当前位置: 首页 > 期刊 > 《广州中医药大学学报》 > 1999年第2期
编号:10287683
中药骨康对去势大鼠血清激素水平变化的影响
http://www.100md.com 《广州中医药大学学报》 1999年第2期
     作者:黄宏兴 魏合伟 刘庆思 陈芝喜 邵 敏 朱辩炫

    单位:广州中医药大学附属骨伤科医院,广州 510240

    关键词:骨质疏松;绝经后;中药疗法;@骨康口服液;药理学;补益脾肾;活血通络;雌二醇;血液;降钙素;血液;骨钙素;血液;大鼠

    广州中医药大学学报990217摘要:骨康口服液是广州中医药大学附属骨伤科医院防治绝经后骨质疏松症的有效方剂,主要由淫羊藿、补骨脂、黄芪、当归、丹参等组成,具有补肾壮骨、益气健脾、活血通络之功效。为探讨其作用机理,采用放射免疫法(RIA)观察了骨康高、中、低剂量及尼尔雌醇对去势大鼠模型血清中雌二醇(E2)、降钙素(CT)和骨钙素(BGP)3种激素水平变化的影响。结果:造模前各组大鼠血清中E2、CT、BGP的含量均无显著性差异,给药3个月后骨康各剂量组大鼠3种激素水平均明显高于造模组,但均低于尼尔雌醇阳性对照组。提示骨康口服液能够通过刺激大鼠体内E2、CT、BGP的分泌而达到抑制骨吸收和促进骨形成的双重作用,此种作用虽不及尼尔雌醇强,但具有副作用小的优势。
, 百拇医药
    中图分类号:R681

    文献标识码:A

    文章编号:1007-3213(1999)02-0138-04

    Effect of Gukang Oral Liquid on Serum Hormone Contents in Ovariectomized Rats

    HUANG Hongxing, WEI Hewei, LIU Qingsi,CHEN Zhixi, SHAO Min, ZHU Bianxuan

    (The Affiliated Hospital of Orthopedics and Traumatology, Guangzhou University of TCM, Guangzhou 510405, China)
, 百拇医药
    Abstract The effect of Gukang Oral Liquid (GOL) on serum contents of estradiol(E2), calcitonin (CT) and bone gal protein (BGP) in the model rats with postmenopausal osteoporosis after ovariectomy was observed. Ninety rats were randomly allocated to six groups: the non-medication group, the model group, three GOL groups (with high, moderate and low dosages respectively) and nilestriol group .The contents of E2, CT and BGP were determined by radioimmunoassay.The results showed that the differences of the above hormone contents were not significant among the six groups. After the medication of GOL for 3 months, the contents of E2, CT and BGP were markedly higher in the three GOL groups than those in the model group, but lower than those in nilestriol group. This indicates that GOL possesses the double actions of suppressing bone absorption and promoting osteosis through stimulating the secretion of E2, CT and BGP, but its actions is weaker than nilestriol.
, http://www.100md.com
    Key words OSTEOPOROSIS, POSTMENOPAUSAL/TCD ther.; @GUKANG ORAL LIQUID/pharmacology;

    REINFORCING SPLEEN & KIDNEY; ACTIVAT BLOOD DRED COLLATER;

    ESTRADIOL/blood; CALCITONIN/blood; OSTEOCALCIN/blood; RATS

    骨康口服液是由淫羊藿、补骨脂、黄芪、当归、丹参等组成的纯中药制剂,具有补肾壮骨、益气健脾、活血通络之功效,经临床观察[1]和动物实验证实其具有抑制骨吸收和促进骨形成的双重作用,是防治绝经后骨质疏松症的理想药物。本实验旨在观察骨康口服液对去势大鼠血清中雌二醇(E2)、降钙素(CT)、骨钙素(BGP)水平变化的影响,进而对骨康防治绝经后骨质疏松症的作用机理进行探讨。
, http://www.100md.com
    1 材料与方法

    1.1 实验药物

    1.1.1 骨康口服液 由广州中医药大学附属骨伤科医院制剂室提供。它是骨康方的提取物,方中各药物的产地、用药部位及炮制方法均有严格控制,采用经工艺优化研究确定的最优工艺制成口服液;参考《中药药理研究方法》[2]分为高、中、低3个剂量,浓度分别为每mL含生药6.6、3.3、1.65g。

    1.1.2 尼尔雌醇 上海华联制药有限公司生产,批号:961001,规格:2mg/片。使用前用蒸馏水配制成浓度为0.167g/L的混悬液。

    1.2 实验动物

    4月龄雌性SD大鼠,体重(200±20)g,分笼饲养,动物及饲料均由广州中医药大学实验动物中心提供。
, http://www.100md.com
    1.3 试验仪器及主要试剂

    FMJ-87型全自动放射免疫计数器,批内CV为3.4%。E2放免试剂盒,美国德普公司提供;CT、BGP 放免试剂盒,北京东亚免疫技术研究所提供;戊巴比妥钠,佛山市化工实验厂生产,批号:860001。

    1.4 实验方法与步骤

    健康4月龄雌性SD大鼠90只,体重(200±20)g,随机分为6组,每组15只:A组为空白对照组,B组为造模组,C组为骨康高剂量组,D组为骨康中剂量组,E组为骨康低剂量组,F组为尼尔雌醇阳性对照组。造模手术前1d各组大鼠用毛细吸管行左侧眼球放血1.5mL,分离血清,-20℃保存备用。造模:3%戊巴比妥钠溶液按1mL/kg的剂量大鼠腹腔注射,麻醉成功后,动物背部剪毛,碘伏消毒,在无菌条件下手术。A组大鼠行伪手术,背部切口,切除少量脂肪组织后立即关闭;B、C、D、E、F各组大鼠,均从背侧入路行完整双侧卵巢摘除术[3]。术后前3d用青霉素抗感染。术后2d开始给药:A组和B组用生理盐水6mL/(kg.d)灌胃;C、D、E组大鼠分别用骨康口服液6mL/(kg.d)灌胃,浓度分别为每mL含生药6.6、3.3、1.65g;F组大鼠用尼尔雌醇混悬液按6mL/kg的剂量每周1次灌胃,浓度为0.167g/L(按1mg/kg大鼠体重计算)。所有动物在同一条件下(室温25℃~27℃)用普通鼠饲料定量饲养90d后,处死实验动物,取血分离血清。采用放射免疫法,对2次所得血清样本分别进行E2、CT、BGP含量的测定[4]。由于手术造模和灌胃等原因,致使在实验过程中B组、C组、D组、E组、F组先后分别有1、3、4、2、1只大鼠死亡。
, 百拇医药
    2 结果

    表1表明:术前各组大鼠血清E2含量差异无显著性;给药3个月后各组大鼠血清E2含量有显著性差异,各组均明显高于造模组(P<0.01),骨康高、中剂量组和阳性对照组均高于空白对照组(P<0.05),说明骨康有提高体内E2含量的作用。

    表2表明:术前各组大鼠血清CT含量差异无显著性;给药3个月后各组大鼠血清CT含量有显著性差异,各组均高于造模组(P<0.01),骨康高、中、低剂量组和阳性对照组均高于空白对照组(P<0.05),阳性对照组又高于骨康各组,说明骨康能提高血中降钙素的水平,但作用不及尼尔雌醇强。

    表3表明:术前各组大鼠血清BGP含量差别无显著性;给药3个月后各组大鼠血清BGP含量有显著性差异,各组均高于造模组(P<0.05),骨康高、中剂量组和阳性对照组均高于空白对照组(P<0.05),阳性对照组又高于骨康各组,说明骨康有提高血中骨钙素含
, 百拇医药
    表1 骨康口服液对大鼠血清雌二醇(E2)含量的影响 组 别

    N术前/只

    ρ术前/(±s)(ng.L-1)

    N药后3个月/只

    ρ药后3个月/(±s)(ng.L-1)

    p1/%

, http://www.100md.com     p2/%

    空白组

    15

    14.57±3.99

    15

    15.77±3.75*

    造模组

    15

    14.23±3.46

    14

    7.78±2.28#

    -51
, 百拇医药
    骨康高剂量组

    15

    15.63±2.04

    12

    20.31±2.96*##

    +29

    +161

    骨康中剂量组

    15

    15.17±1.91

    11

    18.68±2.59*##
, 百拇医药
    +18

    +140

    骨康低剂量组

    15

    14.07±4.12

    13

    16.12±2.39*

    +2

    +107

    尼尔雌醇组

    15

    14.74±3.23

, 百拇医药     14

    28.86±7.85*#

    +83

    +271

    方差分析

    P>0.05

    P<0.001

    两两比较用最小显著差法(LSD法):*各组与造模组比较,P<0.01,**P<0.05;#与空白组比较,P<0.01,##P<0.05;p1:为各组与空白组比较的变化率,p2:为各组与造模组比较的变化率;+:表示增加,-:表示减少(下同)表2 骨康口服液对大鼠血清降钙素(CT)含量的影响 组 别

, http://www.100md.com     N术前/只

    ρ术前/(±s)(ng*L-1)

    N药后3个月/只

    ρ药后3个月/(±s)(ng*L-1)

    p1/%

    p2/%

    空白组

    15
, http://www.100md.com
    221.30±30.63

    15

    213.70±19.42*

    造模组

    15

    233.25±24.39

    14

    195.07±20.83##

    -9

    骨康高剂量组

    15

    225.69±28.18
, http://www.100md.com
    12

    326.16±41.59*#

    +53

    +67

    骨康中剂量组

    15

    208.46±20.41

    11

    345.33±36.16*#

    +62

    +77

    骨康低剂量组
, http://www.100md.com
    15

    221.54±24.94

    13

    246.19±34.13*##

    +15

    +26

    尼尔雌醇组

    15

    223.31±19.23

    14

    405.36±24.49*#

    +90
, http://www.100md.com
    +108

    方差分析

    P>0.05

    P<0.001

    量的作用,但作用不及尼尔雌醇强。

    3 讨论

    绝经后骨质疏松症(PMOP)是绝经后妇女的常见病、多发病。雌激素水平下降是其发病的主要病因。绝经后妇女卵巢功能衰退,激素代谢紊乱,而雌激素、降钙素和骨钙素是与骨代谢直接相关的激素,其在体内水平的下降,导致绝经后妇女骨量快速丢失。在治疗和预防PMOP中,目前常用的是雌激素替代疗法以补充体内雌激素的不足,但由此带来的子宫内膜癌和乳腺癌的危险性明显增加。

    骨质疏松症相当于祖国医学的“骨痿”。中医理论认为,“骨痿”的发生,主要与肾虚、脾虚、血瘀三个因素有关,其中肾虚是主要病因;针对其“多虚多瘀”的病因病机特点,治疗上应以“补虚化瘀”为治则,即除调补脾肾外,活血化瘀也是重要治法[5]。骨康方中淫羊藿、补骨脂补肾壮骨为君,黄芪等益气健脾为臣,丹参、当归等活血通络为佐,全方具有补肾健脾、活血通络之功效。经临床观察和动物实验证实其具有抑制骨吸收和促进骨形成的双重作用,是防治绝经后骨质疏松症的理想药物。本实验建立了通过切除卵巢诱发的绝经后骨质疏松症动物模型,采用放射免疫法对大鼠血清中E2、CT、BGP三种激素水平进行测定。结果表明:骨康对正常组及实验动物组均能提高E2、CT、BGP的含量,特别是对实验动物组,说明它能够改善大鼠体内由于肾虚引起的内分泌功能衰退,纠正去势大鼠体内E2、CT、BGP水平较低的状况。这种作用可能是通过下列途径实现的:(1)促进肾上腺皮质分泌雌激素以代偿由于切除卵巢引起的雌激素水平较低的状况。(2)骨康中有类雌激素样作用物质存在,能补充体内雌激素,对PMOP有一定治疗作用。CT的作用是抑制破骨细胞的活性,抑制骨吸收,但由于CT的分泌受血中雌激素水平的调节,E2的减少可导致CT水平的下降,加速骨质疏松症的发展。BGP能促进成骨细胞的生成和数量,反映成骨细胞活性,促进骨形成。(3)E2可减少破骨细胞前体细胞的形成,抑制破骨细胞的活性,从而抑制骨的吸收,促进CT分泌[6]。因而可以推断骨康能够通过机体内调节和多方位的作用,刺激体内E2、CT、BGP的分泌而达到抑制骨吸收和促进骨形成的双重作用,因而是治疗PMOP的较理想药物。表3 骨康口服液对大鼠血清骨钙素(BGP)含量的影响 组 别
, http://www.100md.com
    N术前/只

    ρ术前/(±s)(μg.L-1)

    N药后3个月/只

    ρ药后3个月/(±s)(μg.L-1)

    p1/%

    p2/%

    空白组
, 百拇医药
    15

    2.71±0.26

    15

    2.83±0.32**

    造模组

    15

    2.72±0.36

    14

    2.13±0.36##

    -25

    骨康高剂量组

    15
, 百拇医药
    2.71±0.28

    12

    3.79±0.66*##

    +34

    +78

    骨康中剂量组

    15

    2.85±0.42

    11

    3.40±0.25*##

    +20

    +60
, 百拇医药
    骨康低剂量组

    15

    2.83±0.25

    13

    2.78±0.28**

    あ-2

    +31

    尼尔雌醇组

    15

    2.94±0.34

    14

    4.17±0.65*#
, http://www.100md.com
    +47

    +96

    方差分析

    P>0.05

    P<0.001

    基金项目:国家中医药管理局科研基金重点课题(No.95B3211)

    作者简介:第一作者,男,讲师

    参考文献:

    [1] 刘庆思,陈仲泽,李小侬.骨康胶囊治疗绝经后骨质疏松症65例疗效观察[J].新中医,1995,10:31

    [2] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,1993.33

    [3] 李青南.仙珍骨宝对去势大鼠骨组织形态计量学影响的药效学研究[J].中药药理,1997,3(4):25

    [4] 李边达.中药治疗无菌性股骨头坏死及骨质疏松症的主要药效学研究技术要求[J].中药新药与临床,1992,3(2):7

    [5] 韦坚义.祖国医学对骨质疏松症的认识[J].浙江中医学院学报,1992,16(5):9

    [6] 刘忠厚.骨质疏松症[M].北京:化学工业出版社,1992.210

    收稿日期:1998-12-02, 百拇医药