花粉症患者IL-10的检测及其意义
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作者：张宗芬 袁润英 贾金波 关晶
单位：张宗芬(北京积水潭医院耳鼻咽喉科 邮政编码 100035)；袁润英(北京市创伤骨科研究所)；贾金波(北京积水潭医院耳鼻咽喉科 邮政编码 100035)；关晶(北京积水潭医院耳鼻咽喉科 邮政编码 100035)
关键词：
北京医学000518 为探讨IL-10与花粉症的关系及临床应用价值，我们采用双抗体夹心ELISA法测定了花粉症发作期患者的血清和鼻分泌物中IL-10的浓度，并与缓解期患者和正常人进行了比较分析。
对象与方法
一、对象
选择我科变态反应门诊确诊的花粉症患者，诊断条件符合1990年乌鲁木齐鼻科会议制定的诊断和疗效评定标准。
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1.实验组：花粉症急性发作期患者20例，男10例，女10例；平均年龄39.5(18～58)岁；有典型的症状和体征，处于发作状态。需用药物控制，未接受过脱敏、手术、封闭治疗。
2.对照组：花粉症缓解期患者14例，男8例，女6例，平均年龄38.5(18～59)岁；无临床表现，不需用药，处于缓解状态。
3.正常对照组25例，男16例，女9例，平均年龄32.9(19～52)岁。无个人及家族过敏史，无鼻部疾病，大便虫卵阴性，近期无任何服药史。
二、实验方法
1.标本收集：于上午采用明胶海绵6cm×2cm×0.5cm各一块分别放入两侧鼻腔，10～15分钟后取出，将分泌物挤于试管中。同时抽取静脉血，沉淀、离心，取其上清液和血清，-20℃冰箱保存待测。所有受检对象受检前3天内未用过糖皮质类固醇激素和抗组胺药及滴鼻剂。
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2.实验步骤：鼻分泌物和血清IL-10的测定采用双抗体夹心ELISA法，用抗IL-10单克隆抗体包被(4μg/ml，4℃过夜)于96孔酶标板(美国Corming酶标板)。平衡至室温，加入待测血清或鼻分泌物上清液及不同浓度的标准品100μl至相应孔中，用封板胶纸封住反应孔，37℃，90分钟。洗板4次，除零孔外，每孔加1∶250生物素二次抗体n-z-S10 100μl，封住板孔，37℃ 60分钟洗板4次。除零孔外，每孔加1∶800酶联物100μl，封住板孔。37℃，30分钟。洗板4次，每孔加底物(显色剂)A、B各50μl避光37℃ 15分钟。加终止液50μl，终止反应。在Dynatech MR 500酶标仪测定450nm值。以IL-10标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标。通过待测血清和鼻分泌物样品IL-10的OD值可在标准曲线上查出其浓度，以pg/ml表示。IL-10试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司提供。
三、统计学分析
检测数据用
±s表示，采用t检验。
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结 果
一、血清IL-10水平
各组IL-10水平比较，花粉症急性发作组(9.7±5.7pg/ml)明显低于缓解期组(17.1±9.2pg/ml)和正常对照组(20.8±9.8pg/ml)(P<0.05，P<0.01)。后两组无显著性差异(P>0.05)。
二、鼻分泌物IL-10水平
各组鼻分泌物IL-10水平比较，实验组(8.6±4.8pg/ml)与缓解期组(15.3±9.5pg/ml)和正常对照(16.9±8.0pg/ml)有显著性差异(P<0.05，P<0.01)。缓解组与正常组比较无显著性差异(P>0.05)。
讨 论
本试验结果表明花粉症急性发作期患者血清和鼻分泌物中IL-10水平均明显低于缓解期和正常人群(P<0.01)，而缓解期患者与正常人则无明显差异，提示IL-10的水平与花粉症的病理生理过程密切相关。
本实验中，花粉症发作期、缓解期、正常人群血清IL-10的浓度均较鼻分泌物高，说明IL-10主要存在于血清中，但实验组与缓解组、正常组鼻分泌物IL-10浓度比较仍有显著性差异(P<0.05，P<0.01)，表明IL-10在鼻变应性疾病的发病过程中起到一定作用，用激素和/或其他能诱导IL-10合成和释放的药物或方法则可减轻气道的炎症反应，对变应性疾病的治疗具有一定的价值。
收稿：1998-04-03
修回：1998-10-15, 百拇医药
单位：张宗芬(北京积水潭医院耳鼻咽喉科 邮政编码 100035)；袁润英(北京市创伤骨科研究所)；贾金波(北京积水潭医院耳鼻咽喉科 邮政编码 100035)；关晶(北京积水潭医院耳鼻咽喉科 邮政编码 100035)
关键词：
北京医学000518 为探讨IL-10与花粉症的关系及临床应用价值，我们采用双抗体夹心ELISA法测定了花粉症发作期患者的血清和鼻分泌物中IL-10的浓度，并与缓解期患者和正常人进行了比较分析。
对象与方法
一、对象
选择我科变态反应门诊确诊的花粉症患者，诊断条件符合1990年乌鲁木齐鼻科会议制定的诊断和疗效评定标准。
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1.实验组：花粉症急性发作期患者20例，男10例，女10例；平均年龄39.5(18～58)岁；有典型的症状和体征，处于发作状态。需用药物控制，未接受过脱敏、手术、封闭治疗。
2.对照组：花粉症缓解期患者14例，男8例，女6例，平均年龄38.5(18～59)岁；无临床表现，不需用药，处于缓解状态。
3.正常对照组25例，男16例，女9例，平均年龄32.9(19～52)岁。无个人及家族过敏史，无鼻部疾病，大便虫卵阴性，近期无任何服药史。
二、实验方法
1.标本收集：于上午采用明胶海绵6cm×2cm×0.5cm各一块分别放入两侧鼻腔，10～15分钟后取出，将分泌物挤于试管中。同时抽取静脉血，沉淀、离心，取其上清液和血清，-20℃冰箱保存待测。所有受检对象受检前3天内未用过糖皮质类固醇激素和抗组胺药及滴鼻剂。
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2.实验步骤：鼻分泌物和血清IL-10的测定采用双抗体夹心ELISA法，用抗IL-10单克隆抗体包被(4μg/ml，4℃过夜)于96孔酶标板(美国Corming酶标板)。平衡至室温，加入待测血清或鼻分泌物上清液及不同浓度的标准品100μl至相应孔中，用封板胶纸封住反应孔，37℃，90分钟。洗板4次，除零孔外，每孔加1∶250生物素二次抗体n-z-S10 100μl，封住板孔，37℃ 60分钟洗板4次。除零孔外，每孔加1∶800酶联物100μl，封住板孔。37℃，30分钟。洗板4次，每孔加底物(显色剂)A、B各50μl避光37℃ 15分钟。加终止液50μl，终止反应。在Dynatech MR 500酶标仪测定450nm值。以IL-10标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标。通过待测血清和鼻分泌物样品IL-10的OD值可在标准曲线上查出其浓度，以pg/ml表示。IL-10试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司提供。
三、统计学分析
检测数据用
±s表示，采用t检验。, http://www.100md.com
结 果
一、血清IL-10水平
各组IL-10水平比较，花粉症急性发作组(9.7±5.7pg/ml)明显低于缓解期组(17.1±9.2pg/ml)和正常对照组(20.8±9.8pg/ml)(P<0.05，P<0.01)。后两组无显著性差异(P>0.05)。
二、鼻分泌物IL-10水平
各组鼻分泌物IL-10水平比较，实验组(8.6±4.8pg/ml)与缓解期组(15.3±9.5pg/ml)和正常对照(16.9±8.0pg/ml)有显著性差异(P<0.05，P<0.01)。缓解组与正常组比较无显著性差异(P>0.05)。
讨 论
本试验结果表明花粉症急性发作期患者血清和鼻分泌物中IL-10水平均明显低于缓解期和正常人群(P<0.01)，而缓解期患者与正常人则无明显差异，提示IL-10的水平与花粉症的病理生理过程密切相关。
本实验中，花粉症发作期、缓解期、正常人群血清IL-10的浓度均较鼻分泌物高，说明IL-10主要存在于血清中，但实验组与缓解组、正常组鼻分泌物IL-10浓度比较仍有显著性差异(P<0.05，P<0.01)，表明IL-10在鼻变应性疾病的发病过程中起到一定作用，用激素和/或其他能诱导IL-10合成和释放的药物或方法则可减轻气道的炎症反应，对变应性疾病的治疗具有一定的价值。
收稿：1998-04-03
修回：1998-10-15, 百拇医药