克拉霉素药代动力学的研究
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作者：李军 张晓坚 刘广炼
单位：李军(河南医科大学一附院药剂科 郑州450052)；张晓坚(河南医科大学一附院药剂科 郑州450052)；刘广炼(河南医科大学一附院药剂科 郑州450052)
关键词：克拉霉素；药动学；HPLC
数理医药学杂志000334
摘 要 采用HPLC法测定10名健康志愿者单剂量口服克拉霉素片500mg后血药浓度，药-时数据经3p87程序处理，得到克拉霉素片的药动学参数分别为：lagtime0.30±0.11h,t1/2k0.65±0.29,Tmax2.15±0.44h;Cmax2.21±0.1ug/ml;T1/2k3.18±0.65h；V/F150.49±18.19L,AUC16.42±2.11μg.h/ml。
, 百拇医药
中图分类号：R 969.1 文献标识码：A
文章编号：1004-4337(2000)03-0244-02
克拉霉素(Clarithromycin,CLM)是一种新开发的大环内酯类抗生素，目前已在国外多个国家获准上市。克拉霉素对G+和G-需氧菌及厌氧菌具有广谱抗菌活性，对金葡菌、表葡菌、肺炎球菌、化脓性链球菌的抗菌活性优于红霉素；对多数细菌，克拉霉素的活性至少是红霉素的2倍；对砂眼衣原体、鸟型分枝杆菌的活性比红霉素强8～32倍。为了给临床合理用药提供依据，本文以10名健康志愿者为对象，对克拉霉素的药动学进行了试验研究。
1 实验材料与方法
1.1 药品与试剂
克拉霉素片(意大利Abbot制药厂，规格：0.25/片，含量为标示量的99.5%，溶出度合格，批号：26051TF)；克拉霉素对照品(中国药品生物制品鉴定所和连云港制药厂联合提供，含量为98.3%)；甲醇，乙腈(色谱纯，山东禹王实业总公司化学试剂厂)；磷酸(A.R.北京化工厂)；蒸馏水均经重蒸馏。
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1.2 仪器与色谱条件
高效液相色谱仪LC-10A;LC-10AD高压输液泵；Shim-pack CLC-ODS(250mmx4.6mm，粒度5μm)分析柱；SPD-10A紫外检测器：CR-7A数据处理机；CTO-10A柱温箱(以上均为日本岛津产品)。色谱条件：流动相：乙腈—甲醇—0.05mol/L磷酸=44:20:36，用氨水调pH值到7.2；流速：1.2ml/min；柱温：55℃；紫外检测条件：波长210nm，灵敏度0.003AUFS。
1.3 受试对象与给药方法
健康志愿者10名，男性，年龄18～23岁，体重50～60kg，均不抽烟、嗜酒。受试前经心电图、肝、肾功能检查正常，身体健康，精神正常，给药前两周均未服任何药物，受试前一天晚饭后到次日晨受试给药后2小时禁食，单剂量口服克拉霉素片500mg,200ml温开水送服，受试期间用统一标准餐。
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1.4 血清采集
志愿者于服两种制剂前分别采空白血5ml,分别于服药后0.33、0.67、1、1.5、2.5、3.5、5、8、11、15小时各采集静脉血5ml，所有血样室温放置2h后离心，分取血清，置-30℃冰箱保存，测定处理前自然解冻。
1.5 样品制备与测定
取血清2.0ml，加0.6M氢氧化钠100μl混匀，加乙醚5.0ml萃取二次，合并二次有机层，置尖底离心试管中，在40℃水浴上空气流吹干，残留物加100μl溶解剂(甲醇-pH6.0磷酸盐缓冲液1∶1)，再加1ml正已烷振荡1分钟，离心5min，取50μl下层甲醇液进样，按前述色谱条件测定CLM的峰面积，以外标法进行定量。
1.6 血清与血清加CLM色谱图及服药前后的色谱图
取健康人混合血清2.0ml及加CLM标准液的混合人血清2.0ml，按样品制备项下操作，得色谱图1-a,1-b。另外服药前及服药后2.5小时和8小时的血清样品的色谱图见图1-c,1-d,1-e。
, 百拇医药
1.7 标准液与标准曲线
精密称取CLM对照品定量，加甲醇配成100μg/m的储备液。取不同量储备液，用甲醇配成一系列标准液(2、10、20、30、40、80μg/ml)。取各标准液100μl，加入健康人混合血清适量，使成0.1、0.5、1.0、1.5、2.0、4.0μ/ml的血清样品，混匀，以乙醚萃取，以下操作同样品项下，峰面积对浓度作线性回归，得标准曲线。
1.8 回收率
在健康人混合血清中，分别加入不同浓度CLM标准液适量，使成0.5、1.5、4.0μg/ml的血清样品，每个浓度各5份，按样品制备项下处理测定。
1.9 方法精密度
在健康人混合血清中，分别加入不同浓度CLM标准液适量，使成0.5、1.5、4.0μg/ml的血清样品，按样品制备项下处理，于一日内测定5次。另按上述操作，每日处理测定一次，连续测定5日，得日内和日间差。
, 百拇医药
1.10 数据处理
志愿者血药浓度-时间资料，用3p87药动学程序，在微机上进行房室拟合，得药动学参数。
图1 色谱图
2 结果
2.1 色谱行为
按本色谱条件，CLM能与血清中其他杂质完全分开，保留时间为8.9min，见图1。
2.2 标准曲线、线性范围、最低检测限
CLM在0.1～4.0μg/ml范围内，线性关系良好，浓度与峰面积回归方程为：A=127980.3c-4536.4(r=0.9983,n=5)。最低检出限按信噪比2∶1为20ng/ml。
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2.3 回收率
进行15次回收率实验，得平均回收率为101.0%，标准差为3.27，见表1。
表1 血清中克拉霉素的回收率(n=5) 加入量(μg/ml)
回收量(μg/ml)
回收率(%)
RSD(%)
0.5
0.488±0.024
97.6±4.77
4.9
1.5
, 百拇医药
1.562±0.057
104.1±3.90
3.7
4.0
4.054±0.203
101.4±5.09
5.0
平均回收率
101.0±3.27
2.4 精密度
按本色谱条件，CLM的日内误差RSD<3.92%，日间误差RSD<6.12%,见表2。表2 方法精密度(n=5) 浓度
, 百拇医药
(μg/ml)
日内变异
日间变异
测得量(μg/ml)
RSD(%)
测得量(μg/ml)
RSD(%)
0.5
0.51±0.02
3.92
0.49±0.03
6.12
, 百拇医药
1.5
1.46±0.05
3.42
1.48±0.06
4.05
4.0
3.99±0.06
1.50
3.95±0.14
3.54
2.5 CLM片剂人体药动学
10名健康志愿者单剂量口服克拉霉素500mg，平均血药浓度-时间数据见表3。将血药浓度-时间资料经3p87程序拟合，10名健康志愿者均符合一室模型，其主要药动学参数为：Iag time 0.30±0.11h,t1/2ka0.65±0.29,Tmax2.15±0.44h；Cmax2.21±0.13μg/ml；T1/2k3.18±0.65h,V/F150.49±18.19L,AUC16.42±2.11μg*h/ml。表3 10名志愿者单剂量口服克拉霉素片后
, 百拇医药
不同时间的平均血药浓度 时间(h)
0.33
0.67
1.0
1.5
2.5
3.5
5.0
8.0
11.0
15.0
(mg/L)
, 百拇医药 0.29
0.77
1.36
2.35
2.27
1.80
1.18
0.86
0.56
0.21
SD
0.15
0.33
, 百拇医药
0.48
0.60
0.54
0.46
0.28
0.14
0.13
0.08
参考文献
1，David H, et al. Clarithromycin: A Review of its Antimicrobial Activity, Pharmacokinetic Properties and Therapeutic Potential Drugs, 1992,44(1):136～138.
2，Sou-yie Chu, et al. Clarithromycin Phamacokinetics in Healthy Young and Elderly Volunteers. J Clin Pharmacol, 1992,32:1046～1048.
3，秦永平等.血清中罗红霉素的反相高效液相色谱法测定.药物分析杂志，1997，17(4)：250.
收稿日期：1999-11-02, http://www.100md.com
单位：李军(河南医科大学一附院药剂科 郑州450052)；张晓坚(河南医科大学一附院药剂科 郑州450052)；刘广炼(河南医科大学一附院药剂科 郑州450052)
关键词：克拉霉素；药动学；HPLC
数理医药学杂志000334
摘 要 采用HPLC法测定10名健康志愿者单剂量口服克拉霉素片500mg后血药浓度，药-时数据经3p87程序处理，得到克拉霉素片的药动学参数分别为：lagtime0.30±0.11h,t1/2k0.65±0.29,Tmax2.15±0.44h;Cmax2.21±0.1ug/ml;T1/2k3.18±0.65h；V/F150.49±18.19L,AUC16.42±2.11μg.h/ml。
, 百拇医药
中图分类号：R 969.1 文献标识码：A
文章编号：1004-4337(2000)03-0244-02
克拉霉素(Clarithromycin,CLM)是一种新开发的大环内酯类抗生素，目前已在国外多个国家获准上市。克拉霉素对G+和G-需氧菌及厌氧菌具有广谱抗菌活性，对金葡菌、表葡菌、肺炎球菌、化脓性链球菌的抗菌活性优于红霉素；对多数细菌，克拉霉素的活性至少是红霉素的2倍；对砂眼衣原体、鸟型分枝杆菌的活性比红霉素强8～32倍。为了给临床合理用药提供依据，本文以10名健康志愿者为对象，对克拉霉素的药动学进行了试验研究。
1 实验材料与方法
1.1 药品与试剂
克拉霉素片(意大利Abbot制药厂，规格：0.25/片，含量为标示量的99.5%，溶出度合格，批号：26051TF)；克拉霉素对照品(中国药品生物制品鉴定所和连云港制药厂联合提供，含量为98.3%)；甲醇，乙腈(色谱纯，山东禹王实业总公司化学试剂厂)；磷酸(A.R.北京化工厂)；蒸馏水均经重蒸馏。
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1.2 仪器与色谱条件
高效液相色谱仪LC-10A;LC-10AD高压输液泵；Shim-pack CLC-ODS(250mmx4.6mm，粒度5μm)分析柱；SPD-10A紫外检测器：CR-7A数据处理机；CTO-10A柱温箱(以上均为日本岛津产品)。色谱条件：流动相：乙腈—甲醇—0.05mol/L磷酸=44:20:36，用氨水调pH值到7.2；流速：1.2ml/min；柱温：55℃；紫外检测条件：波长210nm，灵敏度0.003AUFS。
1.3 受试对象与给药方法
健康志愿者10名，男性，年龄18～23岁，体重50～60kg，均不抽烟、嗜酒。受试前经心电图、肝、肾功能检查正常，身体健康，精神正常，给药前两周均未服任何药物，受试前一天晚饭后到次日晨受试给药后2小时禁食，单剂量口服克拉霉素片500mg,200ml温开水送服，受试期间用统一标准餐。
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1.4 血清采集
志愿者于服两种制剂前分别采空白血5ml,分别于服药后0.33、0.67、1、1.5、2.5、3.5、5、8、11、15小时各采集静脉血5ml，所有血样室温放置2h后离心，分取血清，置-30℃冰箱保存，测定处理前自然解冻。
1.5 样品制备与测定
取血清2.0ml，加0.6M氢氧化钠100μl混匀，加乙醚5.0ml萃取二次，合并二次有机层，置尖底离心试管中，在40℃水浴上空气流吹干，残留物加100μl溶解剂(甲醇-pH6.0磷酸盐缓冲液1∶1)，再加1ml正已烷振荡1分钟，离心5min，取50μl下层甲醇液进样，按前述色谱条件测定CLM的峰面积，以外标法进行定量。
1.6 血清与血清加CLM色谱图及服药前后的色谱图
取健康人混合血清2.0ml及加CLM标准液的混合人血清2.0ml，按样品制备项下操作，得色谱图1-a,1-b。另外服药前及服药后2.5小时和8小时的血清样品的色谱图见图1-c,1-d,1-e。
, 百拇医药
1.7 标准液与标准曲线
精密称取CLM对照品定量，加甲醇配成100μg/m的储备液。取不同量储备液，用甲醇配成一系列标准液(2、10、20、30、40、80μg/ml)。取各标准液100μl，加入健康人混合血清适量，使成0.1、0.5、1.0、1.5、2.0、4.0μ/ml的血清样品，混匀，以乙醚萃取，以下操作同样品项下，峰面积对浓度作线性回归，得标准曲线。
1.8 回收率
在健康人混合血清中，分别加入不同浓度CLM标准液适量，使成0.5、1.5、4.0μg/ml的血清样品，每个浓度各5份，按样品制备项下处理测定。
1.9 方法精密度
在健康人混合血清中，分别加入不同浓度CLM标准液适量，使成0.5、1.5、4.0μg/ml的血清样品，按样品制备项下处理，于一日内测定5次。另按上述操作，每日处理测定一次，连续测定5日，得日内和日间差。
, 百拇医药
1.10 数据处理
志愿者血药浓度-时间资料，用3p87药动学程序，在微机上进行房室拟合，得药动学参数。
图1 色谱图
2 结果
2.1 色谱行为
按本色谱条件，CLM能与血清中其他杂质完全分开，保留时间为8.9min，见图1。
2.2 标准曲线、线性范围、最低检测限
CLM在0.1～4.0μg/ml范围内，线性关系良好，浓度与峰面积回归方程为：A=127980.3c-4536.4(r=0.9983,n=5)。最低检出限按信噪比2∶1为20ng/ml。
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2.3 回收率
进行15次回收率实验，得平均回收率为101.0%，标准差为3.27，见表1。
表1 血清中克拉霉素的回收率(n=5) 加入量(μg/ml)
回收量(μg/ml)
回收率(%)
RSD(%)
0.5
0.488±0.024
97.6±4.77
4.9
1.5
, 百拇医药
1.562±0.057
104.1±3.90
3.7
4.0
4.054±0.203
101.4±5.09
5.0
平均回收率
101.0±3.27
2.4 精密度
按本色谱条件，CLM的日内误差RSD<3.92%，日间误差RSD<6.12%,见表2。表2 方法精密度(n=5) 浓度
, 百拇医药
(μg/ml)
日内变异
日间变异
测得量(μg/ml)
RSD(%)
测得量(μg/ml)
RSD(%)
0.5
0.51±0.02
3.92
0.49±0.03
6.12
, 百拇医药
1.5
1.46±0.05
3.42
1.48±0.06
4.05
4.0
3.99±0.06
1.50
3.95±0.14
3.54
2.5 CLM片剂人体药动学
10名健康志愿者单剂量口服克拉霉素500mg，平均血药浓度-时间数据见表3。将血药浓度-时间资料经3p87程序拟合，10名健康志愿者均符合一室模型，其主要药动学参数为：Iag time 0.30±0.11h,t1/2ka0.65±0.29,Tmax2.15±0.44h；Cmax2.21±0.13μg/ml；T1/2k3.18±0.65h,V/F150.49±18.19L,AUC16.42±2.11μg*h/ml。表3 10名志愿者单剂量口服克拉霉素片后
, 百拇医药
不同时间的平均血药浓度 时间(h)
0.33
0.67
1.0
1.5
2.5
3.5
5.0
8.0
11.0
15.0
(mg/L), 百拇医药 0.29
0.77
1.36
2.35
2.27
1.80
1.18
0.86
0.56
0.21
SD
0.15
0.33
, 百拇医药
0.48
0.60
0.54
0.46
0.28
0.14
0.13
0.08
参考文献
1，David H, et al. Clarithromycin: A Review of its Antimicrobial Activity, Pharmacokinetic Properties and Therapeutic Potential Drugs, 1992,44(1):136～138.
2，Sou-yie Chu, et al. Clarithromycin Phamacokinetics in Healthy Young and Elderly Volunteers. J Clin Pharmacol, 1992,32:1046～1048.
3，秦永平等.血清中罗红霉素的反相高效液相色谱法测定.药物分析杂志，1997，17(4)：250.
收稿日期：1999-11-02, http://www.100md.com