板蓝根颗粒提取工艺的改进
作者：黄 俊 黄 玲
单位：广西钦州市药品检验所 钦州 535000
关键词：板蓝根颗粒；靛玉红；正交试验；提取工艺
华西药学杂志990531 提要 将板蓝根颗粒原提取用水煮醇沉缩膏干燥法改为水煮热浸静置离心减压缩膏法，综合考察了浸膏得率、靛玉红得率两个指标，用正交试验探讨最佳提取浸膏工艺条件。
板蓝根颗粒是中国传统治疗病毒性感冒及腮腺炎的理想药物，是由十字花科植物菘蓝(isatis indigotica Fort.)为原料制成的单味制剂。其主要活性成份为靛玉红，原提取浸膏采用水煎醇沉，上清液回收乙醇后再缩膏干燥的方法。该法存在乙醇用量大，生产周期长，浸膏得率和靛玉红得率低，颗粒的色香味俱差等问题。据报道[1，2]板蓝根提取液的靛玉红经醇沉浓缩后损失达92.4%。因此，对原工艺进行分析研究，现采取水煮热浸提取药液过滤后放置澄清，上清液离心后减压浓缩成膏的新工艺，并以正交试验选择最佳工艺条件，取得较好的效果。改进工艺用于药厂进行三批试验性生产的板蓝根颗粒色香味及澄明度等均达到中国药典的规定，制剂质量较原工艺生产的质量有所提高。
, http://www.100md.com
1 实验部分
1.1 药材、试药及仪器
板蓝根药材(市售)，经鉴别为十字花科植物菘蓝的干燥根。靛玉红对照品(中国药品生物制品检定所)。岛津-265紫外分光光度计(日本)。所用试剂均为AR级。
1.2 实验方法
1.2.1 新工艺的设计 取板蓝根切成小段，水洗净，加水煮沸后停止加热，使提取液保持在(80～90)℃浸渍，过滤，滤液静置过夜，取上清液离心，减压浓缩成膏即得。
1.2.2 正交试验因子及水平选择 选择A(加水倍数)，B(提取次数)，C(提取时间)为影响有效成份收率的3个因素，浸膏和靛玉红得率为考察指标，因素选择见表1。
表1 正交实验表 水平
, 百拇医药
因素
A
B
C(h)
D
1
5
2
1
1
2
10
3
1.5
, 百拇医药
2
3
15
4
2
3
1.2.3 试验方法及数据处理 以上因素水平采用L9(3)4正交表安排实验[3]，烘干法测定浸膏得率，薄层层析-分光光度法[1]测定靛玉红得率，结果见表2。方差分析见表3、表4。表2 正交实验结果 实验号
A
B
C
, 百拇医药
D
收率
(%)
靛玉红含量
(%)
1
1
1
1
1
17.58
0.093
2
1
, 百拇医药
2
2
2
18.51
0.107
3
1
3
3
3
19.12
0.093
4
2
, 百拇医药
1
2
3
19.15
0.118
5
2
2
3
1
19.34
0.121
6
2
, 百拇医药
3
1
2
18.32
0.107
7
3
1
3
2
19.72
0.130
8
3
, 百拇医药
2
1
3
18.80
0.134
9
3
3
2
1
19.63
0.121
K1
, http://www.100md.com
55.21
56.45
54.70
56.55
G=ΣY1=170.17
CT=G2/n=3217.50
Q=K21+K22+K23
K2
56.81
56.65
, http://www.100md.com
57.29
56.55
K3
58.15
57.07
58.18
57.07
R
0.98
0.21
1.16
0.17
K1
, 百拇医药
0.293
0.341
0.327
0.342
G=ΣY1=1.024
CT=G2/n=0.116
Q=K21+K22+K23
K2
0.346
0.362
, 百拇医药
0.352
0.335
K3
0.385
0.321
0.344
0.345
R
0.092
0.041
0.025
0.004
表3 干膏得率的方差分析 方差来源
, 百拇医药
离差平方和
自由度
均方
F
显著性
A
1.47
2
0.74
65.64
P<0.05
B
0.10
, http://www.100md.com
2
0.05
2.2
C
2.21
2
1.11
96.08
P<0.05
Error total
0.09
2
0.04
, 百拇医药
F1-0.10(2.2)=9.00 F1-0.05(2.2)=19.00 F1-0.01(2,2)=99.00
表4 靛玉红的方差分析 方差来源
离差平方和
自由度
均方
F
显著性
A
2.2×10-3
2
1.1×10-3
, 百拇医药
109.09
P<0.01
B
6.8×10-4
2
3.4×10-4
60.60
P<0.05
C
3.3×10-4
2
1.6×10-4
, 百拇医药
-
-
Error total
3.3×10-5
2
1.6×10-5
-
-
F值表示F比，P值表示显著性。
1.2.4 最佳工艺条件的选择和验证 从干浸膏得率方差分析表中可看出，FA>F1-0.05(2.2)，FC>F1-0.05(2.2)，AC两因素对干浸膏得率的影响显著，而B因素则对得膏率影响较小。从靛玉红得率方差分析表中看出，FA>F1-0.01(2.2)，FB>F1-0.05(2.2)，AB因素对靛玉红得率影响显著，C影响较小。从生产情况分析，提取的时间越长，溶出的淀粉、多糖、树指类就越多，因而C对浸膏得率影响显著，但靛玉红是板蓝根颗粒的活性成分，应作为主要质控指标，因此，主要考虑影响靛玉红得率的因素AB，选择A2B2C1、A3B3C1为最佳工艺条件。验证实验见表5。
, 百拇医药
表5 验证结果(%) 方法
实验号
板蓝根
(g)
干膏收率
平均率
靛玉红含量
平均率
A2B2C1
1
1000
21.42
, 百拇医药
0.0128
2
1000
20.61
20.43
0.115
0.117
3
1000
19.26
0.107
A3B3C1
, 百拇医药
1
1000
20.62
0.133
2
1000
20.81
20.50
0.142
0.127
3
1000
20.07
, http://www.100md.com
0.108
原方法
1
1000
14.86
0.047
2
1000
13.74
14.82
0.032
0.045
3
, http://www.100md.com
1000
15.88
0.058
2 讨论
2.1 实验表明，采用新工艺与原工艺相比，板蓝根得率及靛玉红得率均有较大幅度提高。A2B2C1与A3B3C1无显著差别。从经济角度、靛玉红损失及减少浓缩时间考虑，采用A2B2C1为最佳工艺，其条件是加水10倍，提取3次，每次煮沸后(80～90)℃浸渍1 h。
2.2 板蓝根木质部的薄壁细胞中含有大量的淀粉粒，原工艺煮沸提取2 h(第一次)、1 h(第二次)，使得板蓝根的木栓层和皮层被煮烂，树脂状物、植物蛋白和木质部薄壁细胞中大量的淀粉粒大量溶出，且在煮沸过程中淀粉粒进一步糊化，以至提取液浓缩时，常常是一锅糊状物，易产生焦屑。醇沉时，由于大量沉淀物的吸附和包裹作用，使得排弃的醇沉杂质中留有较大量的靛玉红。新工艺采用提取煮沸后保温(80～90)℃热浸[4]，保持了板蓝根药材木栓层、皮层的完整，减少了木质部树脂状物、淀粉粒的溶出及糊化，使提取液色泽棕黄色、液体较澄清，静置离心后可直接浓缩成膏，得膏率及靛玉红得率都有较大幅度的提高，且产品的色、香、味均优于原工艺的产品。
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2.3 靛玉红在板蓝根中以苷的形式存在，在热水中可溶出，但分子中含有酯键易被水解为吲哚醇和糖酮酸，其溶解度降低，醇沉时易被沉淀物吸附和包裹而损失掉。李影[1]等人对板蓝根冲剂在生产中靛玉红含量进行的跟踪测定结果表明，靛玉红的损失主要来自浓缩和醇沉两个环节。
致谢 承防城中药厂提取车间及质检室全体工作人员对实验的大力支持。
参考文献
1 李影，滕兆森，全汉台.板蓝根冲剂生产过程中靛玉红的含量变化及工艺改进设想.中成药，1990，12(9)∶8
2 孟根达莱，刘栓娣，青格乐.醇沉工艺对中成药质量的影响.中成药，1996，18(3)∶51
3 沈阳药学院.高等数学(数理统计方法).上海：上海科学技术出版社，1978.404
4 卫生部中医研究院中药研究所.中药制剂手册.北京：人民卫生出版社，1978.679, 百拇医药
单位：广西钦州市药品检验所 钦州 535000
关键词：板蓝根颗粒；靛玉红；正交试验；提取工艺
华西药学杂志990531 提要 将板蓝根颗粒原提取用水煮醇沉缩膏干燥法改为水煮热浸静置离心减压缩膏法，综合考察了浸膏得率、靛玉红得率两个指标，用正交试验探讨最佳提取浸膏工艺条件。
板蓝根颗粒是中国传统治疗病毒性感冒及腮腺炎的理想药物，是由十字花科植物菘蓝(isatis indigotica Fort.)为原料制成的单味制剂。其主要活性成份为靛玉红，原提取浸膏采用水煎醇沉，上清液回收乙醇后再缩膏干燥的方法。该法存在乙醇用量大，生产周期长，浸膏得率和靛玉红得率低，颗粒的色香味俱差等问题。据报道[1，2]板蓝根提取液的靛玉红经醇沉浓缩后损失达92.4%。因此，对原工艺进行分析研究，现采取水煮热浸提取药液过滤后放置澄清，上清液离心后减压浓缩成膏的新工艺，并以正交试验选择最佳工艺条件，取得较好的效果。改进工艺用于药厂进行三批试验性生产的板蓝根颗粒色香味及澄明度等均达到中国药典的规定，制剂质量较原工艺生产的质量有所提高。
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1 实验部分
1.1 药材、试药及仪器
板蓝根药材(市售)，经鉴别为十字花科植物菘蓝的干燥根。靛玉红对照品(中国药品生物制品检定所)。岛津-265紫外分光光度计(日本)。所用试剂均为AR级。
1.2 实验方法
1.2.1 新工艺的设计 取板蓝根切成小段，水洗净，加水煮沸后停止加热，使提取液保持在(80～90)℃浸渍，过滤，滤液静置过夜，取上清液离心，减压浓缩成膏即得。
1.2.2 正交试验因子及水平选择 选择A(加水倍数)，B(提取次数)，C(提取时间)为影响有效成份收率的3个因素，浸膏和靛玉红得率为考察指标，因素选择见表1。
表1 正交实验表 水平
, 百拇医药
因素
A
B
C(h)
D
1
5
2
1
1
2
10
3
1.5
, 百拇医药
2
3
15
4
2
3
1.2.3 试验方法及数据处理 以上因素水平采用L9(3)4正交表安排实验[3]，烘干法测定浸膏得率，薄层层析-分光光度法[1]测定靛玉红得率，结果见表2。方差分析见表3、表4。表2 正交实验结果 实验号
A
B
C
, 百拇医药
D
收率
(%)
靛玉红含量
(%)
1
1
1
1
1
17.58
0.093
2
1
, 百拇医药
2
2
2
18.51
0.107
3
1
3
3
3
19.12
0.093
4
2
, 百拇医药
1
2
3
19.15
0.118
5
2
2
3
1
19.34
0.121
6
2
, 百拇医药
3
1
2
18.32
0.107
7
3
1
3
2
19.72
0.130
8
3
, 百拇医药
2
1
3
18.80
0.134
9
3
3
2
1
19.63
0.121
K1
, http://www.100md.com
55.21
56.45
54.70
56.55
G=ΣY1=170.17
CT=G2/n=3217.50
Q=K21+K22+K23
K2
56.81
56.65
, http://www.100md.com
57.29
56.55
K3
58.15
57.07
58.18
57.07
R
0.98
0.21
1.16
0.17
K1
, 百拇医药
0.293
0.341
0.327
0.342
G=ΣY1=1.024
CT=G2/n=0.116
Q=K21+K22+K23
K2
0.346
0.362
, 百拇医药
0.352
0.335
K3
0.385
0.321
0.344
0.345
R
0.092
0.041
0.025
0.004
表3 干膏得率的方差分析 方差来源
, 百拇医药
离差平方和
自由度
均方
F
显著性
A
1.47
2
0.74
65.64
P<0.05
B
0.10
, http://www.100md.com
2
0.05
2.2
C
2.21
2
1.11
96.08
P<0.05
Error total
0.09
2
0.04
, 百拇医药
F1-0.10(2.2)=9.00 F1-0.05(2.2)=19.00 F1-0.01(2,2)=99.00
表4 靛玉红的方差分析 方差来源
离差平方和
自由度
均方
F
显著性
A
2.2×10-3
2
1.1×10-3
, 百拇医药
109.09
P<0.01
B
6.8×10-4
2
3.4×10-4
60.60
P<0.05
C
3.3×10-4
2
1.6×10-4
, 百拇医药
-
-
Error total
3.3×10-5
2
1.6×10-5
-
-
F值表示F比，P值表示显著性。
1.2.4 最佳工艺条件的选择和验证 从干浸膏得率方差分析表中可看出，FA>F1-0.05(2.2)，FC>F1-0.05(2.2)，AC两因素对干浸膏得率的影响显著，而B因素则对得膏率影响较小。从靛玉红得率方差分析表中看出，FA>F1-0.01(2.2)，FB>F1-0.05(2.2)，AB因素对靛玉红得率影响显著，C影响较小。从生产情况分析，提取的时间越长，溶出的淀粉、多糖、树指类就越多，因而C对浸膏得率影响显著，但靛玉红是板蓝根颗粒的活性成分，应作为主要质控指标，因此，主要考虑影响靛玉红得率的因素AB，选择A2B2C1、A3B3C1为最佳工艺条件。验证实验见表5。
, 百拇医药
表5 验证结果(%) 方法
实验号
板蓝根
(g)
干膏收率
平均率
靛玉红含量
平均率
A2B2C1
1
1000
21.42
, 百拇医药
0.0128
2
1000
20.61
20.43
0.115
0.117
3
1000
19.26
0.107
A3B3C1
, 百拇医药
1
1000
20.62
0.133
2
1000
20.81
20.50
0.142
0.127
3
1000
20.07
, http://www.100md.com
0.108
原方法
1
1000
14.86
0.047
2
1000
13.74
14.82
0.032
0.045
3
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1000
15.88
0.058
2 讨论
2.1 实验表明，采用新工艺与原工艺相比，板蓝根得率及靛玉红得率均有较大幅度提高。A2B2C1与A3B3C1无显著差别。从经济角度、靛玉红损失及减少浓缩时间考虑，采用A2B2C1为最佳工艺，其条件是加水10倍，提取3次，每次煮沸后(80～90)℃浸渍1 h。
2.2 板蓝根木质部的薄壁细胞中含有大量的淀粉粒，原工艺煮沸提取2 h(第一次)、1 h(第二次)，使得板蓝根的木栓层和皮层被煮烂，树脂状物、植物蛋白和木质部薄壁细胞中大量的淀粉粒大量溶出，且在煮沸过程中淀粉粒进一步糊化，以至提取液浓缩时，常常是一锅糊状物，易产生焦屑。醇沉时，由于大量沉淀物的吸附和包裹作用，使得排弃的醇沉杂质中留有较大量的靛玉红。新工艺采用提取煮沸后保温(80～90)℃热浸[4]，保持了板蓝根药材木栓层、皮层的完整，减少了木质部树脂状物、淀粉粒的溶出及糊化，使提取液色泽棕黄色、液体较澄清，静置离心后可直接浓缩成膏，得膏率及靛玉红得率都有较大幅度的提高，且产品的色、香、味均优于原工艺的产品。
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2.3 靛玉红在板蓝根中以苷的形式存在，在热水中可溶出，但分子中含有酯键易被水解为吲哚醇和糖酮酸，其溶解度降低，醇沉时易被沉淀物吸附和包裹而损失掉。李影[1]等人对板蓝根冲剂在生产中靛玉红含量进行的跟踪测定结果表明，靛玉红的损失主要来自浓缩和醇沉两个环节。
致谢 承防城中药厂提取车间及质检室全体工作人员对实验的大力支持。
参考文献
1 李影，滕兆森，全汉台.板蓝根冲剂生产过程中靛玉红的含量变化及工艺改进设想.中成药，1990，12(9)∶8
2 孟根达莱，刘栓娣，青格乐.醇沉工艺对中成药质量的影响.中成药，1996，18(3)∶51
3 沈阳药学院.高等数学(数理统计方法).上海：上海科学技术出版社，1978.404
4 卫生部中医研究院中药研究所.中药制剂手册.北京：人民卫生出版社，1978.679, 百拇医药
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