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编号:13518887
人TBC1D10C基因过表达慢病毒载体的构建及功能鉴定(3)
http://www.100md.com 2020年1月1日 《新医学》 20201
     伴随着分子生物学技术的不断发展与成熟,各种可以改变基因表达水平的手段和方法日趋进步。目前,用于外源性基因导入的载体主要包括质粒、腺病毒、腺相关病毒、慢病毒和逆转录病毒载体。与其他载体相比,慢病毒载体对非分裂和分裂细胞均具有感染能力,可以将外源基因有效地整合到宿主细胞染色体上,使外源性基因能长期稳定的高效表达[8-10]。使得慢病毒成为实现长期稳定高效表达的理想载体。因考虑后期研究涉及动物及细胞实验,对过表达转染效率要求高,因此研究组决定采用腺病毒载体构建人TBC1D10C过表达载体。

    在rLV-hTBC1D10C-zpp构建过程中,我们首先将人TBC1D10C基因定向克隆至pLVX-hTBC1-D10C-mCMV-ZsGreen-PGK-Puro载体,经测序验证后与系统包装质粒共转染293T细胞 ......
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