长沙地区成人不同人群柯萨奇B组病毒抗体水平研究
作者：谢梅芝 谭红专 卜平凤 吴建民 欧阳范献 袁金玲
单位：谢梅芝 谭红专 卜平凤 吴建民 公共卫生学院流行病学教研室 长沙 410078；欧阳范献 袁金玲 第三附属医院检验科 长沙 410003
关键词：柯萨奇病毒B；柯萨奇病毒感染；抗体类；病毒；流行病学；成人；长沙*
湖南医科大学学报990211 提 要 用免疫酶组化法对46例病毒性心肌炎、121例各型肝炎患者及108名合格献血者进行抗柯萨奇B组病毒(CVB)-IgM和抗CVB-IgG抗体检测，并以倍比稀释进行抗体滴度测定。结果显示：心肌炎组的抗体阳性率明显高于另二组(P<0.01)；心肌炎组两种抗体的几何平均滴度亦明显高于另两组。提示长沙地区正常人群对CVB普遍易感，大多数病毒性心肌炎可能与CVB感染有关。
Study of levels of antibody against coxsackievirus B
, 百拇医药
in different adults in Changsha area
Xie Meizhi, Tan Hongzhuan, Pu Pingfeng, et al
(Department of Epidemiology, Hunan Medical University, Changsha 410008)
In order to verify the antibody levels against coxsackievirus B(CVB) in different adults, specific anti-CVB-IgM and anti-CVB-IgG have been detected in 46 viral myocarditis, 121 viral-hepatitis patients and 108 healthy donors by using immuno-enzyme histochemical method, and the antibody titres were also tested. The results showed that the positive rate of anti-CVB in viral myocarditis group, viral hepatitis group and donor group were 80.4%(37/46), 25.6%(31/121) and 40.7%(44/108), respectively. The GMT of anti-CVB-IgM and anti-CVB-IgG in viral myocarditis group, hepatitis group and donor group were 1∶84.84,1∶9.07,1∶64.00 and 1∶179.27,1∶9.59,1∶21.42, respectively. The positive rate and GMT of anti-CVB-IgM and anti-CVB-IgG in viral myocarditis group were significantly higher than those in the other two groups. The positive rate had no statistical difference between men and women. The results indicate that the majority of the healthy population in Changsha area is susceptible for CVB and most cases of the viral myocarditis many be related to CVB infection. It is considered that CVB can cause many diseases. Furthermore, there are no effective vaccine against CVB so far. One should think of the probability of CVB infection when encountering a patient.
, http://www.100md.com
Key words adult; antibody; viral; epidemiology; coxsackievirus B infection; Changsha*
柯萨奇B组病毒(coxsackievirus B, CVB)是一组较为常见的肠道病毒。自1984年Dalldorf和Sickles在纽约柯萨奇镇发现该病毒以来，已证实它与许多疾病有关。轻度感染时引起急性发热、上呼吸道感染、皮疹等；严重时导致心肌炎、脑软化、胰腺炎等。近年许多学者从不同角度研究，发现CVB还与多肌炎、扩张型心肌病、糖尿病以及自然流产等疾病有联系[1～4]。CVB在不同地区、不同人群的感染率各家报道不一。有关各人群抗CVB的抗体水平国内外报道甚少。本文对长沙地区的病毒性心肌炎和肝炎患者及健康供血者进行了该方面的研究，旨在了解不同人群中CVB的感染状况及抗体水平。
1 材料与方法
, http://www.100md.com
1.1 对象与分组 (1)病毒性心肌炎组(心肌炎组)：选自1995年3月～7月就诊于附属湘雅医院和长沙市第一医院内科门诊和住院诊断为病毒性心肌炎的患者46例。其中男26例，女20例；平均年龄27.3(16～55)岁。诊断按1994年修改的全国病毒性心肌炎诊断标准。每一对象于次日空腹静脉采血2ml，分离血清后置冰箱保存备检。(2)各型肝炎组(肝炎组)：选自同期在本校第二附属医院传染病科住院的各型肝炎患者共121例。诊断根据全国第六届病毒性肝炎会议制定的病毒性肝炎防治方案进行。其中男104例，女17例；平均年龄35(18～67)岁。入院次晨空腹静脉采血2ml，当日分离血清后置冰箱保存备检。(3)献血员组(对照组)：同期在本市中心血站随机抽取108名合格献血员(血清谷丙转氨酶正常，乙型肝炎表面抗原阴性，丙型肝炎抗体阴性)。其中男34名，女74名；平均年龄33(23～48)岁。同时留取标本置冰箱保存备检。
1.2 试剂 CVB1-6型毒种由中国医学科学院昆明医学研究所提供，经本室制备成抗原片；HRP羊抗人IgM和IgG由卫生部北京生物制品所提供；3，3-二氨基联苯胺为上海试剂一厂产品。
, 百拇医药
1.3 方法 全部标本均用免疫酶组织化学法(组化法)检测血清抗CVB-IgM和抗CVB-IgG。操作参照张维[5]等介绍的方法略加改进。被检血清和酶标记物均用pH7.4 0.01M的磷酸盐缓冲液(PBS)稀释，血清稀释度从1∶8开始，作倍比稀释至终点。酶标记物应用浓度为1∶25，检测时设阴、阳性对照，专人操作。
1.4 统计处理 全部资料用Foxpro 5.0数据库管理，用SPSS 7.0统计软件进行统计分析。在CVB感染6型中有任一型IgM或IgG抗体阳性，则认为有相应感染。
2 结果
2.1 不同人群的CVB抗体阳性率 心肌炎组与肝炎组及对照组抗CVB-IgM和抗CVB-IgG阳性率差异均有显著性(表1)。
表1 不同人群抗CVB1-6阳性率 组别
, 百拇医药
例数
IgM
IgG
IgM和/或IgG
阳性数
阳性率(%)
阳性数
阳性率(%)
阳性数
阳性率(%)
心肌炎组
46
18
, http://www.100md.com
39.1①②
35
76.1①②
37
80.4①②
肝炎组
121
12
9.1
24
19.8
31
, 百拇医药
25.6
对照组
108
9
8.3③
39
36.1②
44
40.7④
经χ2检验：①与对照组比P<0.01；②与肝炎组比P<0.01;③与肝炎组比P>0.05;④与肝炎组比P<0.05
, 百拇医药
2.2 不同人群抗CVB1-6抗体滴度 用倍比稀释将上述三组标本作抗体滴度测定。混合感染者以其最高抗体滴度为准，计算各组抗CVB抗体几何平均滴度(GMT)并进行比较。心肌炎组的抗CVB-IgM和抗CVB-IgG抗体的GMT均明显高于其他两组。心肌炎组与对照组间抗CVB-IgM差异虽不显著，但其趋势明显(表2)。
表2 不同人群抗CVB1-6抗体水平 组别
IgM
IgG
GMT
95%可信空间
下限
上限
, 百拇医药
GMT
95%可信空间
下限
上限
心肌炎组
84.840①②
52.857
136.207
179.27①③
141.91
226.52
肝炎组
, 百拇医药
9.074
6.853
12.017
9.59
8.15
11.27
对照组
64.003①
31.735
129.032
21.42①
, 百拇医药 13.95
32.90
经t检验：①与肝炎组比P<0.01;②与对照组比P>0.05;③与对照组比P<0.01
2.3 不同性别抗CVB-IgM和抗CVB-IgG的阳性率 三组男女抗CVB抗体的阳性率差异均无显著性(表3)；各组男女抗CVB-IgM和IgG的GMT差异也无显著性。
表3 各组男女抗CVB抗体(IgM和/或IgG)阳性率比较 组别
例数
男
女
χ2
, 百拇医药
P
例数
阳性数
阳性率(%)
例数
阳性数
阳性率(%)
心肌炎组
46
26
20
76.9
20
, http://www.100md.com
17
85.0
0.4686
>0.05
肝炎组
121
104
24
23.1
17
7
41.2
2.5119
, http://www.100md.com
>0.05
对照组
108
34
13
38.2
74
31
41.9
0.1290
>0.05
3 讨论
柯萨奇B组病毒作为病毒性心肌炎最主要的病原体已成共识。但有关不同人群感染CVB的流行病学资料相对较少，且有一定的地区差异。近年来病毒性心肌炎的发病率不断上升；因该病早期症状和体征缺乏特异性，患者可因贻误诊断而发展为扩张型心肌病。由于目前直接病因诊断难以广泛开展，故抗CVB-IgM和抗CVB-IgG作为血清学感染指标，对早期临床诊断有重要参考价值。本资料结果表明，虽然正常人群中也有一定比例的抗体阳性者，但病毒性心肌炎患者的抗CVB抗体，无论是IgG，抑或IgM，其抗体阳性率均明显高于肝炎组和对照组(P<0.01)；且其抗体平均滴度也高于其他两组，尤其是IgG的抗体平均滴度。各组间差异显著(P<0.01)。提示抗CVB抗体检测对病毒性心肌炎的诊断有一定意义。
, http://www.100md.com
长沙地区病毒性心肌炎组与肝炎组和对照组的CVB总阳性率分别为80.4%，25.6%和40.7%。各组间的总阳性率差异均有高度显著性(P<0.01)。此结果较之上海地区心肌炎患者和正常人群抗CVB中和抗体检出率(分别为94%，77.1%和77.5%)为低[6]，而较长沙地区儿童的研究结果为高[7]。上述结果提示CVB在不同地区的感染率可能不同，成人较儿童感染的机会多且反应强烈。肝炎患者与正常人群比较，其抗体阳性率和几何平均滴度均明显低，其机制有待探讨。
本资料显示，长沙地区成人不同人群CVB的感染率及其抗体水平与上海地区情况基本类似[6]，即病毒性心肌炎组感染率高，其他疾病组和正常对照组亦有一定的感染，且GMT较低。提示正常人群对CVB普遍易感。由于CVB可导致多种疾病，而目前尚无有效疫苗推广使用。一旦机体抵抗力下降，心脏等重要器官乃至各部位肌肉等均可能受感染。故在早期诊治不明原因的相应病症时，应疑及CVB感染。
, 百拇医药
中国图书分类号 R181.36
参考文献
[1]Calama JM, Vogels MT, Jansen GH, et al. Antibodies against enterovious in intravenous Ig preparations: great variation in titres and poor correlation with the incidence of circulating serotypes. J Med Virol, 1997,53:273-276
[2]Goldwaten PN. Immunoglobulin M immunoassay in investigation of coxackie B5 and B6 outbreaks in south Australia. J Clin Microbiol, 1995,33(6):1628-1631
, 百拇医药
[3]Beressi A, Sunheimer RL, Huish S, et al. Acute severe rhabdomydysis in hunan immunodeficiency virus-seropositive patient associated with rising anti-coxsackie B viral titre. Ann Clin Lab Sci, 1994,24(3):278-281
[4]Axelsson C, Bondestam K, Frisk G, et al. Coxsackie B virus infection in women with miscarriage. J Med Virol, 1993,39(4):282-285
[5]张维，何丽芳，夏绿蒂，等.用免疫酶染色法检测急性心肌炎患者血清中柯萨奇B组病毒抗体.中华微生物和免疫学杂志，1983，3(3)：181-183
[6]陈曙霞，郑新娟，包世宏，等.121例病毒性心肌炎柯萨奇B组病毒中和抗体的检测.上海第二医科大学学报，1991，11(2)：143-146
[7]刘爱忠，吴建民，谢梅芝，等.小儿柯萨奇B组病毒性心肌炎血清学诊断标准的研究.实用儿科杂志，1993，8(3)：230-232
收稿日期：1998-09-25, 百拇医药
单位：谢梅芝 谭红专 卜平凤 吴建民 公共卫生学院流行病学教研室 长沙 410078；欧阳范献 袁金玲 第三附属医院检验科 长沙 410003
关键词：柯萨奇病毒B；柯萨奇病毒感染；抗体类；病毒；流行病学；成人；长沙*
湖南医科大学学报990211 提 要 用免疫酶组化法对46例病毒性心肌炎、121例各型肝炎患者及108名合格献血者进行抗柯萨奇B组病毒(CVB)-IgM和抗CVB-IgG抗体检测，并以倍比稀释进行抗体滴度测定。结果显示：心肌炎组的抗体阳性率明显高于另二组(P<0.01)；心肌炎组两种抗体的几何平均滴度亦明显高于另两组。提示长沙地区正常人群对CVB普遍易感，大多数病毒性心肌炎可能与CVB感染有关。
Study of levels of antibody against coxsackievirus B
, 百拇医药
in different adults in Changsha area
Xie Meizhi, Tan Hongzhuan, Pu Pingfeng, et al
(Department of Epidemiology, Hunan Medical University, Changsha 410008)
In order to verify the antibody levels against coxsackievirus B(CVB) in different adults, specific anti-CVB-IgM and anti-CVB-IgG have been detected in 46 viral myocarditis, 121 viral-hepatitis patients and 108 healthy donors by using immuno-enzyme histochemical method, and the antibody titres were also tested. The results showed that the positive rate of anti-CVB in viral myocarditis group, viral hepatitis group and donor group were 80.4%(37/46), 25.6%(31/121) and 40.7%(44/108), respectively. The GMT of anti-CVB-IgM and anti-CVB-IgG in viral myocarditis group, hepatitis group and donor group were 1∶84.84,1∶9.07,1∶64.00 and 1∶179.27,1∶9.59,1∶21.42, respectively. The positive rate and GMT of anti-CVB-IgM and anti-CVB-IgG in viral myocarditis group were significantly higher than those in the other two groups. The positive rate had no statistical difference between men and women. The results indicate that the majority of the healthy population in Changsha area is susceptible for CVB and most cases of the viral myocarditis many be related to CVB infection. It is considered that CVB can cause many diseases. Furthermore, there are no effective vaccine against CVB so far. One should think of the probability of CVB infection when encountering a patient.
, http://www.100md.com
Key words adult; antibody; viral; epidemiology; coxsackievirus B infection; Changsha*
柯萨奇B组病毒(coxsackievirus B, CVB)是一组较为常见的肠道病毒。自1984年Dalldorf和Sickles在纽约柯萨奇镇发现该病毒以来，已证实它与许多疾病有关。轻度感染时引起急性发热、上呼吸道感染、皮疹等；严重时导致心肌炎、脑软化、胰腺炎等。近年许多学者从不同角度研究，发现CVB还与多肌炎、扩张型心肌病、糖尿病以及自然流产等疾病有联系[1～4]。CVB在不同地区、不同人群的感染率各家报道不一。有关各人群抗CVB的抗体水平国内外报道甚少。本文对长沙地区的病毒性心肌炎和肝炎患者及健康供血者进行了该方面的研究，旨在了解不同人群中CVB的感染状况及抗体水平。
1 材料与方法
, http://www.100md.com
1.1 对象与分组 (1)病毒性心肌炎组(心肌炎组)：选自1995年3月～7月就诊于附属湘雅医院和长沙市第一医院内科门诊和住院诊断为病毒性心肌炎的患者46例。其中男26例，女20例；平均年龄27.3(16～55)岁。诊断按1994年修改的全国病毒性心肌炎诊断标准。每一对象于次日空腹静脉采血2ml，分离血清后置冰箱保存备检。(2)各型肝炎组(肝炎组)：选自同期在本校第二附属医院传染病科住院的各型肝炎患者共121例。诊断根据全国第六届病毒性肝炎会议制定的病毒性肝炎防治方案进行。其中男104例，女17例；平均年龄35(18～67)岁。入院次晨空腹静脉采血2ml，当日分离血清后置冰箱保存备检。(3)献血员组(对照组)：同期在本市中心血站随机抽取108名合格献血员(血清谷丙转氨酶正常，乙型肝炎表面抗原阴性，丙型肝炎抗体阴性)。其中男34名，女74名；平均年龄33(23～48)岁。同时留取标本置冰箱保存备检。
1.2 试剂 CVB1-6型毒种由中国医学科学院昆明医学研究所提供，经本室制备成抗原片；HRP羊抗人IgM和IgG由卫生部北京生物制品所提供；3，3-二氨基联苯胺为上海试剂一厂产品。
, 百拇医药
1.3 方法 全部标本均用免疫酶组织化学法(组化法)检测血清抗CVB-IgM和抗CVB-IgG。操作参照张维[5]等介绍的方法略加改进。被检血清和酶标记物均用pH7.4 0.01M的磷酸盐缓冲液(PBS)稀释，血清稀释度从1∶8开始，作倍比稀释至终点。酶标记物应用浓度为1∶25，检测时设阴、阳性对照，专人操作。
1.4 统计处理 全部资料用Foxpro 5.0数据库管理，用SPSS 7.0统计软件进行统计分析。在CVB感染6型中有任一型IgM或IgG抗体阳性，则认为有相应感染。
2 结果
2.1 不同人群的CVB抗体阳性率 心肌炎组与肝炎组及对照组抗CVB-IgM和抗CVB-IgG阳性率差异均有显著性(表1)。
表1 不同人群抗CVB1-6阳性率 组别
, 百拇医药
例数
IgM
IgG
IgM和/或IgG
阳性数
阳性率(%)
阳性数
阳性率(%)
阳性数
阳性率(%)
心肌炎组
46
18
, http://www.100md.com
39.1①②
35
76.1①②
37
80.4①②
肝炎组
121
12
9.1
24
19.8
31
, 百拇医药
25.6
对照组
108
9
8.3③
39
36.1②
44
40.7④
经χ2检验：①与对照组比P<0.01；②与肝炎组比P<0.01;③与肝炎组比P>0.05;④与肝炎组比P<0.05
, 百拇医药
2.2 不同人群抗CVB1-6抗体滴度 用倍比稀释将上述三组标本作抗体滴度测定。混合感染者以其最高抗体滴度为准，计算各组抗CVB抗体几何平均滴度(GMT)并进行比较。心肌炎组的抗CVB-IgM和抗CVB-IgG抗体的GMT均明显高于其他两组。心肌炎组与对照组间抗CVB-IgM差异虽不显著，但其趋势明显(表2)。
表2 不同人群抗CVB1-6抗体水平 组别
IgM
IgG
GMT
95%可信空间
下限
上限
, 百拇医药
GMT
95%可信空间
下限
上限
心肌炎组
84.840①②
52.857
136.207
179.27①③
141.91
226.52
肝炎组
, 百拇医药
9.074
6.853
12.017
9.59
8.15
11.27
对照组
64.003①
31.735
129.032
21.42①
, 百拇医药 13.95
32.90
经t检验：①与肝炎组比P<0.01;②与对照组比P>0.05;③与对照组比P<0.01
2.3 不同性别抗CVB-IgM和抗CVB-IgG的阳性率 三组男女抗CVB抗体的阳性率差异均无显著性(表3)；各组男女抗CVB-IgM和IgG的GMT差异也无显著性。
表3 各组男女抗CVB抗体(IgM和/或IgG)阳性率比较 组别
例数
男
女
χ2
, 百拇医药
P
例数
阳性数
阳性率(%)
例数
阳性数
阳性率(%)
心肌炎组
46
26
20
76.9
20
, http://www.100md.com
17
85.0
0.4686
>0.05
肝炎组
121
104
24
23.1
17
7
41.2
2.5119
, http://www.100md.com
>0.05
对照组
108
34
13
38.2
74
31
41.9
0.1290
>0.05
3 讨论
柯萨奇B组病毒作为病毒性心肌炎最主要的病原体已成共识。但有关不同人群感染CVB的流行病学资料相对较少，且有一定的地区差异。近年来病毒性心肌炎的发病率不断上升；因该病早期症状和体征缺乏特异性，患者可因贻误诊断而发展为扩张型心肌病。由于目前直接病因诊断难以广泛开展，故抗CVB-IgM和抗CVB-IgG作为血清学感染指标，对早期临床诊断有重要参考价值。本资料结果表明，虽然正常人群中也有一定比例的抗体阳性者，但病毒性心肌炎患者的抗CVB抗体，无论是IgG，抑或IgM，其抗体阳性率均明显高于肝炎组和对照组(P<0.01)；且其抗体平均滴度也高于其他两组，尤其是IgG的抗体平均滴度。各组间差异显著(P<0.01)。提示抗CVB抗体检测对病毒性心肌炎的诊断有一定意义。
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长沙地区病毒性心肌炎组与肝炎组和对照组的CVB总阳性率分别为80.4%，25.6%和40.7%。各组间的总阳性率差异均有高度显著性(P<0.01)。此结果较之上海地区心肌炎患者和正常人群抗CVB中和抗体检出率(分别为94%，77.1%和77.5%)为低[6]，而较长沙地区儿童的研究结果为高[7]。上述结果提示CVB在不同地区的感染率可能不同，成人较儿童感染的机会多且反应强烈。肝炎患者与正常人群比较，其抗体阳性率和几何平均滴度均明显低，其机制有待探讨。
本资料显示，长沙地区成人不同人群CVB的感染率及其抗体水平与上海地区情况基本类似[6]，即病毒性心肌炎组感染率高，其他疾病组和正常对照组亦有一定的感染，且GMT较低。提示正常人群对CVB普遍易感。由于CVB可导致多种疾病，而目前尚无有效疫苗推广使用。一旦机体抵抗力下降，心脏等重要器官乃至各部位肌肉等均可能受感染。故在早期诊治不明原因的相应病症时，应疑及CVB感染。
, 百拇医药
中国图书分类号 R181.36
参考文献
[1]Calama JM, Vogels MT, Jansen GH, et al. Antibodies against enterovious in intravenous Ig preparations: great variation in titres and poor correlation with the incidence of circulating serotypes. J Med Virol, 1997,53:273-276
[2]Goldwaten PN. Immunoglobulin M immunoassay in investigation of coxackie B5 and B6 outbreaks in south Australia. J Clin Microbiol, 1995,33(6):1628-1631
, 百拇医药
[3]Beressi A, Sunheimer RL, Huish S, et al. Acute severe rhabdomydysis in hunan immunodeficiency virus-seropositive patient associated with rising anti-coxsackie B viral titre. Ann Clin Lab Sci, 1994,24(3):278-281
[4]Axelsson C, Bondestam K, Frisk G, et al. Coxsackie B virus infection in women with miscarriage. J Med Virol, 1993,39(4):282-285
[5]张维，何丽芳，夏绿蒂，等.用免疫酶染色法检测急性心肌炎患者血清中柯萨奇B组病毒抗体.中华微生物和免疫学杂志，1983，3(3)：181-183
[6]陈曙霞，郑新娟，包世宏，等.121例病毒性心肌炎柯萨奇B组病毒中和抗体的检测.上海第二医科大学学报，1991，11(2)：143-146
[7]刘爱忠，吴建民，谢梅芝，等.小儿柯萨奇B组病毒性心肌炎血清学诊断标准的研究.实用儿科杂志，1993，8(3)：230-232
收稿日期：1998-09-25, 百拇医药