慢性肾功能不全大鼠骨骼肌IGF-1及其受体的基因表达
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作者：高秀林 Ding HU
单位：高秀林(首都医科大学附属复兴医院肾内科)；Ding HU(Department of Pathology,University of Utah Medical School)
关键词：
肠外与肠内营养0004124 探讨IGF-1及其受体在慢性肾功能不全(CRF)时骨骼肌蛋白质代谢中的作用。用放射免疫分析法检测CRF大鼠和与其配对喂养的假手术(SO)对照组大鼠血清和骨骼肌中IGF-1的含量；用液相杂交/RNase Protection Assay法观察骨骼肌中IGF-1和IGF-1受体的基因表达；用密度扫描法测定IGF-1 mRNA和IGF-1受体mRNA的水平；用配位结合置换试验测定IGF-1受体的数量；通过计算解离常数测定IGF-1受体的结合亲和力，以期发现CRF病人发生骨骼肌蛋白质营养不良、肌肉萎缩的原因。结果：①CRF大鼠血清IGF-1水平(170.3±16.4 ng/ml)和骨骼肌IGF-1含量(4.22±1.03 ng/g蛋白质)显著低于SO对照大鼠(分别为410.4±49.3 ng/ml和6.93±1.41 ng/g蛋白质),P均<0.001;②密度扫描分析表明，CRF大鼠骨骼肌开始于外显子1，SS3和外显子1，SS4的IGF-1 mRNA水平仅分别为SO大鼠的(36±3.2)%和(32±3.0)%，P<0.001，而CRF组大鼠骨骼肌IGF-1受体mRNA水平为SO组的(266±12.3)%，P<0.001;③CRF大鼠骨骼肌IGF-1受体数量明显增加，最大IGF-1结合数(Bmax)为(9.78±0.49)nmol/mg蛋白质，为SO组(4.0±0.25 nmol/mg蛋白质)的2.5倍，P<0.001;④CRF大鼠骨骼肌IGF-1受体结合亲和力正常，解离常数(Kd)为(1.63±0.13)nmol，与SO组(1.73±0.26 nmol)比较无显著差异。研究结果提示，CRF大鼠骨骼肌中的IGF-1含量下降可能为IGF-1 mRNA水平下调所致的IGF-1合成减少的结果；CRF大鼠IGF-1受体数量明显增加为IGF-1受体基因转录上调所致。结论：①CRF时，血清中IGF-1水平下降、骨骼肌中IGF-1 mSNA下调和IGF-1含量减少可能是CRF病人骨骼肌蛋白质合成减少、分解增加，进而导致营养不良、肌肉萎缩的主要原因；②CRF大鼠骨骼肌IGF-1受体的结合亲和力正常，不能解释CRF病人对rhIGF-1促进蛋白质合成的生物活性有抵抗的现象，故对CRF时骨骼肌IGF-1受体的功能有待于进一步研究。, http://www.100md.com
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肠外与肠内营养0004124 探讨IGF-1及其受体在慢性肾功能不全(CRF)时骨骼肌蛋白质代谢中的作用。用放射免疫分析法检测CRF大鼠和与其配对喂养的假手术(SO)对照组大鼠血清和骨骼肌中IGF-1的含量；用液相杂交/RNase Protection Assay法观察骨骼肌中IGF-1和IGF-1受体的基因表达；用密度扫描法测定IGF-1 mRNA和IGF-1受体mRNA的水平；用配位结合置换试验测定IGF-1受体的数量；通过计算解离常数测定IGF-1受体的结合亲和力，以期发现CRF病人发生骨骼肌蛋白质营养不良、肌肉萎缩的原因。结果：①CRF大鼠血清IGF-1水平(170.3±16.4 ng/ml)和骨骼肌IGF-1含量(4.22±1.03 ng/g蛋白质)显著低于SO对照大鼠(分别为410.4±49.3 ng/ml和6.93±1.41 ng/g蛋白质),P均<0.001;②密度扫描分析表明，CRF大鼠骨骼肌开始于外显子1，SS3和外显子1，SS4的IGF-1 mRNA水平仅分别为SO大鼠的(36±3.2)%和(32±3.0)%，P<0.001，而CRF组大鼠骨骼肌IGF-1受体mRNA水平为SO组的(266±12.3)%，P<0.001;③CRF大鼠骨骼肌IGF-1受体数量明显增加，最大IGF-1结合数(Bmax)为(9.78±0.49)nmol/mg蛋白质，为SO组(4.0±0.25 nmol/mg蛋白质)的2.5倍，P<0.001;④CRF大鼠骨骼肌IGF-1受体结合亲和力正常，解离常数(Kd)为(1.63±0.13)nmol，与SO组(1.73±0.26 nmol)比较无显著差异。研究结果提示，CRF大鼠骨骼肌中的IGF-1含量下降可能为IGF-1 mRNA水平下调所致的IGF-1合成减少的结果；CRF大鼠IGF-1受体数量明显增加为IGF-1受体基因转录上调所致。结论：①CRF时，血清中IGF-1水平下降、骨骼肌中IGF-1 mSNA下调和IGF-1含量减少可能是CRF病人骨骼肌蛋白质合成减少、分解增加，进而导致营养不良、肌肉萎缩的主要原因；②CRF大鼠骨骼肌IGF-1受体的结合亲和力正常，不能解释CRF病人对rhIGF-1促进蛋白质合成的生物活性有抵抗的现象，故对CRF时骨骼肌IGF-1受体的功能有待于进一步研究。, http://www.100md.com