加减射干麻黄汤对哮喘豚鼠血浆血栓素 B2和6-酮前列腺素 F1α水平变化的影响
作者：梁直英 周名璐 陈芝喜 陈津岩 刘琼 郭淑珍
单位：广州中医药大学第一附属医院内五科，广州 510405
关键词：@加减射干麻黄汤/药理学；射干麻黄汤/治疗应用；哮喘/中药疗法；血栓烷A2；6-酮前列腺素F1α
广州中医药大学学报000321摘要：为进一步探讨加减射干麻黄汤治疗支气管哮喘的作用机理，采用放射免疫分析方法观察了加减射干麻黄汤对实验性哮喘豚鼠血浆血栓素 B2(TXB2)、6-酮前列腺素 F1α(6-酮-PGF1α)含量的影响。结果显示：模型组豚鼠哮喘发作时血浆 TXB2 含量升高(P<0.001)，而 6-酮-PGF1α 含量下降(P<0.001)；治疗组用加减射干麻黄汤治疗 8 d 后，血浆 TXB2 含量及 TXB2/6-酮-PGF1α比值降低(均P<0.001)，而 6-酮-PGF1α 含量升高(P<0.001)。提示该方具有拮抗 TXB2 的合成和释放，促进前列环素 (PGI2) 生成的作用，从而发挥其解痉、平喘的药理效应。
, http://www.100md.com
中图分类号：R562.2+5 文献标识码：A
文章编号：1007-3213(2000)03-0253-03
Effects of Modified Shegan Mahuang Decoction on Plasma Thromboxane B2
and 6-Ketoprostaglandin F1α in Guinea Pig with Asthma
LIANG Zhiying，ZHOU Minlu，LIU Qiong，GUO Shuzhen
(The First Affiliated Hospital, Guangzhou University of TCM, Guangzhou 510405, China)
, 百拇医药
CHEN Zhixi，CHEN Jinyan
(Dept. of Nuclear Medicine, Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou 510405, China)
Abstract: Guinea pig models with asthma were established with aerosolized ovalbumin. The levels of plasma thromboxane B2 (TXB2) and 6-ketoprostaglandin F1α (6-keto-PGF1a ) were measured by radioimmunoassay. Experimental results showed that the TXB2 level was higher while 6-keto-PGF1α level was lower in the model group than the normal group (P<0.001). After 8-day treatment with modified Shegan Mahuang Decoction the level of plasma TXB2 and ratio of TXB2/6-keto-PGF1α were decreased, and 6-keto-PGF1α was increased (P<0.001).It is indicated that modified Shegan Mahuang Decoction can counteract the synthesis and release of TXB2 and promote the formation of PGI2.
, 百拇医药
Key words: @MODIFIED SHEGAN MAHUANG DECOCTION/pharmacology;
SHEGAN MAHUANG DECOCTION/ther.use; ASTHMA/TCD therapy;
THROMBOXANE A2 /blood; 6-KETOPROSTAGLANDIN F1 ALPHA /blood
加减射干麻黄汤具有温肺化饮、祛痰平喘等作用，临床上用于治疗支气管哮喘疗效显著。药理实验发现该方对豚鼠离体气管平滑肌有松驰作用，并有抗组胺、抗乙酰胆碱的作用。为了进一步探讨其作用机理，本文观察该方对实验性哮喘豚鼠治疗前后血浆血栓素 B2(TXB2)、6-酮前列腺素 F1α(6-酮-PGF1α)水平的影响。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 中药
加减射干麻黄汤由射干、麻黄、细辛、地龙、法夏等组成，将992g生药按传统煎药方法制备成248mL的浓缩液(每mL含4g生药)，存放于4℃冰箱备用。
1.2 动物
百花豚鼠，雄性，体重为(200±50)g，由第一军医大学动物中心提供。合格证批号：95A42，96A27。
1.3 试剂
TXB2和6-酮-PGF1α试剂盒由解放军总医院东亚免疫技术研究所提供；10%卵蛋白溶液，临用时新鲜配制，由上海知行化工厂提供，批号931210。
1.4 仪器
, 百拇医药
PA18067型雾化器(美国)，5500型γ计数仪(美国)。
1.5 过敏性哮喘豚鼠模型的复制
按Bames[1]和吕宝璋[2]的方法略加改良，以10%卵蛋白溶液1.0 mL腹腔内注射致敏。然后随机分为模型组和治疗组，14d后以10%卵蛋白溶液喷雾吸入至出现咳嗽、喘鸣、呼吸道梗阻等症状，连续3 d，1次/d。从第4天开始，治疗组动物以加减射干麻黄汤煎剂10mL/kg灌胃(相当于成人每天用量等效剂量的4倍)，1次/d，连续8d。模型组动物以等量生理盐水灌胃，1次/d，连续8d。正常对照组不给卵蛋白溶液，而用等量生理盐水腹腔内注射及雾化吸入，其他处理同模型组。
1.6 血浆TXB2、6-酮-PGF1α含量的测定
于给药前及给药后5d和8d，取一次性5mL空针吸取消炎痛-EDTA.Na2液0.2 mL，快速从心脏取血2mL，立即在空针内颠倒混匀，注入试管内，置入冰浴10min，4℃离心3000r/min，10min，分离血浆，置低温冰箱(-30℃)待测。
, 百拇医药
1.7 统计处理
实验数据均采用POMS医用统计软件进行处理。
2 实验结果
模型组豚鼠经用卵蛋白致敏及喷雾激发后其血浆TXB2含量升高，而6-酮-PGF1α含量降低，与正常对照组比较，有明显差异(P<0.001)。治疗组豚鼠治疗前其血浆TXB2、6-酮-PGF1α含量与模型组比较差异无显著性(P>0.05)，但经用加减射干麻黄汤治疗8d后血浆TXB2含量及TXB2/6-酮-PGF1α比值显著降低(均P<0.001)，同时6-酮-PGF1α含量显著升高(P<0.001)，见表1～表3。
表1 哮喘豚鼠治疗前后血浆TXB2含量的变化(
±s) 组 别
, http://www.100md.com
N/只
ρTXB2/(ng.L-1)
治疗前
治疗后5d
治疗后8d
正常对照组
9
73.80±31.90
68.76±24.01
73.58±31.05
模型组
, http://www.100md.com
14
375.61±123.42**
370.34±127.53**
265.53±129.21**
治疗组
14
389.21±120.56**
308.63±94.14**
149.31±50.66**△△
方差分析
, 百拇医药
P<0.001
P<0.001
P<0.001
**与正常对照组比较P<0.001，*P<0.01；△△与模型组比较P<0.001(下同)表2 哮喘豚鼠治疗前后血浆6-酮-PGF1α含量的变化(±s) 组 别
N/只
ρ6-酮-PGF1α/(ng.L-1)
治疗前
治疗后5d
, http://www.100md.com
治疗后8d
正常对照组
9
84.36±13.48
80.87±12.51
80.94±14.92
模型组
14
31.55±14.83**
31.42±10.37**
36.70±9.91**
, 百拇医药
治疗组
14
30.89±11.82**
38.90±16.77**
72.54±22.80△△
方差分析
P<0.001
P<0.001
P<0.001
表3 哮喘豚鼠治疗前后TXB2/6-酮-PGF1α比值的比较(±s) 组 别
, 百拇医药
N/只
ρTXB2/ρ6-酮-PGF1α
治疗前
治疗后5d
治疗后8d
正常对照组
9
0.85±0.33
0.88±0.39
0.91±0.37
模型组
, 百拇医药
14
14.19±7.59**
13.63±8.80**
7.35±2.80**
治疗组
14
13.58±4.79**
9.29±5.28**
2.37±1.38*△△
方差分析
, 百拇医药
P<0.001
P<0.001
P<0.001
3 讨论
血栓素A2(TXA2)主要是由血小板微粒体合成并释放，具有强烈收缩血管、支气管平滑肌和促进血小板聚集的作用。前列环素(PGI2)则有舒张血管、支气管平滑肌和抑制血小板聚集的作用。由于TXA2和PGI2很不稳定，其稳定代谢产物为TXB2和6-酮-PGF1α。直接测定TXA2、PGI2浓度较为困难。目前，国内外均以测定血浆TXB2和6-酮-PGF1α的浓度作为判断循环血浆中TXA2和PGI2的水平。在正常生理状态下血浆中TXA2和PGI2的浓度比例处于相对平衡，以保持机体内环境的稳定。目前发现参与哮喘发生的炎性介质有50多种，但最主要的是花生四烯酸代谢产物白三烯及前列腺素类，TXB2与6-酮-PGF1α的比值升高，可使气道平滑肌痉挛，呼吸道阻力增加，从而导致哮喘的发生。本实验结果显示，经用卵蛋白致敏及喷雾激发后的哮喘豚鼠，其血浆TXB2水平显著升高(P<0.001)，6-酮-PGF1α水平显著下降(P<0.001)，TXB2/6-酮-PGF1α比值增高(P<0.001)。这表明哮喘发作时，TXA2生成增加，PGI2生成减少，TXB2-PGI2之间平衡失调。这与以上理论及文献报道[3，4]的结果一致，说明本实验的动物造型是成功的。
, 百拇医药
气道变应性炎症(AAI)和炎症介质(IM)是哮喘发作的重要病理生理基础。目前应寻找能改善AAI和拮抗IM的药物来防治支气管哮喘，类固醇制剂是有效的抗AAI药物，但长期应用有全身性副作用，仍然不是治疗哮喘的理想药物。本实验结果发现，加减射干麻黄汤能显著降低血浆TXB2、升高6-酮-PGF1α水平，改善TXB2/6-酮-PGF1α比值，无论是治疗前后的自身对照或治疗8d后与对照组相比均有显著意义(均P<0.001)；同时能减轻哮喘豚鼠发作程度及持续时间。提示该方药的作用机理与调节前列腺素水平有关，主要是抑制TXA2的合成和促进PGI2生成，从而发挥其解痉、平喘的药理效应。这为中药复方防治哮喘的研究提供了科学依据。
本实验结果还显示，哮喘豚鼠经用该方治疗5d时，其TXB2/6-酮-PGF1α比值已有所下降，但与模型组比较差异不显著。治疗8d后，其TXB2/6-酮-PGF1α比值显著下降(P<0.001)，说明该方治疗哮喘的疗程要在8d以上效果才明显，否则疗效不显著。
, http://www.100md.com
基金项目：广东省中医药管理局课题(编号：96034)
作者简介：梁直英(1942-)，男，主任医师
参考文献：
[1] Bames J Peter,Dollery T Colin, MacDermot J. Increased pulmonary α-adrenergic and reduced β-adrenergic receptors in experimental asthma[J].Nature,1980,285:569
[2] 吕宝璋，刘林英，田英，等.豚鼠肺组织中β和M受体的检定及其在实验性过敏性哮喘时的变化[J].中华医学杂志，1985(7)：385
[3] Folco G, Omini C, Rossoni G,et al. Anticholinergic agents prevent guinea-pig airway contriction induced by histamine, bradykinin and leukotriene C4: relationship to circulating TXA2[J].European J Pharmacol,1982,78:159
[4] Shephard G Enid,Malan L, Macfarlane C M,et al. Lung function and plasma levels of thromboxan B2 6-keto-prostaglandin F1α and B-thromboglobulin in antigen induced asthma before and after indomethacin pretreatment[J].Br J Clin Pharmac, 1985,19：459
收稿日期：2000-02-22, 百拇医药
单位：广州中医药大学第一附属医院内五科，广州 510405
关键词：@加减射干麻黄汤/药理学；射干麻黄汤/治疗应用；哮喘/中药疗法；血栓烷A2；6-酮前列腺素F1α
广州中医药大学学报000321摘要：为进一步探讨加减射干麻黄汤治疗支气管哮喘的作用机理，采用放射免疫分析方法观察了加减射干麻黄汤对实验性哮喘豚鼠血浆血栓素 B2(TXB2)、6-酮前列腺素 F1α(6-酮-PGF1α)含量的影响。结果显示：模型组豚鼠哮喘发作时血浆 TXB2 含量升高(P<0.001)，而 6-酮-PGF1α 含量下降(P<0.001)；治疗组用加减射干麻黄汤治疗 8 d 后，血浆 TXB2 含量及 TXB2/6-酮-PGF1α比值降低(均P<0.001)，而 6-酮-PGF1α 含量升高(P<0.001)。提示该方具有拮抗 TXB2 的合成和释放，促进前列环素 (PGI2) 生成的作用，从而发挥其解痉、平喘的药理效应。
, http://www.100md.com
中图分类号：R562.2+5 文献标识码：A
文章编号：1007-3213(2000)03-0253-03
Effects of Modified Shegan Mahuang Decoction on Plasma Thromboxane B2
and 6-Ketoprostaglandin F1α in Guinea Pig with Asthma
LIANG Zhiying，ZHOU Minlu，LIU Qiong，GUO Shuzhen
(The First Affiliated Hospital, Guangzhou University of TCM, Guangzhou 510405, China)
, 百拇医药
CHEN Zhixi，CHEN Jinyan
(Dept. of Nuclear Medicine, Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou 510405, China)
Abstract: Guinea pig models with asthma were established with aerosolized ovalbumin. The levels of plasma thromboxane B2 (TXB2) and 6-ketoprostaglandin F1α (6-keto-PGF1a ) were measured by radioimmunoassay. Experimental results showed that the TXB2 level was higher while 6-keto-PGF1α level was lower in the model group than the normal group (P<0.001). After 8-day treatment with modified Shegan Mahuang Decoction the level of plasma TXB2 and ratio of TXB2/6-keto-PGF1α were decreased, and 6-keto-PGF1α was increased (P<0.001).It is indicated that modified Shegan Mahuang Decoction can counteract the synthesis and release of TXB2 and promote the formation of PGI2.
, 百拇医药
Key words: @MODIFIED SHEGAN MAHUANG DECOCTION/pharmacology;
SHEGAN MAHUANG DECOCTION/ther.use; ASTHMA/TCD therapy;
THROMBOXANE A2 /blood; 6-KETOPROSTAGLANDIN F1 ALPHA /blood
加减射干麻黄汤具有温肺化饮、祛痰平喘等作用，临床上用于治疗支气管哮喘疗效显著。药理实验发现该方对豚鼠离体气管平滑肌有松驰作用，并有抗组胺、抗乙酰胆碱的作用。为了进一步探讨其作用机理，本文观察该方对实验性哮喘豚鼠治疗前后血浆血栓素 B2(TXB2)、6-酮前列腺素 F1α(6-酮-PGF1α)水平的影响。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 中药
加减射干麻黄汤由射干、麻黄、细辛、地龙、法夏等组成，将992g生药按传统煎药方法制备成248mL的浓缩液(每mL含4g生药)，存放于4℃冰箱备用。
1.2 动物
百花豚鼠，雄性，体重为(200±50)g，由第一军医大学动物中心提供。合格证批号：95A42，96A27。
1.3 试剂
TXB2和6-酮-PGF1α试剂盒由解放军总医院东亚免疫技术研究所提供；10%卵蛋白溶液，临用时新鲜配制，由上海知行化工厂提供，批号931210。
1.4 仪器
, 百拇医药
PA18067型雾化器(美国)，5500型γ计数仪(美国)。
1.5 过敏性哮喘豚鼠模型的复制
按Bames[1]和吕宝璋[2]的方法略加改良，以10%卵蛋白溶液1.0 mL腹腔内注射致敏。然后随机分为模型组和治疗组，14d后以10%卵蛋白溶液喷雾吸入至出现咳嗽、喘鸣、呼吸道梗阻等症状，连续3 d，1次/d。从第4天开始，治疗组动物以加减射干麻黄汤煎剂10mL/kg灌胃(相当于成人每天用量等效剂量的4倍)，1次/d，连续8d。模型组动物以等量生理盐水灌胃，1次/d，连续8d。正常对照组不给卵蛋白溶液，而用等量生理盐水腹腔内注射及雾化吸入，其他处理同模型组。
1.6 血浆TXB2、6-酮-PGF1α含量的测定
于给药前及给药后5d和8d，取一次性5mL空针吸取消炎痛-EDTA.Na2液0.2 mL，快速从心脏取血2mL，立即在空针内颠倒混匀，注入试管内，置入冰浴10min，4℃离心3000r/min，10min，分离血浆，置低温冰箱(-30℃)待测。
, 百拇医药
1.7 统计处理
实验数据均采用POMS医用统计软件进行处理。
2 实验结果
模型组豚鼠经用卵蛋白致敏及喷雾激发后其血浆TXB2含量升高，而6-酮-PGF1α含量降低，与正常对照组比较，有明显差异(P<0.001)。治疗组豚鼠治疗前其血浆TXB2、6-酮-PGF1α含量与模型组比较差异无显著性(P>0.05)，但经用加减射干麻黄汤治疗8d后血浆TXB2含量及TXB2/6-酮-PGF1α比值显著降低(均P<0.001)，同时6-酮-PGF1α含量显著升高(P<0.001)，见表1～表3。
表1 哮喘豚鼠治疗前后血浆TXB2含量的变化(
±s) 组 别, http://www.100md.com
N/只
ρTXB2/(ng.L-1)
治疗前
治疗后5d
治疗后8d
正常对照组
9
73.80±31.90
68.76±24.01
73.58±31.05
模型组
, http://www.100md.com
14
375.61±123.42**
370.34±127.53**
265.53±129.21**
治疗组
14
389.21±120.56**
308.63±94.14**
149.31±50.66**△△
方差分析
, 百拇医药
P<0.001
P<0.001
P<0.001
**与正常对照组比较P<0.001，*P<0.01；△△与模型组比较P<0.001(下同)表2 哮喘豚鼠治疗前后血浆6-酮-PGF1α含量的变化(
±s) 组 别N/只
ρ6-酮-PGF1α/(ng.L-1)
治疗前
治疗后5d
, http://www.100md.com
治疗后8d
正常对照组
9
84.36±13.48
80.87±12.51
80.94±14.92
模型组
14
31.55±14.83**
31.42±10.37**
36.70±9.91**
, 百拇医药
治疗组
14
30.89±11.82**
38.90±16.77**
72.54±22.80△△
方差分析
P<0.001
P<0.001
P<0.001
表3 哮喘豚鼠治疗前后TXB2/6-酮-PGF1α比值的比较(
±s) 组 别, 百拇医药
N/只
ρTXB2/ρ6-酮-PGF1α
治疗前
治疗后5d
治疗后8d
正常对照组
9
0.85±0.33
0.88±0.39
0.91±0.37
模型组
, 百拇医药
14
14.19±7.59**
13.63±8.80**
7.35±2.80**
治疗组
14
13.58±4.79**
9.29±5.28**
2.37±1.38*△△
方差分析
, 百拇医药
P<0.001
P<0.001
P<0.001
3 讨论
血栓素A2(TXA2)主要是由血小板微粒体合成并释放，具有强烈收缩血管、支气管平滑肌和促进血小板聚集的作用。前列环素(PGI2)则有舒张血管、支气管平滑肌和抑制血小板聚集的作用。由于TXA2和PGI2很不稳定，其稳定代谢产物为TXB2和6-酮-PGF1α。直接测定TXA2、PGI2浓度较为困难。目前，国内外均以测定血浆TXB2和6-酮-PGF1α的浓度作为判断循环血浆中TXA2和PGI2的水平。在正常生理状态下血浆中TXA2和PGI2的浓度比例处于相对平衡，以保持机体内环境的稳定。目前发现参与哮喘发生的炎性介质有50多种，但最主要的是花生四烯酸代谢产物白三烯及前列腺素类，TXB2与6-酮-PGF1α的比值升高，可使气道平滑肌痉挛，呼吸道阻力增加，从而导致哮喘的发生。本实验结果显示，经用卵蛋白致敏及喷雾激发后的哮喘豚鼠，其血浆TXB2水平显著升高(P<0.001)，6-酮-PGF1α水平显著下降(P<0.001)，TXB2/6-酮-PGF1α比值增高(P<0.001)。这表明哮喘发作时，TXA2生成增加，PGI2生成减少，TXB2-PGI2之间平衡失调。这与以上理论及文献报道[3，4]的结果一致，说明本实验的动物造型是成功的。
, 百拇医药
气道变应性炎症(AAI)和炎症介质(IM)是哮喘发作的重要病理生理基础。目前应寻找能改善AAI和拮抗IM的药物来防治支气管哮喘，类固醇制剂是有效的抗AAI药物，但长期应用有全身性副作用，仍然不是治疗哮喘的理想药物。本实验结果发现，加减射干麻黄汤能显著降低血浆TXB2、升高6-酮-PGF1α水平，改善TXB2/6-酮-PGF1α比值，无论是治疗前后的自身对照或治疗8d后与对照组相比均有显著意义(均P<0.001)；同时能减轻哮喘豚鼠发作程度及持续时间。提示该方药的作用机理与调节前列腺素水平有关，主要是抑制TXA2的合成和促进PGI2生成，从而发挥其解痉、平喘的药理效应。这为中药复方防治哮喘的研究提供了科学依据。
本实验结果还显示，哮喘豚鼠经用该方治疗5d时，其TXB2/6-酮-PGF1α比值已有所下降，但与模型组比较差异不显著。治疗8d后，其TXB2/6-酮-PGF1α比值显著下降(P<0.001)，说明该方治疗哮喘的疗程要在8d以上效果才明显，否则疗效不显著。
, http://www.100md.com
基金项目：广东省中医药管理局课题(编号：96034)
作者简介：梁直英(1942-)，男，主任医师
参考文献：
[1] Bames J Peter,Dollery T Colin, MacDermot J. Increased pulmonary α-adrenergic and reduced β-adrenergic receptors in experimental asthma[J].Nature,1980,285:569
[2] 吕宝璋，刘林英，田英，等.豚鼠肺组织中β和M受体的检定及其在实验性过敏性哮喘时的变化[J].中华医学杂志，1985(7)：385
[3] Folco G, Omini C, Rossoni G,et al. Anticholinergic agents prevent guinea-pig airway contriction induced by histamine, bradykinin and leukotriene C4: relationship to circulating TXA2[J].European J Pharmacol,1982,78:159
[4] Shephard G Enid,Malan L, Macfarlane C M,et al. Lung function and plasma levels of thromboxan B2 6-keto-prostaglandin F1α and B-thromboglobulin in antigen induced asthma before and after indomethacin pretreatment[J].Br J Clin Pharmac, 1985,19：459
收稿日期：2000-02-22, 百拇医药