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编号:13606992
环介导等温扩增法在登革病毒临床检测中的运用(2)
http://www.100md.com 2017年11月1日 《新医学》 201711
     二、标准登革病毒株制备与核酸提取

    本研究采用的病毒株由南方医科大学病原生物学系P3实验室赵卫教授馈赠,病毒株的型别分别为:1型夏威夷株,2型新几内亚株,3型H87株,4型 H241株。采用QIAGEN病毒RNA提取试剂盒提取RNA,并采用实验室已存的标准质粒和探针对提取的RNA进行绝对定量,以标准株为阳性对照。

    三、登革病毒的血清特异性抗体检测

    采用胶体金快速免疫层析法(试剂盒由广州万孚生物技术有限公司提供)对登革病毒非结构蛋白1(NS1)IgG/IgM抗体进行定性检测,当样品中含有登革病毒IgG/IgM抗体,且浓度高于最低检出限时,将在检测区T1或T2形成肉眼可见的红色反应线,此时结果为登革病毒IgG或登革病毒IgM抗体阳性,相反,当样品中不含有登革病毒IgG/IgM抗体或浓度低于最低检出限时,则检测区(T1、T2)无红色反应线出现,此时结果为登革病毒IgG/IgM抗体阴性。无论样本中是否含有登革病毒IgG/IgM抗体,在质控区(C)都会形成一条红色的反应线。

    四、登革病毒RNA的PCR定量检测

    使用Taqman探针法,采用OMIGA病毒RNA提取试剂盒提取病毒RNA ......
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