pretreated stage; △P<0.05 vs dexamethasone group at same stage
3 讨 论
在临床上，原发性脊髓损伤直接导致脊髓神经功能丧失仅为少数，而脊髓损伤后脊髓组织系列自毁性介质大量释放，继发性脊髓组织缺血、缺氧、水肿、变性和坏死是导致伤后神经功能损害的主要因素。如何抑制自毁性介质释放和阻断生物效应是防治脊髓损伤后继发性损害的关键。长期以来，可供临床脊髓损伤急救用药是糖皮质激素(地塞米松、甲基强的松)，其对神经细胞结构和功能均具有一定保护作用。然而，糖皮质激素常常带来一系列不容忽视的副作用，如应激性溃疡、机体免疫功能低下等。因此，选择有效安全的脊髓损伤复苏药物已成为重要的课题。现已证明，PAF是创伤后机体内激发病理生理反应的始动及放大因子。作者在另一组实验中证实了脊髓损伤后脊髓组织PAF含量成倍增加，其伤后PAF含量变化规律与脊髓组织水肿、缺血的程度密切相关。应用PAF受体拮抗剂BN52021预防脊髓损伤后继发性损害，发现PAF受体拮抗剂能够减少神经组织坏死范围，降低血管壁的通透性，改善微循环，有效减轻脊髓水肿及坏死[5]。本实验使用了PAF受体拮抗剂中具有代表性的药物BN52021，其拮抗PAF受体的作用最强。本结果发现，BN52021组患者用药后全血PAF、血浆TXB2含量及T/K值均较地塞米松组明显降低。BN52021的作用机制可能与下列因素有关：(1) 通过阻断PAF受体，抑制了PAF的生物效应，也抑制了花生四烯酸代谢产物的释放，使体内两大强烈的血小板聚集剂、血管收缩剂PAF、TXA2作用减弱。(2)使PAF对其他炎性介质(Ca2+、自由基、兴奋性氨基酸)的介导或协同作用减弱[6]，抑制了Ca2+内流、自由基、兴奋性氨基酸的产生和释放。有效地防治了血管痉挛、血栓形成、血管内皮细胞损害，从而改善了微循环血流量，延缓了伤后继发性损害的发生、发展。观察两组伤后MSOF的发生率，发现BN52021组MSOF的发生率明显低于地塞米松组。说?Transfer interrupted!, http://www.100md.com
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关键词：脊髓损伤；受体拮抗剂；血小板活化因子
摘要 目的摘要 目的: 探讨全血血小板活化因子(PAF)受体拮抗剂BN52021对颈髓损伤患者早期治疗的效果及其机制。方法: 颈髓损伤患者分为地塞米松组和BN52021组(n=18)，观察两组颈髓损伤患者PAF、血浆血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素1α(6-Keto-PGF1α)含量的变化、多系统器官衰竭(MSOF)发生率及脊髓神经功能恢复状态。结果: BN52021组血液中PAF、TXB2含量、T/K值、伤后MSOF发生率较地塞米松组明显降低，而脊髓神经功能恢复优于地塞米松组。结论: PAF受体拮抗剂对颈髓损伤后神经功能具有较好的保护作用，并且是早期治疗脊髓损伤的潜在理想药物。
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中国图书资料分类法分类号 R651.205
Inspection of the early treatment effects of PAF receptor antagonist on cervical cord injury
Xiao Jianru, Hou Tiesheng, Lu Yongjian, Shao Qingdong, Hu Yefeng, Yuan Zhongping, Wu Keqing, Jia Lianshun, Zhao Dinglin (Department of Orthopaedics, Changzheng Hospital, Second Military Medical University, Shanghai, 200003)
Abstract Objective: To investigate the early treatment effects of platelet activating factor (PAF) receptor antagonist BN52021 on the patients with cervical cord injury and their machanisms. Methods: The patients with cervical cord injury were divided into two groups, who were treated with PAF receptor antagonist BN52021 or dexamethasone respectively. We investigated the consecutive changes of PAF levels of whole blood, thromboxane B2 (TXB2),6-keto-prostaglandin1α (6-Keto-PGF1α) levels and T/K ratio of plasma, multiple system organ failure (MSOF) morbidity and recovery state of spinal cord neurological function in the patients. Results: The levels of PAF, TXB2, T/K ratio, MSOF morbidity significantly decreased in the BN52021 group as compared with the dexamethasone group, and functional neurologic recovery in the BN52021 group was superior to the dexamethasone group. Conclusion: PAF receptor antagonist BN52021 has the better protective effects on neurological function after cervical cord injury and would be a potentially ideal therapeutic agent for the clinical treatment of spinal cord injury.
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Key words cervical cord injuries; receptor antagonist; platelet activating factor
血小板活化因子(PAF)被认为是中枢神经损伤后继发性损害的重要启动因子之一[1]。本研究应用PAF受体拮抗剂BN52021早期治疗颈髓损伤，并与地塞米松治疗效果进行综合比较。
1 材料和方法
1.1 临床资料 本组36例急性颈髓损伤患者中，男性32例，女性4例，年龄为18～63岁，平均(37.2±15.4)岁。损伤部位：C4，5骨折脱位伴四肢全瘫4例，不全瘫2例；C5，6骨折脱位伴四肢全瘫2例，不全瘫6例；C5爆裂性骨折伴四肢全瘫2例，不全瘫2例；C6爆裂性骨折伴四肢全瘫2例，不全瘫2例；C6，7骨折脱位伴四肢不全瘫4例；颈髓过伸性损伤10例。
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1.2 脊髓损伤分类 根据Frankle分类系统与外伤性运动神经指标[2]，将36例分为5类。A类：完全性瘫痪10例；B类：不完全性瘫痪，仅有感觉，没有随意运动6例；C类：不完全性瘫痪，有非功能性运动存在10例；D类：有局限性运动功能的不完全性瘫痪10例；E类：感觉存在，运动功能基本正常，可能有异常反射，本组未收集此类病例。常规给予速尿、地塞米松、维生素C等治疗。
1.3 分组及给药方法 入院抽血后，将入院时脊髓功能和损伤节段大致相同的病例，分为地塞米松组和BN52021 组，每组18例。地塞米松组采用常规药物治疗(给予地塞米松20 mg、速尿20 mg、维生素C 2 g静滴，1次/d，前2种药物5 d后停药)。BN52021 组在上述常规治疗药物中除去地塞米松，给予BN52021 120 mg静滴，1次/d，5 d后停药。另根据病情给予抗感染及对症处理。32例行颈前路减压或后路减压复位术, 4例行格氏带牵引术。
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1.4 标本采集和处理 入院后当天、用药后1，3 d分别抽取静脉血5 ml，其中3 ml置于含有2% EDTA Na2 0.5 ml的离心管内，4℃、3 000 r/min离心15 min，取上清液(血浆)。另取2 ml全血迅速放入冷终止反应液 (氯仿∶甲醇∶冰醋酸为1∶2∶0.04 V/V)中作为提取PAF的标本。
1.5 PAF提取及定量分析 采用改良的Eligh-Dyer 方法和薄层层析分离技术[3]提取PAF，采用改良的Lalaukeraly法[4]进行PAF定量生物分析，吹干的样本用50 μl无水乙醇复溶，低温振荡，取10 μl和经洗涤的兔富含血小板悬液0.2 ml加入测定杯中，终容积为210 μl，于PAM-2型PPP自动平衡血小板聚集仪上测定血小板最大聚集率，然后根据PAF标准液的量效曲线推算出PAF的质量浓度，用ng/ml表示。
1.6 TXB2、6-Keto-PGF1α含量的测定 采用放射免疫分析法测定血浆中的TXB2、6-Keto-PGF1α含量，药盒购自苏州医学院血栓与止血研究室，具体操作过程按药盒说明书进行，其质量浓度用pg/ml表示。
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1.7 脊髓神经功能评定 按Frankel法分别记录两组患者入院时和治疗后3个月脊髓神经功能。
1.8 统计学处理 数据以
±s表示，两组用t检验统计学分析。脊髓神经功能评定经秩和检验统计学分析。2 结 果
2.1 血液系列脂质炎性介质变化 两组患者入院当天全血PAF、血浆TXB2、6-Keto-PGF1α及T/K值均明显增高，用药后1，3 d，BN52021 组全血PAF、血浆TXB2、6-Keto-PGF1α含量及T/K值均较地塞米松组明显降低(P<0.01,P<0.05,表1)。
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2.2 神经功能恢复状况 术后或伤后3个月随访，BN52021 组A类6例中，4例有改善，进入C类，2例无好转；B类4例，进入C类3例，D类1例；C类5例，进入D类5例；D类5例进入E类4例，1例有改善，但进入E类条件不足。地塞米松组A类5例中，2例有改善，进入C类，1例无好转，2例死亡；B类3例，进入C类1例，D类1例,1例无好转；C类5例，进入D类3例，2例无好转；D类5例，进入E类2例，3例有改善，但进入E类条件不足。经Wilcoxon秩和检验，U>0.05,P<0.05，BN52021 组神经功能恢复优于地塞米松组。
2.3 多系统器官衰竭(MSOF)发生率 BN52021组发生1例MSOF，表现为呼吸功能和心功能衰竭；地塞米松组发生4例MSOF，表现为呼吸和心功能衰竭1例，呼吸功能、心功能及消化道功能衰竭2例，呼吸功能、心功能、消化道功能及肾功能衰竭1例，2例死亡。
表 1 血液脂质炎性介质含量的变化
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Tab 1 Changes of series lipid inflammatory mediators contents
of blood(n=18，
±s)Group
PAF(ρB/ng*ml-1)
TXB2
(ρB/ng*ml-1)
6-Keto-PGF1α
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(ρB/ng*ml-1)
T/K
Dexamethasone (t/d)
0
1 267.33±254.55
1 541.50±248.72
85.12±15.36
18.11±2.39
1
1 060.56±204.69*
1 174.98±243.87*
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83.65±15.06
14.04±2.12*
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846.57±127.51**
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BN52021 (t/d)
0
1 239.51±256.77
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1 557.29±246.48
84.78±15.11
18.37±2.41
1
767.34±213.73**△
949.27±195.44**△
81.22±14.18
11.68±1.63**△
3
552.45±118.12**△
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672.74±134.36**△
74.37±12.13
9.04±1.55**△
*P<0.05, **P<0.01 vs same group at pretreated stage; △P<0.05 vs dexamethasone group at same stage
3 讨 论
在临床上，原发性脊髓损伤直接导致脊髓神经功能丧失仅为少数，而脊髓损伤后脊髓组织系列自毁性介质大量释放，继发性脊髓组织缺血、缺氧、水肿、变性和坏死是导致伤后神经功能损害的主要因素。如何抑制自毁性介质释放和阻断生物效应是防治脊髓损伤后继发性损害的关键。长期以来，可供临床脊髓损伤急救用药是糖皮质激素(地塞米松、甲基强的松)，其对神经细胞结构和功能均具有一定保护作用。然而，糖皮质激素常常带来一系列不容忽视的副作用，如应激性溃疡、机体免疫功能低下等。因此，选择有效安全的脊髓损伤复苏药物已成为重要的课题。现已证明，PAF是创伤后机体内激发病理生理反应的始动及放大因子。作者在另一组实验中证实了脊髓损伤后脊髓组织PAF含量成倍增加，其伤后PAF含量变化规律与脊髓组织水肿、缺血的程度密切相关。应用PAF受体拮抗剂BN52021预防脊髓损伤后继发性损害，发现PAF受体拮抗剂能够减少神经组织坏死范围，降低血管壁的通透性，改善微循环，有效减轻脊髓水肿及坏死[5]。本实验使用了PAF受体拮抗剂中具有代表性的药物BN52021，其拮抗PAF受体的作用最强。本结果发现，BN52021组患者用药后全血PAF、血浆TXB2含量及T/K值均较地塞米松组明显降低。BN52021的作用机制可能与下列因素有关：(1) 通过阻断PAF受体，抑制了PAF的生物效应，也抑制了花生四烯酸代谢产物的释放，使体内两大强烈的血小板聚集剂、血管收缩剂PAF、TXA2作用减弱。(2)使PAF对其他炎性介质(Ca2+、自由基、兴奋性氨基酸)的介导或协同作用减弱[6]，抑制了Ca2+内流、自由基、兴奋性氨基酸的产生和释放。有效地防治了血管痉挛、血栓形成、血管内皮细胞损害，从而改善了微循环血流量，延缓了伤后继发性损害的发生、发展。观察两组伤后MSOF的发生率，发现BN52021组MSOF的发生率明显低于地塞米松组。说?Transfer interrupted!, http://www.100md.com