甘油蛋白等渗混封液封制钩虫卵永久标本初探
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作者：李辉
单位：广西中医学院寄生虫教研室 南宁 530001
关键词：钩虫卵；标本；甘油蛋白
广西中医学院学报000148 中图分类号 R383.13
蠕虫卵永久封片标本，常规方法对大部分的虫卵封存都得到满意的结果，唯独钩虫卵制作永久封片易于出现卵壳变形，内部结构靠边，结构模糊，失去自然状态的弊病，制作难度大。为满足我校学生实习的需要，1987年起，笔者试用文献介绍的方法如甘油明胶封片法、虫胶圈封法、凡士林圈封法、洪氏虫卵封片法[1～4]制作永久钩虫卵封片标本，经过历年观察，上述方法制片效果不够理想。为寻求操作简便，省时省事，效果较好，而且保存期长的制片方法，在洪氏虫卵封片的基础上作一些改进，设计了本题的方法。从1988年起，学生用的实验标本大部分按此法做成。效果比较满意，现将制作要求介绍如下。
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1 材料与方法
1.1 甘油蛋白等渗混封液(下称混封液)配制及使用
甲液：甘油10ml，甲醛40ml，鸡蛋白50ml，先将蛋白拌匀，加入甲醛拌匀，最后加入甘油，然后用棉花纱布过滤，置冰箱10℃保存备用。
乙液：生理盐水(氯化钠0.85%)50ml，临用时配制，使用时甲乙两液为2∶1比例充分混合使用。
1.2 制作方法
取10%甲醛固定的虫卵液滴于18mm×18mm大盖片上，待水分挥发，粪渣呈湿润状态，加细沙(过280目筛、水洗、沉淀、烤干、砂粒大小直径45～60μm)少许，滴上一滴混封液，用竹签拌匀，盖上9mm×9mm的小盖片(注意混封液用量要适当，勿使溢出为度)，反转大盖片，使小盖片朝下，封置于事先加有中性树胶的载片上，这时小盖片包埋在大盖片与载片的树胶之中，平放于托板置室温或37℃温箱中待干固。
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2 结果与讨论
用本法所制封片，卵壳不变形，内部结构清晰，操作手续简便，省时、省事，经过八年使用观察效果满意，与用其它方法同批制作的标本相比，优于其它方法的制片，结果详见表1。
表1 五种方法制备蠕虫卵封片标本的优缺点比较 方法
适用范围
混封液
制片前处理
结果
卵壳
内部结构
制片过程
甘油明胶封片法
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蠕虫卵
甘油明胶液
脱水、透明蒸发共12天
正常
清晰自然
繁锁、期长
虫胶圈封制片法
蠕虫卵
甘油虫胶液
浓缩、蒸发6天
部分变形
易变黑色
简单、期长
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凡士林圈封制片法
蠕虫卵
虫卵保存液
-
正常
易变黑色
简单、省时省事
洪氏虫卵封片法
蠕虫卵临时封片
甘油、鸡蛋白甲醛混合液
-
部分变形
欠清晰
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简单、省时省事
甘油蛋白钠盐液封存法
蠕虫卵
甘油、鸡蛋白、甲醛、氯化钠
载片蒸发15分钟
正常
清晰自然
简单、省时省事
参考文献
[1] 杨文远.寄生虫标本采集保存及制用技术.武汉医学院学报.1983，(10)：51
[2] 缪 峰.制作蠕虫卵玻片标本的一种方法.临床检验杂志.1985，3(4)：193
[3] 缪 峰.制作蠕虫卵永久性玻片的一种新方法.生物学通报.1985，(9)：40
[4] 宋宗臣.寄生虫卵长期玻片标本的制作方法.动物学杂志.1982，(1)：39
收稿日期：1999-10-21, 百拇医药
单位：广西中医学院寄生虫教研室 南宁 530001
关键词：钩虫卵；标本；甘油蛋白
广西中医学院学报000148 中图分类号 R383.13
蠕虫卵永久封片标本，常规方法对大部分的虫卵封存都得到满意的结果，唯独钩虫卵制作永久封片易于出现卵壳变形，内部结构靠边，结构模糊，失去自然状态的弊病，制作难度大。为满足我校学生实习的需要，1987年起，笔者试用文献介绍的方法如甘油明胶封片法、虫胶圈封法、凡士林圈封法、洪氏虫卵封片法[1～4]制作永久钩虫卵封片标本，经过历年观察，上述方法制片效果不够理想。为寻求操作简便，省时省事，效果较好，而且保存期长的制片方法，在洪氏虫卵封片的基础上作一些改进，设计了本题的方法。从1988年起，学生用的实验标本大部分按此法做成。效果比较满意，现将制作要求介绍如下。
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1 材料与方法
1.1 甘油蛋白等渗混封液(下称混封液)配制及使用
甲液：甘油10ml，甲醛40ml，鸡蛋白50ml，先将蛋白拌匀，加入甲醛拌匀，最后加入甘油，然后用棉花纱布过滤，置冰箱10℃保存备用。
乙液：生理盐水(氯化钠0.85%)50ml，临用时配制，使用时甲乙两液为2∶1比例充分混合使用。
1.2 制作方法
取10%甲醛固定的虫卵液滴于18mm×18mm大盖片上，待水分挥发，粪渣呈湿润状态，加细沙(过280目筛、水洗、沉淀、烤干、砂粒大小直径45～60μm)少许，滴上一滴混封液，用竹签拌匀，盖上9mm×9mm的小盖片(注意混封液用量要适当，勿使溢出为度)，反转大盖片，使小盖片朝下，封置于事先加有中性树胶的载片上，这时小盖片包埋在大盖片与载片的树胶之中，平放于托板置室温或37℃温箱中待干固。
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2 结果与讨论
用本法所制封片，卵壳不变形，内部结构清晰，操作手续简便，省时、省事，经过八年使用观察效果满意，与用其它方法同批制作的标本相比，优于其它方法的制片，结果详见表1。
表1 五种方法制备蠕虫卵封片标本的优缺点比较 方法
适用范围
混封液
制片前处理
结果
卵壳
内部结构
制片过程
甘油明胶封片法
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蠕虫卵
甘油明胶液
脱水、透明蒸发共12天
正常
清晰自然
繁锁、期长
虫胶圈封制片法
蠕虫卵
甘油虫胶液
浓缩、蒸发6天
部分变形
易变黑色
简单、期长
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凡士林圈封制片法
蠕虫卵
虫卵保存液
-
正常
易变黑色
简单、省时省事
洪氏虫卵封片法
蠕虫卵临时封片
甘油、鸡蛋白甲醛混合液
-
部分变形
欠清晰
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简单、省时省事
甘油蛋白钠盐液封存法
蠕虫卵
甘油、鸡蛋白、甲醛、氯化钠
载片蒸发15分钟
正常
清晰自然
简单、省时省事
参考文献
[1] 杨文远.寄生虫标本采集保存及制用技术.武汉医学院学报.1983，(10)：51
[2] 缪 峰.制作蠕虫卵玻片标本的一种方法.临床检验杂志.1985，3(4)：193
[3] 缪 峰.制作蠕虫卵永久性玻片的一种新方法.生物学通报.1985，(9)：40
[4] 宋宗臣.寄生虫卵长期玻片标本的制作方法.动物学杂志.1982，(1)：39
收稿日期：1999-10-21, 百拇医药