重组表达的恶性疟原虫顶端膜抗原1片段诱导小鼠保护性抗体应答
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第四军医大学病原生物学教研室 西安 710032 李珣;薛采芳;刘忠湘;王宪锋;丁劲;雷俊川;甄荣芬
恶性疟原虫|顶端膜抗原1|抗体应答|疫苗
参见附件(598kb)。
第四军医大学病原生物学教研室 西安 710032 李珣;薛采芳;刘忠湘;王宪锋;丁劲;雷俊川;甄荣芬
关键词:恶性疟原虫;顶端膜抗原1;抗体应答;疫苗
摘要:目的分析恶性疟原虫顶端膜抗原(apical membrane antigen 1,AMA1)主要结构域在诱导保护性抗体应答中的作用,为正确选择疫苗应用片段提供依据。方法PCR扩增编码P.fAMA1相应结构域的基因序列,构建pET原核表达载体,用纯化重组蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA测定抗体效价,用免疫荧光和免疫印迹分析抗体的特异性,用小鼠免疫血清进行疟原虫体外生长抑制实验。结果成功表达并纯化了代表AMA1不同结构域的重组抗原片段,包括完整的胞外域片段E、结构域Ⅰ+Ⅱ、Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ,免疫小鼠后分别诱导出不同滴度的IgG抗体,免疫血清可特异地识别天然AMA1抗原,重组蛋白E和Ⅰ+Ⅱ免疫 ...
第四军医大学病原生物学教研室 西安 710032 李珣;薛采芳;刘忠湘;王宪锋;丁劲;雷俊川;甄荣芬
关键词:恶性疟原虫;顶端膜抗原1;抗体应答;疫苗
摘要:目的分析恶性疟原虫顶端膜抗原(apical membrane antigen 1,AMA1)主要结构域在诱导保护性抗体应答中的作用,为正确选择疫苗应用片段提供依据。方法PCR扩增编码P.fAMA1相应结构域的基因序列,构建pET原核表达载体,用纯化重组蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA测定抗体效价,用免疫荧光和免疫印迹分析抗体的特异性,用小鼠免疫血清进行疟原虫体外生长抑制实验。结果成功表达并纯化了代表AMA1不同结构域的重组抗原片段,包括完整的胞外域片段E、结构域Ⅰ+Ⅱ、Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ,免疫小鼠后分别诱导出不同滴度的IgG抗体,免疫血清可特异地识别天然AMA1抗原,重组蛋白E和Ⅰ+Ⅱ免疫 ...
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