PT测定中不同对照血浆和试剂对INR结果的影响
作者：刘波 方国安 金秀国 庄晓玲
单位：舟山市人民医院血液学实验室
关键词：血浆凝血酶原时间；国际标准化比率
临床检验杂志990529 血浆凝血酶元时间(PT)测定是当前监测口服抗凝药物治疗的实验指标，其报告方式有秒、比值和国际标准化比率(International Normalized Ratio，INR)[1]。我们采用了不同对照血浆、试剂对标本的INR测定，以探讨其影响因素，并对实验进行质量控制，现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 样品与试剂 样品为健康人、肝炎患者、口服华法林患者血浆各18份。顺利抽血2.7 ml，加109 mmol/L枸橼酸钠0.3 ml作1∶9抗凝，立即分离血浆待测。健康人对照、异常质控品-低值(Abnormal Control Plasma-Low)冻干血浆及组织凝血活酶冻干品均为Coulter-IL公司产品，PT试剂的国际敏感指数(International Sensitivity Index，ISI)为2.247。
, 百拇医药
1.2 检测方法 采用Coulter-IL公司的ACL-200凝血仪，同时报告INR和秒数。在实验过程中，用已连续检测20天的健康人、异常质控品-低值冻干血浆作质控品，进行质量控制。
1.3 统计学方法 用配对t检验。
2 结果
2.1 20份健康人冻干血浆的检测结果(
±s)11.71±0.27(s)，INR(±s)1.00±0.013，20份异常质控品-低值冻干血浆结果(±s)21.97±0.84(s)，INR(±s)4.13±0.18。
, 百拇医药
2.2 样品测定时分别用不同的健康人对照血浆，其测定的INR结果，见表1。
表1 用不同健康人对照血浆测定样品INR结果(±s) 样 品
n
健康人对照(s)
11.2
11.7
12.2
健康人
肝炎患者
口服华法林患者
, http://www.100md.com
18
18
18
1.11±0.079
1.84±0.33
2.90±0.60
1.00±0.073
1.67±0.30
2.63±0.55
0.91±0.066
1.52±0.27
, 百拇医药
2.40±0.50
注：*与健康人对照11.7 s结果比较P<0.01
2.3 组织凝血活酶冻干试剂溶解后在4°C放置3 d、5 d、7 d后与当天溶解的试剂分别检测同批样品和健康人对照血浆的秒数，以同样品一起测得的健康人血浆秒数为对照计算样品的INR，然后再用健康人对照均值11.7 s为对照计算样品的INR，结果见表2。以上实验时，健康人对照、异常质控品-低值浆干血浆的PT值均在(±2s)范围。表2 组织凝血活酶浸出液放置不同时间后对样品测定结果(±s) 样 品
n
报告方式
, 百拇医药
试剂放置时间
当天
3 d
5 d
7 d
健康人
18
s
INR*
INR**
11.72±0.37
1.04±0.076
, http://www.100md.com
1.00±0.073
11.93±0.38
1.04±0.080
1.04±0.080
11.98±0.36
1.04±0.069
1.06±0.070△
12.17±0.36
1.04±0.070
1.10±0.071△
肝炎患者
, 百拇医药
18
s
INR*
INR**
14.61±1.17
1.73±0.30
1.67±0.29
14.79±1.27
1.71±0.32
1.71±0.32
14.94±1.23
1.71±0.31
, 百拇医药
1.75±0.31△
15.21±1.28
1.71±0.30
1.80±0.32△
口服华法
林患者
18
s
INR*
INR**
17.91±1.68
, http://www.100md.com
2.71±0.61
2.63±0.55
18.11±1.70
2.70±0.56
2.70±0.56
18.29±1.65
2.71±0.55
2.71±0.56△
18.65±1.74
2.72±0.57
2.88±0.60△
, http://www.100md.com
注：*以与样品同天测得的健康人结果为对照 **以健康人对照均值11.7 s对照
△与当天结果比较P<0.01
3 讨论
近几年提出了PT测定的标准化和室内、室间质控[2]。PT检测的标准化包括试剂、报告方法等各方面，其报告方式有秒、比值(PTR)和INR，而用于口服抗凝药物监测时应用INR，计算公式：INR＝PTRISI，可见INR受到PTR和试剂ISI的影响。而PTR＝病人的PT秒数/健康人对照血浆的PT秒数，因此健康人血浆的选择是很重要的。本文应用不同健康人对照血浆检测不同样品的INR结果，发现健康人对照的秒数虽在±2 s的范围内，但INR的结果有明显差异(P<0.01)，尤以口服抗凝剂组更为明显。健康人对照的秒数至少为20份健康人血浆测得的PT均值[1]，本文以连续检测20次的健康人冻干血浆的PT均值11.7 s为对照，可以防止因健康人对照不同而引起的INR结果差异。试剂ISI对INR结果的影响较为明显，不同ISI的试剂测定正常人PT相差不大，但测定口服抗凝药物的病人PT有较大差异，而INR无差异[3]。为观察PT试剂效价对结果的影响，从表2的结果表明：随着试剂放置时间的延长，测定秒数也随之延长。而用当天与样品同样测得的健康人对照来计算INR，其结果基本相同(P>0.05)。如以均值11.7 s为健康人对照，则试剂在4°C放置3 d后，INR结果随之增高(P<0.01)。这是由于试剂放置时间过久后，其有效活性降低，采用与样品当天测得的健康人对照结果对试剂效价有抵消作用，使PTR不变[4]。因此，在试剂放置时间过长时，则不应采用健康人对照的均值11.7 s为对照，而以当天测得的健康人对照为宜，可纠正INR的结果。
, http://www.100md.com
本文以Coulter-IL公司提供的健康人、异常质控品-低值冻干血浆作为质控品，加入PT的日常检测中，对其作了连续20 d的检测其日间秒数CV为2.3%、3.8%，INR的CV为1.3%、4.4%，均符合小于5%的要求，因此把其作为质控品用于PT监测病人的口服抗凝药物治疗是可行的。
参考文献
1 程烽，朱忠勇，凝血酶原时间测定标准化及在抗凝治疗中应用.中华医学检验杂志，1995，18(2)：111
2 陈宝珊，谷小林，彭明婷，等.我国凝血酶原时间测定情况的调查，中华医学检验杂志，1995，18(2)：78
3 曾淑燕，张端伟，余展超，国际敏感指数在口服抗凝药治疗监测中的意义.中华血液学杂志，1996，17(9)：484
4 方国安，金秀国，刘波，等.PT、KPTT和TT测定中R值的临床意义探讨.上海医学检验杂志，1992，7(3)：186
(1998-01-19收稿，1999-06-18修回), 百拇医药
单位：舟山市人民医院血液学实验室
关键词：血浆凝血酶原时间；国际标准化比率
临床检验杂志990529 血浆凝血酶元时间(PT)测定是当前监测口服抗凝药物治疗的实验指标，其报告方式有秒、比值和国际标准化比率(International Normalized Ratio，INR)[1]。我们采用了不同对照血浆、试剂对标本的INR测定，以探讨其影响因素，并对实验进行质量控制，现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 样品与试剂 样品为健康人、肝炎患者、口服华法林患者血浆各18份。顺利抽血2.7 ml，加109 mmol/L枸橼酸钠0.3 ml作1∶9抗凝，立即分离血浆待测。健康人对照、异常质控品-低值(Abnormal Control Plasma-Low)冻干血浆及组织凝血活酶冻干品均为Coulter-IL公司产品，PT试剂的国际敏感指数(International Sensitivity Index，ISI)为2.247。
, 百拇医药
1.2 检测方法 采用Coulter-IL公司的ACL-200凝血仪，同时报告INR和秒数。在实验过程中，用已连续检测20天的健康人、异常质控品-低值冻干血浆作质控品，进行质量控制。
1.3 统计学方法 用配对t检验。
2 结果
2.1 20份健康人冻干血浆的检测结果(
±s)11.71±0.27(s)，INR(±s)1.00±0.013，20份异常质控品-低值冻干血浆结果(±s)21.97±0.84(s)，INR(±s)4.13±0.18。, 百拇医药
2.2 样品测定时分别用不同的健康人对照血浆，其测定的INR结果，见表1。
表1 用不同健康人对照血浆测定样品INR结果(
±s) 样 品n
健康人对照(s)
11.2
11.7
12.2
健康人
肝炎患者
口服华法林患者
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18
18
18
1.11±0.079
1.84±0.33
2.90±0.60
1.00±0.073
1.67±0.30
2.63±0.55
0.91±0.066
1.52±0.27
, 百拇医药
2.40±0.50
注：*与健康人对照11.7 s结果比较P<0.01
2.3 组织凝血活酶冻干试剂溶解后在4°C放置3 d、5 d、7 d后与当天溶解的试剂分别检测同批样品和健康人对照血浆的秒数，以同样品一起测得的健康人血浆秒数为对照计算样品的INR，然后再用健康人对照均值11.7 s为对照计算样品的INR，结果见表2。以上实验时，健康人对照、异常质控品-低值浆干血浆的PT值均在(
±2s)范围。表2 组织凝血活酶浸出液放置不同时间后对样品测定结果(±s) 样 品n
报告方式
, 百拇医药
试剂放置时间
当天
3 d
5 d
7 d
健康人
18
s
INR*
INR**
11.72±0.37
1.04±0.076
, http://www.100md.com
1.00±0.073
11.93±0.38
1.04±0.080
1.04±0.080
11.98±0.36
1.04±0.069
1.06±0.070△
12.17±0.36
1.04±0.070
1.10±0.071△
肝炎患者
, 百拇医药
18
s
INR*
INR**
14.61±1.17
1.73±0.30
1.67±0.29
14.79±1.27
1.71±0.32
1.71±0.32
14.94±1.23
1.71±0.31
, 百拇医药
1.75±0.31△
15.21±1.28
1.71±0.30
1.80±0.32△
口服华法
林患者
18
s
INR*
INR**
17.91±1.68
, http://www.100md.com
2.71±0.61
2.63±0.55
18.11±1.70
2.70±0.56
2.70±0.56
18.29±1.65
2.71±0.55
2.71±0.56△
18.65±1.74
2.72±0.57
2.88±0.60△
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注：*以与样品同天测得的健康人结果为对照 **以健康人对照均值11.7 s对照
△与当天结果比较P<0.01
3 讨论
近几年提出了PT测定的标准化和室内、室间质控[2]。PT检测的标准化包括试剂、报告方法等各方面，其报告方式有秒、比值(PTR)和INR，而用于口服抗凝药物监测时应用INR，计算公式：INR＝PTRISI，可见INR受到PTR和试剂ISI的影响。而PTR＝病人的PT秒数/健康人对照血浆的PT秒数，因此健康人血浆的选择是很重要的。本文应用不同健康人对照血浆检测不同样品的INR结果，发现健康人对照的秒数虽在
±2 s的范围内，但INR的结果有明显差异(P<0.01)，尤以口服抗凝剂组更为明显。健康人对照的秒数至少为20份健康人血浆测得的PT均值[1]，本文以连续检测20次的健康人冻干血浆的PT均值11.7 s为对照，可以防止因健康人对照不同而引起的INR结果差异。试剂ISI对INR结果的影响较为明显，不同ISI的试剂测定正常人PT相差不大，但测定口服抗凝药物的病人PT有较大差异，而INR无差异[3]。为观察PT试剂效价对结果的影响，从表2的结果表明：随着试剂放置时间的延长，测定秒数也随之延长。而用当天与样品同样测得的健康人对照来计算INR，其结果基本相同(P>0.05)。如以均值11.7 s为健康人对照，则试剂在4°C放置3 d后，INR结果随之增高(P<0.01)。这是由于试剂放置时间过久后，其有效活性降低，采用与样品当天测得的健康人对照结果对试剂效价有抵消作用，使PTR不变[4]。因此，在试剂放置时间过长时，则不应采用健康人对照的均值11.7 s为对照，而以当天测得的健康人对照为宜，可纠正INR的结果。, http://www.100md.com
本文以Coulter-IL公司提供的健康人、异常质控品-低值冻干血浆作为质控品，加入PT的日常检测中，对其作了连续20 d的检测其日间秒数CV为2.3%、3.8%，INR的CV为1.3%、4.4%，均符合小于5%的要求，因此把其作为质控品用于PT监测病人的口服抗凝药物治疗是可行的。
参考文献
1 程烽，朱忠勇，凝血酶原时间测定标准化及在抗凝治疗中应用.中华医学检验杂志，1995，18(2)：111
2 陈宝珊，谷小林，彭明婷，等.我国凝血酶原时间测定情况的调查，中华医学检验杂志，1995，18(2)：78
3 曾淑燕，张端伟，余展超，国际敏感指数在口服抗凝药治疗监测中的意义.中华血液学杂志，1996，17(9)：484
4 方国安，金秀国，刘波，等.PT、KPTT和TT测定中R值的临床意义探讨.上海医学检验杂志，1992，7(3)：186
(1998-01-19收稿，1999-06-18修回), 百拇医药