病毒性肝炎患者血清GM-CSF和IL-8水平的检测及其意义
作者：穆锦江 吕淑兰 刘应麟
单位：穆锦江(哈尔滨医科大学附属第二医院 传染科，黑龙江 哈尔滨 150086)； 吕淑兰(哈尔滨医科大学附属第二医院 传染科，黑龙江 哈尔滨 150086)； 刘应麟(哈尔滨医科大学附属第二医院 传染科，黑龙江 哈尔滨 150086)
关键词：病毒性肝炎；粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子；白细胞介素-8
哈尔滨医科大学学报000126 摘 要：目的 对病毒性肝炎患者血清中粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-8(IL-8)水平检测，探讨GM-CSF、IL-8与肝脏炎症活动及肝损害的关系，及二者在病毒性肝炎发病中的作用。方法 采用双抗体酶联免疫吸附法(ELISA法)检测了59例病毒性肝炎患者血清中的GM-CSF和IL-8水平，及患者血清中的ALT、AST、T-BIL及白蛋白的水平。结果 59例病毒性肝炎患者血清中的GM-CSF和IL-8水平较正常人显著升高(P<0.01)，并且GM-CSF和IL-8水平与ALT、AST、T-BIL及白蛋白的水平有明显的相关性。结论 GM-CSF和IL-8与肝细胞的炎性损伤密切相关，在肝脏免疫损伤中可能起重要作用。提示检测血清中GM-CSF及IL-8水平可以部分代表肝脏炎症活动及损伤程度。
, http://www.100md.com
分类号：R512.6 文献标识码：A
文章编号：1000-1905(2000)01-0061-02▲
近年来，细胞因子与病毒性肝炎的关系受到广泛关注。TNF等细胞因子在肝损伤中的作用已经得到证实[1，2]。近年来发现的粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-8(IL-8)在肝脏疾病中的作用日益受到重视。本研究通过对病毒性肝炎患者血清中GM-CSF、IL-8水平的检测，以探讨GM-CSF、IL-8与肝脏炎症活动及肝损害的关系，及其在肝炎发病中的作用。
1 临床资料与方法
1.1 检测对象
1.1.1 实验组 1997年5～8月我院收治的病毒性肝炎患者59例，男性45例，女性14例，平均年龄(37±15.2)岁。其中重型肝炎27例，慢性肝炎23例，急性肝炎9例。病原学检测：HBsAg“+”46例，HBeAg“+”5例，抗-HDV“+”2例，抗-HCV“+”5例，抗-HAV-IgM“+”3例，抗-HEV“+”1例，未分型4例。
, 百拇医药
1.1.2 对照组：以20名义务献血者设为对照组(NC)。其中男性14人，女性6人，平均年龄(35±15.5)岁。均为HBsAg“-”，抗-HBs“-”及抗-HCV“-”。
1.2 试剂
GM-CSF及IL-8检测试剂盒购自法国Immunotech acoulter Company。
1.3 标本采集
清晨空腹采血10ml后置于试管中，室温下立即离心10min(3 000r/min)后分离血清，-20℃保存待用。同时采血5ml常规化验肝功等生化指标(T-BIL、ACT、AST、ALB等)。
1.4 实验方法
采用双抗体酶联免疫吸附法(ELISA)，操作按说明书进行。
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1.5 统计学处理
应用t检验和直线相关分析，所有统计分析均应用Statistics Software 5.0软件。
2 结果
正常对照组(NC)GM-CSF水平为(78.3±50.6)μg/L，急性肝炎组(AH)、慢性肝炎组(CH)、重型肝炎组(FH)血清中GM-CSF水平分别为(115.5±38.5)μg/L、(201.6±118.2)μg/L、(336.7±109.7)μg/L。各肝病组GM-CSF水平均较NC组显著升高(P<0.001)，尤以FH组最高。FH组、CH组较AH组显著增高(P<0.01)，FH组又较CH组显著性增高(P<0.01)，见附表。
同时检测IL-8含量，分别为NC组(30.5±21.4)μg/L、AH组(61.0±32.3)μg/L、CH组(110.8±65.2)μg/L、FH组(103.6±60.5)μg/L。各肝病组IL-8水平均较NC组显著性升高(P<0.01)，且CH组及FH组又显著高于AH组(P<0.01)，CH组与FH组无显著性差异(P>0.05)，见附表。
, 百拇医药
附表 各组肝病患者血清中GM-CSF及IL-8水平和肝功指标 组别
n
GM-CSF
IL-8
ALT
AST
T-BIL
ALB
NC
11
2.17±0.32
1.93±0.20
, http://www.100md.com
-
-
-
-
AH
9
2.31±0.25
2.26±0.23
2.86±0.47
2.89±0.49
2.12±0.12
1.62±0.05
CH
, 百拇医药
23
2.85±0.35*
2.74±0.45*
2.11±0.24#
1.80±0.28#
1.21±0.23
1.62±0.03##
FH
27
3.20±0.39*△
, 百拇医药 2.65±0.38*
2.35±0.49#
2.31±0.47#
2.62±0.13#
1.49±0.06##
注：以上数据均为换算成对数后结果。各组肝病GM-CSF、IL-8水平较NC组分别为：P<0.001、P<0.01。与AH组比较，*：P<0.01；与CH组比较，△：P<0.001；与同组的GM-CSF、IL-8水平相关；#：P<0.05，##：P<0.01 GM-CSF与IL-8的等级相关分析为：r=0.314,P<0.05，二者呈明显正相关。
3 讨论
, 百拇医药
GM-CSF是由活化的T淋巴细胞释放的一种糖蛋白，具有多种免疫效应，其在抗传染免疫，尤其是在抗病毒免疫及炎症和病理损伤方面起重要作用[3]。病毒性肝炎，尤其是重型肝炎，其主要病理变化是肝细胞的广泛坏死及损伤，并导致ALT、AST等的被动释放。本研究发现各型肝炎患者血清中GM-CSF水平较对照组明显升高，且以重型肝炎最为显著。且各肝病组总的趋势为GM-CSF水平与ALT(r=0.429,P<0.001)、AST(r=0.413,P<0.001)及T-BIL(r=0.618,P<0.001)呈明显正相关，与血清白蛋白(ALB)(r=-0.410,P<0.001)呈明显负相关。总体表现为肝损害愈重，GM-CSF水平愈高。提示GM-CSF与肝细胞损伤密切相关，其在肝脏免疫损伤中可能起重要作用。
IL-8在机体炎症反应中起重要作用，是一种抗感染的炎症应答介质，具有吸引和活化中性粒细胞的作用，其主要来源于单核/巨噬细胞[4]。本研究中急、慢性及重型肝炎患者血清中IL-8水平均显著高于正常人且以慢性肝炎为著。而且其升高水平与代表肝脏炎症及损伤程度的ALT、AST、T-BIL及ALB等密切相关。各组肝病患者血清IL-8总体水平与ALT(r=0.512,P<0.001)，AST(r=0.483,P<0.001)，T-BIL(r=0.472,P<0.001)呈正相关，与ALB(r=-0.512，P<0.001)呈负相关。因此推测肝病患者血清中IL-8水平的升高与肝脏的局部炎症反应有关，可能参与肝脏的窦性损伤过程。由于血清中IL-8水平的升高，使渗入组织中的含量增多，引起炎性细胞在受累肝组织的浸润、聚集和释放的活性产物也相应增加，从而导致肝细胞损伤的加重[5，6]。
, 百拇医药
由于活化的淋巴细胞可产生并释放GM-CSF，而IL-8可激活和趋化淋巴细胞，推测肝炎患者血清中IL-8能否是促使GM-CSF水平升高的原因之一。本实验发现两者之间有显著的相关性。总之，本文证实了不同肝病患者血清中GM-CSF和IL-8水平均有不同程度的升高，而且GM-CSF和IL-8水平与血清中ALT、AST、T-BIL、ALB水平有明显的相关性。提示检测血清中GM-CSF及IL-8可以部分代表肝脏炎症活动及损伤程度。■
作者简介：穆锦江(1968-)，男，主治医师，硕士
参考文献：
[1]谢清，郭青，周霞秋，等.DHBV诱发亚急性肝坏死发病机制的实验研究[J].中华消化杂志，1995，15：176-177.
[2]王新，许才发，赵国宁，等.TNF-α、IL-6和IL-8与慢性肝病的关系[J].中华传染病杂志，1997，15：85-88.
, 百拇医药
[3]Kubota A,Okamura,Omoiri F,et al.High serum levels of GM-CSF in patients with liver cirrohosis and granulocytopenia[J].Clin Lab Haematol,1995,17(1):61-63.
[4]Baggiolini M,Walz A,Stereren L,et al.Neutrophil-acivating peptide-1/interleukin-8 a novel cytokine that activates nentrophils[J].J Clin Invest,1989,84:1045.
[5]al-Wabel A,al-Knawy B,Razinddins.Interleukin-8 and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor seretion in hepatocellular carcinoma and viral chronic active hepatitis[J].Clin Immunol Immunopathol,1995,74(3):231-235.
[6]朱仲武，贺永久，罗瑞德，等.肝炎患者血清SCAM-1与IL-8的检测[J].中华内科杂志，1997，9：625-626.
收稿日期：1999-03-10
修改日期：1999-11-04, 百拇医药
单位：穆锦江(哈尔滨医科大学附属第二医院 传染科，黑龙江 哈尔滨 150086)； 吕淑兰(哈尔滨医科大学附属第二医院 传染科，黑龙江 哈尔滨 150086)； 刘应麟(哈尔滨医科大学附属第二医院 传染科，黑龙江 哈尔滨 150086)
关键词：病毒性肝炎；粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子；白细胞介素-8
哈尔滨医科大学学报000126 摘 要：目的 对病毒性肝炎患者血清中粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-8(IL-8)水平检测，探讨GM-CSF、IL-8与肝脏炎症活动及肝损害的关系，及二者在病毒性肝炎发病中的作用。方法 采用双抗体酶联免疫吸附法(ELISA法)检测了59例病毒性肝炎患者血清中的GM-CSF和IL-8水平，及患者血清中的ALT、AST、T-BIL及白蛋白的水平。结果 59例病毒性肝炎患者血清中的GM-CSF和IL-8水平较正常人显著升高(P<0.01)，并且GM-CSF和IL-8水平与ALT、AST、T-BIL及白蛋白的水平有明显的相关性。结论 GM-CSF和IL-8与肝细胞的炎性损伤密切相关，在肝脏免疫损伤中可能起重要作用。提示检测血清中GM-CSF及IL-8水平可以部分代表肝脏炎症活动及损伤程度。
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分类号：R512.6 文献标识码：A
文章编号：1000-1905(2000)01-0061-02▲
近年来，细胞因子与病毒性肝炎的关系受到广泛关注。TNF等细胞因子在肝损伤中的作用已经得到证实[1，2]。近年来发现的粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-8(IL-8)在肝脏疾病中的作用日益受到重视。本研究通过对病毒性肝炎患者血清中GM-CSF、IL-8水平的检测，以探讨GM-CSF、IL-8与肝脏炎症活动及肝损害的关系，及其在肝炎发病中的作用。
1 临床资料与方法
1.1 检测对象
1.1.1 实验组 1997年5～8月我院收治的病毒性肝炎患者59例，男性45例，女性14例，平均年龄(37±15.2)岁。其中重型肝炎27例，慢性肝炎23例，急性肝炎9例。病原学检测：HBsAg“+”46例，HBeAg“+”5例，抗-HDV“+”2例，抗-HCV“+”5例，抗-HAV-IgM“+”3例，抗-HEV“+”1例，未分型4例。
, 百拇医药
1.1.2 对照组：以20名义务献血者设为对照组(NC)。其中男性14人，女性6人，平均年龄(35±15.5)岁。均为HBsAg“-”，抗-HBs“-”及抗-HCV“-”。
1.2 试剂
GM-CSF及IL-8检测试剂盒购自法国Immunotech acoulter Company。
1.3 标本采集
清晨空腹采血10ml后置于试管中，室温下立即离心10min(3 000r/min)后分离血清，-20℃保存待用。同时采血5ml常规化验肝功等生化指标(T-BIL、ACT、AST、ALB等)。
1.4 实验方法
采用双抗体酶联免疫吸附法(ELISA)，操作按说明书进行。
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1.5 统计学处理
应用t检验和直线相关分析，所有统计分析均应用Statistics Software 5.0软件。
2 结果
正常对照组(NC)GM-CSF水平为(78.3±50.6)μg/L，急性肝炎组(AH)、慢性肝炎组(CH)、重型肝炎组(FH)血清中GM-CSF水平分别为(115.5±38.5)μg/L、(201.6±118.2)μg/L、(336.7±109.7)μg/L。各肝病组GM-CSF水平均较NC组显著升高(P<0.001)，尤以FH组最高。FH组、CH组较AH组显著增高(P<0.01)，FH组又较CH组显著性增高(P<0.01)，见附表。
同时检测IL-8含量，分别为NC组(30.5±21.4)μg/L、AH组(61.0±32.3)μg/L、CH组(110.8±65.2)μg/L、FH组(103.6±60.5)μg/L。各肝病组IL-8水平均较NC组显著性升高(P<0.01)，且CH组及FH组又显著高于AH组(P<0.01)，CH组与FH组无显著性差异(P>0.05)，见附表。
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附表 各组肝病患者血清中GM-CSF及IL-8水平和肝功指标 组别
n
GM-CSF
IL-8
ALT
AST
T-BIL
ALB
NC
11
2.17±0.32
1.93±0.20
, http://www.100md.com
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9
2.31±0.25
2.26±0.23
2.86±0.47
2.89±0.49
2.12±0.12
1.62±0.05
CH
, 百拇医药
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2.85±0.35*
2.74±0.45*
2.11±0.24#
1.80±0.28#
1.21±0.23
1.62±0.03##
FH
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3.20±0.39*△
, 百拇医药 2.65±0.38*
2.35±0.49#
2.31±0.47#
2.62±0.13#
1.49±0.06##
注：以上数据均为换算成对数后结果。各组肝病GM-CSF、IL-8水平较NC组分别为：P<0.001、P<0.01。与AH组比较，*：P<0.01；与CH组比较，△：P<0.001；与同组的GM-CSF、IL-8水平相关；#：P<0.05，##：P<0.01 GM-CSF与IL-8的等级相关分析为：r=0.314,P<0.05，二者呈明显正相关。
3 讨论
, 百拇医药
GM-CSF是由活化的T淋巴细胞释放的一种糖蛋白，具有多种免疫效应，其在抗传染免疫，尤其是在抗病毒免疫及炎症和病理损伤方面起重要作用[3]。病毒性肝炎，尤其是重型肝炎，其主要病理变化是肝细胞的广泛坏死及损伤，并导致ALT、AST等的被动释放。本研究发现各型肝炎患者血清中GM-CSF水平较对照组明显升高，且以重型肝炎最为显著。且各肝病组总的趋势为GM-CSF水平与ALT(r=0.429,P<0.001)、AST(r=0.413,P<0.001)及T-BIL(r=0.618,P<0.001)呈明显正相关，与血清白蛋白(ALB)(r=-0.410,P<0.001)呈明显负相关。总体表现为肝损害愈重，GM-CSF水平愈高。提示GM-CSF与肝细胞损伤密切相关，其在肝脏免疫损伤中可能起重要作用。
IL-8在机体炎症反应中起重要作用，是一种抗感染的炎症应答介质，具有吸引和活化中性粒细胞的作用，其主要来源于单核/巨噬细胞[4]。本研究中急、慢性及重型肝炎患者血清中IL-8水平均显著高于正常人且以慢性肝炎为著。而且其升高水平与代表肝脏炎症及损伤程度的ALT、AST、T-BIL及ALB等密切相关。各组肝病患者血清IL-8总体水平与ALT(r=0.512,P<0.001)，AST(r=0.483,P<0.001)，T-BIL(r=0.472,P<0.001)呈正相关，与ALB(r=-0.512，P<0.001)呈负相关。因此推测肝病患者血清中IL-8水平的升高与肝脏的局部炎症反应有关，可能参与肝脏的窦性损伤过程。由于血清中IL-8水平的升高，使渗入组织中的含量增多，引起炎性细胞在受累肝组织的浸润、聚集和释放的活性产物也相应增加，从而导致肝细胞损伤的加重[5，6]。
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由于活化的淋巴细胞可产生并释放GM-CSF，而IL-8可激活和趋化淋巴细胞，推测肝炎患者血清中IL-8能否是促使GM-CSF水平升高的原因之一。本实验发现两者之间有显著的相关性。总之，本文证实了不同肝病患者血清中GM-CSF和IL-8水平均有不同程度的升高，而且GM-CSF和IL-8水平与血清中ALT、AST、T-BIL、ALB水平有明显的相关性。提示检测血清中GM-CSF及IL-8可以部分代表肝脏炎症活动及损伤程度。■
作者简介：穆锦江(1968-)，男，主治医师，硕士
参考文献：
[1]谢清，郭青，周霞秋，等.DHBV诱发亚急性肝坏死发病机制的实验研究[J].中华消化杂志，1995，15：176-177.
[2]王新，许才发，赵国宁，等.TNF-α、IL-6和IL-8与慢性肝病的关系[J].中华传染病杂志，1997，15：85-88.
, 百拇医药
[3]Kubota A,Okamura,Omoiri F,et al.High serum levels of GM-CSF in patients with liver cirrohosis and granulocytopenia[J].Clin Lab Haematol,1995,17(1):61-63.
[4]Baggiolini M,Walz A,Stereren L,et al.Neutrophil-acivating peptide-1/interleukin-8 a novel cytokine that activates nentrophils[J].J Clin Invest,1989,84:1045.
[5]al-Wabel A,al-Knawy B,Razinddins.Interleukin-8 and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor seretion in hepatocellular carcinoma and viral chronic active hepatitis[J].Clin Immunol Immunopathol,1995,74(3):231-235.
[6]朱仲武，贺永久，罗瑞德，等.肝炎患者血清SCAM-1与IL-8的检测[J].中华内科杂志，1997，9：625-626.
收稿日期：1999-03-10
修改日期：1999-11-04, 百拇医药