胆固醇酯转移蛋白与动脉粥样硬化相互关系的临床研究
作者：丁丽华 鲁 翔 李崇勇 陆珊华 王 屹
单位：丁丽华 鲁 翔：南京医科大学第一附属医院(210029)；李崇勇 陆珊华：南京医科大学生化教研室；王 屹：江苏省省级机关医院
关键词：
江苏医药991238 由于胆固醇酯转移蛋白(CETP)可能与动脉粥样硬化(AS)发生和发展相关，目前国际上关于CETP的研究是一个热点，并已取得了很大进展。国内关于CETP的研究刚起步，尚未见报道。本研究采用ELISA法检测血浆CETP浓度，以动脉粥样硬化组和正常对照组为对象，对其血浆中的CETP、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A-I(apoA-I)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和载脂蛋白B(apoB)进行检测并分析，现将结果报告如下。
材料与方法
, 百拇医药
一、对象：被检者为1997年8月至1998年2月期间南京医科大学第一附属医院住院及门诊病人和健康体检者。其中AS患者79例，年龄25～75岁，男75例，女4例；正常对照组74例，年龄34～53岁，男41例，女33例。分别按常规抽取静脉血进行检测。
二、试剂：CETP标准、兔抗人CETP多克隆抗体、HRP-CETP多抗均由南京医科大学生化教研室提供。
三、方法：
1.双抗体夹心ELISA法测CETP浓度，包被抗体、酶标抗体的浓度均用矩阵法滴度。取40孔聚苯乙烯微量反应板，留一孔作底物对照，该孔不加包被抗体、抗原及酶标抗体。另一孔作阴性对照，不加抗原，其它试剂一样。常规洗涤、加样、显色，在酶联检测仪上以λ490nm比色，以标准孔浓度(C)作横坐标，以吸光度(A)作纵坐标，在方格坐标纸上作标准曲线，以待测孔吸光度(A)查曲线得其浓度。
, 百拇医药
2.血浆TC、TG、HDL-C、LDL-C、apoA-I、apoB浓度均按临床常规检验测定。
结果
一、CETP浓度：2份不同CETP浓度的血浆作连续13次测定，结果批间(n＝13)平均变异系数为7.3%，批内(n＝10)平均变异系数为8.4%。以稀释度为1∶100、1∶200、1∶400、1∶800、1∶1600的抗CETP多抗对人血浆(CETP浓度为2.04mg/L)作阻断抑制试验(复孔，取平均值)，其吸光度(A)值分别为0.65、0.52、0.39、0.31、0.20，呈剂量依赖性下降，抑制率15%～74%。
二、CETP浓度与吸光度的相关性分析：以本研究测定的标本CETP浓度(mg/L)为0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8、3.2、3.6、4.0，吸光度分别为0.20、0.32、0.37、0.55、0.81、1.12、1.20、1.39、1.48、1.52，浓度与吸光度的直线相关系数r＝0.98，进行直线相关系数r的假设检验，成直线正相关(P<0.05)。
, 百拇医药
三、AS组、正常对照组血浆CETP和其它脂质、载脂蛋白浓度检测数据见附表。 附表
AS组、正常对照组血浆CETP和其它脂质、载脂蛋白的检测结果(
±s)
例数(男/女)
TC
(mmol/L)
TG
(mmol/L)
HDL-C
(mmol/L)
, 百拇医药
apoA
(g/L)
apoB
(g/L)
LDL-C
(mmol/L)
CETP
(mg/L)
AS组
79(75/4)
5.21±1.23
1.78±0.98
, 百拇医药 1.26±0.34
1.43±0.29
0.96±0.25
3.15±1.04
2.13±0.90
对照组
74(41/33)
4.76±0.68
1.52±0.88
1.50±0.28
1.18±0.08
1.09±0.30
, 百拇医药
3.19±0.65
1.71±0.75
AS组与正常对照组比较，经t检验，AS组TC、TG、apoA-I、apoB、LDL-C与正常对照组无显著差异(P>0.05)，HDL-C浓度低于对照组(P<0.05)，CETP浓度高于对照组(P<0.05)。
讨论
正常个体之间血浆CETP浓度差异较小，一般在1～2mg/L之间，女性和青春期前儿童体内CETP浓度稍高。高脂血症和高胆固醇血症患者血浆CETP浓度增高26%，家族性复合型高脂血症患者血浆CETP浓度增高25%。在正常个体内，胆固醇酯转移作用依赖于VLDL中的TG浓度，TG浓度愈高，CE转移作用便随之增加。
许多不同的环境因素通过CETP而影响HDL-C浓度。有长期适量饮酒习惯的人，HDL-C升高(+30%)，同时CETP浓度下降(-25%)，学术界公认血液HDL-C浓度高的人不易患AS。长期吸烟者，血液HDL-C浓度下降，含apoB脂蛋白(VLDL、LDL等)中的CE上升，CETP含量上升，含apoB脂蛋白颗粒有致AS作用。体育锻炼能导致血浆CETP浓度降低，HDL-C含量升高。
, http://www.100md.com
肥胖症患者以HDL-C浓度下降和TG浓度上升为特征，CETP由脂肪组织合成，致血浆CETP浓度上升，这可能是导致肥胖症患者HDL-C浓度下降的原因。
非胰岛素依赖性糖尿病和胰岛素依赖性糖尿病，由于CE受脂蛋白(VLDL、LDL)增加的缘故，CETP浓度正常，但CE转移增加。
本研究结果AS患者血浆CETP浓度升高，而HDL-C浓度降低，支持CETP致AS的论点。分析是因为CETP促进CE从HDL转移至VLDL，VLDL接受CE后，进一步转化为LDL，肝细胞和动脉壁内皮细胞都有LDL受体，LDL胆固醇脂大部分被肝脏摄取再利用或分泌入胆汁的同时，也有一部分被动脉壁内皮细胞摄取，导致胆固醇酯沉积于动脉壁内，日积月累，形成粥样硬化。本组检查病例尚少，有待今后作较大范围的流行病学研究，以期获得更完善的结果。, 百拇医药
单位：丁丽华 鲁 翔：南京医科大学第一附属医院(210029)；李崇勇 陆珊华：南京医科大学生化教研室；王 屹：江苏省省级机关医院
关键词：
江苏医药991238 由于胆固醇酯转移蛋白(CETP)可能与动脉粥样硬化(AS)发生和发展相关，目前国际上关于CETP的研究是一个热点，并已取得了很大进展。国内关于CETP的研究刚起步，尚未见报道。本研究采用ELISA法检测血浆CETP浓度，以动脉粥样硬化组和正常对照组为对象，对其血浆中的CETP、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A-I(apoA-I)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和载脂蛋白B(apoB)进行检测并分析，现将结果报告如下。
材料与方法
, 百拇医药
一、对象：被检者为1997年8月至1998年2月期间南京医科大学第一附属医院住院及门诊病人和健康体检者。其中AS患者79例，年龄25～75岁，男75例，女4例；正常对照组74例，年龄34～53岁，男41例，女33例。分别按常规抽取静脉血进行检测。
二、试剂：CETP标准、兔抗人CETP多克隆抗体、HRP-CETP多抗均由南京医科大学生化教研室提供。
三、方法：
1.双抗体夹心ELISA法测CETP浓度，包被抗体、酶标抗体的浓度均用矩阵法滴度。取40孔聚苯乙烯微量反应板，留一孔作底物对照，该孔不加包被抗体、抗原及酶标抗体。另一孔作阴性对照，不加抗原，其它试剂一样。常规洗涤、加样、显色，在酶联检测仪上以λ490nm比色，以标准孔浓度(C)作横坐标，以吸光度(A)作纵坐标，在方格坐标纸上作标准曲线，以待测孔吸光度(A)查曲线得其浓度。
, 百拇医药
2.血浆TC、TG、HDL-C、LDL-C、apoA-I、apoB浓度均按临床常规检验测定。
结果
一、CETP浓度：2份不同CETP浓度的血浆作连续13次测定，结果批间(n＝13)平均变异系数为7.3%，批内(n＝10)平均变异系数为8.4%。以稀释度为1∶100、1∶200、1∶400、1∶800、1∶1600的抗CETP多抗对人血浆(CETP浓度为2.04mg/L)作阻断抑制试验(复孔，取平均值)，其吸光度(A)值分别为0.65、0.52、0.39、0.31、0.20，呈剂量依赖性下降，抑制率15%～74%。
二、CETP浓度与吸光度的相关性分析：以本研究测定的标本CETP浓度(mg/L)为0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8、3.2、3.6、4.0，吸光度分别为0.20、0.32、0.37、0.55、0.81、1.12、1.20、1.39、1.48、1.52，浓度与吸光度的直线相关系数r＝0.98，进行直线相关系数r的假设检验，成直线正相关(P<0.05)。
, 百拇医药
三、AS组、正常对照组血浆CETP和其它脂质、载脂蛋白浓度检测数据见附表。 附表
AS组、正常对照组血浆CETP和其它脂质、载脂蛋白的检测结果(
±s)例数(男/女)
TC
(mmol/L)
TG
(mmol/L)
HDL-C
(mmol/L)
, 百拇医药
apoA
(g/L)
apoB
(g/L)
LDL-C
(mmol/L)
CETP
(mg/L)
AS组
79(75/4)
5.21±1.23
1.78±0.98
, 百拇医药 1.26±0.34
1.43±0.29
0.96±0.25
3.15±1.04
2.13±0.90
对照组
74(41/33)
4.76±0.68
1.52±0.88
1.50±0.28
1.18±0.08
1.09±0.30
, 百拇医药
3.19±0.65
1.71±0.75
AS组与正常对照组比较，经t检验，AS组TC、TG、apoA-I、apoB、LDL-C与正常对照组无显著差异(P>0.05)，HDL-C浓度低于对照组(P<0.05)，CETP浓度高于对照组(P<0.05)。
讨论
正常个体之间血浆CETP浓度差异较小，一般在1～2mg/L之间，女性和青春期前儿童体内CETP浓度稍高。高脂血症和高胆固醇血症患者血浆CETP浓度增高26%，家族性复合型高脂血症患者血浆CETP浓度增高25%。在正常个体内，胆固醇酯转移作用依赖于VLDL中的TG浓度，TG浓度愈高，CE转移作用便随之增加。
许多不同的环境因素通过CETP而影响HDL-C浓度。有长期适量饮酒习惯的人，HDL-C升高(+30%)，同时CETP浓度下降(-25%)，学术界公认血液HDL-C浓度高的人不易患AS。长期吸烟者，血液HDL-C浓度下降，含apoB脂蛋白(VLDL、LDL等)中的CE上升，CETP含量上升，含apoB脂蛋白颗粒有致AS作用。体育锻炼能导致血浆CETP浓度降低，HDL-C含量升高。
, http://www.100md.com
肥胖症患者以HDL-C浓度下降和TG浓度上升为特征，CETP由脂肪组织合成，致血浆CETP浓度上升，这可能是导致肥胖症患者HDL-C浓度下降的原因。
非胰岛素依赖性糖尿病和胰岛素依赖性糖尿病，由于CE受脂蛋白(VLDL、LDL)增加的缘故，CETP浓度正常，但CE转移增加。
本研究结果AS患者血浆CETP浓度升高，而HDL-C浓度降低，支持CETP致AS的论点。分析是因为CETP促进CE从HDL转移至VLDL，VLDL接受CE后，进一步转化为LDL，肝细胞和动脉壁内皮细胞都有LDL受体，LDL胆固醇脂大部分被肝脏摄取再利用或分泌入胆汁的同时，也有一部分被动脉壁内皮细胞摄取，导致胆固醇酯沉积于动脉壁内，日积月累，形成粥样硬化。本组检查病例尚少，有待今后作较大范围的流行病学研究，以期获得更完善的结果。, 百拇医药