肿节风片的质量标准研究
作者：吕武清 吴朝阳 吴丽萍
单位：吕武清(江西省中医药研究所 南昌 330077)；吴朝阳 吴丽萍(江西贵溪制药厂 贵溪 335400)
关键词：总黄酮；含量测定；肿节风；薄层色谱鉴别
中国现代应用药学000221 摘要 目的：制订肿节风片 质量标准。方法：紫外分光光度法测定了总黄酮的含量，对肿节风药材 进行了薄层色谱鉴别。结果：加标回收率平均98.1%(RSD=2.3%,n=6),r=0.99996，重复性RSD=1.23%(n=6),精密度RSD=1.14%([ WTBX]n=6)结论：方法稳定、可靠，可作为该制剂的质量控制方法 之一。
Study of quality standard of Zhongjiefeng pian
Lu Wuqing(Lu WQ),Wu Zhaoyang(Wu ZY),Wu Liping(Wu LP)
, 百拇医药
(Jia ngxi Institution of traditional Chinese medical and Pharmaceutical Sciences,Nanc hang 330077)
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish t he quality standard of Zhongjiefeng pian.METHOD:The content of total flavone in Zhongjiefeng pian was determined by UV.The Zhongjiefeng was identifi ed by TLC.RESULTS:The average recovery is 98.1%(RSD= 2.3%,n=6),with good linear relationship(r=0.99996 and reproduc ity(RSD=1.23%,n=6) and precision(RSD=1.14%,[ WTBX]n=6).CONCLUSION:The method is accurate,reliable,and can b e used as method for quality control of the production.
, 百拇医药
KEY WORDS Zhongjiefeng pian,determining content,total flavone,TLC
肿节风片由单味药肿节风经提取浸膏后压制而成，收载于部颁标准中，功 能为消肿散结，清热解毒。临床用于肺炎、阑尾炎、蜂窝组织炎，大剂量用于肿瘤。主要成 分有香豆酮、内酯、黄酮苷、挥发油、鞣酸、异白醋定、落新妇苷、葡萄糖、蔗糖等。本品 原标准仅有一个专属性并不强的有机酸试管反应和黄酮类荧光观察，为了有效地控制质量， 我们对其质量标准提高进行了实验研究。
1 仪器与药品
日立U-2000紫外可见双光束分光光度 计，岛津UV-120紫外可见分光光度计，CQ-250超声波清洗仪(上海船舶电子设备研究所)， 芦丁对照品(含量测定用，中国药品生物制品检定所)，肿节风对照药材为金粟兰科植物接骨 金粟兰Sarcandra glabra(Thunb.) Nakai的枝叶(江西中医学院中药鉴定教研室杨雄志讲师 鉴定)，其它试剂均为分析纯。
, 百拇医药
肿节风片(江西贵溪制药厂，批号:971117,951121,951209, 960406,960407,960407,960410,960514,960520,960526和960712)。
2 方法与结果
2.1 薄层鉴别
取本品3片，研细，加 甲醇10ml,超声处理20min,滤过，滤液作为供试品溶液。另取肿节风对照药材2.5g,加水 60ml,微沸20min,滤过，滤液浓缩至约10ml,加乙醇3倍量使沉淀，放置1h,滤过，滤液挥去乙 醇，浓缩至稠膏状，加0.5g硅藻土拌匀，水浴上蒸干，用甲醇5ml超声处理10min,滤过，滤 液作为对照品药材溶液，照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两 种溶液各3μl,分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以石 油醚(60～90℃)-醋酸乙酯-冰醋酸(10∶4∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 (365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结 果见图1。
, 百拇医药
图1 肿节风片TLC图
1，2，3-肿节风片；4-肿节风对照药材
2.2 含量测定
2.2.1 提取方法的选择 《中国药典》(1990年版第二 增补本)血康口服液所附的肿节风浸膏含量测定方法采用70%乙醇为溶剂，置索氏提取器中回 流提取，比色法测定黄酮。但从理论上分析，用70%乙醇索氏回流提取，经索氏提取器冷凝 管流至提取筒内的乙醇含醇量可达90%以上，失去了用70%乙醇的意义。基于此，我们对同一 样品采用水溶解，醇沉淀(下称水醇法)方法与《中国药典》提取方法进行比较，方法如下： 药典法：取肿节风片，剥去糖衣，研细，置索氏提取器中，用70%乙醇回流提取6h,提取液定 容至100ml,吸取1ml,照上述含量测定方法测定，结果见表1。测得总黄酮含量为6.3%。水醇 法：取肿节风片，剥去糖衣，研细，置100ml量瓶中，加水90ml,超声处理20min使溶解，放 置室温，加水至刻度，摇匀，吸取15ml,置50ml量瓶中，加乙醇至刻度，使含醇量为70%，摇 匀，放置使沉淀，吸取上清液2ml,照含量测定方法项下试验，测得总黄酮含量为7.3%。
, 百拇医药
表1 不同提取方法总黄酮测定结果/%
1
2
3
4
平 均
RSD
水醇法
7.35
7.29
7.30
7.26
7.30
, 百拇医药
0.51
药典法
6.22
6.34
6.29
6.38
6.30
1.09
上述两种提取方法显示，水醇法提取率高于药典法，而且免去了药典法的 繁杂操作，故本品采用水醇法提取。
2.2.2 线性关系的考察 精密称 取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品110mg,置100ml量中，加60%乙醇70ml使溶解， 放置室温，加60%乙醇至刻度，摇匀，精密吸取上述溶液10ml,置50ml量量中，加水至刻度， 摇匀，精密吸取对照品溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0和6.0ml,分别置25ml量瓶中，各加水至6ml ,加5%亚硝酸钠溶液1ml,摇匀，放置6min,加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置15min,照分光光 度法(中国药典1995年版一部附录ⅤA)，在500nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓 度为横坐标进行回归处理。回归方程为:A=0.01138c-0.0037,r=0.99996，结果 芦丁浓度在8.8～52.8μg/ml范围内呈线性关系。
, 百拇医药
2.2.3 光谱扫描 精 密吸取上述对照品溶液4.0ml和对照品溶液2ml,照标准曲线制备方法显色。在U-2000紫 外可见分光光度计上从370～700nm扫描。样品的扫描图谱与芦丁扫描图谱顺500nm处均有最 大吸收，样品辅料制成的空白对照对测定无影响，在500nm处无吸收，结果见图2。
图2 肿节风片UV光谱图
1-肿节风片；2-芦丁对照品
2.2.4 稳定性试验 取供试品溶液2ml,照标准曲线制备方法项试验 ，在500nm波长处测定吸收度，以后每隔半小时测定一次，数据经处理RSD=0.3 5%，样品在4h内极稳定。
2.2.5 精密度试验 精密吸取供试品溶液2 .0ml共6份，照标准曲线制备项下“自各加水至6ml,至在500nm波长处测定吸收度”，测得 6份样品吸收度，结果样品吸收度相对标准偏差为1.14%。
, 百拇医药
2.2.6 重复性试验 取样品6份，照含量测定项下方法试验，对含量 测定结果进行数据处理RSD=1.23%。
2.2.7 样品加样回收 率 分别精密称取芦丁对照品6份，各置100ml量瓶中，再分别精密称取已知含量的样品 各置上述量瓶中，加水溶解，超声处理20min，放置室温，定容，摇匀，余照含量测定项下 试验，计算回收率，结果见表2。
表2 回收率测定结果 样品
样品中总黄酮
/mg
加入芦丁量
/mg
测出总黄酮量
/mg
, 百拇医药
回收率
/%
1
87.4
18.7
101.30
95.5
2
75.65
20.0
96.7
101.2
3
, http://www.100md.com
62.5
20.5
82.6
99.5
4
44.2
35.4
78.0
98.0
5
30.4
41.4
70.2
, 百拇医药
97.8
6
20.6
54.8
73.0
96.8
平均回收率98.1%，RSD=2.3%
2.2.8 样品测定 取本品10片，除去糖衣，精密称定，研细，精密 称取1g,置100ml量瓶中，加水90ml超声处理20min,放置室温，加水至刻度，摇匀，滤过，精 密吸取续滤液15ml,置50ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，滤过，精密吸取上清液2ml,置25m l量瓶中，照标准曲线项下方法，自“各加水至6ml”起，以2ml样品液，加水至25ml作为空 白，至“在500nm波长处测定吸收度”，按回归方程计算含量，结果见表3。
, http://www.100md.com
表3 样品中总黄酮含量/n=3 批 号
总黄酮含量/mg.片-1
批 号
总黄酮含量/mg.片-1
951117
33.2
960410
29.2
951121
33.9
960514
, 百拇医药
38. 4
951209
36.1
960520
36.8
960406
28.6
960526
37.4
960407
29.0
960721
40.2
3 小 结
采用本方法对肿节风片进行薄层色谱鉴别， 重现性好。我们对样品在不同温度、湿度条件下考察，经近10余批次样品鉴别，均能检出与 对照药材相同的斑点。含量测定具有简便、重现性好、精密度高的优点，10批次样品含量测 定结果显示，各批次含量较为稳定，为肿节风片的质量控制提供了有效的方法。
收稿日期：1999-02-04, 百拇医药
单位：吕武清(江西省中医药研究所 南昌 330077)；吴朝阳 吴丽萍(江西贵溪制药厂 贵溪 335400)
关键词：总黄酮；含量测定；肿节风；薄层色谱鉴别
中国现代应用药学000221 摘要 目的：制订肿节风片 质量标准。方法：紫外分光光度法测定了总黄酮的含量，对肿节风药材 进行了薄层色谱鉴别。结果：加标回收率平均98.1%(RSD=2.3%,n=6),r=0.99996，重复性RSD=1.23%(n=6),精密度RSD=1.14%([ WTBX]n=6)结论：方法稳定、可靠，可作为该制剂的质量控制方法 之一。
Study of quality standard of Zhongjiefeng pian
Lu Wuqing(Lu WQ),Wu Zhaoyang(Wu ZY),Wu Liping(Wu LP)
, 百拇医药
(Jia ngxi Institution of traditional Chinese medical and Pharmaceutical Sciences,Nanc hang 330077)
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish t he quality standard of Zhongjiefeng pian.METHOD:The content of total flavone in Zhongjiefeng pian was determined by UV.The Zhongjiefeng was identifi ed by TLC.RESULTS:The average recovery is 98.1%(RSD= 2.3%,n=6),with good linear relationship(r=0.99996 and reproduc ity(RSD=1.23%,n=6) and precision(RSD=1.14%,[ WTBX]n=6).CONCLUSION:The method is accurate,reliable,and can b e used as method for quality control of the production.
, 百拇医药
KEY WORDS Zhongjiefeng pian,determining content,total flavone,TLC
肿节风片由单味药肿节风经提取浸膏后压制而成，收载于部颁标准中，功 能为消肿散结，清热解毒。临床用于肺炎、阑尾炎、蜂窝组织炎，大剂量用于肿瘤。主要成 分有香豆酮、内酯、黄酮苷、挥发油、鞣酸、异白醋定、落新妇苷、葡萄糖、蔗糖等。本品 原标准仅有一个专属性并不强的有机酸试管反应和黄酮类荧光观察，为了有效地控制质量， 我们对其质量标准提高进行了实验研究。
1 仪器与药品
日立U-2000紫外可见双光束分光光度 计，岛津UV-120紫外可见分光光度计，CQ-250超声波清洗仪(上海船舶电子设备研究所)， 芦丁对照品(含量测定用，中国药品生物制品检定所)，肿节风对照药材为金粟兰科植物接骨 金粟兰Sarcandra glabra(Thunb.) Nakai的枝叶(江西中医学院中药鉴定教研室杨雄志讲师 鉴定)，其它试剂均为分析纯。
, 百拇医药
肿节风片(江西贵溪制药厂，批号:971117,951121,951209, 960406,960407,960407,960410,960514,960520,960526和960712)。
2 方法与结果
2.1 薄层鉴别
取本品3片，研细，加 甲醇10ml,超声处理20min,滤过，滤液作为供试品溶液。另取肿节风对照药材2.5g,加水 60ml,微沸20min,滤过，滤液浓缩至约10ml,加乙醇3倍量使沉淀，放置1h,滤过，滤液挥去乙 醇，浓缩至稠膏状，加0.5g硅藻土拌匀，水浴上蒸干，用甲醇5ml超声处理10min,滤过，滤 液作为对照品药材溶液，照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两 种溶液各3μl,分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以石 油醚(60～90℃)-醋酸乙酯-冰醋酸(10∶4∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 (365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结 果见图1。
, 百拇医药
图1 肿节风片TLC图
1，2，3-肿节风片；4-肿节风对照药材
2.2 含量测定
2.2.1 提取方法的选择 《中国药典》(1990年版第二 增补本)血康口服液所附的肿节风浸膏含量测定方法采用70%乙醇为溶剂，置索氏提取器中回 流提取，比色法测定黄酮。但从理论上分析，用70%乙醇索氏回流提取，经索氏提取器冷凝 管流至提取筒内的乙醇含醇量可达90%以上，失去了用70%乙醇的意义。基于此，我们对同一 样品采用水溶解，醇沉淀(下称水醇法)方法与《中国药典》提取方法进行比较，方法如下： 药典法：取肿节风片，剥去糖衣，研细，置索氏提取器中，用70%乙醇回流提取6h,提取液定 容至100ml,吸取1ml,照上述含量测定方法测定，结果见表1。测得总黄酮含量为6.3%。水醇 法：取肿节风片，剥去糖衣，研细，置100ml量瓶中，加水90ml,超声处理20min使溶解，放 置室温，加水至刻度，摇匀，吸取15ml,置50ml量瓶中，加乙醇至刻度，使含醇量为70%，摇 匀，放置使沉淀，吸取上清液2ml,照含量测定方法项下试验，测得总黄酮含量为7.3%。
, 百拇医药
表1 不同提取方法总黄酮测定结果/%
1
2
3
4
平 均
RSD
水醇法
7.35
7.29
7.30
7.26
7.30
, 百拇医药
0.51
药典法
6.22
6.34
6.29
6.38
6.30
1.09
上述两种提取方法显示，水醇法提取率高于药典法，而且免去了药典法的 繁杂操作，故本品采用水醇法提取。
2.2.2 线性关系的考察 精密称 取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品110mg,置100ml量中，加60%乙醇70ml使溶解， 放置室温，加60%乙醇至刻度，摇匀，精密吸取上述溶液10ml,置50ml量量中，加水至刻度， 摇匀，精密吸取对照品溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0和6.0ml,分别置25ml量瓶中，各加水至6ml ,加5%亚硝酸钠溶液1ml,摇匀，放置6min,加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置15min,照分光光 度法(中国药典1995年版一部附录ⅤA)，在500nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓 度为横坐标进行回归处理。回归方程为:A=0.01138c-0.0037,r=0.99996，结果 芦丁浓度在8.8～52.8μg/ml范围内呈线性关系。
, 百拇医药
2.2.3 光谱扫描 精 密吸取上述对照品溶液4.0ml和对照品溶液2ml,照标准曲线制备方法显色。在U-2000紫 外可见分光光度计上从370～700nm扫描。样品的扫描图谱与芦丁扫描图谱顺500nm处均有最 大吸收，样品辅料制成的空白对照对测定无影响，在500nm处无吸收，结果见图2。
图2 肿节风片UV光谱图
1-肿节风片；2-芦丁对照品
2.2.4 稳定性试验 取供试品溶液2ml,照标准曲线制备方法项试验 ，在500nm波长处测定吸收度，以后每隔半小时测定一次，数据经处理RSD=0.3 5%，样品在4h内极稳定。
2.2.5 精密度试验 精密吸取供试品溶液2 .0ml共6份，照标准曲线制备项下“自各加水至6ml,至在500nm波长处测定吸收度”，测得 6份样品吸收度，结果样品吸收度相对标准偏差为1.14%。
, 百拇医药
2.2.6 重复性试验 取样品6份，照含量测定项下方法试验，对含量 测定结果进行数据处理RSD=1.23%。
2.2.7 样品加样回收 率 分别精密称取芦丁对照品6份，各置100ml量瓶中，再分别精密称取已知含量的样品 各置上述量瓶中，加水溶解，超声处理20min，放置室温，定容，摇匀，余照含量测定项下 试验，计算回收率，结果见表2。
表2 回收率测定结果 样品
样品中总黄酮
/mg
加入芦丁量
/mg
测出总黄酮量
/mg
, 百拇医药
回收率
/%
1
87.4
18.7
101.30
95.5
2
75.65
20.0
96.7
101.2
3
, http://www.100md.com
62.5
20.5
82.6
99.5
4
44.2
35.4
78.0
98.0
5
30.4
41.4
70.2
, 百拇医药
97.8
6
20.6
54.8
73.0
96.8
平均回收率98.1%，RSD=2.3%
2.2.8 样品测定 取本品10片，除去糖衣，精密称定，研细，精密 称取1g,置100ml量瓶中，加水90ml超声处理20min,放置室温，加水至刻度，摇匀，滤过，精 密吸取续滤液15ml,置50ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，滤过，精密吸取上清液2ml,置25m l量瓶中，照标准曲线项下方法，自“各加水至6ml”起，以2ml样品液，加水至25ml作为空 白，至“在500nm波长处测定吸收度”，按回归方程计算含量，结果见表3。
, http://www.100md.com
表3 样品中总黄酮含量/n=3 批 号
总黄酮含量/mg.片-1
批 号
总黄酮含量/mg.片-1
951117
33.2
960410
29.2
951121
33.9
960514
, 百拇医药
38. 4
951209
36.1
960520
36.8
960406
28.6
960526
37.4
960407
29.0
960721
40.2
3 小 结
采用本方法对肿节风片进行薄层色谱鉴别， 重现性好。我们对样品在不同温度、湿度条件下考察，经近10余批次样品鉴别，均能检出与 对照药材相同的斑点。含量测定具有简便、重现性好、精密度高的优点，10批次样品含量测 定结果显示，各批次含量较为稳定，为肿节风片的质量控制提供了有效的方法。
收稿日期：1999-02-04, 百拇医药
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