国产葛属药用植物叶表面的扫描电镜观察
作者：曾明 郑水庆 张汉明 叶熙亭 陶朝阳 苏中武
单位：曾明(第二军医大学药学院生药学教研室，上海 200433)；郑水庆(第二军医大学药学院生药学教研室，上海 200433)；张汉明(第二军医大学药学院生药学教研室，上海 200433)；叶熙亭(基础医学部细胞生物学教研室)；陶朝阳(第二军医大学药学院生药学教研室，上海 200433)；苏中武(第二军医大学药学院生药学教研室，上海 200433)
关键词：葛属；叶表面特征；显微镜检查，电子；扫描透射
第二军医大学学报001037 [中图分类号] R 282.71 [文献标识码] B
[文章编号] 0258-879X(2000)10-0996-03
葛根是一味常用中药，其原植物为豆科葛属植物野葛[Pueraria lobata (Willd. )Ohwi]和粉葛(P. thomsonii Benth.)。除上述两种植物外，同属的一些植物如食用 葛、峨嵋葛、三裂叶葛等在我国部分地区也作葛根使用[1]。我们已对葛属植物的 花粉[2]及花冠表面显微特征[3]进行了研究，而叶片作为植物的最外部分 之一，其表皮和毛被特征必将最快地反映外界环境的变化，一些特征已明显处于基因的控制 之下[4]，从而成为分类和鉴定的有用证据。尤其是随着电镜扫描(SEM)的应用，这 些特征更广泛地应用于不同的分类群的区分。本文报道了野葛、粉葛及同属的6个种和1个变 种植物叶表面特征的SEM观察结果，以期为更好地识别种、变种，并为该属植物的鉴定和分 类提供更多的形态学依据。
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1 材料和方法
1.1 材料 野葛[Pueraria lobata (Willd.)Ohwi,四川峨嵋山，标本号： 96026]，粉葛[P. thomsonii Benth.,云南大理，标本号：94054]，峨嵋葛[P. o meiensis Wang et Tang，四川峨嵋山，标本号：94037]，山葛[P. lobata(Willd .)Ohwi var. montana(Lour.)van der Maesen.，福建福州，标本号：96072]，食 用葛[P. edulis Pampan.，云南，标本号：94056]，苦葛[P. peduncularis ( Grah. ex Benth.) Benth.，四川峨嵋山，标本号：94044]，黄毛葛[P. calycina F ranch.，云南永胜，标本号：94050]，三裂叶葛[P. phaseoloides(Roxb.)Benth. ，广东广州，标本号：94021]，密花葛[P. alopeculoides，云南景洪，标本号：940 09]。所有样品均为作者采集并鉴定，保存于第二军医大学药学院生药学教研室。
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1.2 仪器 Hitachi S-526型扫描电镜。
1.3 方法 取干燥标本上的叶，距叶缘1.5～2 cm处取样，超声波洗去表面杂质， 依次用70%，90%及100%乙醇脱水，临界点干燥，粘贴，喷金，扫描电镜下观察照相。
2 结 果
9种葛属植物叶上下表皮角 质纹理大多不同,垂周壁大多突起,气孔多为椭圆形或类椭圆形，保卫细胞外侧有角质层环绕 ，非腺毛众多，其外壁上有点状钩刺，具体各种描述如下，并见图1。
2.1 野葛 (P. lobata，图1中的1，2) 上表皮角质层纹交织成不规则粗网 状，垂周壁突起，波状弯曲，平周壁略下陷，密被雪花状附着物。下表皮具无规则细针状的 角理，气孔椭圆形，副卫细胞沿平轴方向具致密的雪花状纹理。
2.2 粉葛 (P. thomsonii，图1中的3，4) 上表皮角质层纹呈长椭圆形或团 块状并排列成环状，垂周壁较平直，平周壁略突起，密被雪花状附着物。下表皮具无规则块 状或类三角状角质纹理并散布细针状物，气孔椭圆形。
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2.3 峨嵋葛 (P. omeiensis， 图1中的5，6) 上表皮角质层纹成条状重叠 ，垂周壁清晰，平周壁略为突起。下表皮具无规则块状或三角状的角质纹理，气孔宽椭圆形 。
2.4 山葛 (P. lobata var. montana，图1中的7，8) 上表皮角质层纹 交织成不规则粗网状，垂周壁突起，波状弯曲，平周壁略下陷。下表皮具无规则细针状的角 理，气孔椭圆形，垂周壁突起波状弯曲，密被雪花状附着物。
2.5 食用葛 (P. edulis，图1中的9，10) 上表皮角质层纹粗条状不规则交 织在一起，垂周壁突起，波状弯曲，平周壁下陷。下表皮气孔椭圆形，垂周壁突起弯曲，平 周壁略凹陷被致密的雪花状纹理。
2.6 苦葛 (P. peduncularis，图1中的11，12) 上表皮角质层纹呈条状或 不规则块状并排列成环状，垂周壁略凹陷，平周壁略突起，密被雪花状附着物。下表皮细密 布针状角质纹理，气孔类椭圆形，副卫细胞沿平轴方向具致密附着物。
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2.7 黄毛葛 (P. calycina，图1中的13，14) 上表皮角质层纹条片状无规 则地交织在一起，垂周壁突起，波状弯曲，平周壁下陷。下表皮角质层纹交织成不规则网状 ,气孔类椭圆形，副卫细胞具厚密的环状角质层,垂周壁突起弯曲，平周壁凹陷。
2.8 三裂叶葛 (P. phaseoloides，图1中的15，16) 上表皮角质层纹交织 成不规则粗网状，垂周壁突起，波状弯曲，平周壁略下陷。下表皮散布有无规则细针状的角 理，气孔椭圆形，垂周壁被较密的雪花状附着物。
2.9 密花葛 (P. alopeculoides，图1中的17，18) 上表皮角质层纹成不规 则状，垂周壁突起，波状弯曲，平周壁略下陷，密被雪花状附着物。下表皮密布细针状的角 质纹理，气孔椭圆形，副卫细胞沿平轴方向具显著的角质纹理。
3 讨 论
由于葛属植物的花期短，给分类鉴定带来一定的困难。我们对叶表面进行扫描电镜观察，发 现种间有一定的鉴别特征，有助于分种鉴定。加上葛属植物叶片较大且易采，故有一定的实 用意义。葛属8种、1变种植物叶上下表皮的角质纹理、密度，附着物，垂周壁、平周壁及气孔形状等 特征均各不相同，据此叶表面以及花粉和花冠表面的显微特征，可作为葛属植物间的显微鉴别的依据，同时亦可作为葛属植物分类的参考。
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图 1 叶上下表皮表面特征电镜扫描照片(奇数为上表皮,偶数为下表皮，×500)
1,2： 野葛(P.lobata)； 3,4： 粉葛 (P.thomsonii)； 5,6： 峨嵋葛 (P.ome iensis)； 7,8： 山葛 (P.lobata var. montana)； 9,10： 食用葛 (P. edu lis)；
11,12： 苦葛 (P. peduncularis)；13,14： 黄毛葛 (P. calycina)； 15,16： 三裂叶葛 (P. phaseoloides)； 17,18： 密花葛 (P.alopeculoides)
[作者简介]曾明(1965-)，男(汉族),博士，现在华东师范大学化学与生命科学院博士后流动站.
[参 考 文 献]
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[1] 中国医学科学院药物研究所，北京医学院药学系，中国药科大学，等 编著. 中药志(第1册)[M]. 北京:人民卫生出版社, 1993.563-568.
[2] 曾 明，张汉明，郑水庆，等. 中国葛属植物花粉形态的研究[J]. 第二 军医大学学报，1998，19(6)：600-602.
[3] 曾 明，张汉明，郑水庆，等. 花冠表面角质层在葛属植物及生药葛花鉴定中 的意义[J]. 中国中药杂志，1998，23(7)：387-389.
[4] Stuessy TF. The systematic evolution of comparative data. In: Stue ssy TF. ed. Plant taxonomy[M]. New York: Columbia University Press, 1990. 222-223.
[收稿日期] 2000-05-24
[修回日期] 2000-08-04, http://www.100md.com
单位：曾明(第二军医大学药学院生药学教研室，上海 200433)；郑水庆(第二军医大学药学院生药学教研室，上海 200433)；张汉明(第二军医大学药学院生药学教研室，上海 200433)；叶熙亭(基础医学部细胞生物学教研室)；陶朝阳(第二军医大学药学院生药学教研室，上海 200433)；苏中武(第二军医大学药学院生药学教研室，上海 200433)
关键词：葛属；叶表面特征；显微镜检查，电子；扫描透射
第二军医大学学报001037 [中图分类号] R 282.71 [文献标识码] B
[文章编号] 0258-879X(2000)10-0996-03
葛根是一味常用中药，其原植物为豆科葛属植物野葛[Pueraria lobata (Willd. )Ohwi]和粉葛(P. thomsonii Benth.)。除上述两种植物外，同属的一些植物如食用 葛、峨嵋葛、三裂叶葛等在我国部分地区也作葛根使用[1]。我们已对葛属植物的 花粉[2]及花冠表面显微特征[3]进行了研究，而叶片作为植物的最外部分 之一，其表皮和毛被特征必将最快地反映外界环境的变化，一些特征已明显处于基因的控制 之下[4]，从而成为分类和鉴定的有用证据。尤其是随着电镜扫描(SEM)的应用，这 些特征更广泛地应用于不同的分类群的区分。本文报道了野葛、粉葛及同属的6个种和1个变 种植物叶表面特征的SEM观察结果，以期为更好地识别种、变种，并为该属植物的鉴定和分 类提供更多的形态学依据。
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1 材料和方法
1.1 材料 野葛[Pueraria lobata (Willd.)Ohwi,四川峨嵋山，标本号： 96026]，粉葛[P. thomsonii Benth.,云南大理，标本号：94054]，峨嵋葛[P. o meiensis Wang et Tang，四川峨嵋山，标本号：94037]，山葛[P. lobata(Willd .)Ohwi var. montana(Lour.)van der Maesen.，福建福州，标本号：96072]，食 用葛[P. edulis Pampan.，云南，标本号：94056]，苦葛[P. peduncularis ( Grah. ex Benth.) Benth.，四川峨嵋山，标本号：94044]，黄毛葛[P. calycina F ranch.，云南永胜，标本号：94050]，三裂叶葛[P. phaseoloides(Roxb.)Benth. ，广东广州，标本号：94021]，密花葛[P. alopeculoides，云南景洪，标本号：940 09]。所有样品均为作者采集并鉴定，保存于第二军医大学药学院生药学教研室。
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1.2 仪器 Hitachi S-526型扫描电镜。
1.3 方法 取干燥标本上的叶，距叶缘1.5～2 cm处取样，超声波洗去表面杂质， 依次用70%，90%及100%乙醇脱水，临界点干燥，粘贴，喷金，扫描电镜下观察照相。
2 结 果
9种葛属植物叶上下表皮角 质纹理大多不同,垂周壁大多突起,气孔多为椭圆形或类椭圆形，保卫细胞外侧有角质层环绕 ，非腺毛众多，其外壁上有点状钩刺，具体各种描述如下，并见图1。
2.1 野葛 (P. lobata，图1中的1，2) 上表皮角质层纹交织成不规则粗网 状，垂周壁突起，波状弯曲，平周壁略下陷，密被雪花状附着物。下表皮具无规则细针状的 角理，气孔椭圆形，副卫细胞沿平轴方向具致密的雪花状纹理。
2.2 粉葛 (P. thomsonii，图1中的3，4) 上表皮角质层纹呈长椭圆形或团 块状并排列成环状，垂周壁较平直，平周壁略突起，密被雪花状附着物。下表皮具无规则块 状或类三角状角质纹理并散布细针状物，气孔椭圆形。
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2.3 峨嵋葛 (P. omeiensis， 图1中的5，6) 上表皮角质层纹成条状重叠 ，垂周壁清晰，平周壁略为突起。下表皮具无规则块状或三角状的角质纹理，气孔宽椭圆形 。
2.4 山葛 (P. lobata var. montana，图1中的7，8) 上表皮角质层纹 交织成不规则粗网状，垂周壁突起，波状弯曲，平周壁略下陷。下表皮具无规则细针状的角 理，气孔椭圆形，垂周壁突起波状弯曲，密被雪花状附着物。
2.5 食用葛 (P. edulis，图1中的9，10) 上表皮角质层纹粗条状不规则交 织在一起，垂周壁突起，波状弯曲，平周壁下陷。下表皮气孔椭圆形，垂周壁突起弯曲，平 周壁略凹陷被致密的雪花状纹理。
2.6 苦葛 (P. peduncularis，图1中的11，12) 上表皮角质层纹呈条状或 不规则块状并排列成环状，垂周壁略凹陷，平周壁略突起，密被雪花状附着物。下表皮细密 布针状角质纹理，气孔类椭圆形，副卫细胞沿平轴方向具致密附着物。
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2.7 黄毛葛 (P. calycina，图1中的13，14) 上表皮角质层纹条片状无规 则地交织在一起，垂周壁突起，波状弯曲，平周壁下陷。下表皮角质层纹交织成不规则网状 ,气孔类椭圆形，副卫细胞具厚密的环状角质层,垂周壁突起弯曲，平周壁凹陷。
2.8 三裂叶葛 (P. phaseoloides，图1中的15，16) 上表皮角质层纹交织 成不规则粗网状，垂周壁突起，波状弯曲，平周壁略下陷。下表皮散布有无规则细针状的角 理，气孔椭圆形，垂周壁被较密的雪花状附着物。
2.9 密花葛 (P. alopeculoides，图1中的17，18) 上表皮角质层纹成不规 则状，垂周壁突起，波状弯曲，平周壁略下陷，密被雪花状附着物。下表皮密布细针状的角 质纹理，气孔椭圆形，副卫细胞沿平轴方向具显著的角质纹理。
3 讨 论
由于葛属植物的花期短，给分类鉴定带来一定的困难。我们对叶表面进行扫描电镜观察，发 现种间有一定的鉴别特征，有助于分种鉴定。加上葛属植物叶片较大且易采，故有一定的实 用意义。葛属8种、1变种植物叶上下表皮的角质纹理、密度，附着物，垂周壁、平周壁及气孔形状等 特征均各不相同，据此叶表面以及花粉和花冠表面的显微特征，可作为葛属植物间的显微鉴别的依据，同时亦可作为葛属植物分类的参考。
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图 1 叶上下表皮表面特征电镜扫描照片(奇数为上表皮,偶数为下表皮，×500)
1,2： 野葛(P.lobata)； 3,4： 粉葛 (P.thomsonii)； 5,6： 峨嵋葛 (P.ome iensis)； 7,8： 山葛 (P.lobata var. montana)； 9,10： 食用葛 (P. edu lis)；
11,12： 苦葛 (P. peduncularis)；13,14： 黄毛葛 (P. calycina)； 15,16： 三裂叶葛 (P. phaseoloides)； 17,18： 密花葛 (P.alopeculoides)
[作者简介]曾明(1965-)，男(汉族),博士，现在华东师范大学化学与生命科学院博士后流动站.
[参 考 文 献]
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[1] 中国医学科学院药物研究所，北京医学院药学系，中国药科大学，等 编著. 中药志(第1册)[M]. 北京:人民卫生出版社, 1993.563-568.
[2] 曾 明，张汉明，郑水庆，等. 中国葛属植物花粉形态的研究[J]. 第二 军医大学学报，1998，19(6)：600-602.
[3] 曾 明，张汉明，郑水庆，等. 花冠表面角质层在葛属植物及生药葛花鉴定中 的意义[J]. 中国中药杂志，1998，23(7)：387-389.
[4] Stuessy TF. The systematic evolution of comparative data. In: Stue ssy TF. ed. Plant taxonomy[M]. New York: Columbia University Press, 1990. 222-223.
[收稿日期] 2000-05-24
[修回日期] 2000-08-04, http://www.100md.com