肾缺血再灌注损伤大鼠蛋白尿的生成及其机制的研究
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作者：王新良 黄善生 陈晓玲 王殿华 张玉华
单位：王新良 黄善生 陈晓玲 王殿华(河北医科大学病理生理学教研室， 河北 石家庄 050017)；张玉华( 河北医科大学第二医院同位素室)
关键词：
中国病理生理杂志0010306
目的：肾缺血再灌注(ischemia-reperfusion，I-R)损伤是导致急性肾功能衰竭的常见原因。肾I-R损伤后有关肾小球的损伤及其机能障碍尚未引起人们足够的重视。虽已有文献报道实验性肾I-R损伤后出现大量蛋白尿，但其发生的规律和机制不明。方法：健康SD大鼠22只，雌雄不拘， 体重250～300 g，河北省实验动物中心提供。实验动物随机分为三组：(1)假手术组(sham)(n=10)；(2)I45 minR1h组(n=6)；(3)I45 minR5h组(n=6)。大鼠肾I-R模型复制：在乌拉坦麻醉下，行颈动脉插管监测血压，并结扎(离断)右侧肾脏，膀胱造漏取尿。以2 mL*100 g-1*h-1的速率输入0.9% NaCI，补充体液丢失，待尿量平稳并收集1 h尿液后，用无创动脉夹夹闭左侧肾动静脉，45 min后松开动脉夹。留尿计尿量，考马斯亮蓝比色法测定尿蛋白，SDS-PAGE尿蛋白电泳，硫代巴比妥比色法测定肾组织匀浆MDA含量。结果：肾I-R后大鼠一般状态稳定，血压无明显波动。再灌注0～4 h尿量逐渐增多，5～8 h稳定在高水平，之后逐渐减少。I-R组大鼠存活期显著低于sham组，I-R组仅一例于再灌注16 h死亡，其余均超过24 h。Sham组也有少量尿蛋白(0.67±0.22 mg/h)排出，但I-R后尿蛋白排出量明显增多，I-R后0～4 h尿蛋白排出增加约1.5倍(1.80±0.48 mg/h)，I-R后5～8 h继续增多(2.31±0.54 mg/h)，11 h～14 h略有降低(1.59±0.46 mg/h)。SDS-PAGE电泳表明，sham组和I-R组大鼠尿蛋白均以白蛋白(66 kD)为主，分子量大于白蛋白的条带只有一条(73 kD)；而I-R组可以见到分子量更大的蛋白条带(99 kD、 108 kD、121 kD、142 kD和161 kD)。与sham组相比，肾I-R后肾组织匀浆中MDA含量明显升高(P<0.01)。结论：肾I-R后肾脏的尿液生成减少及尿蛋白的排出增多，且显示一定的规律性变化。肾I-R后排出的尿蛋白虽仍以白蛋白(66 kD)为主，但排出的尿液中出现了在sham组未见到的更大分子量的蛋白质，甚至于分子量接近于球蛋白的物质。肾I-R动物存活期缩短，肾组织匀浆中MDA含量增高，以上结果证明肾I-R导致了肾脏的损伤，肾小球滤过膜通透性增高，存在肾小球的机能障碍。, http://www.100md.com
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中国病理生理杂志0010306
目的：肾缺血再灌注(ischemia-reperfusion，I-R)损伤是导致急性肾功能衰竭的常见原因。肾I-R损伤后有关肾小球的损伤及其机能障碍尚未引起人们足够的重视。虽已有文献报道实验性肾I-R损伤后出现大量蛋白尿，但其发生的规律和机制不明。方法：健康SD大鼠22只，雌雄不拘， 体重250～300 g，河北省实验动物中心提供。实验动物随机分为三组：(1)假手术组(sham)(n=10)；(2)I45 minR1h组(n=6)；(3)I45 minR5h组(n=6)。大鼠肾I-R模型复制：在乌拉坦麻醉下，行颈动脉插管监测血压，并结扎(离断)右侧肾脏，膀胱造漏取尿。以2 mL*100 g-1*h-1的速率输入0.9% NaCI，补充体液丢失，待尿量平稳并收集1 h尿液后，用无创动脉夹夹闭左侧肾动静脉，45 min后松开动脉夹。留尿计尿量，考马斯亮蓝比色法测定尿蛋白，SDS-PAGE尿蛋白电泳，硫代巴比妥比色法测定肾组织匀浆MDA含量。结果：肾I-R后大鼠一般状态稳定，血压无明显波动。再灌注0～4 h尿量逐渐增多，5～8 h稳定在高水平，之后逐渐减少。I-R组大鼠存活期显著低于sham组，I-R组仅一例于再灌注16 h死亡，其余均超过24 h。Sham组也有少量尿蛋白(0.67±0.22 mg/h)排出，但I-R后尿蛋白排出量明显增多，I-R后0～4 h尿蛋白排出增加约1.5倍(1.80±0.48 mg/h)，I-R后5～8 h继续增多(2.31±0.54 mg/h)，11 h～14 h略有降低(1.59±0.46 mg/h)。SDS-PAGE电泳表明，sham组和I-R组大鼠尿蛋白均以白蛋白(66 kD)为主，分子量大于白蛋白的条带只有一条(73 kD)；而I-R组可以见到分子量更大的蛋白条带(99 kD、 108 kD、121 kD、142 kD和161 kD)。与sham组相比，肾I-R后肾组织匀浆中MDA含量明显升高(P<0.01)。结论：肾I-R后肾脏的尿液生成减少及尿蛋白的排出增多，且显示一定的规律性变化。肾I-R后排出的尿蛋白虽仍以白蛋白(66 kD)为主，但排出的尿液中出现了在sham组未见到的更大分子量的蛋白质，甚至于分子量接近于球蛋白的物质。肾I-R动物存活期缩短，肾组织匀浆中MDA含量增高，以上结果证明肾I-R导致了肾脏的损伤，肾小球滤过膜通透性增高，存在肾小球的机能障碍。, http://www.100md.com