无精子症患者体内抗精子抗体的观察(附29例报告)
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作者：温晓华 黄鹂 王淑钗 常笑雪 张鑫 杨石强 赵荣坡
单位：洛阳医学高等专科学校，河南 洛阳 471003
关键词：男性不孕；无精子；抗精子抗体
中国医师杂志000430[中图分类号] R698.2+；R446.69 [文献标识码] B
[文章编号] 1008-1372(2000)04-0240-01
无精子症是引起男性不育的常见原因，其病因较为复杂。不育夫妇中约有5%～10%的男性对精子有自身免疫，血清中可测到AsAb，其中85%的人射出的精液中也有AsAb。众多的研究表明，血清和精浆中的AsAb影响男性的生育能力[1]。为探讨无精子症与AsAb之间的相互关系，我们对29例无精子症患者的血清和精浆进行了AsAb的检测，并与正常生育男性进行统计比较，现将结果报告如下。
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1 临床资料
1.1 实验对象 无精子症组：29人，年龄23～29岁，将收集数次精液离心沉淀，沉淀物在高倍镜下均未发现精子。对照组：32人，年龄25～39岁，正常生育男性，精液分析正常。
1.2 实验方法
1.2.1 采用酶联免疫吸附试验(ELISA) 试剂盒及阳性对照血清由南京军区总医院提供。受检者禁欲(3～5)d后收集精液，进行常规分析后离心，留取精浆；同时抽取静脉血1ml，分离血清，待检。
1.2.2 实验步骤 精子膜抗原用包被液稀释后加入包被板，每孔100μl，4℃冰箱过夜。次日用PBS洗三遍，每遍3min，拍干；10%小牛血清每孔100μl封闭，37℃1h，洗法同上；每孔加待检血清100μl(5%小牛血清1∶6稀释)或精浆(5%小牛血清1∶1稀释)100μl，43℃40min，洗法同上；加HRP-SPA每孔100μl，43℃40min，洗法同上；加底物与显色液每孔各50μl室温3～5min，判定结果。
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1.2.3 判定结果 参照阳性对照，呈色与阳性对照相同或超过阳性对照者为阳性。
2 结果
无精子症组体内AsAb的阳性率为27.5%，对照组为3.1%，见附表。对无精子症组和对照组检测出的AsAb阳性率进行统计分析，结果显示有显著性差异(P<0.01)。提示AsAb与无精子症有关。
3 讨论
体内AsAb的存在可引起不育。男性AsAb的形成与自身免疫有关。精子对成年男性具有抗原性。在正常情况下，男性血睾屏障和生殖系统粘膜上皮可防御精子与免疫系统接触，不会产生抗精子的免疫反应。但是在男性存在生殖系统炎症，精索静脉曲张，梗阻及手术、外伤等情况时，其屏障作用可遭破坏，精子漏出或巨噬细胞进入生殖道吞噬降解精子并成为激活免疫系统的抗原，刺激机体产生AsAb[2]。
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附表 两组AsAb检测结果比较 组别
n
AsAb(+)
(血清 精浆)例数
阳性率(%)
无精子症组
29
8
(6 2)
27.6
对照组
32
1
, 百拇医药
(1 0)
3.1
本组检验结果显示，无精子症患者体内的AsAb阳性率为27.5%，明显高于正常生育组(3.1%)。无精子症患者血清中AsAb阳性率为20.7%，精子浆中为6.9%，血清中AsAb阳性检出率明显较精浆高，提示无精子症患者的AsAb易在血清中产生。检测中未发现血清、精浆同时阳性者，可能二者之间无明显关系。无精子症分为分泌性无精子症和阻塞性无精子症，后者即由精道阻塞引起，梗阻的存在诱发体内产生AsAb，这与上述AsAb的产生机理相符。有资料显示，输精管结扎术后约有50%～70%的男性出现高滴度的AsAb，并可持续数年[3]，这一结论间接地支持了上述研究结果。
无精子症和体内AsAb的存在均是导致男性不育的原因。对无精子症患者进行血清和精浆的AsAb检测，有助于鉴别无精子症的类型，并对进一步确定诊疗方案有一定的意义。无精子症的治疗一直较为困难。目前，对阻塞性无精子症的治疗研究较多。国外已采用抽取附睾精子进行人工授精，并取得了成功。国内也开始进行研究最近见报道，采用抽取附睾液放入术前精浆和精子保养液中冷冻保存的方法，收集阻塞性无精子症不育患者的附睾精子，解冻复苏后进行人工授精[4]。未获受孕者。此与多种因素有关，体内AsAb的存在可能也是原因之一。此类无精症患者易产生AsAb，血清和精浆中的AsAb可作用于授精的多个环节，尤以精浆中的AsAb影响较为明显。未经处理或常规的处理精液技术，不能去除或仅能去除与精子结合松散的抗体，而对牢固结合于精子表现的AsAb是无效的[5]。因此，对伴有体内AsAb阳性的无精子症患者，同时治疗AsAb是必要的。积极治疗AsAb，可望对部分无精子症患者取得较好的疗效。 参考文献
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[1]Menge AC,Naz RK,Deutsch J,et al.Interrelationships among semen characteristics,antisperm antibodies and cervical mucus penetration assay in infertile human couples.Fertil Steril 1989；51(3)：486
[2]Marshurn PB.The role of antisperm antibodies in infertility.Fertil Steril 1994；61(5)：799
[3]王苏梅，邱毅，高建文，等.两种输精管阻断术后血清抗精子抗体检测.生殖与避孕 1993；13(2)：150
[4]陆寄坤，江峰，张学忠，等.抽取附睾精子作人工授精治疗梗阻性无精子症初步报告.中国男科学杂志 1998；12(3)：157
[5]Rassanen M,Lahteen maki A,Saarikoskis,et al.Comparison of flow cytometric measurement of seminal antisperm antibodies with the mixed antiglobulin reaction and the serum stray agglutination test.Fertil Steril 1994；61(1)：143
收稿日期：1998-11-18, http://www.100md.com
单位：洛阳医学高等专科学校，河南 洛阳 471003
关键词：男性不孕；无精子；抗精子抗体
中国医师杂志000430[中图分类号] R698.2+；R446.69 [文献标识码] B
[文章编号] 1008-1372(2000)04-0240-01
无精子症是引起男性不育的常见原因，其病因较为复杂。不育夫妇中约有5%～10%的男性对精子有自身免疫，血清中可测到AsAb，其中85%的人射出的精液中也有AsAb。众多的研究表明，血清和精浆中的AsAb影响男性的生育能力[1]。为探讨无精子症与AsAb之间的相互关系，我们对29例无精子症患者的血清和精浆进行了AsAb的检测，并与正常生育男性进行统计比较，现将结果报告如下。
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1 临床资料
1.1 实验对象 无精子症组：29人，年龄23～29岁，将收集数次精液离心沉淀，沉淀物在高倍镜下均未发现精子。对照组：32人，年龄25～39岁，正常生育男性，精液分析正常。
1.2 实验方法
1.2.1 采用酶联免疫吸附试验(ELISA) 试剂盒及阳性对照血清由南京军区总医院提供。受检者禁欲(3～5)d后收集精液，进行常规分析后离心，留取精浆；同时抽取静脉血1ml，分离血清，待检。
1.2.2 实验步骤 精子膜抗原用包被液稀释后加入包被板，每孔100μl，4℃冰箱过夜。次日用PBS洗三遍，每遍3min，拍干；10%小牛血清每孔100μl封闭，37℃1h，洗法同上；每孔加待检血清100μl(5%小牛血清1∶6稀释)或精浆(5%小牛血清1∶1稀释)100μl，43℃40min，洗法同上；加HRP-SPA每孔100μl，43℃40min，洗法同上；加底物与显色液每孔各50μl室温3～5min，判定结果。
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1.2.3 判定结果 参照阳性对照，呈色与阳性对照相同或超过阳性对照者为阳性。
2 结果
无精子症组体内AsAb的阳性率为27.5%，对照组为3.1%，见附表。对无精子症组和对照组检测出的AsAb阳性率进行统计分析，结果显示有显著性差异(P<0.01)。提示AsAb与无精子症有关。
3 讨论
体内AsAb的存在可引起不育。男性AsAb的形成与自身免疫有关。精子对成年男性具有抗原性。在正常情况下，男性血睾屏障和生殖系统粘膜上皮可防御精子与免疫系统接触，不会产生抗精子的免疫反应。但是在男性存在生殖系统炎症，精索静脉曲张，梗阻及手术、外伤等情况时，其屏障作用可遭破坏，精子漏出或巨噬细胞进入生殖道吞噬降解精子并成为激活免疫系统的抗原，刺激机体产生AsAb[2]。
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附表 两组AsAb检测结果比较 组别
n
AsAb(+)
(血清 精浆)例数
阳性率(%)
无精子症组
29
8
(6 2)
27.6
对照组
32
1
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(1 0)
3.1
本组检验结果显示，无精子症患者体内的AsAb阳性率为27.5%，明显高于正常生育组(3.1%)。无精子症患者血清中AsAb阳性率为20.7%，精子浆中为6.9%，血清中AsAb阳性检出率明显较精浆高，提示无精子症患者的AsAb易在血清中产生。检测中未发现血清、精浆同时阳性者，可能二者之间无明显关系。无精子症分为分泌性无精子症和阻塞性无精子症，后者即由精道阻塞引起，梗阻的存在诱发体内产生AsAb，这与上述AsAb的产生机理相符。有资料显示，输精管结扎术后约有50%～70%的男性出现高滴度的AsAb，并可持续数年[3]，这一结论间接地支持了上述研究结果。
无精子症和体内AsAb的存在均是导致男性不育的原因。对无精子症患者进行血清和精浆的AsAb检测，有助于鉴别无精子症的类型，并对进一步确定诊疗方案有一定的意义。无精子症的治疗一直较为困难。目前，对阻塞性无精子症的治疗研究较多。国外已采用抽取附睾精子进行人工授精，并取得了成功。国内也开始进行研究最近见报道，采用抽取附睾液放入术前精浆和精子保养液中冷冻保存的方法，收集阻塞性无精子症不育患者的附睾精子，解冻复苏后进行人工授精[4]。未获受孕者。此与多种因素有关，体内AsAb的存在可能也是原因之一。此类无精症患者易产生AsAb，血清和精浆中的AsAb可作用于授精的多个环节，尤以精浆中的AsAb影响较为明显。未经处理或常规的处理精液技术，不能去除或仅能去除与精子结合松散的抗体，而对牢固结合于精子表现的AsAb是无效的[5]。因此，对伴有体内AsAb阳性的无精子症患者，同时治疗AsAb是必要的。积极治疗AsAb，可望对部分无精子症患者取得较好的疗效。 参考文献
, http://www.100md.com
[1]Menge AC,Naz RK,Deutsch J,et al.Interrelationships among semen characteristics,antisperm antibodies and cervical mucus penetration assay in infertile human couples.Fertil Steril 1989；51(3)：486
[2]Marshurn PB.The role of antisperm antibodies in infertility.Fertil Steril 1994；61(5)：799
[3]王苏梅，邱毅，高建文，等.两种输精管阻断术后血清抗精子抗体检测.生殖与避孕 1993；13(2)：150
[4]陆寄坤，江峰，张学忠，等.抽取附睾精子作人工授精治疗梗阻性无精子症初步报告.中国男科学杂志 1998；12(3)：157
[5]Rassanen M,Lahteen maki A,Saarikoskis,et al.Comparison of flow cytometric measurement of seminal antisperm antibodies with the mixed antiglobulin reaction and the serum stray agglutination test.Fertil Steril 1994；61(1)：143
收稿日期：1998-11-18, http://www.100md.com