双波长分光光度法测定甲硝唑氧氟沙星注射液含量
http://www.100md.com
37c医学网
作者：何继祥 李应芬 管毓向
单位：何继祥 李应芬(云南省曲靖市药品检验所 655000)；管毓向(云南省曲靖市妇幼医院)
关键词：双波长分光光度法；甲硝唑；氧氟沙星
中国药师000421 摘 要 目的： 应用双波长分光光度法测定甲硝唑氧氟沙星注射液含量。 方法：以0.1 mol.L-1盐酸液为溶剂， 在波长277， 307.4， 293， 260 nm处进行测定。 结果：甲硝唑浓度在4～20 μg.ml-1之间， 氧氟沙星浓度在2～10 μg.ml-1之间符合比尔定律， 浓度与吸收度差值呈良好线性关系， 甲硝唑平均回收率为99.5 %， RSD为0.6 %(n=8)， 氧氟沙星平均回收率为100.7 %， RSD为0.4 %(n=8)。 结论：该法方便、 快速、 准确可靠。
, 百拇医药
甲硝唑(MTZ)为抗厌氧菌药物， 氧氟沙星(OFLO)为第三代喹诺酮类药物， 具有广谱抗菌活性， 两药合用， 不仅增大抗菌谱， 且提高疗效， 用于泌尿生殖系感染疗效显著。 本文以双波长分光光度法[1]， 测定甲硝唑氧氟沙星注射液中甲硝唑、 氧氟沙星含量， 可满足制剂质量控制要求。
1 仪器试药
1.1 仪器 UV-2401 PC紫外分光光度计(日本岛津)。
1.2 试药 甲硝唑对照品(武汉制药股份公司， 批号980501)； 氧氟沙星对照品(成都药业有限责任公司， 批号9901122)； 甲硝唑氧氟沙星注射液[云南省曲靖市妇幼医院制剂，每100 ml含甲硝唑0.5 g 氧氟沙星0.2 g]； 盐酸为分析纯(配成0.1 mol.L-1浓度)。
2 方法与结果
, 百拇医药
2.1 测定波长的选择 精密称取甲硝唑、 氧氟沙星对照品适量， 以0.1 mol.L-1盐酸液为溶剂， 分别配成浓度为10 μg.ml-1及4 μg.ml-1的溶液， 以0.1 mol.L-1盐酸液为空白， 在波长200～350 nm波长之间扫描， 甲硝唑在277 nm波长处有最大吸收， 氧氟沙星和277 nm处等吸收波长为307.4 nm， 氧氟沙星在293 nm波长处有最大吸收， 甲硝唑和293 nm处等吸收波长为260 nm， 处方中的附加剂不干扰测定， 见图1。
图1
2.2 工作曲线的建立 精密称取甲硝唑50 mg， 氧氟沙星25 mg， 以0.1 mol.L-1盐酸液配成浓度为1， 0.5 mg.ml-1的溶液。 分别精密量取甲硝唑、 氧氟沙星对照液0.2， 0.4， 0.6， 0.8， 1.0 ml， 置50 ml量瓶中， 以0.1 mol.L-1盐酸液稀释至刻度， 摇匀， 以0.1 mol.L-1盐酸液为空白， 于波长277， 307.4及293， 260 nm处测定吸收度， 令ΔAMTZ=A277-A307.4， ΔAOFLO=A293-A260， 以浓度C为横坐标， ΔA为纵坐标， 计算回归方程和相关系数， 甲硝唑浓度在4～20 μg.ml-1范围内的回归方程为ΔAMTZ=0.026 4CMTZ-0.005， r=0.999 8(1)， 氧氟沙星浓度在2～10 μg.ml-1范围内的回归方程为ΔΑOFLO=0.071 1COFLO-0.019， r=1.0000(2)。
, 百拇医药
2.3 回收率试验 按处方精密配制供试品， 精密量取适量， 以0.1 mol.L-1盐酸液配成不同浓度， 在277， 307.4， 293， 260 nm波长处测定吸收度A， 计算差值ΔΑMTZ、 ΔAOFLO， 分别代入回归方程(1)和(2)， 计算回收率， 结果见表1。
表1 回收率试验结果 MTZ
OFLO
加入量
(μg.ml-1)
测得量
(μg.ml-1)
, 百拇医药
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
加入量
(μg.ml-1)
测得量
(μg.ml-1)
回收率
(%)
, 百拇医药
平均回收率
(%)
RSD
(%)
10
9.92
99.20
5
5.01
100.20
10.03
100.30
4.99
, 百拇医药
99.80
9
8.94
99.33
4.5
4.53
100.64
8.96
99.55
99.50
0.6
4.54
100.89
, 百拇医药
100.7
0.4
8
7.95
99.38
4
4.06
101.50
8.01
100.12
4.05
101.25
12
, 百拇医药
11.97
99.75
6
6.05
100.83
11.80
98.33
6.03
100.50
2.4 样品测定 精密量取样品2 ml， 置100 ml量瓶中， 以0.1 mol.L-1盐酸液稀释至刻度， 摇匀； 精密量取10 ml， 置100 ml量瓶中， 以0.1mol.L-1盐酸液稀释至刻度， 摇匀， 照回收率项下的方法测定， 计算含量， 结果见表2。表2 样品测定结果(相当于标示量%) 批 号
, 百拇医药
MTZ
OFLO
990528
101.9
102.3
991011
97.9
100.5
990615
99.3
98.7
990620
98.2
, 百拇医药
99.7
990919
100.2
100.3
2.5 稳定性试验 取样品测定项下的溶液， 室温放置0， 2，4， 6， 8， 10 h， 测定吸收度A， 计算ΔA， 被测溶液在10 h内吸收度及吸收度差值几乎无变化。 结果见表3。
3 讨论
3.1 在实验中， 我们选择了水、 不同浓度的氢氧化钠、 盐酸为溶剂， 最终确定0.1mol.L-1盐酸液为溶剂， 既避免了两药的吸收重叠， 又能满足两药的稳定性要求。
表3 稳定性试验结果 放置时间
, http://www.100md.com
(h)
A277
A307.4
A277-A307.4
A293
A260
A293-A260
0
0.604
0.349
, http://www.100md.com 0.255
0.683
0.422
0.261
2
0.604
0.349
0.255
0.683
0.422
0.261
4
0.604
, 百拇医药
0.349
0.255
0.683
0.422
0.261
6
0.603
0.348
0.255
0.682
0.422
0.260
8
, http://www.100md.com
0.603
0.349
0.254
0.683
0.421
0.261
10
0.602
0.348
0.254
0.681
0.421
0.260
3.2 寻找等吸收点时， 为保证测定结果的准确性， 应以0.2 nm波长为单位。
参 考 文 献
1，周燕萍， 郭吉荣， 蒋均德， 等. 双波长分光光度法测定替硝唑环丙沙星注射液含量. 中国医院药学杂志， 1999，19(5)：283
1999-12-08 收稿 2000-04-14 修回, 百拇医药
单位：何继祥 李应芬(云南省曲靖市药品检验所 655000)；管毓向(云南省曲靖市妇幼医院)
关键词：双波长分光光度法；甲硝唑；氧氟沙星
中国药师000421 摘 要 目的： 应用双波长分光光度法测定甲硝唑氧氟沙星注射液含量。 方法：以0.1 mol.L-1盐酸液为溶剂， 在波长277， 307.4， 293， 260 nm处进行测定。 结果：甲硝唑浓度在4～20 μg.ml-1之间， 氧氟沙星浓度在2～10 μg.ml-1之间符合比尔定律， 浓度与吸收度差值呈良好线性关系， 甲硝唑平均回收率为99.5 %， RSD为0.6 %(n=8)， 氧氟沙星平均回收率为100.7 %， RSD为0.4 %(n=8)。 结论：该法方便、 快速、 准确可靠。
, 百拇医药
甲硝唑(MTZ)为抗厌氧菌药物， 氧氟沙星(OFLO)为第三代喹诺酮类药物， 具有广谱抗菌活性， 两药合用， 不仅增大抗菌谱， 且提高疗效， 用于泌尿生殖系感染疗效显著。 本文以双波长分光光度法[1]， 测定甲硝唑氧氟沙星注射液中甲硝唑、 氧氟沙星含量， 可满足制剂质量控制要求。
1 仪器试药
1.1 仪器 UV-2401 PC紫外分光光度计(日本岛津)。
1.2 试药 甲硝唑对照品(武汉制药股份公司， 批号980501)； 氧氟沙星对照品(成都药业有限责任公司， 批号9901122)； 甲硝唑氧氟沙星注射液[云南省曲靖市妇幼医院制剂，每100 ml含甲硝唑0.5 g 氧氟沙星0.2 g]； 盐酸为分析纯(配成0.1 mol.L-1浓度)。
2 方法与结果
, 百拇医药
2.1 测定波长的选择 精密称取甲硝唑、 氧氟沙星对照品适量， 以0.1 mol.L-1盐酸液为溶剂， 分别配成浓度为10 μg.ml-1及4 μg.ml-1的溶液， 以0.1 mol.L-1盐酸液为空白， 在波长200～350 nm波长之间扫描， 甲硝唑在277 nm波长处有最大吸收， 氧氟沙星和277 nm处等吸收波长为307.4 nm， 氧氟沙星在293 nm波长处有最大吸收， 甲硝唑和293 nm处等吸收波长为260 nm， 处方中的附加剂不干扰测定， 见图1。
图1
2.2 工作曲线的建立 精密称取甲硝唑50 mg， 氧氟沙星25 mg， 以0.1 mol.L-1盐酸液配成浓度为1， 0.5 mg.ml-1的溶液。 分别精密量取甲硝唑、 氧氟沙星对照液0.2， 0.4， 0.6， 0.8， 1.0 ml， 置50 ml量瓶中， 以0.1 mol.L-1盐酸液稀释至刻度， 摇匀， 以0.1 mol.L-1盐酸液为空白， 于波长277， 307.4及293， 260 nm处测定吸收度， 令ΔAMTZ=A277-A307.4， ΔAOFLO=A293-A260， 以浓度C为横坐标， ΔA为纵坐标， 计算回归方程和相关系数， 甲硝唑浓度在4～20 μg.ml-1范围内的回归方程为ΔAMTZ=0.026 4CMTZ-0.005， r=0.999 8(1)， 氧氟沙星浓度在2～10 μg.ml-1范围内的回归方程为ΔΑOFLO=0.071 1COFLO-0.019， r=1.0000(2)。
, 百拇医药
2.3 回收率试验 按处方精密配制供试品， 精密量取适量， 以0.1 mol.L-1盐酸液配成不同浓度， 在277， 307.4， 293， 260 nm波长处测定吸收度A， 计算差值ΔΑMTZ、 ΔAOFLO， 分别代入回归方程(1)和(2)， 计算回收率， 结果见表1。
表1 回收率试验结果 MTZ
OFLO
加入量
(μg.ml-1)
测得量
(μg.ml-1)
, 百拇医药
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
加入量
(μg.ml-1)
测得量
(μg.ml-1)
回收率
(%)
, 百拇医药
平均回收率
(%)
RSD
(%)
10
9.92
99.20
5
5.01
100.20
10.03
100.30
4.99
, 百拇医药
99.80
9
8.94
99.33
4.5
4.53
100.64
8.96
99.55
99.50
0.6
4.54
100.89
, 百拇医药
100.7
0.4
8
7.95
99.38
4
4.06
101.50
8.01
100.12
4.05
101.25
12
, 百拇医药
11.97
99.75
6
6.05
100.83
11.80
98.33
6.03
100.50
2.4 样品测定 精密量取样品2 ml， 置100 ml量瓶中， 以0.1 mol.L-1盐酸液稀释至刻度， 摇匀； 精密量取10 ml， 置100 ml量瓶中， 以0.1mol.L-1盐酸液稀释至刻度， 摇匀， 照回收率项下的方法测定， 计算含量， 结果见表2。表2 样品测定结果(相当于标示量%) 批 号
, 百拇医药
MTZ
OFLO
990528
101.9
102.3
991011
97.9
100.5
990615
99.3
98.7
990620
98.2
, 百拇医药
99.7
990919
100.2
100.3
2.5 稳定性试验 取样品测定项下的溶液， 室温放置0， 2，4， 6， 8， 10 h， 测定吸收度A， 计算ΔA， 被测溶液在10 h内吸收度及吸收度差值几乎无变化。 结果见表3。
3 讨论
3.1 在实验中， 我们选择了水、 不同浓度的氢氧化钠、 盐酸为溶剂， 最终确定0.1mol.L-1盐酸液为溶剂， 既避免了两药的吸收重叠， 又能满足两药的稳定性要求。
表3 稳定性试验结果 放置时间
, http://www.100md.com
(h)
A277
A307.4
A277-A307.4
A293
A260
A293-A260
0
0.604
0.349
, http://www.100md.com 0.255
0.683
0.422
0.261
2
0.604
0.349
0.255
0.683
0.422
0.261
4
0.604
, 百拇医药
0.349
0.255
0.683
0.422
0.261
6
0.603
0.348
0.255
0.682
0.422
0.260
8
, http://www.100md.com
0.603
0.349
0.254
0.683
0.421
0.261
10
0.602
0.348
0.254
0.681
0.421
0.260
3.2 寻找等吸收点时， 为保证测定结果的准确性， 应以0.2 nm波长为单位。
参 考 文 献
1，周燕萍， 郭吉荣， 蒋均德， 等. 双波长分光光度法测定替硝唑环丙沙星注射液含量. 中国医院药学杂志， 1999，19(5)：283
1999-12-08 收稿 2000-04-14 修回, 百拇医药