榄香烯复合瘤苗对小鼠腹腔巨噬细胞功能影响的分析
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作者：李丹 施广霞 屈虹 朴花 沈洁 钱振超 程一木翟
单位：大连医科大学肿瘤生物治疗所，辽宁 大连 116027
关键词：
中国病理生理杂志0010229
目的：本室已证明榄香烯复合瘤苗对多种小鼠肿瘤(如L615白血病、H22肝癌等)有明显的主动免疫保护作用。巨噬细胞在抗肿瘤免疫中不仅作为抗原递呈细胞，而且也是参与肿瘤杀伤的效应细胞。本实验检测了榄香烯复合瘤苗对小鼠腹腔巨噬细胞(PEMΦ)的吞噬、杀瘤及一氧化氮(nitric oxide, NO)产生等功能的影响，以期从这一方面研究瘤苗免疫的机制。方法：MTT法检测不同浓度的榄香烯及榄香烯复合瘤苗体外刺激正常小鼠PEMΦ的活性变化；通过PEMΦ的吞噬功能(血红蛋白释放法)、对肿瘤靶细胞(HCa-F、L929)的细胞毒作用(MTT法)、NO产生(NO试剂盒测定)，以及经LPS和粗提淋巴因子(LK)刺激后上述指标的变化，比较了用腹腔注射硫代乙醇酸钠(TG)和不注射TG获取的两种PEMΦ；用本室常规方法制备HCa-F和L615榄香烯复合瘤苗，并通过ADP亲合层析法从这两种瘤苗中提取HSP70-肿瘤肽复合物；用上述瘤苗、HSP(右腋皮下分别为3×106个/只，90 μg/只)以及CP(腹腔内，30亿/只)免疫615系小鼠，每周1次，连续3周，末次免疫后1周，检测PEMΦ的吞噬功能、细胞毒作用、NO产生及其LPS、LK的反应。结果：1. MTT法检测：体外50 μg/mL的榄香烯对PEMΦ活性有抑制作用(P<0.05)，而5、 0.5 μg/mL的榄香烯和榄香烯复合瘤苗对PEMΦ有激活作用(P<0.05)。2.注射TG后获取的PEMΦ，从细胞毒、吞噬、NO产生以及对LPS、LK反应的功能方面同不注射TG获取的PEMΦ没有区别。3. 榄香烯复合瘤苗免疫后PEMΦ的细胞毒、吞噬、NO产生以及对LPS、LK反应方面与未免疫组相同。4.榄香烯复合瘤苗提取的HSP70-肿瘤肽免疫后PEMΦ上述功能亦与未免疫组相同。5.CP则显现出对PEMΦ明显的激活作用，细胞毒、吞噬、NO产生以及对LPS、LK反应各指标均明显高于未免疫组。结论：榄香烯复合瘤苗体外可以增强PEMΦ的活性但瘤苗及其HSP70-肿瘤肽免疫后其PEMΦ的以上的功能没有改变，说明榄香烯复合瘤苗的免疫保护效应并非通过PEMΦ实现的，与PEMΦ的功能无明显关系。而CP作为榄香烯复合瘤苗的组成部分，可以明显增强PEMΦ的功能。
国家自然科学基金重点项目(No.39730440-Ⅱ)的组成部分, http://www.100md.com
单位：大连医科大学肿瘤生物治疗所，辽宁 大连 116027
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目的：本室已证明榄香烯复合瘤苗对多种小鼠肿瘤(如L615白血病、H22肝癌等)有明显的主动免疫保护作用。巨噬细胞在抗肿瘤免疫中不仅作为抗原递呈细胞，而且也是参与肿瘤杀伤的效应细胞。本实验检测了榄香烯复合瘤苗对小鼠腹腔巨噬细胞(PEMΦ)的吞噬、杀瘤及一氧化氮(nitric oxide, NO)产生等功能的影响，以期从这一方面研究瘤苗免疫的机制。方法：MTT法检测不同浓度的榄香烯及榄香烯复合瘤苗体外刺激正常小鼠PEMΦ的活性变化；通过PEMΦ的吞噬功能(血红蛋白释放法)、对肿瘤靶细胞(HCa-F、L929)的细胞毒作用(MTT法)、NO产生(NO试剂盒测定)，以及经LPS和粗提淋巴因子(LK)刺激后上述指标的变化，比较了用腹腔注射硫代乙醇酸钠(TG)和不注射TG获取的两种PEMΦ；用本室常规方法制备HCa-F和L615榄香烯复合瘤苗，并通过ADP亲合层析法从这两种瘤苗中提取HSP70-肿瘤肽复合物；用上述瘤苗、HSP(右腋皮下分别为3×106个/只，90 μg/只)以及CP(腹腔内，30亿/只)免疫615系小鼠，每周1次，连续3周，末次免疫后1周，检测PEMΦ的吞噬功能、细胞毒作用、NO产生及其LPS、LK的反应。结果：1. MTT法检测：体外50 μg/mL的榄香烯对PEMΦ活性有抑制作用(P<0.05)，而5、 0.5 μg/mL的榄香烯和榄香烯复合瘤苗对PEMΦ有激活作用(P<0.05)。2.注射TG后获取的PEMΦ，从细胞毒、吞噬、NO产生以及对LPS、LK反应的功能方面同不注射TG获取的PEMΦ没有区别。3. 榄香烯复合瘤苗免疫后PEMΦ的细胞毒、吞噬、NO产生以及对LPS、LK反应方面与未免疫组相同。4.榄香烯复合瘤苗提取的HSP70-肿瘤肽免疫后PEMΦ上述功能亦与未免疫组相同。5.CP则显现出对PEMΦ明显的激活作用，细胞毒、吞噬、NO产生以及对LPS、LK反应各指标均明显高于未免疫组。结论：榄香烯复合瘤苗体外可以增强PEMΦ的活性但瘤苗及其HSP70-肿瘤肽免疫后其PEMΦ的以上的功能没有改变，说明榄香烯复合瘤苗的免疫保护效应并非通过PEMΦ实现的，与PEMΦ的功能无明显关系。而CP作为榄香烯复合瘤苗的组成部分，可以明显增强PEMΦ的功能。
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